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文檔簡介
ICS
21
非洲豬瘟病毒
目視檢測方法
Amplification（LAMP）
遼寧省市場監(jiān)督管理局??發(fā)
布
本文件按照GB/T
1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則
第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定文件布實后，何單和個如有題和意見議，可以過來和來等方進(jìn)行街2：024-文件起草單位通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心（沈陽市沈北新區(qū)人和街95號），聯(lián)系電話：
倍～10
倍的核酸擴增。在DNA合成
倍～10
倍的核酸擴增。在DNA合成時，從脫氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸離子與
本文件規(guī)定了非洲豬瘟病毒（African
Virus）
LAMP目視檢測方法的生物安全基本文件用于洲豬的診、監(jiān)及流病學(xué)調(diào)查適用豬全、脾、扁體、巴結(jié)
列文中的內(nèi)容過文的規(guī)范性用而成本件必不可的條。其中，日期引用，僅該日對應(yīng)的版適用于本件；不注期的用文件，最新版本包括所有修改單）
針對靶基因的6個區(qū)域設(shè)計4種特異引物，并引入環(huán)引物加快反應(yīng)，在鏈置換DNA聚合酶的作用下，基因模板、引物、鏈置換型DNA合成酶等在60
℃進(jìn)行恒溫擴增，15
二級生物安全柜、高速臺式冷凍離心機、組織研磨儀、冰箱（2
℃～8
℃和-20
℃以下）、金屬浴或恒溫水浴鍋（25
℃～100
℃）、微量移液器（量程：0.5
μL～10
μL、2
μL～20
μL、20
L～200
核酸提取試劑盒、離心管（15
血液樣品：按照
中第
條中豬血液樣品采集的要求進(jìn)行，將采集的血液注
臟器、組織樣品：按
中第
條和
條中的要求進(jìn)行，將采集的病死或剖殺豬要臟器（臟、扁桃、淋巴結(jié)腎臟）、骨髓樣品使用織研磨儀研缽在二
應(yīng)在制備行，商品提取按說提取酸，核酸
2×反應(yīng)液（RM）
μ
μmol/L）
μ
μmol/L）
μ
μ
μ
μ
μ
μ
μ
μ
在試劑配制區(qū)進(jìn)行。設(shè)所需PCR管數(shù)為n（n=待測樣品數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照）。按n+1計算
μL/管分裝至PCR管并編號。表1
向上述編號的PCR管中分別加入制備的陰性對照核酸、陽性對照核酸和樣本核酸各2
μL，扣緊混
min。
引物的名稱和序列見表A.1。
取引物對（內(nèi)引物FIP、內(nèi)引物BIP、外引物F3、外引物B3、環(huán)引物L(fēng)B）干粉，按
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