非臨床藥代動(dòng)力學(xué)-2

非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與評(píng)價(jià)

Testdesignandevaluationofnon-clinicalpharmacokineticsfornewdrugs1新藥發(fā)現(xiàn)、開發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)

及淘汰過(guò)程的殘酷性目前新藥淘汰的分類療效（10-20%）

毒性（30-40%）

代謝動(dòng)力學(xué)（30-40%）?關(guān)心商業(yè)因素（<10%）2研究目的非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究是通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)、外和人體外的研究方法，揭示新藥在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律獲得新藥的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),闡明藥物的吸收、分布、代謝和排泄的過(guò)程和特點(diǎn)3?在藥效學(xué)和毒理學(xué)評(píng)價(jià)中，藥物或活性代謝物濃度數(shù)據(jù)及其相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)是產(chǎn)生、決定或闡明藥效或毒性大小的基礎(chǔ)，和提供藥物對(duì)靶器官的效應(yīng)（藥效或毒性）的依據(jù)?在藥物制劑學(xué)研究中，藥代動(dòng)力學(xué)研究也是評(píng)價(jià)藥物制劑特性和質(zhì)量的重要依據(jù)；?在藥物臨床研究中，為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床研究給藥方案提供有關(guān)信息?在藥物設(shè)計(jì)研究中，為藥物結(jié)構(gòu)改造和設(shè)計(jì)提供結(jié)構(gòu)與動(dòng)力學(xué)關(guān)系的信息45研究的六項(xiàng)基本原則非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究，要遵循以下基本原則：（一）試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_（二）分析方法可靠（三）試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理（四）所得參數(shù)全面，滿足評(píng)價(jià)要求（五）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析與評(píng)價(jià)（六）具體問題具體分析6試驗(yàn)設(shè)計(jì)的四點(diǎn)總體要求1試驗(yàn)藥品應(yīng)提供受試藥物的名稱、劑型、批號(hào)、來(lái)源、純度保存條件及配制方法使用的受試藥物及劑型應(yīng)盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究使用的一致研制單位應(yīng)提供質(zhì)檢報(bào)告72試驗(yàn)動(dòng)物

一般采用成年和健康的動(dòng)物。常用動(dòng)物種屬有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等。選擇動(dòng)物的原則如下:首選動(dòng)物：盡可能與藥效學(xué)和毒理學(xué)研究一致。盡量在清醒狀態(tài)下試驗(yàn)，動(dòng)力學(xué)研究最好從同一動(dòng)物多次采樣。創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種或兩種以上的動(dòng)物，其中一種為嚙齒類動(dòng)物；另一種為非嚙齒類動(dòng)物（如犬、小型豬或猴等）。其它類型的藥物，可選用一種動(dòng)物，建議首選非嚙齒類動(dòng)物。經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類動(dòng)物。83劑量選擇動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個(gè)劑量組，其高劑量最好接近最大耐受劑量，中、小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取。主要考察在所試劑量范圍內(nèi)，藥物的體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程是屬于線性還是非線性，以所得結(jié)果有利于解釋藥效學(xué)和毒理學(xué)研究中的發(fā)現(xiàn)，并為新藥的進(jìn)一步開發(fā)和研究提供信息。4給藥途徑所用的給藥途徑和方式，應(yīng)盡可能與臨床用藥一致。9研究項(xiàng)目?jī)?nèi)容1血藥濃度-時(shí)間曲線

2藥物的吸收

3藥物的分布

4藥物的排泄

5藥物與血漿蛋白的結(jié)合6藥物的生物轉(zhuǎn)化7對(duì)藥物代謝酶活性的影響8藥代動(dòng)力學(xué)與毒代動(dòng)力學(xué)

101血藥濃度-時(shí)間曲線

受試動(dòng)物數(shù)?以血藥濃度-時(shí)間曲線的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)有不少于5個(gè)數(shù)據(jù)為限計(jì)算所需動(dòng)物數(shù)。最好從同一動(dòng)物多次取樣。如由多只動(dòng)物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃度-時(shí)間曲線，應(yīng)相應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)，以反映個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。?建議受試動(dòng)物采用雌雄各半，如發(fā)現(xiàn)動(dòng)力學(xué)存在明顯的性別差異，應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)以便認(rèn)識(shí)試驗(yàn)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)的性別差異。?對(duì)于單一性別用藥，可選擇與臨床用藥一致的性別。11

采樣點(diǎn)的確定

?給藥前需要采血作為空白樣品。

?給藥后的一個(gè)完整的血藥濃度-時(shí)間曲線，采樣時(shí)間點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（或峰濃度附近）和消除相。

?一般在吸收相至少需要2~3個(gè)采樣點(diǎn)，平衡相在峰濃度附近至少需要3個(gè)采樣點(diǎn)，消除相需要4~6個(gè)采樣點(diǎn)。對(duì)于吸收快的藥物，應(yīng)盡量避免第一個(gè)點(diǎn)是Cmax。

?整個(gè)采樣時(shí)間至少應(yīng)持續(xù)到3~5個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/10~1/20。

?為保證最佳采樣點(diǎn)，建議在正式試驗(yàn)前，選擇2~3只動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)。

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藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算

?將試驗(yàn)中測(cè)得的各受試動(dòng)物的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)分別進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算，求得受試藥物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

?靜脈注射給藥，應(yīng)提供t1/2（消除半衰期）、Vd（表觀分布容積）、AUC（血藥濃度-時(shí)間曲線下面積）、CL或CL/f（清除率）等參數(shù)值；

?血管外給藥，除提供上述參數(shù)外,尚應(yīng)提供Cmax和Tmax等參數(shù)，以反映藥物吸收的規(guī)律。

?提供一些統(tǒng)計(jì)矩參數(shù)，如:MRT、AUC(0-t)和AUC(0-∞)等，對(duì)于藥物藥代動(dòng)力學(xué)特征的描述也有意義。

132藥物的吸收對(duì)于經(jīng)口給藥的新藥，應(yīng)進(jìn)行整體動(dòng)物試驗(yàn)，盡可能同時(shí)進(jìn)行血管內(nèi)給藥的試驗(yàn)，提供絕對(duì)生物利用度。如有必要，可進(jìn)行體外吸收模型、在體或離體腸道吸收試驗(yàn)以闡述藥物吸收特性。對(duì)于其它血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物，應(yīng)根據(jù)立題目的，盡可能提供絕對(duì)生物利用度。

143藥物的分布選用大鼠或小鼠做組織分布試驗(yàn)較為方便。選擇一個(gè)劑量（一般有效劑量）給藥后，至少測(cè)定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織。特別注意藥物濃度高、蓄積時(shí)間長(zhǎng)的組織和器官，以及在藥效或毒性靶器官的分布（如對(duì)造血系統(tǒng)有影響的藥物，應(yīng)考察在骨髓的分布）。參考血藥濃度-時(shí)間曲線的變化趨勢(shì)，選擇至少3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布。若某組織的藥物濃度較高，應(yīng)增加觀測(cè)點(diǎn)，進(jìn)一步研究該組織中藥物消除的情況。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，至少應(yīng)有5個(gè)動(dòng)物的數(shù)據(jù)。15做組織分布試驗(yàn)，必須注意取樣的代表性和一致性。164藥物的排泄尿和糞的藥物排泄：一般采用小鼠或大鼠，將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi)，選定一個(gè)有效劑量給藥后，按一定的時(shí)間間隔分段收集尿或糞的全部樣品，測(cè)定藥物濃度。糞樣品晾干后稱重（不同動(dòng)物糞便干濕不同），按一定比例制成勻漿，記錄總體積，取部分樣品進(jìn)行藥物含量測(cè)定。計(jì)算藥物經(jīng)此途徑排泄的速率及排泄量，直至收集到的樣品測(cè)定不到藥物為止。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)至少有5只動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。17應(yīng)采取給藥前尿及糞樣，并參考預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，設(shè)計(jì)給藥后收集樣品的時(shí)間點(diǎn)，包括藥物從尿或糞中開始排泄、排泄高峰及排泄基本結(jié)束的全過(guò)程。膽汁排泄：一般用大鼠在乙醚麻醉下作膽管插管引流，待動(dòng)物清醒后給藥，并以合適的時(shí)間間隔分段收集膽汁，進(jìn)行藥物測(cè)定。

185藥物與血漿蛋白的結(jié)合研究藥物與血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)可采用多種方法，如平衡透析法、超過(guò)濾法、分配平衡法、凝膠過(guò)濾法、光譜法等。根據(jù)藥物的理化性質(zhì)及試驗(yàn)室條件，可選擇使用一種方法進(jìn)行至少3個(gè)濃度（包括有效濃度）的血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)每個(gè)濃度至少重復(fù)試驗(yàn)三次，以了解藥物的血漿蛋白結(jié)合率是否有濃度依賴性。19一般情況下，只有游離型藥物才能通過(guò)脂膜向組織擴(kuò)散，被腎小管濾過(guò)或被肝臟代謝，因此藥物與蛋白的結(jié)合會(huì)明顯影響藥物分布與消除的動(dòng)力學(xué)過(guò)程并降低藥物在靶部位的作用強(qiáng)度。建議根據(jù)藥理毒理研究所采用的動(dòng)物種屬，進(jìn)行動(dòng)物與人血漿蛋白結(jié)合率比較試驗(yàn)，以預(yù)測(cè)和解釋動(dòng)物與人在藥效和毒性反應(yīng)方面的相關(guān)性。206藥物的生物轉(zhuǎn)化對(duì)于新藥，尚需了解在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化情況，包括轉(zhuǎn)化類型、主要轉(zhuǎn)化途徑及其可能涉及的代謝酶。對(duì)于新的前體藥物,除對(duì)其代謝途徑和主要活性代謝物結(jié)構(gòu)確證外,尚應(yīng)對(duì)原藥和活性代謝物進(jìn)行系統(tǒng)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。而對(duì)主要在體內(nèi)以代謝消除為主的藥物(原形藥排泄<50%)，生物轉(zhuǎn)化研究則可分為兩個(gè)階段：臨床前可先采用色譜方法或放射性核素標(biāo)記方法分析和分離可能存在的代謝產(chǎn)物，并用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法初步推測(cè)其結(jié)構(gòu)。21如果II期臨床研究提示其在有效性和安全性方面有開發(fā)前景，在申報(bào)生產(chǎn)前進(jìn)一步研究并闡明主要代謝產(chǎn)物的可能代謝途徑、結(jié)構(gòu)及代謝酶。當(dāng)多種跡象提示可能存在有較強(qiáng)活性的代謝產(chǎn)物時(shí)，應(yīng)盡早開展活性代謝產(chǎn)物的研究，以確定開展代謝產(chǎn)物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)的必要性。

227對(duì)藥物代謝酶活性的影響對(duì)于創(chuàng)新藥，應(yīng)觀察藥物對(duì)藥物代謝酶，特別是細(xì)胞色素P450同工酶的誘導(dǎo)或抑制作用。在臨床前階段可以用底物法觀察對(duì)動(dòng)物和人肝微粒體P450酶的抑制作用，比較種屬差異。藥物對(duì)酶的誘導(dǎo)作用可觀察整體動(dòng)物多次給藥后的肝P450酶或在藥物反復(fù)作用后的肝細(xì)胞（最好是人肝細(xì)胞）P450酶活性的變化，以了解該藥物是否存在潛在的代謝性相互作用。

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8藥代動(dòng)力學(xué)與毒代動(dòng)力學(xué)

毒代動(dòng)力學(xué)研究通常結(jié)合毒性研究進(jìn)行，將獲得的藥代動(dòng)力學(xué)資料作為毒性研究的組成部分，以評(píng)價(jià)全身暴露的結(jié)果藥代動(dòng)力學(xué)和毒代動(dòng)力學(xué)研究的目的不同，但兩者又是相互聯(lián)系的，其分析方法是相同的，技術(shù)可以共享或相互借鑒24藥物組織分布研究結(jié)果可為評(píng)價(jià)藥物毒性靶器官提供依據(jù)生物轉(zhuǎn)化研究所提供的代謝產(chǎn)物資料有助于判斷可能引起毒性反應(yīng)的成分和毒代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)檢測(cè)的成分

259關(guān)于多次給藥的藥代研究

對(duì)于臨床需長(zhǎng)期給藥且有蓄積傾向的藥物，應(yīng)考慮進(jìn)行多次給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究。多次給藥試驗(yàn)時(shí),一般可選用一個(gè)劑量(有效劑量)。根據(jù)單次給藥藥代試驗(yàn)結(jié)果求得的消除半衰期(t1/2