【高效液相色譜-紫外檢測法檢測奶茶添加劑實驗探究2700字（論文）】

高效液相色譜-紫外檢測法檢測奶茶添加劑實驗探究目錄TOC\o"1-2"\h\u阿44091材料與試劑 254521.1樣品來源 2195461.2試劑 299961.3器材 2313142實驗方法 2280612.1溶液配置 2181352.2樣品前處理 3293152.3液相色譜分析條件 45983注：流動相中，A為甲醇，B為乙酸銨溶液（0.02mol/L） 418843實際樣品測定結果 4228194結論與分析 5奶茶飲品口感香甜可口，且不同的品種口味層出不窮，是當代年輕人群的心頭好，如此美味的奶茶，其中也必然含有多種食品添加劑，如防腐劑、甜味劑以及咖啡因等。食品防腐劑是指為防止食品因微生物污染導致腐敗變質，而加入食品中的人工合成的化學物質或天然的化合物。目前，苯甲酸及苯甲酸鈉是眾多防腐劑里，我國各大食品加工廠中最常用的。苯甲酸在進入細胞后，通過電離酸化堿儲，降低呼吸酶系的活性，阻止乙酰輔酶A的縮合反應，從而達到食品防腐的目的。但超過限定劑量的苯甲酸具有一定的生物毒性，應嚴格規(guī)范其使用。糖精鈉的甜度為蔗糖的三百到五百倍，作為甜味劑中的一種，其作用除了在味覺上帶來的甜蜜感以外，本身并不具有營養(yǎng)價值，當攝入量較大時，會干擾消化酶的正常分泌，削弱小腸的吸收能力，同時導致食欲不振，致使青少年出現(xiàn)營養(yǎng)不良的癥狀?？Х纫蜃鳛橐环N中樞神經(jīng)興奮劑，不僅能解除疲勞、還可以促進人體血液循環(huán)，但劑量過大后，容易提高致突變和致畸的幾率，還會引起局部缺血性心臟病。這些添加劑在規(guī)定范圍和用量內使用是不會對人體造成影響的，但若是高頻率地攝入，長期以往則會導致各類添加劑在體內蓄積，成為危害身體健康的一大隱患。因此，檢測食品中的苯甲酸、糖精鈉、咖啡因等對維護廣大消費者群體的健康具有重要意義。材料與試劑樣品來源購自嘉興市各個縣區(qū)的不同奶茶店，包括但不限于一點點、古茗、coco、茶百道等眾多奶茶品牌的不同品種茶飲料。經(jīng)統(tǒng)計，共有50份市售奶茶樣品，分別標記編號，冷藏保存。試劑甲醇（HPLC，批號：20150608），咖啡因標準品（BW0130-15-1，濃度1000μg/mL），苯甲酸標準品（BW（E）100006，濃度：100.0μg/mL），糖精鈉標準品（GBW（E）100008，濃度：100.0μg/mL），超純水，冰乙酸，甲酸，亞鐵氰化鉀（分析純，批號：20190220），乙酸鋅（分析純，批號：20190712），乙酸銨（分析純，批號：20170913）器材1260高效液相色譜儀帶DAD檢測器（購自美國Agilent公司），Milli-Q超純水系統(tǒng)（購自美國Millipore公司），XW-80A旋渦混合器（購自中國精科實業(yè)有限公司），KQ5200DA型數(shù)控超聲波清洗器（購自昆山市超聲儀器有限公司），LG10-2.4A高速離心機（購自中國北京醫(yī)用離心機廠），0.22μm水相微孔濾膜（13mm×0.22μm，購自中國上海安譜實驗科技股份有限公司），一次性無菌注射器（5mL，購自岳陽民康醫(yī)用材料有限公司，批號：190125），50mL塑料離心管，電子天平（購自賽多利斯科學儀器有限公司），抽濾裝置，一次性吸管，移液槍，一次性槍頭。實驗方法溶液配置試劑配制亞鐵氰化鉀溶液（92g/L）：稱取106g亞鐵氰化鉀（K4Fe(CN)6），加入適量純水溶解，用純水定容至1000mL。乙酸鋅溶液（183g/L）：稱取220g乙酸鋅[(CH3COO)2Zn]，加入少量純水溶解，加入冰乙酸30mL，純水定容至1000mL。乙酸銨溶液（20mmol/L）：稱取1.54g乙酸銨（CH3COONH4），適量水溶解后，用純水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm濾膜過濾后備用。甲酸-乙酸銨溶液（1：10）：稱取1.54g乙酸銨，少量水溶解后，加入75.2μL甲酸（HCOOH），純水定容至1000mL，過0.22μm濾膜后備用（存在干擾峰時使用）。標準溶液配制苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標準中間溶液：取適量苯甲酸標準溶液、糖精鈉標準溶液和咖啡因標準溶液，用超純水配制成標準混合液，混勻待用。苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標準混合液：取適量苯甲酸、糖精鈉、咖啡因標準中間溶液，加入超純水進行稀釋，分別配制成濃度為1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL的標準溶液，顛倒混勻后，過0.22μm濾膜于進樣小瓶中，待測。樣品前處理待測樣品取50支50mL塑料離心管，每管進行編號，將樣品奶茶顛倒混勻，用吸管準確吸取2.0g奶茶液體于離心管中，加入2mL甲醇溶液，用超純水定容至50mL，試使用旋渦混合器對定容好的樣品管進行振蕩混勻，持續(xù)2min后，繼續(xù)對其超聲5min。超聲結束，取出離心管，放入高速離心機中，8000r/min離心5min。一次性注射器吸取適量上清液，過0.22μm濾膜于進樣小瓶中，待測。加標樣品隨機選擇一份空白樣品，添加一定標準混合溶液后制成標準物質含量分別為0.05g/kg、0.10g/kg、0.50g/kg的加標樣品，按上述步驟同步進行前處理操作后，過濾待測。液相色譜分析條件色譜柱：AgilentPoroshell120EC-C18柱（3mm×150mm，2.7μm）；柱溫：35℃；流動相：甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）洗脫方式：梯度洗脫，具體程序見表2-1；進樣量10μL；流速：1.0mL/min；紫外檢測器波長：240nm。表2-1梯度洗脫條件時間（min）流動相A（%）流動相B（%）0595740609208012595注：流動相中，A為甲醇，B為乙酸銨溶液（0.02mol/L）實際樣品測定結果該實驗中共檢測市售奶茶50份，取樣后對樣品1：1加入甲醇沉淀劑沉淀離心，分離效果均良好，根據(jù)檢測得到的色譜圖，按保留時間定性、峰面積定量，經(jīng)計算，待測的三種添加劑成分各有一定程度的檢出，詳細結果見表3-3。檢測的50份市售奶茶飲品中，有6份檢測出苯甲酸，含量在0.0988～0.197g/kg之間；有4份檢測出糖精鈉，含量在0.0550～0.176g/kg之間；有12份檢測出咖啡因，含量在0.0195～0.483g/kg之間。表3-3樣品中苯甲酸、糖精鈉、咖啡因含量檢測結果組分檢出數(shù)（份）檢出范圍（g/kg）苯甲酸60.0988～0.197糖精鈉40.0550～0.176咖啡因120.0195～0.483結論與分析上述實驗結果中，關于標準曲線繪制，除苯甲酸檢測得到的標準曲線的相關系數(shù)較低、線性較差外，糖精鈉及咖啡因所對應的標準曲線均線性良好，相關系數(shù)在0.9999以上。分析可能存在原因是，在制作標準混合溶液時，未能準確控制好苯甲酸的加入量，導致實際濃度與坐標上對應點的濃度不符。檢測結果表明，本實驗中使用的樣品預處理方式更加便捷，沉淀分離后去除雜質的效果也更好，優(yōu)化后的色譜檢測條件也具有更好的分離度及精確度，適用于奶茶飲品中苯甲酸、糖精鈉及咖啡因的同時檢測，為這三種食品添加劑的定量分析及監(jiān)管提供了技術支持。經(jīng)過對市售奶茶中三種添加劑的定量分析表明，各個品種奶茶中雖各有部分添加劑檢出，但都未超過國家食品安全檢測中對這三種物質規(guī)定的劑量標準，但若長期頻繁攝入，仍具有較低風險。同時，因部分奶茶中本就以茶湯作為原材料，而茶葉中本就含有部分咖啡因，因此在50份市售奶茶中咖啡因的檢出份數(shù)較多且含量也略高。本次實驗僅檢測了50份市售奶茶中的三種添加劑，并不能代表奶茶中的全部添加劑種類及含量，且樣本量較小，不能涵蓋市面上所有的奶茶品牌及種類，僅能作為參考而不具有很大的代表性。奶茶雖然好喝，但市售奶茶中并無太多對人體有益的成分，極少數(shù)添加純奶，大多奶茶店都選擇加入奶精及其他調味劑來