遺傳學果蠅雜交

黒腹果蠅雜交驗證

遺傳學規(guī)律實驗陸巖冰羅雪萍王志敏王培楊磊鄭濤扎西卓瑪實驗目的1學習并掌握果蠅雜交技術2理解并驗證遺傳學定律原理：（1）分離定律（2）自由組合定律（3）版型遺傳規(guī)律（4）連鎖互換定律3記錄實驗結果掌握實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理方法4學習并掌握重組值求法以及遺傳學圖的繪制方法實驗原理1相互區(qū)分的相對性狀都是有相對的等位基因決定的2在雜交實驗中，配子形成和受精時染色體的行為跟基因的行為是一致的：（1）分離定律：在生物的體細胞中，控制同一性狀的遺傳因子成對存在，相融合；在形成配子的減數(shù)分裂過程中，同源染色體及其上的等位基因彼此分離，分離后的遺傳因子分別進入不同的配子中，隨配子遺傳給后代（2）伴性遺傳規(guī)：位于性染色體上的基因的遺傳行為與性別有關；

實驗原理（3自由組合定律：在形成配子時，非同源染色體上及其上的非等位基因間自由組合，即一對染色體上的等位基因與另一對染色體上的等位基因的分離或組合是彼此間互不干擾的，各自獨立地分配到配子中去；（4）連鎖互換定律：配子形成過程中，位于同一染色體上的基因是連鎖在一起，作為一個單位進行傳遞，稱為連鎖律。在生殖細胞形成時，一對同源染色體上的不同對等位基因之間可以發(fā)生交換，稱為交換律或互換律。在減數(shù)分裂第一次分裂中期，位于赤道班上的同源染色體的非姐妹染色單之間發(fā)生片段交換，導致連鎖群的等位基因發(fā)生一定的重組，重組率越大，交換律越高。實驗原理1重組值的大小與基因間距離有關，依次可確定相關連鎖基因在染色體上的位置與排列順序，從而做出基因連鎖圖。2果蠅生活史短，繁育率高，飼養(yǎng)簡便，并且染色體數(shù)目少，相對性狀容易區(qū)分，故選用果蠅作為本次的遺傳學研究材料3本次試驗選取了果蠅的體色、眼色、翅形，剛毛四個形狀為研究對象，其中體色為檀黑色是由位于第Ⅲ染色體上的隱性基因e控制；白眼、短翅、卷剛毛三個形狀則分別由位于X染色體上的w、m、sn3控制實驗材料與儀器果蠅品種：黒腹果蠅6品種（灰體、短翅、白眼，卷剛毛）黒腹果蠅e品種（檀黑體、長翅、紅眼、直剛毛）實驗材料：玉米粉、瓊脂粉、蔗糖、酵母粉、丙酸、水、乙醚實驗器材：培養(yǎng)瓶、燒杯、玻璃棒、量筒、標簽、稱量紙、移液槍、毛筆、紗布、膠頭滴管、脫脂棉、棉線、剪刀、電子天平、電爐、恒溫培養(yǎng)箱、雙筒解剖鏡實驗步驟制備果蠅培養(yǎng)基處女蠅的收集果蠅的雜交與培養(yǎng)F1代果蠅的性狀觀察與統(tǒng)計F1代處女蠅的收集F1代果蠅的雜交與培養(yǎng)F2代果蠅形狀的觀察與統(tǒng)計℃（一）制備果蠅培養(yǎng)基配方：A:糖6.2克，加瓊脂0.62克，在加水38毫升，煮沸溶解。B:玉米粉8.25克，加水38毫升，加熱攪拌均勻將A、B混合加熱成糊狀（大約混合后體積減少約1/5）后，從電爐上取下，冷卻至50~60℃時，加入0.7克酵母粉，攪拌均勻后，加入0.5毫升丙酸攪拌。分裝置培養(yǎng)瓶中。（二）處女蠅的收集選取瓶中已有卵和幼蟲的培養(yǎng)瓶，將其中的老果蠅全部轉移除去，只留下卵和幼蟲。收集自轉移后8小時之內瓶中羽化出來的新果蠅。收集的果蠅用乙醚麻醉后用放大鏡在百瓷板上將果蠅雌雄分開，這時的雌果蠅即為處女蠅。本次實驗共需收集6號品種處女蠅與e品種處女蠅各5只，分別放至已加入培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，放至25℃恒溫培養(yǎng)箱中，并在瓶身分別做好標簽如下：

6品種處女蠅（P）e品種處女蠅（P）（灰、短、白、卷）(檀黑、長、紅、直）+mwsn3e+++1號瓶2號瓶（三）果蠅的雜交與培養(yǎng)本次試驗分為正交與反交兩組同時進行正交組：6品種♂×e品種♀反交組：6品種♀×e品種♂A.正交步驟如下：1.從6品種原始培養(yǎng)瓶中果蠅轉移出麻醉，在白紙板上用放大鏡觀察仔細挑出5只雄果蠅。2.將上述挑出的果蠅移入2號瓶中，并將標簽如下：

三號瓶（正交）6品種（+mwsn3/+YYY）×e品種（e+++/e+++）

♂♀

××月××日生技1102班第六小組覆蓋于原標簽上，之后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

B.反交步驟如下：1.從e品種原始培養(yǎng)瓶中果蠅轉移出麻醉，在白紙板上用放大鏡觀察仔細挑出5只雄果蠅。2.將上述挑出的果蠅移入1號瓶中，并將標簽如下：

四號瓶（反交）

e品種（e+++/eYYY）×

6品種（+mwsn3/+mwsn3）

♂♀

××月××日生技1102班第六小組

覆蓋于原標簽上，之后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.每兩天觀察一次果蠅，當三號(四號)培養(yǎng)瓶中蛹變黑時，將親本轉移出培養(yǎng)瓶。（四）F1代果蠅的性狀觀察與統(tǒng)計：成蟲轉移出之后，當三號(四號)培養(yǎng)瓶中再次出現(xiàn)成蟲時，每天統(tǒng)計果蠅形狀并填寫表格如下，并當天統(tǒng)計完成后，轉移出培養(yǎng)瓶，直至培養(yǎng)瓶中再無成蟲產(chǎn)生。表型正交后代數(shù)目

♂♀合計灰長紅卷xxxxxxxx總計F1代果蠅性狀、數(shù)量觀察統(tǒng)計表正(反)交xx月xx日（五）F1代處女蠅與雄果蠅的收集在開始統(tǒng)計F1代果蠅性狀數(shù)量起第三天，開始收集F1代處女蠅，累計收集正(反)交F1代處女蠅10只，雄果蠅10只，分裝置兩只以裝培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，并貼上標簽：

五(七)號瓶六(八)號瓶F1代處女蠅正(反)交F1代雄果蠅正(反)交第六小組第六小組（六）F1代果蠅的雜交與培養(yǎng)

將六(八)號瓶中的雄果蠅轉移到五(七)號培養(yǎng)瓶中，比用標簽如下，覆蓋于五(七)號培養(yǎng)瓶原標簽，并置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待培養(yǎng)瓶中蛹變黑時，將成蟲轉移出培養(yǎng)瓶。

九號瓶十號瓶F1代正交組F1代反交組灰長紅直♀×♂灰長紅直灰長紅直♀×♂灰短白卷(e+++/+mwsn3×e+++/+YYY)(+mwsn3/e+++×+mwsn3/eYYY)xx月xx日xx月xx日第六小組第六小組（七）F2代果蠅性狀與數(shù)量統(tǒng)計與F1代果蠅的方法相同實驗數(shù)據(jù)的總合分析與實驗預期分離定律的驗證6品種與e品種進行雜交僅關注其體色性狀，灰色對黑色為顯性,可分析其遺傳樹狀圖如下：正反

P檀

黑體(♀)×灰體(♂)

e/e+/+

↓

F1

灰體

+/e

↓

F2

灰體

檀黑體

1+/+,2+/ee/e

比例

3：

1通過實驗統(tǒng)計數(shù)據(jù)，運用χ2檢驗，來驗證實驗是否符合分離定律反交

P灰體(♀)×檀黑體(♂)

+/+e/e

↓

F1灰體

+/e

↓

F2灰體

檀黑體

1+/+,2+/ee/e

比例

3：

1伴性遺傳規(guī)律的驗證以果蠅的眼色作為研究對象，決定果蠅眼色的基因w位于果蠅的X染色體上，故應符合伴性遺傳規(guī)律，分析其遺傳樹狀圖如下通過實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，運用χ2檢驗驗證是否符合伴性遺傳規(guī)律

正交

P

紅眼(♀)×白眼(♂)

+/+w/Y

↓

F1紅眼

+/w、+/Y

↓

F2紅眼

白眼

1+/+,1+/w,1+/Y1w/w

比例

3;

1

反交

P白眼(♀)×

紅眼(♂)

w/w+/Y

↓

F1紅眼、

白眼

1+/w,1w/Y

↓

F2紅眼

白眼

1+/w,1+/y1w/w,1w/Y

比例

1

：

1自由組合定律的驗證選取6品種與e品種的體色與眼色為研究對象，決定果蠅體色的基因位于第Ⅲ染色體上，決定果蠅眼色的基因為與x染色體上，故兩基因在遺傳過程中互不影響，應符合自由組合定律。分析其遺傳圖譜如下：

正交

P檀黑紅(♀)×

灰白(♂)

e+/e++w/+Y

↓F1

灰紅

1+w/e+，1e+/+Y

↓

F2

灰紅

灰白

黑紅黑白1++/++,1++/+w1+w/+Y1e+/ew1e+/+Y,1e+/+w1+w/eY1e+/ey1ew/ey2++/e+,2++/eY1ew/=Y1ew/e+9：3：3：1其中正交灰眼：黑眼=3:1，紅眼：白眼=3:1,反交灰眼：黑眼=3:1，紅眼:白眼=1:1眼色性狀符合分離定律，眼色遺傳符合伴性遺傳規(guī)律，兩者在遺傳過程中互不干擾，符合自由組合定率，通過實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，運用χ2檢驗來驗證實驗驗是否符合自由組合定律

反交

P灰白(♀)×

檀黑紅(♂)

+w/+we+/eY

↓F1

灰紅灰白

1+w/e+，1+w/eY

↓

F2灰紅

黑紅

灰白黑白

1++/+w,1++/ew1e+/ew2+w/ew,1+w/+w1++/+Y,1e+/+w1e+/ey1+w/eY,1+W/+y1ew/ey1e+/+Y+,+1+/eY1ew/+Y1ew/ew6