JJF 2023-2023 黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀校準(zhǔn)規(guī)范

中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量技術(shù)規(guī)黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀校準(zhǔn)規(guī)5發(fā) 5實(shí)黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀校準(zhǔn)規(guī)范

歸位:全國(guó)物理化學(xué)計(jì)量技術(shù)委員會(huì)主要起草單位:中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院參加起草單位:北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院本規(guī)范委托全國(guó)物理化學(xué)計(jì)量技術(shù)委員會(huì)負(fù)責(zé)解釋本規(guī)范主要起草人馬康中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院趙海波北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院參加起草人張宜文北京市計(jì)量檢測(cè)科學(xué)研究院王松雪國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院 引言………………………范圍……………………引用文件………………術(shù)語(yǔ)……………………概述……………………計(jì)量特性………………濃度示值誤差………………………測(cè)量重復(fù)性…………檢出限………………校準(zhǔn)條件………………環(huán)境條件……………測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備………………校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法…………………校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工作……………………濃度示值誤差………………………測(cè)量重復(fù)性…………檢出限………………校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)…………復(fù)校時(shí)間間隔…………

Ⅱ)1)1)1)1)2)2)2)2)2)2)2)2)2)3)3)3)3)4)附錄 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備及使用方

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5)附錄B 校準(zhǔn)原始記錄參考格式附錄 校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)參考格

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6)8)附錄 儀器示值誤差測(cè)量不確定度評(píng)定示

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9)Ⅰ 本規(guī)范依據(jù)0國(guó)家計(jì)量校準(zhǔn)規(guī)范編寫(xiě)規(guī)則1通用計(jì)量術(shù)語(yǔ)及定義2測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》的相關(guān)規(guī)定編寫(xiě)。本規(guī)范主要參考7食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限量》中黃曲霉毒素的限量要求7糧油檢驗(yàn)設(shè)備和方法標(biāo)準(zhǔn)適用性驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)一般原則本規(guī)范為首次發(fā)布Ⅱ黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀校準(zhǔn)規(guī)范圍本規(guī)范適用于基于酶聯(lián)免疫或免疫層析膠體金/熒光)原理定量檢測(cè)黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀的校準(zhǔn)。引用文件本規(guī)范引用了下列文件7食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限7糧油檢驗(yàn)設(shè)備和方法標(biāo)準(zhǔn)適用性驗(yàn)證及結(jié)果評(píng)價(jià)一般原則凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版包括所有的修改單適用于本規(guī)范術(shù)語(yǔ)下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件酶聯(lián)免疫分析法采用間接競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)原理,將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法膠體金免疫層析法采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理,樣本在層析過(guò)程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆體結(jié)合,進(jìn)行免疫層析的定性和定量檢測(cè)方法概述黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀以下簡(jiǎn)稱檢測(cè)儀)主要用于測(cè)定糧食、飼料、中藥、乳制品等中的黃曲霉毒素含量。其檢測(cè)原理分為兩種:一是A法,樣本中的黃曲霉毒素與酶標(biāo)板上的黃曲霉抗原競(jìng)爭(zhēng)黃曲霉毒素的抗體,用底物顯色后,樣本所對(duì)應(yīng)微孔的吸光度減小,吸光度值與樣本中的黃曲霉毒素含量呈負(fù)相關(guān);二是免疫層析膠體金/熒光)法,樣品中的黃曲霉毒素在層析的過(guò)程中與膠體金熒光標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,從而抑制抗體和硝酸纖維素膜檢測(cè)線上的黃曲霉毒素偶聯(lián)物的結(jié)合,使得檢測(cè)線顯色或熒光強(qiáng)度降低,顯色或熒光強(qiáng)度與樣本中的黃曲霉毒素含量相關(guān)。檢測(cè)儀由光路系統(tǒng)、圖像傳感器或光電傳感器、試劑包酶聯(lián)免疫試劑盒或免疫層析試紙條/卡、信號(hào)處理系統(tǒng)和數(shù)據(jù)顯示系統(tǒng)組成,其結(jié)構(gòu)如圖1所示。1圖1黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀的結(jié)構(gòu)示意計(jì)量特性 濃度示值誤差% 測(cè)量重復(fù)性%檢出限不大于注:??技術(shù)指標(biāo)僅作為參考,不作為合格性判定校準(zhǔn)條件環(huán)境條件環(huán)境溫度:℃%%供電電源:,應(yīng)無(wú)粉塵、振動(dòng)及電磁場(chǎng)干擾測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用國(guó)家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)其相對(duì)擴(kuò)展不確定度應(yīng)不大于5%容量瓶和移液器容量瓶符合A級(jí)要求,移液器檢定合格甲醇色譜級(jí)校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法校準(zhǔn)項(xiàng)目可根據(jù)被校儀器的預(yù)期用途選擇使用校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工作根據(jù)使用說(shuō)明書(shū),檢查檢測(cè)儀功能及試劑包是否正常。使用試劑包進(jìn)行檢測(cè)時(shí),按說(shuō)明書(shū)要求升至室溫或在恒溫孵育器中恒溫。按照附錄A要求配制系列校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)2溶液濃度示值誤差依據(jù)使用說(shuō)明書(shū),將配制濃度為L(zhǎng)和L的黃曲霉毒素1標(biāo)準(zhǔn)溶液用試劑包進(jìn)行處理。將處理后的樣本放入被校檢測(cè)儀中,讀取儀器的濃度示值,每個(gè)濃度重復(fù)試驗(yàn)7次,按公式)計(jì)算檢測(cè)儀各濃度校準(zhǔn)點(diǎn)的示值誤差。c =式中c濃度示值誤差ci7次測(cè)量結(jié)果的平均值cs標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值測(cè)量重復(fù)性n n->i測(cè)量重復(fù)性:采用2中濃度為0L黃曲霉毒B1標(biāo)準(zhǔn)溶液的7次測(cè)量數(shù)據(jù),按照公)計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏n n->is

式中sr相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差ci檢測(cè)儀各次的測(cè)量值c標(biāo)準(zhǔn)溶液7次測(cè)量結(jié)果的平均值;n檢出限用被校檢測(cè)儀連續(xù)測(cè)量空白樣品如甲醇)0次計(jì)算測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差按)計(jì)算檢測(cè)儀的檢出限。+s 式中LOD檢出限 空白樣品0次測(cè)量結(jié)果的平均值 0次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在證書(shū)中反映校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)格式見(jiàn)附錄,校準(zhǔn)證書(shū)應(yīng)至少應(yīng)包含以下信息標(biāo)題:校準(zhǔn)證書(shū)實(shí)驗(yàn)室名稱和地址進(jìn)行校準(zhǔn)的地點(diǎn)如果與實(shí)驗(yàn)室地址不同證書(shū)的唯一性標(biāo)識(shí)如編號(hào),每頁(yè)及總頁(yè)數(shù)的標(biāo)識(shí)3客戶的名稱和地址被校對(duì)象的描述和明確標(biāo)識(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)的日期,如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)時(shí),應(yīng)說(shuō)明被校對(duì)象的接收日期;校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范的標(biāo)識(shí),包括名稱及代號(hào)本次校準(zhǔn)所用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說(shuō)明校準(zhǔn)環(huán)境的描述校準(zhǔn)結(jié)果及其測(cè)量不確定度的說(shuō)明對(duì)校準(zhǔn)規(guī)范的偏離的說(shuō)明校準(zhǔn)證書(shū)或校準(zhǔn)報(bào)告簽發(fā)人的簽名、職務(wù)或等效標(biāo)識(shí)校準(zhǔn)結(jié)果僅對(duì)被校對(duì)象有效的聲明未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室書(shū)面批準(zhǔn),不得部分復(fù)制證書(shū)的說(shuō)明復(fù)校時(shí)間間隔由于復(fù)校時(shí)間時(shí)隔的長(zhǎng)短是由儀器的使用情況、使用者、儀器本身質(zhì)量等因素所決定的,因此檢測(cè)儀的復(fù)校時(shí)間間隔由送校單位根據(jù)使用情況確定,建議不超過(guò)1年。當(dāng)檢測(cè)儀更換了配件及修理后,或?qū)ζ錂z測(cè)數(shù)據(jù)有懷疑時(shí),應(yīng)及時(shí)校準(zhǔn)。4附錄系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備及使用方法使用國(guó)家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋配制的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液建議現(xiàn)用現(xiàn)配。配制用移液器準(zhǔn)確移取表1所示不同體積的國(guó)家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW6,至0mL容量瓶中用甲醇稀釋至刻度并搖勻,即可得到不同濃度黃曲霉毒素B1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,1所示。1黃曲霉毒素B1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制濃標(biāo)準(zhǔn)溶液序號(hào)取L有證溶液最終定容體配制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度123標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)移液體積的計(jì)算配制一定體積的黃曲霉毒素1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,所移取的國(guó)家有證黃曲霉毒素1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積i按式)計(jì)算: V×10 式中

i=Vi移取的國(guó)家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積,;si配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度值V配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液定容體積,;c國(guó)家有證黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度5附錄校準(zhǔn)原始記錄參考格式記錄編號(hào) 證書(shū)編號(hào)委托單單位地校準(zhǔn)地儀器型生產(chǎn)廠儀器編儀器量試劑包測(cè)量范試劑包批校準(zhǔn)日校準(zhǔn)依環(huán)境溫相對(duì)濕校準(zhǔn)核驗(yàn)校準(zhǔn)用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)校準(zhǔn)前準(zhǔn)備工 是否就緒是 否 濃度示值誤差標(biāo)準(zhǔn)溶液濃儀器示值平均值示值誤差%相對(duì)不確定k=)6續(xù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃儀器示值平均值示值誤差%相對(duì)不確定k=)測(cè)量重復(fù)平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏%檢出限次數(shù)12345空白樣測(cè)量值次數(shù)6789空白樣測(cè)量值平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差檢出限濃度示值誤差的測(cè)量不確定度7附錄校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)參考格式濃度示值誤差標(biāo)準(zhǔn)溶液濃測(cè)量平均示值誤差%擴(kuò)展不確定k=)測(cè)量重復(fù)性%8附錄儀器示值誤差測(cè)量不確定度評(píng)定示例校準(zhǔn)條件2%校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)W,標(biāo)稱值為UL被校準(zhǔn)設(shè)備:黃曲霉毒素快速檢測(cè)儀測(cè)量方法及測(cè)量模型按照附錄A配制濃度為L(zhǎng)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,使用檢測(cè)儀分別測(cè)量相應(yīng)濃度點(diǎn)的示值誤差。測(cè)量時(shí)應(yīng)參照儀器說(shuō)明書(shū),采用配套試劑并孵育或恒溫至相應(yīng)溫度。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定7次,按公式)分別計(jì)算儀器各濃度校準(zhǔn)點(diǎn)的示值誤差。測(cè)量模型示值誤差的計(jì)算公式為c =式中c濃度示值誤差ci7次測(cè)量結(jié)果的平均值cs標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值不確定度的計(jì)算公式靈敏系數(shù)為:c=1

c=?c

s s由公式)可知,儀器示值誤差的不確定度來(lái)源于由測(cè)量結(jié)果平均值引入的不確定度和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液引入的不確定度。各輸入量的不確定度之間彼此不相關(guān),根據(jù)不確定度傳播律可以得到公式)和公式。i i s+c

u)

uc2+uc r r儀器示值誤差的不確定度主要來(lái)源于由測(cè)量結(jié)果平均值引入的不確定度i和由標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度,包括)黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的不確定度u>;)溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋過(guò)程中可調(diào)移液器取液體積引入的不確定9V1>;)V>℃玻璃膨脹系數(shù)較小,所以由溫度引起的容量瓶的體積引入的不確定度可忽略。不確定度分量的評(píng)定各不確定度分量來(lái)源及描述見(jiàn)1不確定度分量來(lái)源及描不確定度分不確定度來(lái)分量描ri)測(cè)量結(jié)果平均值引入的不確定測(cè)量重復(fù)性引入的不確定標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的不確定度移液器移液體積引入的不確定度uV1i>容量瓶定容體積引入的不確定度uV>測(cè)量結(jié)果平均值引入的不確定度由儀器測(cè)量重復(fù)性引入的不確定度見(jiàn)2儀器測(cè)量結(jié)果的重復(fù)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制ci測(cè)量值平均值%1234567儀器測(cè)量重復(fù)性引入的不確定度777%%%777標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度2+2+2+式中

有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值引入的相對(duì)不確定度uV1i>uV> 0L容量瓶定容體積引入的相對(duì)不確定度黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值的不確定度由黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū),黃曲霉毒素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)認(rèn)定值的擴(kuò)展不確定3標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值和擴(kuò)展不確定標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)展不確定度k=2)黃曲霉毒素B1溶液標(biāo)準(zhǔn)物ucr 移液器移液體積引入的相對(duì)不確定度配制濃度為、、3個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)L的移液器分別移取了、、L的溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。溫度的變化引入的不確定度忽略不計(jì)移液器對(duì)應(yīng)移液體積的最大允許誤差分別為8、5,按均勻分布,則由移液器移液體積引入的最大的相對(duì)不確定度為11=8%×21=5%×31= %%×容量瓶定容體積引入的相對(duì)不確定度容量瓶校準(zhǔn)對(duì)體積影響0L容量瓶最大允差為2。按三角形分布,此項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為8溫度對(duì)體積影響實(shí)驗(yàn)室溫控在23℃,實(shí)驗(yàn)室溫度與容量瓶校準(zhǔn)時(shí)的溫度有偏差,以3℃計(jì)。容量瓶材質(zhì)玻璃膨脹系數(shù)與甲醇膨脹系數(shù)相比很小可忽略不計(jì)。甲醇膨脹系數(shù)2℃1,因此產(chǎn)生的體積變化為±)6mL。假定溫度變化為均勻分布,標(biāo)準(zhǔn)不確定度為/1mL。則由容量瓶定容體積引入的相對(duì)不確定度為:u