生物實驗室安全常識

廣西中醫(yī)藥科學實驗中心衛(wèi)智權生物實驗室平安常識.內容介紹1實驗室電、氣、水、火2化學試劑的平安使用3微生物的危害及處理4放射性物質的平安使用5紫外線輻射的危害及防護6廢棄物的處理.實驗室電、氣、水、火連線：儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護套線，不可使用普通的塑料絞線。線可用普通的塑料絞線。嚴禁私拉亂扯。接地：儀器應有良好的接地，提高儀器的穩(wěn)定性及平安系數(shù)。維修：儀器出現(xiàn)故障時，應切斷電源，立即向實驗室負責人報告。維修儀器時必須切斷電源，方可拆機修理。墻電：不得私自對墻電進行維修、改造，該工作由實驗室負責人進行方案，由相關專業(yè)人員進行維修、改造。檢查：如遇線路老化或損壞應及時地更換。觸電：斷電或絕緣脫離急救電燈：進入實驗室，有需要時翻開電源開關、排氣扇；離開實驗室時假設無人請關閉電燈及排氣扇?？照{：進入實驗室，有需要時可翻開空調，溫度不得低于27℃；每天下班時實驗室負責人將關閉空調。假設在非上班時間內翻開空調，離開時請關閉！.實驗室電、氣、水、火搬運：搬運或轉動鋼瓶時，不得用手執(zhí)著開關閥移動。使用：按氣瓶的類別選用減壓器，安裝時螺扣應擰緊，并檢漏。開啟鋼瓶：逆時針方向為開；先開總閥，后開減壓閥。關閉鋼瓶：順時針方向為關；先關總閥，后關減壓閥。氣嘴保護：用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。平安：氣瓶內的氣體不可用盡。惰性氣體：應剩余0.05MPa以上壓力的氣體?？扇細怏w：應剩余0.2Mpa以上壓力的氣體。氫氣：應剩余2.0MPa以上壓力的氣體。存放：分類分處存放直立放置時要穩(wěn)妥；氣瓶要遠離熱源；防止曝曬和強烈振動；一般實驗室內存放氣瓶量不得超過兩瓶。氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。.實驗室電、氣、水、火上水：水龍頭或水管漏水時，應及時向實驗室負責人報告，以便及時維修。下水：水池內不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質；清洗廢液缸時請注意將其中的固體物質倒入到垃圾桶后才能沖洗，特別是tip和eppendorf管。下水道排水不暢時，應及時向實驗室負責人報告，以便及時疏通。冷卻水：輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊；下水管必須插入水池的下水管中。純潔水：應按照“操作規(guī)程〞進行操作；取水時應注意及時地關閉取水開關，防止溢流。.實驗室電、氣、水、火報警：119〔說明火源、火情、單位名稱、地理位置或明顯標志〕措施：早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報告滅火：學會使用滅火器〔一拔、二握、三瞄、四掃〕沉著、冷靜易燃固體、易燃氣體、易燃液體和帶電物體著火時，可用干粉滅火器滅火；導線或電器著火時，應先斷電，再用干粉滅火器滅火。切不可用泡沫滅火器，此滅火器導電。衣服著火時，應盡快地脫掉衣服，并用水滅火。或就地滾動，切忌外跑。防火：火災不能預期、不能杜絕、只能預防消除火災隱患〔電、火、氣、試劑〕備逃生四件寶〔滅火器、繩、手電筒、防毒面具〕.化學試劑的平安使用藥品狀態(tài)定口徑，瓶塞取決酸堿性受熱見光易分解，存放低溫棕色瓶特殊試劑特殊放，互不反響要記清標識：自配試劑標簽注明化合物名稱、濃度、配制日期以及配制人姓名.化學試劑的平安使用易燃易爆化學試劑：一般將閃點在25℃以下的化學試劑列入易燃化學試劑，它們多是極易揮發(fā)的液體，遇明火即可燃燒。有毒化學試劑：以較小劑量進入人體而導致疾病或死亡的才被劃為有毒物質。腐蝕性化學試劑：化學試劑碰到皮膚、粘膜、眼、呼吸器官都有及時清洗，如各種酸和堿、溴、苯酚等。強氧化性化學試劑：包括過氧化物和含有強氧化能力的含氧酸及其鹽，如硝酸銨、高氯酸及其鹽、重鉻酸及其鹽等。放射性化學試劑：同位素示蹤技術的開展，廣泛應用于生物化學與分子生物學。由于其特殊性，該種試劑不得帶入公共實驗室，在各自實驗室進行專項管理或者由學校進行統(tǒng)一管理。不相容化學試劑：一些化學試劑在儲存和操作過程中不能與其他物質接觸，否那么就發(fā)生爆炸，這些化學試劑稱為不相容化學試劑。如：疊氮化物通常用作溶液中的抗菌劑，由于輕微碰撞就可能造成疊氮化銅的爆炸，因此不能與銅接觸〔如污水管及管道設施〕。.化學試劑的平安使用溴化乙錠〔EB〕一種強誘變劑〔可能造成遺傳性危害〕，直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收，因此應當防止一切與EB的直接接觸。EB對皮膚，眼睛，口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應將EB平安密封，并密閉存放于枯燥避光處。Trizol提取組織和細胞RNA的一種重要試劑，在提取RNA時一定要在通風櫥進行。如皮膚接觸Trizol，請立即用大量去垢劑和水沖洗，廢液埋入地下。.化學試劑的平安使用二乙基焦碳酸酯〔DEPC〕RNA酶的強抑制劑，一種潛在的致癌物質。操作時戴口罩，在通風櫥中進行。沾到手上立即沖洗，廢液通過廢液道排泄。氯仿常用于DNA和RNA提取，對皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有強烈的刺激作用和腐蝕性，易損害肝和腎。操作時戴手套在通風櫥里進行，廢液收集后埋入地下。丙烯酰胺DNA測序、SSR及蛋白質別離等技術中作電泳支持物，具神經(jīng)毒性，聚合后毒性消失。操作時戴手套在通風櫥內進行，聚合后的聚丙烯酰胺凝膠沒有毒性，可隨普通垃圾一起扔掉，千萬不要倒入下水道.。.化學試劑的平安使用二甲基亞砜〔DMSO〕一種既溶于水又溶于有機溶劑的非質子極性溶劑，常用作細胞的凍存液和配制AS。皮膚沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水洗滌。十二烷基磺酸鈉〔SDS〕有毒，易損害眼睛。質粒提取時作裂解液破壞細胞膜和Southern雜交時的洗膜液中的去垢劑。戴適宜的手套和平安護目鏡，不要吸入其粉末。四甲基乙二胺〔TEMED〕強神經(jīng)毒性，防止誤吸，操作時快速，存放時密封。.化學試劑的平安使用二硫蘇糖醇〔DTT〕很強的復原劑，散發(fā)難聞的氣味。可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時，戴手套和護目鏡，在通風櫥中操作。苯甲基磺酰氟〔PMSF〕一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而致命。戴適宜的手套和平安眼鏡，始終在化學通風櫥里使用。在接觸到的情況下，要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚，已污染的工作服作為有害廢物處理。TritonX-100引起嚴重的眼睛刺激和灼傷?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而受害。戴適宜的手套和護目鏡。.化學試劑的平安使用過硫酸銨〔NH4〕2S2O8對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時戴適宜的手套、平安眼鏡和防護服。始終在通風櫥里操作，操作完后徹底洗手。疊氮鈉〔NaN3〕毒性非常大。它阻斷細胞色素電子運送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標記清楚?？梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而損害健康。戴適宜的手套和平安護目鏡，操作時要格外小心。Giemsa染液染料咽下可致命或引起眼睛失明，通過吸入和皮膚吸收是有毒的。其可能的危險是不可逆的效應。戴適宜的手套和平安護目鏡。在化學通風櫥里操作，不要吸入其粉末。.微生物的危害及處理的法律法規(guī)世界大多數(shù)國家都是以致病微生物的危害程度進行分類，形成不同的實驗室平安防護等級。我國一般以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實驗室的相應生物平安防護水平;以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動物實驗室的相應生物平安防護水平。中國實驗室生物平安法規(guī)?病原微生物實驗室生物平安管理條例??中華人民共和國傳染病防治法??中華人民共和國傳染病防治法實施方法??中華人民共和國國境衛(wèi)生檢疫法??中華人民共和國進出境動植物檢疫法?中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準?微生物和生物醫(yī)學實驗室生物平安通用準那么??實驗室生物平安通用要求??動物病原微生物菌〔毒〕種保藏管理方法??高致病性動物病原微生物實驗室生物平安管理審批方法?.人間傳染的病原微生物高致病性病原微生物是指?人間傳染的病原微生物名錄?中規(guī)定的第一類、第二類病原微生物。第一類病原微生物是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。.人間傳染的病原微生物名錄第一類病原微生物名錄〔29種〕類天花病毒、克里米亞-剛果出血熱病毒〔新疆出血熱病毒〕、東方馬腦炎病毒、埃博拉病毒、Flexal病毒、瓜納瑞托病毒、Hanzalova病毒、亨德拉病毒、猿皰疹病毒、Hypr病毒、鳩寧病毒、Kumlinge病毒、卡薩諾爾森林病病毒、拉沙熱病毒、跳躍病病毒、馬秋波病毒、馬爾堡病毒、猴痘病毒、Mopeia病毒〔和其他Tacaribe病毒〕、尼巴病毒、鄂木斯克出血熱病毒、Sabian病毒、圣路易斯腦炎病毒、Tacaribe病毒、天花病毒、委內瑞拉馬腦炎病毒、西方馬腦炎病毒、黃熱病毒、蜱傳腦炎病毒.人間傳染的病原微生物名錄第二類病原微生物名錄〔51種〕加利福利亞腦炎病毒、基孔肯尼雅病毒、多里病毒、Everglades病毒、口蹄疫病毒、Garba病毒、Germiston病毒、Getah病毒、Gordil病毒、其它漢坦病毒、引起肺綜合征的漢坦病毒、引起腎綜合征出血熱的漢坦病毒、松鼠猴皰疹病毒、高致病性禽流感病毒、艾滋病毒〔I型和II型〕、Inhangapi病毒、Inini病毒、Issyk-Kul病毒、Itaituba病毒、乙型腦炎病毒、Khasan病毒、Kyz病毒、淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎(嗜神經(jīng)性的)病毒、Mayaro病毒、米德爾堡病毒、擠奶工結節(jié)病毒、Murcambo病毒、墨累谷腦炎病毒(澳大利亞腦炎病毒)、內羅畢綿羊病病毒、恩杜姆病毒、Negishi病毒、新城疫病毒、口瘡病毒、Oropouche病毒、不屬于危害程度第一或三、四類的其他正痘病毒屬病毒、Paramushir病毒、脊髓灰質炎病毒、hPowassan病毒兔痘病毒(痘苗病毒變種)、狂犬病毒(街毒)、Razdan病毒、立夫特谷熱病毒、Rochambeau病毒、羅西奧病毒、Sagiyama病毒、SARS冠狀病毒、塞皮克病毒、猴免疫缺陷病毒、Tamdy病毒、西尼羅病毒.人間傳染的病原微生物名錄第三類病原微生物是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物：多種動物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、破傷風梭菌、氣腫疽梭菌、結核分支桿菌、副結核分支桿菌、致病性大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、致病性鏈球菌、李氏桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、嗜水氣單胞菌、肉毒梭狀芽孢桿菌、腐敗梭菌和其他致病性梭菌、鸚鵡熱衣原體、放線菌、鉤端螺旋體水生動物病病原微生物：流行性造血器官壞死病毒、傳染性造血器官壞死病毒、馬蘇大麻哈魚病毒、病毒性出血性敗血癥病毒、錦鯉皰疹病毒、斑點叉尾鮰病毒、病毒性腦病和視網(wǎng)膜病毒、傳染性胰臟壞死病毒、真鯛虹彩病毒、白鱘虹彩病毒、中腸腺壞死桿狀病毒、傳染性皮下和造血器官壞死病毒、核多角體桿狀病毒、蝦產(chǎn)卵死亡綜合癥病毒、鱉鰓腺炎病毒、Taura綜合癥病毒、對蝦白斑綜合癥病毒、黃頭病病毒、草魚出血病毒、鯉春病毒血癥病毒、鮑球形病毒、鮭魚傳染性貧血病毒.生物平安實驗室分級標準一級生物平安防護實驗室〔BSL-1〕實驗室結構和設施、平安操作規(guī)程、平安設備適用于對健康成年人無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。二級生物平安防護實驗室〔BSL-2〕實驗室結構和設施、平安操作規(guī)程、平安設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。實驗脊椎動物生物平安防護實驗室，其適用微生物范圍與同級的一般生物平安防護實驗室相同。.生物平安實驗室分級標準三級生物平安防護實驗室〔BSL-3〕實驗室結構和設施、平安操作規(guī)程、平安設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學實驗除外)應在三級生物平安防護實驗室中進行。四級生物平安防護實驗室〔BSL-4〕實驗室結構和設施、平安操作規(guī)程、平安設備適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。與上述情況類似的不明微生物，也必須在四級生物平安防護實驗室中進行，待有充分數(shù)據(jù)后再決定此種微生物或毒素應在四級還是在較低級別的實驗室中處理。.重組核酸技術和生物平安采用遺傳工程技術人為設計出更多帶有新型遺傳物質的生物，既涉及到有生命活性的載體自身對實驗室人員的生物平安，還存在大量投放于環(huán)境后的生物污染問題——此類問題造成的影響更是深遠而不易覺察。當考慮要構建或使用遺傳修飾生物時，對實驗室工作的危害度評估可能比從事遺傳學正常生物〔未修飾〕工作的危害度評估更為重要，不能僅憑經(jīng)驗或未經(jīng)驗證的文獻來評估此類生物的潛在危害。例如：構建轉基因動物常用的逆轉錄病毒載體，重組將外源基因轉入體內的同時，伴隨有致病性增強的過程。必須經(jīng)過驗證明確所必需的生物平安級別，并對供體生物的特性、將要轉移的核酸序列的性質、受體生物的特性以及環(huán)境特性做一綜合評估，才能確定遺傳修飾生物體所要求的生物平安水平，并做到平安操作目標基因。.重組核酸技術和生物平安生物表達系統(tǒng)：由符合一系列標準并可平安使用的載體和宿主細胞組成。如果所要插入的外源基因序列不要求更高級別的生物平安水平，大局部常規(guī)遺傳工程實驗可以按BSL-1平安操作大腸桿菌工程菌。用于基因治療和有效轉移基因到組織培養(yǎng)細胞的病毒載體，大多是復制缺陷型的，但操作時應采用與構建這些載體時的親本病毒相同的生物平安水平。攜帶外源性遺傳信息的動物〔轉基因動物〕應當在靶基因編碼產(chǎn)物特性的防護水平下進行操作，定點缺失特性基因的動物〔基因敲除動物〕一般不表現(xiàn)特殊的生物危害。基因產(chǎn)物是否具有潛在的藥理學活性是必須考慮的一項重要因素。比方，克隆、表達編碼毒素的基因就需要較高的生物平安水平，因為當采用病毒載體過量表達這些毒素蛋白時有可能產(chǎn)生難以預料的后果。危害度評估：一種動態(tài)過程，必須密切跟蹤該生物因子研究的最新進展，一旦獲得載體/宿主的新信息時，需要隨時將相關工作歸入更高或更低的生物平安水平。.放射性物質的平安使用輻射防護的三項根本原那么，即輻射事業(yè)的正當化、防護水平的最優(yōu)化和個人劑量的限額化。固體廢物的處理放射性藥品使用后殘留和剩余局部被稱為放射性廢物。放射性廢物處理不當會造成環(huán)境的放射性污染,影響工作人員和周圍居民的健康。主要采用放置法，被放射性藥物污染的固體廢物應存在固定的指定地點并采用適當?shù)钠帘挝锛右苑雷o,待其自然衰變后,當作非放射性廢物處理即可。如為過期的發(fā)生器吸附柱應標明日期并用塑料袋包裝后置于貯源室,待其自然衰變后再處理。放射性廢物的轉運：放射性廢物轉運的關鍵是廢物的包裝容器，事先要做好平安檢驗，對容器的強度、屏蔽防護、密封系統(tǒng)、包裝的標志等都有嚴格的規(guī)定。要求做到平安運輸，防止發(fā)生火災、容器顛覆及包裝破損而使放射性廢物泄漏，污染環(huán)境。.放射性物質的平安使用液體廢物的處理應根據(jù)放射性物質的最大容許濃度、化學性質、放射性強度、廢液的容積以及下水道的排水設備等情況進行不同的處理。一般采用放置法,半衰期短的也可用稀釋法到達容許排放水平。放射性強度低的廢水也可直接排入下水道,但其放射性濃度不得超過露天水源中限制嘗試的100倍。不能直接排入下水道的放射性廢液,可采用衰變池貯存10個半衰期后排入下水道。注意：未經(jīng)固化處理的放射性廢液和濃縮物以及尚未選定最終處置方案的固化體等放射性廢物，都應在固定地點貯存在專用的容器中，貯存過程中注意平安，不能使反射性廢物泄漏。不同的比活度的廢物要求使用不同的貯罐。.紫外線輻射的危害和防護紫外輻射是指波長范圍在100nm—400nm的光輻射，一般把100nm—280nm稱作UVC，把280nm—315nm稱作UVB，把315nm—400nm稱作UVA。其中我們觀察膠體用的最多的就是280nm—315nm的紫外線。紫外線的有害效應主要是由于紫外線對脫氧核糖核酸〔DNA〕的作用造成的。最有害的效應是細胞致死，其它的效應那么包括致突、致癌、干擾DNA、核糖核酸〔RNA〕和蛋白質的合成、細胞分裂的延遲、以及在通透性和能動性上的變化等。.紫外線輻射的危害和防護在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)。只能通過吸收有害波長的濾片或平安玻璃片才能觀察。在紫外光下操作時要戴適宜的預防性手套。應佩戴具有紫外線防護功能的護目鏡和/或防護面罩，并遮蔽暴露的皮膚。紫外照射消毒后由于空氣中臭氧富集，不宜立即開始工作，應在停止紫外照射30min后開始工作，有條件的實驗室，可安裝無臭氧紫外燈。超凈工作臺中進行紫外照射消毒后，也應用強風進行吹掃后再進行工作，以免臭氧危害身體健康。.含有EB的廢棄物的處理廢液描述廢棄處理方法緩沖液ＥＢ濃度較低（<0.5mg/L）在排入下水道之前，緩沖液請先用過濾器或“茶包”處理。確定緩沖液中在紫外燈下無熒光方可下排儲備溶液ＥＢ濃度較高（1-10mg/mL）濃度之高，使得處理EB的過濾和吸收方法都無法適用。將這些儲液交由相關部門專業(yè)人員處理處理用過的過濾器和“茶包”ＥＢ在（過濾/吸收過程）污染將已用的過濾器和茶包明確標記。用過的過濾器和茶包交由相關