幾種菌種的保存及復(fù)蘇方法及極有趣味的語(yǔ)文游戲-適合語(yǔ)文課堂教學(xué)

幾種菌種的保存及復(fù)蘇方法（含擴(kuò)增方法）

定期移植法，亦稱傳代培養(yǎng)保藏法，包括斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、液體培養(yǎng)等。是指將菌種接種于適宜的培養(yǎng)基中，最適條件下培養(yǎng)，待生長(zhǎng)充分后，于4～6℃進(jìn)行保存并間隔一定時(shí)間進(jìn)行移植培養(yǎng)的菌種保藏方法。

操作步驟如下：

1培養(yǎng)基制備

1.1器皿準(zhǔn)備

培養(yǎng)基制備過(guò)程中所用的一些玻璃器皿，如三角瓶、試管、培養(yǎng)皿、燒杯、吸管等，經(jīng)洗滌、干燥、包裝、滅菌后使用。

1.2溶解培養(yǎng)基配料

先在燒杯中放適量水，按培養(yǎng)基配方稱取各項(xiàng)材料，依次將緩沖化合物、主要元素、微量元素、維生素等材料加入水中溶解，最后加足水量，攪拌均勻。

1.3調(diào)pH值

配料溶解后將培養(yǎng)基冷卻至室溫，根據(jù)要求加稀酸（0.1mol/L鹽酸）或稀堿(10%氫氧化鈉)調(diào)pH值。加酸或堿液時(shí)要緩慢、少量、多次攪拌，防止局部過(guò)堿或過(guò)酸而導(dǎo)致測(cè)量不準(zhǔn)確和營(yíng)養(yǎng)成分被破壞。

1.4加凝固劑

配制固體培養(yǎng)基時(shí)需加凝固劑，如瓊脂、明膠等。將凝固劑加入液體培養(yǎng)基中，加熱并不斷攪拌至融解，再補(bǔ)足所蒸發(fā)水分。

1.5過(guò)濾分裝

在二層紗布中間夾入脫脂棉，將配好的培養(yǎng)基趁熱過(guò)濾并分裝。斜面培養(yǎng)基分裝量約為試管高度的四分之一(4～5mL)，穿刺培養(yǎng)基分裝量以試管高度的二分之一為宜。分裝過(guò)程中勿使培養(yǎng)基沾污管口，以免弄濕棉塞造成污染。

1.6包扎標(biāo)記

將試管加棉塞，外面包扎一層牛皮紙或鋁箔并注明培養(yǎng)基名稱及配制日期。

1.7滅菌

根據(jù)要求將培養(yǎng)基滅菌，通常蒸汽滅菌為121℃，15～20min。

1.8斜面擺放

滅菌后及時(shí)擺放斜面，斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管管長(zhǎng)的二分之一為宜。

1.9無(wú)菌檢查

將滅菌的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作無(wú)菌檢驗(yàn)，通常30℃培養(yǎng)1～3天。無(wú)菌檢查合格后將其保存于4℃下備用。

2接種

2.1斜面接種

2.1.1點(diǎn)接

把菌種點(diǎn)接在斜面中部偏下方處。適用于擴(kuò)散型生長(zhǎng)及絨毛狀氣生菌絲類霉菌（如毛霉、根霉等）。

2.1.2中央劃線

從斜面中央自下而上劃一直線。適用于細(xì)菌和酵母菌等。

2.1.3稀波狀蜿蜒劃線法

從斜面底部自下而上劃“之”字形線。適用于易擴(kuò)散的細(xì)菌，也適用于部分真菌。

2.1.4密波狀蜿蜒劃線法

從斜面底部自下而上劃密“之”字形線。能充分利用斜面獲得大量菌體細(xì)胞，適用于細(xì)菌和酵母菌等。

2.1.5挖塊接種法

挖取菌絲體連同少量培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)接到新鮮斜面上。適用靈芝等擔(dān)子菌類真菌。

2.2穿刺接種

用接種針從原菌種斜面上挑取少量菌體，從柱狀培養(yǎng)基中心自上而下刺入，直到接近管底（勿穿到管底），然后沿原穿刺途徑慢慢抽出接種針。適用于細(xì)菌和酵母菌等。

2.3液體接種

挑取少量固體斜面菌種或用無(wú)菌滴管等吸取原菌液接種于新鮮液體培養(yǎng)基中。

3培養(yǎng)

將接種后的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，在適宜的條件下培養(yǎng)至細(xì)胞穩(wěn)定期或得到成熟孢子。細(xì)菌培養(yǎng)溫度一般為30～37℃，真菌培養(yǎng)溫度一般為25～28℃。

4保藏

培養(yǎng)好的菌種于4～6℃保存，根據(jù)要求每3～6個(gè)月移植一次。某些菌種，如芽裂酵母，阿舒假囊酵母，棉病囊霉等，須1～3個(gè)月移植一次。

保藏濕度用相對(duì)濕度表示，通常為50%～70%。

斜面菌種應(yīng)保藏相繼三代培養(yǎng)物以便對(duì)照，防止因意外和污染造成損失。

液體石蠟保藏法

亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，最適條件下培養(yǎng)至菌種長(zhǎng)出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個(gè)斜面，再直立放置于低溫（4～6℃）干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。

操作步驟如下：

1液體石蠟的準(zhǔn)備

選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：

121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。

160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。

2斜面培養(yǎng)物的制備

參照定期移植法。

3灌注石蠟

將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件下注入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上，液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4保藏

4.1注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。

4.2保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。

5恢復(fù)培養(yǎng)

恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。

3.標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇、復(fù)壯及標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備

3.1物品及試劑：接種針、酒精燈、移液管、75%酒精及75%酒精棉球

3.2培養(yǎng)基

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基:用于黑曲霉復(fù)蘇、復(fù)壯.用于白色念珠菌復(fù)蘇、復(fù)壯.

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基:用于生孢梭菌復(fù)蘇、復(fù)壯.

營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基:用于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、乙型副傷寒沙門(mén)菌、短小芽孢桿菌、銅綠假單胞菌復(fù)蘇、復(fù)壯。

3.3操作步驟：

a.打開(kāi)潔凈工作臺(tái)。

b.在安瓿的外表面用75%的酒精擦拭并讓其自然風(fēng)干。

c.用一小砂輪在安瓿的上部劃一條線，用手輕輕將安瓿掰開(kāi)（開(kāi)啟安瓿時(shí)必須小心，因?yàn)榘碴秤鰺釙r(shí)可能會(huì)破裂）。

d.以無(wú)菌方法用一無(wú)菌吸管從已準(zhǔn)備好的上述液體培養(yǎng)基中移取0.5～0.8ml到安瓿中。

e.輕輕地旋轉(zhuǎn)安瓿以使凍干菌種和液體培養(yǎng)基充分混合并完全溶解。

f.用無(wú)菌吸管將安瓿內(nèi)菌液全部轉(zhuǎn)接到相應(yīng)的液體培養(yǎng)基。

g.根據(jù)安瓿上所標(biāo)明的不同菌種類型而將其培養(yǎng)于相應(yīng)的溫度（細(xì)菌培養(yǎng)溫度30～35℃，培養(yǎng)18～24小時(shí)；真菌培養(yǎng)溫度23～28℃，培養(yǎng)3～5天。觀察是否渾濁，渾濁說(shuō)明菌種復(fù)蘇生長(zhǎng)；若不渾濁，細(xì)菌應(yīng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7天，真菌應(yīng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至14天，若仍未渾濁，滅菌處理。

h.黑曲霉的菌懸液先室溫待菌懸液融化后用無(wú)菌吸管吸取管內(nèi)液體1～2滴滴在改良馬丁瓊脂斜面上，用吸管涂布均勻，置23～28℃培養(yǎng)5～7天，斜面正面為黑褐色厚絨狀，色澤均一，不應(yīng)有雜色，斜面?zhèn)让鏌o(wú)色，接近菌層培養(yǎng)基略帶黃色。確認(rèn)后用含有0.05%（ml/ml）的吐溫-80的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液洗脫到無(wú)菌試管中。

i.取經(jīng)復(fù)蘇后的上述細(xì)菌菌液8-10ml至液體培養(yǎng)基中按g項(xiàng)操作對(duì)菌種進(jìn)行復(fù)壯。以無(wú)菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入100ml20%的無(wú)菌甘油混勻，1-2ml/管分裝于凍存管。每個(gè)菌種制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。黑曲霉的h項(xiàng)下洗脫液按h項(xiàng)下方法進(jìn)行復(fù)壯，制成復(fù)壯后的孢子懸液20ml。以無(wú)菌技術(shù)向復(fù)壯后的菌種中加入20ml、30%的無(wú)菌甘油混勻，1-2ml/管封存于凍存管。制備10支，按順序進(jìn)行編號(hào)，最后一支做為質(zhì)控管進(jìn)行質(zhì)量控制，即進(jìn)行相應(yīng)的確認(rèn)。其余作為儲(chǔ)備管。將上述制備好的凍存管逐支粘貼標(biāo)簽。內(nèi)容包括：菌種名稱、菌種代號(hào)、編號(hào)、代次、制備日期、制備人、貯存條件、有效期至等。

j．儲(chǔ)備菌種管制備成功，儲(chǔ)存于－20℃，有效期為三年。

3.4菌種確認(rèn)

用無(wú)菌接種環(huán)從質(zhì)控管中取細(xì)菌培養(yǎng)物接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，或相應(yīng)的宜于該細(xì)菌生長(zhǎng)的鑒別平板上，劃線分離出單個(gè)菌落。然后在30～35℃下培養(yǎng)2～3天；同樣的方法取真菌到玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板，并在23～28℃下培養(yǎng)7天；培養(yǎng)后，觀察其菌落形態(tài)，應(yīng)符合該菌種形態(tài)特征。

3.5污染處理

假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長(zhǎng)，則說(shuō)明或操作有污染或菌種不純。將此被污染了的培養(yǎng)物滅菌處理?？蓪ふ以蛑匦路蛛x挑選純菌落轉(zhuǎn)接斜面菌種作為第四代。并重新制備儲(chǔ)備菌種管

3.6菌種的傳代與保藏

將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上，每萌發(fā)一次即稱為一代，因此，當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，即認(rèn)為已傳代一次，從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代，冷凍干燥的原始菌種開(kāi)啟后轉(zhuǎn)種后為第1代，直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)（自原始菌種凍干粉起）不得超過(guò)5代。

菌種的傳代保藏過(guò)程

3.3項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)菌的復(fù)蘇為傳第一代，復(fù)壯為第二代。傳第三代時(shí)取1支凍存管自然解凍，將其轉(zhuǎn)接斜面菌種作為工作用菌種。此時(shí)，工作用菌種為第3代。工作用菌種，分為兩類：一類用于定期傳代(W3)，一類用于實(shí)驗(yàn)用（S3）。

定期傳代用菌的傳代其操作步驟如下（斜面接種法）：

（1）從冰箱冷藏室中取出菌種斜面后，應(yīng)在室溫放置約30分鐘。

（2）將裝有新鮮配制的培養(yǎng)基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期，和傳代菌種一并移入潔凈工作臺(tái)，打開(kāi)紫外燈照射一小時(shí)。

（3）關(guān)閉紫外燈。點(diǎn)燃酒精燈，左手握住菌種斜面，將管口靠近火焰上方，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅約30秒，隨后將接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過(guò)三次。

（4）右手用無(wú)名指、小指及掌部夾住管塞，左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕拔開(kāi)管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷后再至菌苔上，刮取少量菌苔，隨即取出接種棒并將菌種管口移至火焰上方。

（5）塞上管塞，左手將菌種管放下，取營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面（或改良馬丁瓊脂斜面）一支，照上述操作打開(kāi)管塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部向上劃一條直線，然后從底部向上作連續(xù)曲線劃線，一直劃到斜面頂端，使細(xì)菌接種在斜面的表面上。

（6）取出接種環(huán)，在火焰上方將培養(yǎng)基管蓋上塞子，然后將接種過(guò)細(xì)菌的接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

（7）將已接種好的細(xì)菌管置30～35℃細(xì)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)22～24h，真菌管置23～28℃真菌培養(yǎng)箱最多培養(yǎng)7天。

當(dāng)工作用菌種傳代代數(shù)小于5時(shí)，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種，如：（W3）可直接轉(zhuǎn)接為（W4）。按上述程序操作，直至（W4）轉(zhuǎn)為（W5）為止，需重新接種，舊的工作菌種進(jìn)行銷(xiāo)毀。

菌種斜面的培養(yǎng)、保藏條件及時(shí)間

菌種培養(yǎng)條件及時(shí)間培養(yǎng)基保存條件及時(shí)間

大腸埃希菌(CMCC(B)44102)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

金黃色葡萄球菌(CMCC(B)26003)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

枯草芽孢桿菌(CMCC(B)63501)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

銅綠假單胞菌(CMCC(B)10104)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

乙型副傷寒沙門(mén)菌(CMCC(B)50094)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

生孢梭菌(CMCC(B)64941)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

白色念珠菌(CMCC(F)98001)23～28℃最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

黑曲霉(CMCC(F)98003)23～28℃最多7天改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

短小芽孢桿菌(CMCC(B)63602)30～35℃22～24h營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2℃～8℃保存3個(gè)月

注：菌種斜面1次/周觀察狀態(tài)是否正常。

3.7菌種的使用及銷(xiāo)毀

每次進(jìn)行菌種復(fù)活時(shí)，只能復(fù)活一個(gè)菌種。如果要復(fù)活其他菌時(shí)，應(yīng)對(duì)所用物品重新消毒滅菌。

每次操作，都應(yīng)進(jìn)行記錄。菌種管上應(yīng)貼有牢固的標(biāo)簽。標(biāo)明菌種名稱、菌種代號(hào)、代次、傳代人、編號(hào)和傳代日期、貯存條件、有效期至等。

廢棄菌種及實(shí)驗(yàn)用品廢棄物的處理：121℃高壓蒸汽滅菌20分鐘。并對(duì)操作過(guò)程進(jìn)行記錄。極有趣味的語(yǔ)文游戲－適合語(yǔ)文課堂教學(xué)極有趣味的語(yǔ)文游戲玩法：第一輪：選拔題1、成語(yǔ)對(duì)對(duì)子（注意對(duì)仗要工整，意思要相對(duì)）。例：粗茶淡飯（山珍海味）答案：流芳百世（遺臭萬(wàn)年）指鹿為馬（點(diǎn)石成金）精雕細(xì)刻（粗制濫造）雪中送炭（錦上添花）伶牙利齒（笨嘴拙舌）2、說(shuō)出有“舌”字的成語(yǔ)，說(shuō)得最多的勝出。答案：七嘴八舌、妄口八舌、閑嘴淡舌、唇槍舌劍、張口結(jié)舌、笨嘴笨舌、鸚鵡學(xué)舌等。3、各舉出以一、二、三、四、五、六、七、八、九、十開(kāi)頭的俗語(yǔ)（包括成語(yǔ)、慣用語(yǔ)等）。例如：一是一，二是二答案：一不做,二不休一心一意二一添作五三心二意三下五除二三人同行，必有我?guī)熕耐ò诉_(dá)五花八門(mén)六六大順七上八下八九不離十八仙過(guò)海，各顯神通九九歸一九牛二虎之力十有八九十拿九穩(wěn)4、下面人名各取自什么成語(yǔ)？杜鵬程（鵬程萬(wàn)里）陳殘?jiān)疲L(fēng)卷殘?jiān)疲┩跞沃兀ㄈ沃氐肋h(yuǎn)）劉海粟（滄海一粟）丁慧中（秀外慧中）焦若愚（大智若愚）5、成語(yǔ)填空第一組：（心）服（口）服（以）德（報(bào)）德（以）訛（傳）訛（以）牙（還）牙（倚）老（賣(mài)）老（將）計(jì)（就）計(jì)第二組：神（乎）（其）神精（益）（求）精痛（定）（思）痛欺（人）（自）欺日（復(fù)）（一）日微（乎）（其）微8、怪體詩(shī)如何讀？龍虎虎望山山山湖湖湖湖湖海海海海會(huì)仙仙仙仙仙仙仙仙(一龍二虎望三山,五湖四海會(huì)八仙)第二輪：初級(jí)1、“大珠小珠落玉盤(pán)”所形容的是什么樂(lè)器的彈奏聲？A、琵琶B、古箏C、揚(yáng)琴2、《孔雀東南飛》里，劉蘭芝"十三能織素，十四學(xué)裁衣，十五彈箜篌，十六誦詩(shī)書(shū)”，請(qǐng)問(wèn)，“箜篌”是什么樂(lè)器：A、撥弦樂(lè)器B、擊弦樂(lè)器（A）3、"有板有眼"的"板"是我國(guó)傳統(tǒng)音樂(lè)節(jié)奏中的：A、強(qiáng)拍B、弱拍（A）4、我們常說(shuō)"隔著門(mén)縫看人”，當(dāng)我們隔著門(mén)縫看人時(shí)，看到的人：A、比原來(lái)扁了B、和原來(lái)一樣C、比原來(lái)寬了（B）5、在古代，“爵”是一種什么器皿？A、食器B、酒器（A）6、“白雪公主”這個(gè)形象最早來(lái)自于：A、格林童話B、安徒生童話C、伊索寓言（B）7、在“精衛(wèi)填?！钡墓适吕?"精衛(wèi)”是A、一個(gè)人B、一只鳥(niǎo)C、一只猴子D、一條龍（B）8、王昭君沒(méi)有得到漢元帝的召見(jiàn)而遠(yuǎn)嫁匈奴單于，是因?yàn)椋篈、王妃對(duì)她的陷害B、畫(huà)師歪曲她的形象C、大臣說(shuō)她的壞話（B）9、安徒生童話《海的女兒》里，小美人魚(yú)變成人是為了見(jiàn)到誰(shuí)？A、漁夫B、皇后C、王子（C）10“臥薪嘗膽”說(shuō)的是：A、夫差B、范蠡C、管仲D、勾踐（D）第三輪：擂臺(tái)題從上面剩下的題目選。1、第一次搶答你知道下面的慣用語(yǔ)是什么嗎？把在團(tuán)體中起主導(dǎo)的人喻為（主心骨）把足智多謀的人喻為（智多星）把接待賓客的當(dāng)?shù)刂魅擞鳛椋|道主）把公堂臺(tái)階下受審的囚犯喻為（階下囚）把吝嗇錢(qián)財(cái)、一毛不拔的人喻為（鐵公雞）把混混噩噩、不明事理的人喻為（糊涂蟲(chóng)）把世故圓滑的人喻為（老油條）把沒(méi)有專業(yè)知識(shí)的外行人喻為（門(mén)外漢）把技藝不精、勉強(qiáng)湊合的人喻為（三腳貓）2、第二次搶答數(shù)字猜成語(yǔ)（小黑板）12345609（七零八落）1256789（丟三落四）1+2+3（接二連三）333555（三五成群）3.5（不三不四）510（一五一十）9寸+1寸=1尺（得寸進(jìn)尺）3、第三次搶答說(shuō)出歇后語(yǔ)的后半部分：矮子坐高凳--夠不著八月的核桃--擠滿了人（仁）稻草人救火--引火上身、同歸于盡擦脂粉進(jìn)棺材--死要面子炒咸菜放鹽巴--太閑（咸）了廁所里掛個(gè)鐘--有始有終外甥打燈籠--照舅豬鼻子插蔥--裝象一、成語(yǔ)對(duì)對(duì)子：（注意對(duì)仗要工整，意思要相對(duì)）井然有序（雜亂無(wú)章、混亂不堪）指鹿為馬（點(diǎn)石成金）固若金湯（危如朝露、不堪一擊）流芳百世（遺臭萬(wàn)年）雪中送炭（錦上添花、火上澆油）伶牙利齒（笨嘴拙舌）精雕細(xì)刻（粗制濫造、粉妝玉砌）粗茶淡飯（錦衣玉食）二、成語(yǔ)不離“舌”形容信口胡說(shuō)（枉口拔舌）形容驚詫無(wú)言（張口結(jié)舌、瞠目結(jié)舌）形容能說(shuō)會(huì)道（唇槍舌劍、巧舌如簧）形容不善辭令（笨嘴拙舌）形容隨聲附和（鸚鵡學(xué)舌）形容人多嘴雜（七嘴八舌）形容說(shuō)話輕?。ㄝp嘴薄舌、油嘴滑舌）三、數(shù)字俗語(yǔ)：表示實(shí)實(shí)在在，不可更改時(shí)用（一言為定）表示做事不考慮周到，干了再說(shuō)時(shí)用（不管三七二十一）表示一樣?xùn)|西兩人平分時(shí)用（二一添作五）表示某人干事麻利時(shí)用（三下五除二）表示差不多時(shí)用（八九不離十）表示某人打小算盤(pán)時(shí)用（小九九）表示歸根到底時(shí)用（九九歸一）表示把握大時(shí)用（十拿九穩(wěn)）表示很不容易時(shí)用（九牛二虎之力）表示信心十足時(shí)用（萬(wàn)無(wú)一失）表示距離遠(yuǎn)時(shí)用（十萬(wàn)八千里）四、下面人名各取自什么成語(yǔ)？杜鵬程（鵬程萬(wàn)里）陳殘?jiān)疲L(fēng)卷殘?jiān)疲┩跞沃兀ㄈ沃氐肋h(yuǎn)）劉海粟（滄海一粟）丁慧中（秀外慧中）甘如飴（甘之如飴）焦若愚（大智若愚）五、成語(yǔ)填空：（心）服（口）服（以）德（報(bào)）德（以）訛（傳）訛（以）牙（還）牙（倚）老（賣(mài)）老（將）計(jì)（就）計(jì)神（乎）（其）神精（益）（求）精痛（定）（思）痛欺（人）（自）欺將（門(mén)）（有）將日（復(fù)）（一）日微（乎）（其）微六、寶塔詩(shī)如何讀？開(kāi)山滿桃山杏山好景好來(lái)山客看山里山僧山客山山中山路轉(zhuǎn)山崖（這首詩(shī)這樣讀的:山中山路轉(zhuǎn)山崖山客山僧山里來(lái)山客看山好景好山桃山杏滿山開(kāi)）七、怪體詩(shī)如何讀？龍虎虎望山山山湖湖湖湖湖海海海海會(huì)仙仙仙仙仙仙仙仙萬(wàn)國(guó)州州州州州州州州州掉川川川川（數(shù)一數(shù)龍虎山湖海仙州川便知一二：一龍二虎望三山，五湖四海會(huì)八仙，萬(wàn)國(guó)九州掉四川。）八、下列對(duì)聯(lián)各詠的是誰(shuí)？1、一門(mén)父子三詞客，千古文章四大家。（三蘇、韓愈、柳宗元、歐陽(yáng)修、蘇軾）2、豪氣壓群雄，能使力士脫靴，貴妃捧硯；仙才媲美，不讓參軍俊逸，開(kāi)府清新。（李白）3、玉帳深宵悲駿馬，楚歌四面促紅妝。（項(xiàng)羽）4、四面湖山歸眼底，萬(wàn)家憂樂(lè)到心頭。（范仲淹）九、你知道下面的慣用語(yǔ)是什么嗎？1、把在團(tuán)體中起主導(dǎo)的人喻為（主心骨）2、把足智多謀的人喻為（智多星）3、把接待賓客的當(dāng)?shù)刂魅擞鳛椋|道主）4、把公堂臺(tái)階下受審的囚犯喻為（階下囚）5、把吝嗇錢(qián)財(cái)、一毛不拔的人喻為（鐵公雞）6、把混混噩噩、不明事理的人喻為（糊涂蟲(chóng)）7、把世故圓滑的人喻為（老狐貍）8、把沒(méi)有專業(yè)知識(shí)的外行人喻為（門(mén)外漢）9、把技藝不精、勉強(qiáng)湊合的人喻為（南郭先生）十、數(shù)字猜成語(yǔ)：12345609（七零八落）1256789（丟三落四）1+2+3（接二連三）333555（三五成群）3.5（不三不四）510（一五一十）9寸+1寸=1尺（得寸進(jìn)尺）十一、巧用標(biāo)點(diǎn)有位書(shū)生到親戚家串門(mén)，頃刻間外面就下起雨來(lái)，這時(shí)天已將晚，他只得打算住下來(lái)。但這位親戚卻不樂(lè)意，于是就在紙上寫(xiě)了-一句話:下雨天留客天留人不留書(shū)生看了，即刻明臼親戚的意思，卻又不好明說(shuō)，就心想一不做、二不休，干脆加了幾個(gè)標(biāo)點(diǎn):下雨天，留客天，留人不?留!親戚一看，這句話的意思完全反了。也就無(wú)話可說(shuō)，只好給書(shū)生安排了住宿。其實(shí)，這句話除了書(shū)生標(biāo)點(diǎn)的這一種辦法外。還有三種標(biāo)法，可分別使它變成陳述、疑問(wèn)、問(wèn)答三種句式，請(qǐng)你加上標(biāo)