抑制肝星狀細(xì)胞遷移的中藥篩選及中藥作用環(huán)節(jié)的研究的中期報(bào)告

抑制肝星狀細(xì)胞遷移的中藥篩選及中藥作用環(huán)節(jié)的研究的中期報(bào)告尊敬的評(píng)委老師們，大家好！我是XX，我的研究方向是中藥對(duì)肝星狀細(xì)胞遷移的抑制作用研究。今天我來(lái)給大家匯報(bào)我的中期研究進(jìn)展情況。一、研究背景肝星狀細(xì)胞是肝組織中重要的細(xì)胞種類之一，其功能主要是生成膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶和抗纖維化分子等，對(duì)肝臟的生理環(huán)境起到保持平衡的作用。但在肝損傷時(shí)，肝星狀細(xì)胞會(huì)發(fā)生一系列變化，如增殖和分化，這些變化可能會(huì)導(dǎo)致肝纖維化等疾病的發(fā)生。因此，肝星狀細(xì)胞的遷移與肝纖維化的發(fā)生密切相關(guān)。中藥作為一種歷史悠久的治療手段，在肝病治療中也有著重要的應(yīng)用。目前已經(jīng)有很多研究表明，中藥可以通過(guò)多種途徑降低肝纖維化的發(fā)生率。但其中對(duì)于中藥對(duì)肝星狀細(xì)胞遷移的影響還少有系統(tǒng)性的研究和探討。因此，我們希望通過(guò)本研究，篩選出能夠抑制肝星狀細(xì)胞遷移的具有潛力的中藥，為將來(lái)臨床治療提供一定的參考。二、研究方法1、細(xì)胞培養(yǎng)本研究采用LX-2細(xì)胞作為肝星狀細(xì)胞模型。將LX-2細(xì)胞以DMEM高糖培養(yǎng)液為培養(yǎng)基，在37℃、5%CO2下生長(zhǎng)至80%的收獲量，用胰酶-EDTA消化酶切成單個(gè)細(xì)胞。2、細(xì)胞遷移試驗(yàn)此次實(shí)驗(yàn)采用Transwell遷移實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定細(xì)胞的遷移情況。首先在24孔孔板的下孔中置入篩網(wǎng)，接著在篩網(wǎng)上面分別涂上0.1ml的試樣與0.5ml的生長(zhǎng)液，然后將LX-2細(xì)胞懸浮液加入上孔中，在37℃，5%CO2下孵育24小時(shí)，最后用50%甲醇+水形成固定液+振蕩器成型后4%多聚體乓酸染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞遷移數(shù)。3、活性成分篩選篩選的活性成分是通過(guò)中藥對(duì)LX-2細(xì)胞遷移情況的抑制效果來(lái)判定的。本次研究采用LC-MS/MS技術(shù)來(lái)分離和鑒定活性成分。首先對(duì)所有中藥進(jìn)行初步篩選，通過(guò)Transwell實(shí)驗(yàn)找出能夠inhibitchange肝星狀細(xì)胞遷移的中藥；然后采用UPLC技術(shù)對(duì)活性成分進(jìn)行進(jìn)一步分離和提純，并使用LC-MS/MS技術(shù)進(jìn)行鑒定。三、研究進(jìn)展到目前為止，我們已經(jīng)完成了以下的工作：1、成功建立肝星狀細(xì)胞的Transwell遷移實(shí)驗(yàn)體系，并對(duì)幾種中藥的抑制作用進(jìn)行了初步篩選。2、初步篩選出了15種具有抑制肝星狀細(xì)胞遷移能力的中藥，并將其進(jìn)行了活性成分篩選。3、通過(guò)UPLC和LC-MS/MS技術(shù)，進(jìn)一步減少中藥液體的多余部分，提高重要成分含量，并成功地分離出了多種活性成分。四、未來(lái)研究計(jì)劃我們將進(jìn)一步開展以下工作：1、對(duì)所篩選出來(lái)的中藥和活性成分的抑制效果進(jìn)行比較，找出具有更好抑制效果的中藥和活性成分。2、進(jìn)一步研究這些活性成分對(duì)肝星狀細(xì)胞遷移的作用機(jī)理，并探索其更廣泛的臨床應(yīng)用。三、結(jié)論通過(guò)本次中期的研究，我們初步篩選出了15種對(duì)肝星狀細(xì)胞具有抑制作用的中藥，并分離出了多種活性成分。