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第一部分專題九第三講專題九生物技術(shù)與工程基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)測(cè)試一、選擇題(每道題只有一個(gè)最合理的答案。)1.(2023·邯鄲市模擬)某興趣小組利用葡萄制作果酒和果醋。在該過程中發(fā)酵條件的控制至關(guān)重要,下列相關(guān)敘述正確的是(D)A.葡萄汁要裝滿發(fā)酵瓶,造成無氧環(huán)境,有利于發(fā)酵B.果酒發(fā)酵過程溫度控制在30℃,果醋發(fā)酵過程溫度控制在C.用帶蓋的瓶子進(jìn)行發(fā)酵,每隔12h左右打開瓶蓋一次,放出CO2D.在果醋發(fā)酵過程中,要持續(xù)通過充氣口充氣,有利于醋酸菌的代謝【解析】用葡萄制作果酒時(shí),葡萄汁不能裝滿發(fā)酵瓶,要留有大約1/3的空間,防止發(fā)酵液溢出,A錯(cuò)誤;果酒發(fā)酵過程溫度控制在18~30℃,果醋發(fā)酵過程溫度控制在30~35℃,B錯(cuò)誤;用帶蓋的瓶子進(jìn)行發(fā)酵,每隔12h左右擰松瓶蓋一次,放出CO2,打開瓶蓋易染雜菌,導(dǎo)致發(fā)酵失敗,C錯(cuò)誤;醋酸菌是好氧菌,在果醋發(fā)酵過程中,要持續(xù)通過充氣口充氣,有利于醋酸菌的代謝,D正確。2.(2023·三明市模擬)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的是(B)A.利用乳酸菌制作泡菜過程中,應(yīng)先通氣培養(yǎng),后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低,果酒制作過程中情況相反D.毛霉中只存在一種與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的細(xì)胞器——核糖體【解析】本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí)。乳酸菌是厭氧菌,利用乳酸菌制作泡菜過程中,要一直密封發(fā)酵,A錯(cuò)誤;家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵,如參與了腐乳發(fā)酵的微生物有毛霉、曲霉、酵母等,B正確;果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低,果酒制作過程中會(huì)產(chǎn)生二氧化碳,二氧化碳微溶于水形成少量H2CO3,發(fā)酵液pH也逐漸降低,C錯(cuò)誤;毛霉是一種絲狀真菌,屬于真核生物,除核糖體外,還存在高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的細(xì)胞器,D錯(cuò)誤。3.(2023·漯河市模擬)下列關(guān)于滅菌或消毒的相關(guān)敘述正確的是(B)A.巴氏消毒法常用于消毒牛奶,可以殺死牛奶中的全部微生物B.在接種過程中,試管口、瓶口等都可以通過火焰灼燒進(jìn)行滅菌C.培養(yǎng)基、接種環(huán)、涂布器、外植體可采用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌D.可用紫外線照射接種室,以殺死空氣中的所有微生物及芽孢和孢子【解析】巴氏消毒法常用于消毒牛奶,可以殺死牛奶中的大部分微生物,但不是所有微生物,A錯(cuò)誤;在接種過程中,試管口、瓶口等都可以通過火焰灼燒進(jìn)行滅菌,B正確;培養(yǎng)基采用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌,接種環(huán)采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌,涂布器蘸酒精后在酒精燈外焰上引燃滅菌,外植體進(jìn)行消毒,不能滅菌,C錯(cuò)誤;可用紫外線照射接種室進(jìn)行消毒,以殺死空氣中的部分微生物,不包括芽孢和孢子,D錯(cuò)誤。4.(2023·臨沂市模擬)下列關(guān)于稀釋涂布平板法和平板劃線法的敘述,錯(cuò)誤的是(D)A.稀釋涂布平板法使用的接種工具是涂布器,而平板劃線法是接種環(huán)B.稀釋涂布平板法接種前需配制不同濃度稀釋液,平板劃線法不需要C.稀釋涂布平板法和平板劃線法都可以得到單菌落D.稀釋涂布平板法和平板劃線法都可以對(duì)樣液中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)【解析】稀釋涂布平板法使用的接種工具是涂布器,而平板劃線法使用的是接種環(huán),A正確;稀釋涂布平板法接種前需將菌液進(jìn)行一系列的稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布在固體培養(yǎng)基表面,而平板劃線法是用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線,不需要配制不同濃度的稀釋液,B正確;稀釋涂布平板法和平板劃線法是純化菌種常用的接種方法,都可以得到單菌落,C正確;稀釋涂布平板法可以對(duì)樣液中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),而平板劃線法由于劃線的起始段菌落數(shù)量較多,故無法計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。5.(2023·廊坊市模擬)下列生物工程技術(shù)應(yīng)用的組合錯(cuò)誤的是(C)A.轉(zhuǎn)基因牛培育:基因工程+早期胚胎培養(yǎng)+胚胎移植B.克隆牛培養(yǎng):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)+核移植+早期胚胎培養(yǎng)+胚胎移植C.試管牛:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)+胚胎移植D.植物體細(xì)胞雜交:酶工程(酶降解)+體細(xì)胞雜交+植物組織培養(yǎng)【解析】轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育時(shí)先用基因工程構(gòu)建含有轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞,再通過早期胚胎培養(yǎng)到一定階段的胚胎,之后胚胎移植到受體,A正確;核移植(克隆)動(dòng)物的培育主要包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù),B正確;試管動(dòng)物技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù),C錯(cuò)誤;植物體細(xì)胞雜交技術(shù)通過酶工程(酶降解)獲得原生質(zhì)體,再用融合技術(shù)使體細(xì)胞融合,獲得雜交細(xì)胞,經(jīng)過植物組織培養(yǎng)成植株,D正確。6.(2023·襄陽市一模)下列關(guān)于細(xì)胞全能性的理解,不正確的是(D)A.高度分化的植物體細(xì)胞仍具有全能性B.細(xì)胞內(nèi)含有個(gè)體發(fā)育所需的全部基因是細(xì)胞具有全能性的內(nèi)在條件C.通過植物組織培養(yǎng)得到試管苗,是植物細(xì)胞具有全能性的有力證據(jù)D.玉米種子發(fā)育成玉米植株是細(xì)胞全能性的表現(xiàn)【解析】細(xì)胞的全能性指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能,其內(nèi)在的遺傳基礎(chǔ)是細(xì)胞內(nèi)具有個(gè)體發(fā)育所需要的全部基因,植物組織培養(yǎng)形成試管苗是細(xì)胞全能性的表現(xiàn),A、B、C正確。玉米種子發(fā)育成正常植株,是自然生長過程,不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,D不正確。7.(2023·開封市模擬)下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的分析,不正確的是(C)A.愈傷組織細(xì)胞分裂旺盛,經(jīng)誘變處理,有利于獲得突變個(gè)體B.利用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng),可以獲得脫毒苗C.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出的雜種植物一定是高度不育的D.利用植物的細(xì)胞克隆,能實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)某些中藥【解析】愈傷組織細(xì)胞分裂旺盛,DNA復(fù)制頻繁,更易誘發(fā)突變,A正確;莖尖等分生組織所含病原體極少甚至不含病原體,經(jīng)植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗,B正確;植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出的雜種植物是否可育取決于細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù),C不正確;植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于工廠化生產(chǎn)某些植物細(xì)胞次生代謝物,D正確。8.(2023·唐山市模擬)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(A)A.用機(jī)械方法處理組織后再用酶處理組織,更易將組織分散成單個(gè)細(xì)胞B.大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞能夠在細(xì)胞培養(yǎng)液中懸浮生長增殖C.對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌后,為防止雜菌污染,培養(yǎng)細(xì)胞的過程中不應(yīng)更換培養(yǎng)液D.對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),通常會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接觸后繼續(xù)分裂生長的現(xiàn)象【解析】可以用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理的方法將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,A正確;大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞能夠在細(xì)胞培養(yǎng)液中貼壁生長,B錯(cuò)誤;對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌后,為防止雜菌污染,培養(yǎng)細(xì)胞的過程中應(yīng)加入抗生素,C錯(cuò)誤;對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),通常會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接觸抑制的現(xiàn)象,D錯(cuò)誤。9.(2023·淄博市模擬)對(duì)于單克隆抗體說法不正確的敘述是(D)A.在體外培養(yǎng)條件下,一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的,骨髓瘤細(xì)胞可以大量增殖B.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體C.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并可以大量制備D.取相應(yīng)B細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗體,形象地說先“打針”,否則失敗【解析】在體外培養(yǎng)條件下,一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的,但是骨髓瘤細(xì)胞可以大量增殖,A正確;免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生單克隆抗體,B正確;單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并可以大量制備,C正確;取相應(yīng)B細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原,D錯(cuò)誤。10.(2023·佛山市模擬)胚胎分割能提高胚胎的利用率。下列關(guān)于胚胎分割的敘述,正確的是(C)A.對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí),可將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)不均等分割B.體外受精獲得的個(gè)體與核移植獲得的個(gè)體的生殖方式相同C.胚胎分割移植所產(chǎn)生的后代的遺傳物質(zhì)相同D.胚胎分割次數(shù)對(duì)分割后的胚胎成活率無明顯影響【解析】對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育,A錯(cuò)誤;體外受精獲得的個(gè)體的生殖方式是有性生殖,核移植獲得的個(gè)體的生殖方式是無性生殖,B錯(cuò)誤;胚胎分割移植所產(chǎn)生的后代的遺傳物質(zhì)相同,原因是他們由同一個(gè)受精卵發(fā)育而來,C正確;胚胎分割可將早期胚胎分為2等份、4等份、8等份等,但胚胎分割次數(shù)越多,分割后的胚胎成活率也越低,D錯(cuò)誤。11.(2023·廣安市模擬)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。下列關(guān)于PCR引物的敘述不正確的是(B)A.為保證模板鏈與引物結(jié)合的效率,兩種引物之間盡量避免存在互補(bǔ)序列B.為了便于將擴(kuò)增的DNA片段與載體連接,可在引物的3′端加上限制酶識(shí)別序列C.在兩種引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶識(shí)別序列,主要目的是使目的基因定向插入載體并可避免目的基因自身環(huán)化D.復(fù)性所需的溫度、時(shí)長和延伸所需的溫度、時(shí)長均與引物有關(guān)【解析】引物自身不應(yīng)存在互補(bǔ)序列,否則會(huì)出現(xiàn)引物與自身配對(duì)、引物與引物配對(duì)情況,降低PCR的效率,A正確;引物引導(dǎo)子鏈合成的方向是5′→3′,因此為了便于擴(kuò)增的DNA片段與載體連接,需要在引物的5′端加上限制酶識(shí)別序列,B錯(cuò)誤;設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自身環(huán)化的現(xiàn)象,為了便于擴(kuò)增的DNA片段與載體連接,常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶識(shí)別位點(diǎn),主要目的是使目的基因能定向插入表達(dá)載體,避免目的基因自身環(huán)化,C正確;復(fù)性所需的溫度、時(shí)長和延伸所需的溫度、時(shí)長均與引物有關(guān),如引物中G與C含量高時(shí),需要設(shè)定更高的復(fù)性和延伸溫度,D正確。12.(2023·錦州市模擬)科學(xué)家利用基因工程技術(shù)將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕?,使番茄的耐寒能力大大提高。在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因番茄的過程中,下列操作不合理的是(B)A.可用PCR技術(shù)或逆(反)轉(zhuǎn)錄法獲得抗凍蛋白基因B.利用選擇培養(yǎng)基對(duì)構(gòu)建的基因表達(dá)載體直接篩選C.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞D.在低溫條件下篩選已導(dǎo)入抗凍蛋白基因的番茄植株【解析】基因工程中獲取目的基因的方法包括利用PCR獲取和擴(kuò)增、從基因文庫中獲取和人工合成,如逆(反)轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因,A正確;構(gòu)建的基因表達(dá)載體不可直接在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選,需要先導(dǎo)入受體細(xì)胞中再進(jìn)行篩選,B錯(cuò)誤;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞的常用方法,C正確;可利用低溫條件對(duì)耐寒番茄進(jìn)行個(gè)體性狀水平的檢測(cè),篩選成功轉(zhuǎn)基因的耐寒番茄植株,D正確。二、非選擇題13.(2023·洛陽市質(zhì)檢)圓褐固氮菌能將大氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨,是異養(yǎng)需氧型原核生物。某同學(xué)采用稀釋涂布平板法從土壤中分離獲得圓褐固氮菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)制作平板時(shí),實(shí)驗(yàn)室中常用的凝固劑是瓊脂。圓褐固氮菌與硝化細(xì)菌在同化作用過程中最主要的區(qū)別在于圓褐固氮菌不能將CO2和H2O轉(zhuǎn)化為含碳有機(jī)物(或只能利用現(xiàn)成的有機(jī)物)。用無氮培養(yǎng)基培養(yǎng)圓褐固氮菌時(shí)不能隔絕空氣,其原因是圓褐固氮菌為需氧型生物,還需要利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?答出2點(diǎn)即可)。(2)培養(yǎng)微生物時(shí)將培養(yǎng)皿倒置的目的是避免培養(yǎng)基被污染、防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)(答出2點(diǎn)即可)。(3)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目常用稀釋涂布平板法,測(cè)定土壤中不同種類微生物的數(shù)目往往需要采用不同的稀釋倍數(shù),原因是(單位質(zhì)量)土壤中不同種類的微生物數(shù)量不同。并且該方法統(tǒng)計(jì)得到的菌落數(shù)往往比活菌數(shù)低,其原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),我們觀察到的只是一個(gè)菌落。(4)該同學(xué)將三個(gè)接種了等量相同稀釋倍數(shù)培養(yǎng)液的培養(yǎng)基置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng),24h后觀察到三個(gè)平板上的菌落數(shù)目分別為19、197、215,出現(xiàn)該結(jié)果的原因可能是涂布第一個(gè)平板時(shí)涂布器未冷卻便涂布平板【解析】(1)制作平板時(shí),瓊脂是實(shí)驗(yàn)室中常用的凝固劑。圓褐固氮菌與硝化細(xì)菌在同化作用過程中最主要的區(qū)別在于圓褐固氮菌是異養(yǎng)型生物,不能進(jìn)行化能合成作用將CO2和H2O轉(zhuǎn)化為含碳有機(jī)物,只能利用現(xiàn)成的有機(jī)物。用無氮培養(yǎng)基培養(yǎng)圓褐固氮菌時(shí),由于圓褐固氮菌為需氧型生物,且需要利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,因此在培養(yǎng)過程中不能隔絕空氣。(2)培養(yǎng)微生物時(shí)將培養(yǎng)皿倒置,可避免培養(yǎng)基被污染、防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)、防止冷凝水滴落影響微生物生長等。(3)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目常用稀釋涂布平板法,由于單位質(zhì)量土壤中不同種類的微生物數(shù)量不同,所以測(cè)定土壤中不同種類微生物的數(shù)目時(shí)往往需要采用不同的稀釋倍數(shù),以保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。但在實(shí)際操作中,當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)得到的菌落數(shù)往往比活菌數(shù)低。(4)該同學(xué)將三個(gè)接種了等量相同稀釋倍數(shù)培養(yǎng)液的培養(yǎng)基置于37℃14.(2023·日照市模擬)利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株。已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力,再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題。(1)該過程用到的工程技術(shù)有植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)。(2)過程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶,過程②PEG的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體的融合。經(jīng)過②操作后,需篩選出融合的雜種細(xì)胞,顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在,這些葉綠體可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是保持原生質(zhì)體完整性。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖,制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中,可篩選出具有高抗性的雜種植株?!窘馕觥?1)題中流程圖表示先去掉兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,然后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合獲得雜種細(xì)胞,通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株,該過程是植物體細(xì)胞雜交。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,因此采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。聚乙二醇(PEG)的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體的融合。(3)去掉細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中,保持原生質(zhì)體完整性,避免其失水死亡或吸水漲破。在植物組織培養(yǎng)過程中,原生質(zhì)體經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織。(4)由于在普通光學(xué)顯微鏡下能看見染色體,因此可以通過制作臨時(shí)裝片,觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目,以確定是否發(fā)生染色體變異。對(duì)雜種植株進(jìn)行篩選,最簡(jiǎn)單的方法是從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè),即接種黑腐病菌,篩選出具有高抗性的雜種植株。15.(2023·周口市模擬)如圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程,①~④表示相關(guān)的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶,它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示?;卮鹣铝袉栴}:(1)題述過程中,需將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA片段上才能整合到人參細(xì)胞的染色體DNA上,檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞的方法是PCR技術(shù)。(2)步驟①中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列??蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了—GAATTC—和—GGATCC—序列,以便于后續(xù)的剪切和連接,PCR過程中要用到耐高溫的DNA聚合酶,至少需復(fù)制3次才可以獲得2個(gè)單獨(dú)的目的基因。(3)過程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中啟動(dòng)子的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位(或RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA),過程③中需先用Ca2+(或CaCl2)處理根瘤農(nóng)桿菌,以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。(4)與用一種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因相比,用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是保證目的基因和質(zhì)粒定向連接(或防止目的基因和質(zhì)粒反向連接或防止目的基因和質(zhì)粒自身連接)?!窘馕觥?1)Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上,故需要把目的基因插入Ti質(zhì)粒上的T-DNA上,才能整合到人參細(xì)胞的染色體DNA上,可以用PCR技術(shù)來檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)步驟①中,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí),設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列。由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,根據(jù)題干可知,兩者識(shí)別序列分別為—GAATTC—和—GGATCC—,因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了—GAATTC—和—GGATCC—序列,以便于后續(xù)的剪切和連接。PCR的原理是DNA的半保留復(fù)制,需要用到耐高溫的DNA聚合酶。由于PCR擴(kuò)增時(shí),子鏈的延伸是從引物的3′端開始,第一次擴(kuò)增出的兩個(gè)DNA分子雙鏈不等長,第二次擴(kuò)增時(shí),以含引物的2條鏈為模板分別可以合成一條單獨(dú)的目的基因的單鏈,第三次擴(kuò)增時(shí),以這兩條單獨(dú)的目的基因的單鏈為模板復(fù)制出的2個(gè)DNA分子是單獨(dú)的目的基因,故至少需要復(fù)制3次才能獲得2個(gè)單獨(dú)的目的基因。(3)基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位;過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌,需先用Ca2+處理根瘤農(nóng)桿菌,使其處于感受態(tài),以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。(4)用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是防止任意連接,保證目的基因和質(zhì)粒定向連接(或防止目的基因和質(zhì)粒反向連接或防止目的基因和質(zhì)粒自身連接)。能力達(dá)標(biāo)測(cè)試一、選擇題(每道題只有一個(gè)最合理的答案。)1.(2023·宜賓市模擬)《齊民要術(shù)》中記載了許多古人在生產(chǎn)生活中運(yùn)用發(fā)酵技術(shù)加工食品積累的寶貴經(jīng)驗(yàn)。下列對(duì)相關(guān)記載的理解,錯(cuò)誤的是(D)食品加工歷史記載釀酒浸曲發(fā)如魚眼湯,凈淘米八斗,炊作飯,舒令極冷制醋大率酒一斗,用水三斗,合甕盛,置日中曝之。七日后當(dāng)臭,衣生,勿得怪也,但停置,勿移動(dòng),撓攪之。數(shù)十日,醋成泡菜制作作鹽水,令極咸,于鹽水中洗菜,即內(nèi)(納)甕中。其洗菜鹽水,澄取清者,瀉著甕中,令沒菜把即止,不復(fù)調(diào)和A.“浸曲發(fā)”目的是活化酵母菌,此時(shí)酵母菌通過有氧呼吸和無氧呼吸釋放CO2B.“舒令極冷”是為了防止蒸熟的米溫度過高而殺死酒曲中的酵母菌等微生物C.“用水三斗”為避免酒精濃度過高殺死醋酸菌而不易形成醋酸菌衣膜D.“令沒菜把即止”主要目的是讓蔬菜充分吸收鹽分,使風(fēng)味品質(zhì)更佳【解析】“浸曲發(fā)”的目的是活化酵母菌,使其由休眠狀態(tài)變?yōu)榛钴S狀態(tài),酵母菌可以進(jìn)行有氧呼吸(產(chǎn)生CO2和水)和無氧呼吸(產(chǎn)生酒精和CO2),所以都可以釋放CO2,A正確;“舒令極冷”是降低米的溫度,防止蒸熟的米溫度過高而殺死酒曲中的酵母菌等微生物,B正確;“用水三斗”可以將酒精稀釋,避免酒精濃度過高殺死醋酸菌而不易形成醋酸菌衣膜,C正確;“令沒菜把即止”是用水將蔬菜淹沒,制造無氧環(huán)境,D錯(cuò)誤。2.(2023·臨滄市模擬)為了檢驗(yàn)?zāi)吵鞘凶詠硭械拇竽c桿菌含量,甲、乙、丙三個(gè)生物興趣小組進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。先將5L水樣濃縮至5mL,再取水樣在伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基上進(jìn)行接種,最后計(jì)算菌落數(shù)。其中甲組每次取濃縮水樣1mL,乙組每次取濃縮水樣0.1mL,丙組每次取濃縮水樣0.01mL。結(jié)果如下表:菌落數(shù)第一次取樣第二次取樣第三次取樣甲組100011501200乙組110100120丙組131514下列說法正確的是(D)A.實(shí)驗(yàn)過程要設(shè)置空白對(duì)照組,若空白對(duì)照組上長出了菌落,需要在實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上減去空白對(duì)照組的菌落數(shù)B.原水樣中大腸桿菌的數(shù)目,要用三個(gè)小組三次取樣所得菌落數(shù)的平均值來表示C.該過程最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,二者都會(huì)稀釋分散菌種,實(shí)現(xiàn)目的菌的分離、純化D.每0.1mL濃縮水樣中的活菌數(shù)通常比乙組的統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏大【解析】實(shí)驗(yàn)過程中要設(shè)置空白對(duì)照組,若空白平板上長出了菌落,則培養(yǎng)基有污染,需要重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn),A錯(cuò)誤;原水樣中大腸桿菌的數(shù)目,可分別采用甲、乙、丙組的結(jié)果取平均值進(jìn)行計(jì)算,不能三組混合計(jì)算,每組的稀釋倍數(shù)是不同的,B錯(cuò)誤;該過程需要計(jì)數(shù),可用稀釋涂布平板法,不能用平板劃線法,C錯(cuò)誤;兩個(gè)菌或多個(gè)菌連在一起時(shí)會(huì)長成一個(gè)菌落,因此實(shí)際的結(jié)果要比菌落計(jì)數(shù)的大,D正確。3.(2023·洛陽市模擬)生長圖形法是一種測(cè)定微生物營養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒平板,然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域,培養(yǎng)結(jié)果如圖所示,下列說法錯(cuò)誤的是(B)A.倒平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙和丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選【解析】平板上不含任何生長因子,若倒平板后直接培養(yǎng),出現(xiàn)菌落說明平板已被雜菌感染,因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL因子的培養(yǎng)基中生長,A正確;制備平板時(shí),滅菌在倒平板之前操作,B錯(cuò)誤;圖中菌落生活在乙和丙區(qū)域之間,說明該菌同時(shí)需要乙和丙兩種生長因子,C正確;不同菌種所需生長因子不同,可利用生長圖形法篩選菌種,D正確。4.(2023·菏澤市模擬)發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段,利用微生物的某些特定功能,為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品。常用好氧菌谷氨酸棒狀桿菌利用圖1所示的發(fā)酵罐來大量生產(chǎn)味精,發(fā)酵流程如圖2所示。下列敘述正確的是(B)圖1圖2A.發(fā)酵中所使用的谷氨酸棒狀桿菌菌種可從自然界篩選,也可通過誘變育種、雜交育種或者基因工程育種獲得B.為了保證發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì),圖中發(fā)酵配料及發(fā)酵罐需經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌C.在發(fā)酵過程中,通過加料口取樣,隨時(shí)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物濃度和微生物數(shù)量D.圖中發(fā)酵過程需通入無菌空氣,并通過攪拌使培養(yǎng)液與菌種充分接觸后關(guān)閉通氣口【解析】谷氨酸棒狀桿菌屬于原核生物,不能進(jìn)行有性生殖,無法通過雜交育種獲得,A錯(cuò)誤;嚴(yán)格滅菌可以殺死發(fā)酵配料及發(fā)酵罐中的所有微生物,防止雜菌污染,從而保證發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì),B正確;在發(fā)酵過程中,應(yīng)通過放料口取樣,隨時(shí)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物濃度和微生物數(shù)量,C錯(cuò)誤;谷氨酸棒狀桿菌屬于好氧菌,在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣,不能關(guān)閉通氣口,D錯(cuò)誤。5.(2023·煙臺(tái)市模擬)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體,為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用某植物外植體(2n)獲得愈傷組織,然后在培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng),再經(jīng)秋水仙素處理,產(chǎn)生染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是(B)A.培養(yǎng)液中添加的蔗糖具有提供能源和調(diào)節(jié)滲透壓的作用B.需要用胰蛋白酶將愈傷組織分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)C.誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍處理后,可以觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞D.細(xì)胞干重在培養(yǎng)12d后會(huì)下降,原因可能是營養(yǎng)物質(zhì)減少、有害代謝產(chǎn)物積累【解析】蔗糖是碳源,同時(shí)可作為溶質(zhì),因此培養(yǎng)液中添加的蔗糖具有提供能源和調(diào)節(jié)滲透壓的作用,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)才需要用胰蛋白酶將組織分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng),B錯(cuò)誤;愈傷組織染色體數(shù)為2n,經(jīng)秋水仙素誘導(dǎo)一次后變成4n,4n細(xì)胞在有絲分裂后期染色體數(shù)為8n,C正確;細(xì)胞干重在培養(yǎng)12d后會(huì)下降,原因可能是營養(yǎng)物質(zhì)減少,細(xì)胞生長所需要的營養(yǎng)供應(yīng)不足,也可能是有害代謝產(chǎn)物積累,抑制了細(xì)胞的生長,從而使細(xì)胞干重下降,D正確。6.(2023·西安市模擬)甲品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀,但屬于胞質(zhì)雄性不育品種。通過體細(xì)胞雜交,成功地將乙品種細(xì)胞質(zhì)中的可育基因引入甲中。過程如圖所示,在此過程中利用的技術(shù)或方法有(B)①基因工程②細(xì)胞融合技術(shù)③組織培養(yǎng)技術(shù)④雜交育種A.①④ B.②③C.①③ D.②④【解析】在圖示植物體細(xì)胞雜交過程中,先將甲、乙細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,再利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成雜種植物。此過程利用了細(xì)胞融合技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)。②和③符合題意,①和④不符合題意。故選B。7.(2023·杭州市模擬)制備抗A抗原單克隆抗體的過程如圖,下列有關(guān)敘述正確的是(D)A.提取的脾B淋巴細(xì)胞有多種,是因?yàn)橐环N抗原可以誘導(dǎo)產(chǎn)生多種B淋巴細(xì)胞B.誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法完全相同C.通過特定的選擇培養(yǎng)基可以將能產(chǎn)生抗A抗原抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來D.檢測(cè)抗A抗原單抗時(shí)可選用熒光標(biāo)記的A抗原作為檢測(cè)試劑【解析】一種抗原只能誘導(dǎo)產(chǎn)生一種特異性的抗體,脾B淋巴細(xì)胞有多種的原因是小鼠接觸過除了A抗原之外的其他抗原,A錯(cuò)誤;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可以用滅活的病毒,但誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒,B錯(cuò)誤;通過特定的選擇培養(yǎng)基可以將雜交瘤細(xì)胞篩選出來,若篩選產(chǎn)生抗A抗原的雜交瘤細(xì)胞需要做抗體檢測(cè),C錯(cuò)誤;抗原和抗體會(huì)發(fā)生特異性結(jié)合,所以通過熒光標(biāo)記的A抗原可以將產(chǎn)生抗A抗原抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,D正確。8.(2023·泰安市模擬)Leigh氏綜合征患者中有20%~25%是由線粒體基因突變導(dǎo)致的。一位母親約有1/4的線粒體攜帶有這種線粒體突變基因,她的前兩個(gè)孩子因患有該病而夭亡。她的第三個(gè)孩子因?yàn)榻邮芰肆硪幻跃栀?zèng)的健康基因而成為全球首個(gè)擁有“三個(gè)父母”的男嬰。如圖為該男嬰的孕育過程,下列說法錯(cuò)誤的是(D)A.圖示過程中代表該母親卵母細(xì)胞的是卵母細(xì)胞BB.該健康男嬰孕育過程中依次使用了核移植、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)C.進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除了添加必需營養(yǎng)成分外,還需要添加血清D.體外受精獲得的早期胚胎,可培養(yǎng)至原腸胚階段進(jìn)行胚胎移植【解析】該母親的線粒體基因異常,但其核基因是正常的,因此只需要另外的母親A提供細(xì)胞質(zhì),因此,圖示過程中代表該母親卵母細(xì)胞的是卵母細(xì)胞B,A正確;該健康男嬰孕育過程中依次使用了核移植、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù),B正確;進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除了添加必需營養(yǎng)成分外,還需要添加血清,C正確;體外受精獲得的早期胚胎,通常可培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚階段進(jìn)行胚胎移植,D錯(cuò)誤。9.(2023·隨州市模擬)為了初步檢測(cè)藥物X和Y的抗癌活性,在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞,使其貼壁生長,實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,培養(yǎng)過程及結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(C)A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水D.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好【解析】培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì),A正確;用胰蛋白酶處理貼壁生長的肝癌細(xì)胞,使其脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù),B正確;實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞砜(溶劑),排除溶劑二甲基亞砜對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾和影響,加蒸餾水會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞吸水漲破,C錯(cuò)誤;從表格數(shù)據(jù)分析可知,添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目最少,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好,D正確。10.(2023·通化市模擬)如圖為數(shù)字PCR技術(shù)的原理示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(B)A.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三步B.每個(gè)反應(yīng)單位中都含有耐高溫的RNA聚合酶C.每個(gè)反應(yīng)單位有無熒光取決于是否含有靶分子D.?dāng)?shù)字PCR技術(shù)有利于提高病原體檢測(cè)的靈敏度【解析】PCR的每個(gè)循環(huán)一般由變性、復(fù)性、延伸三個(gè)基本步驟構(gòu)成,A正確;每個(gè)反應(yīng)單位中都含有耐高溫的DNA聚合酶,催化子鏈的延伸過程,B錯(cuò)誤;熒光的出現(xiàn)是熒光探針?biāo)鈱?dǎo)致的,熒光探針將首先與模板DNA的相應(yīng)區(qū)段結(jié)合(靶分子),DNA復(fù)制延伸至熒光探針部位,導(dǎo)致熒光探針的水解進(jìn)而產(chǎn)生熒光,每個(gè)反應(yīng)單位有無熒光取決于是否含有靶分子,C正確;根據(jù)熒光是否出現(xiàn)能檢測(cè)目標(biāo)DNA的存在,數(shù)字PCR技術(shù)更有利于提高病原體檢測(cè)的靈敏度,D正確。11.(2023·珠海市模擬)熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中某種DNA的含量,其原理是在PCR體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針,當(dāng)耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處,會(huì)水解探針,使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一次,就有一個(gè)熒光分子生成。下列敘述錯(cuò)誤的是(B)A.引物與探針均具有特異性,與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B.反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈負(fù)相關(guān)C.耐高溫的DNA聚合酶催化DNA合成的方向總是從子鏈的5′端到3′端D.若用上述技術(shù)檢測(cè)某基因的轉(zhuǎn)錄水平,則需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶【解析】引物與探針均具特異性,與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,A正確;模板DNA含量越高,PCR擴(kuò)增過程中形成的熒光分子越多,因此熒光強(qiáng)度越大,即反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān),B錯(cuò)誤;耐高溫的DNA聚合酶催化DNA合成的方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸,C正確;若要檢測(cè)某基因的轉(zhuǎn)錄水平,即檢測(cè)細(xì)胞中mRNA的含量,則先要將mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA再檢測(cè),故需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶,D正確。12.(2023·信陽市模擬)胰島素可用于治療糖尿病,但胰島素注射后易在皮下堆積,需較長時(shí)間才能進(jìn)入血液,進(jìn)入血液后又易被分解,因此治療效果受到影響。下圖是新的速效胰島素的生產(chǎn)過程示意圖,有關(guān)敘述正確的是(B)A.新的胰島素生產(chǎn)過程中不涉及中心法則B.若用大腸桿菌生產(chǎn)新的胰島素,常用Ca2+處理大腸桿菌C.新的胰島素生產(chǎn)過程中最困難的一步是由胰島素分子結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列D.當(dāng)前限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是基因工程技術(shù)還不成熟【解析】新的胰島素生產(chǎn)過程中涉及轉(zhuǎn)錄、翻譯等,故涉及中心法則,A錯(cuò)誤;把目的基因?qū)氪竽c桿菌,常用Ca2+處理大腸桿菌,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入,B正確;新的胰島素生產(chǎn)過程中最困難的一步是設(shè)計(jì)新的胰島素分子的空間結(jié)構(gòu),C錯(cuò)誤;當(dāng)前限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是對(duì)蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)了解不夠,D錯(cuò)誤。二、非選擇題13.(2023·六安市質(zhì)檢)為了檢測(cè)牛奶中是否含有某種微生物,配制的培養(yǎng)基的配方如表(注:伊紅、亞甲藍(lán)是兩種細(xì)胞染料):蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅亞甲藍(lán)蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000mL將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2左右請(qǐng)分析回答下列問題:(1)根據(jù)配方,該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)細(xì)菌(填“細(xì)菌”“霉菌”或“細(xì)菌與霉菌”),其所含氮源的主要功能是用于合成蛋白質(zhì)、核酸等含氮有機(jī)物。(2)該微生物在同化作用上的代謝類型是異養(yǎng)型,其在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落在生態(tài)學(xué)中被稱為種群。(3)接種好的培養(yǎng)皿在恒溫箱中培養(yǎng)時(shí)要倒置,目的是防止冷凝水滴落在培養(yǎng)基上,以及避免水分過快揮發(fā)。(4)有同學(xué)為統(tǒng)計(jì)消毒后的牛奶中該微生物的含量,取5mL牛奶樣液進(jìn)行了下圖操作,每個(gè)平板中的統(tǒng)計(jì)結(jié)果為87、83、85,則經(jīng)過消毒后的牛奶中該微生物的含量大約是8.5×104個(gè)·mL-1。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是(填“是”或“否”)需要設(shè)置空白對(duì)照組,目的是判斷培養(yǎng)基是否被污染(或培養(yǎng)基滅菌是否合格)?!窘馕觥?1)根據(jù)表中“將培養(yǎng)基的pH調(diào)至7.2左右”可知,該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)細(xì)菌。該培養(yǎng)基的氮源是蛋白胨,主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸等含氮有機(jī)物。(2)根據(jù)培養(yǎng)基中含有有機(jī)碳源可知,該細(xì)菌的同化作用類型是異養(yǎng)型。菌落是指一個(gè)細(xì)菌或真菌在適宜的培養(yǎng)基上繁殖后形成的肉眼可見的集合體(細(xì)菌或真菌集團(tuán)),在生態(tài)學(xué)上被稱為種群。(3)接種好的培養(yǎng)基要倒置培養(yǎng),目的是防止冷凝水滴落在培養(yǎng)基上,以及避免水分過快揮發(fā)。(4)由圖可知,取1mL牛奶樣液稀釋了103倍,則消毒后的牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為(87+83+85)÷3÷1×103=8.5×104(個(gè))。圖示接種方法為稀釋涂布平板法,統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí),需要設(shè)置空白對(duì)照組,目的是判斷培養(yǎng)基是否被污染。14.(2023·濰坊市模擬)三白草和魚腥草是兩種常見藥用植物,二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被用作“藥對(duì)”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將兩種藥物的配合提前到個(gè)體生長或生產(chǎn)過程,并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn),具體操作如圖1。(1)過程①通過酶解法去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體,并向三白草和魚腥草細(xì)胞酶解液中分別加入紅、綠熒光色素(帶熒光色素的原生質(zhì)體仍能融合和再生)。過程②利用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)融合,隨后在熒光顯微鏡下選擇帶紅、綠熒光色素的雜種原生質(zhì)體。(2)科研人員研究不同的原生質(zhì)體密度對(duì)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合率的影響,結(jié)果如圖2。注:雙核異核融合體指具有兩個(gè)不同來源細(xì)胞核的細(xì)胞。由圖2可知,促進(jìn)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為1×106個(gè)·mL-1,高于此密度不利于形成雙核異核融合體的原因是密度過高,原生質(zhì)體的相互粘連、聚集作用過強(qiáng),PEG的誘導(dǎo)作用受到抑制等(寫出1種可能)。(3)通常情況下,能增加免疫器官的重量的物質(zhì)具有一定的增強(qiáng)免疫力的作用。為判斷融合體對(duì)動(dòng)物免疫力的影響,科研人員取同種小鼠30只,雌雄各半,隨機(jī)均分為三組,實(shí)驗(yàn)處理如下表。組別A組B組C組(空白對(duì)照組)實(shí)驗(yàn)處理三白草和魚腥草雜種愈傷組織的蒸餾水提取物三白草和魚腥草直接混合后的蒸餾水提取物等量的蒸餾水三白草和魚腥草雜種愈傷組織的蒸餾水提取物三白草和魚腥草直接混合后的蒸餾水提取物等量的蒸餾水每天一次等量灌胃,連續(xù)一周,檢測(cè)各組小鼠的胸腺重量①在表格中將C組的實(shí)驗(yàn)處理補(bǔ)充完整。②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組,則說明利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍提前并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)是可行的?!窘馕觥?1)據(jù)圖示可知,過程①通過酶解法去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體。誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法有化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG(聚乙二醇)誘導(dǎo)融合,所以過程②利用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG誘導(dǎo)融合。由于三白草細(xì)胞酶解液中加入了紅熒光色素,魚腥草細(xì)胞酶解液中加入了綠熒光色素,所以雜種原生質(zhì)體應(yīng)該帶紅、綠熒光色素。(2)由圖2柱形圖可知,在密度為1×106個(gè)·mL-1時(shí),雙核異核融合體比例最高,說明促進(jìn)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為1×106個(gè)·mL-1。高于此密度不利于形成雙核異核融合體,因?yàn)槊芏冗^高,原生質(zhì)體的相互粘連、聚集作用過強(qiáng),PEG的誘導(dǎo)作用受到抑制。(3)①因?yàn)镃組為對(duì)照組,因此根據(jù)對(duì)A、B兩組的處理,C組應(yīng)用等量的蒸餾水,每天一次等量灌胃,連續(xù)一周。②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組,則說明利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍提前并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)是可行的。15.(2023·常州模擬)英國約翰·伯恩教授領(lǐng)導(dǎo)的研究小組從人皮膚細(xì)胞中提取出細(xì)胞核,然后將其植入去除了細(xì)胞核的牛卵母細(xì)胞中,從而培育出人獸混合胚胎。該胚胎發(fā)育到第3天時(shí)已含有32個(gè)細(xì)胞,研究人員希望它能繼續(xù)生長到第6天,再從胚胎中提取干細(xì)胞供醫(yī)學(xué)研究使用。請(qǐng)回答下列問題:(1)人獸混合胚胎的基因中,99.9%以上的基因來自人類,只有不到0.1%的基因來自牛的線粒體/細(xì)胞質(zhì)(填細(xì)胞結(jié)構(gòu))。進(jìn)行體細(xì)胞核移植時(shí)通常選用卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,原因是卵母細(xì)胞體積大、營養(yǎng)物質(zhì)含量高、易操作等(至少寫兩點(diǎn))。(2)核移植過程中,采集的牛卵母細(xì)胞需將其在體外培養(yǎng)至MⅡ期,再通過顯微操作去除其中的細(xì)胞核。將人皮膚細(xì)胞的細(xì)胞核植入牛的去核卵母細(xì)胞后,用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,其目的是使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。(3)體外培養(yǎng)重組卵母細(xì)胞時(shí),需要在無菌、營養(yǎng)充足、適宜溫度和pH、適宜氣體等(至少寫兩種)環(huán)境條件下進(jìn)行。從早期胚胎或原始性腺中分離出來的細(xì)胞,稱為ES或EK細(xì)胞,這類細(xì)胞在功能上的特點(diǎn)是具有全能性。若在ES細(xì)胞培養(yǎng)液中添加?;撬?、丁酰環(huán)腺苷酸等物質(zhì)時(shí),可誘導(dǎo)ES細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞分化。(4)若想同時(shí)得到多頭基因型相同的“重組動(dòng)物”,可通過胚胎分割技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)?!窘馕觥?1)重組胚胎由人體細(xì)胞核和牛的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)融合、發(fā)育而來,故人獸混合胚胎的基因中,99.9%以上的基因來自人類,只有不到0.1%的基因來自牛的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)(線粒體);卵母細(xì)胞體積大、營養(yǎng)物質(zhì)含量高、易操作,細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì),因此體細(xì)胞核移植技術(shù)中經(jīng)常用卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞。(2)核移植過程中,采集的牛卵母細(xì)胞需將其在體外培養(yǎng)至MⅡ(減數(shù)第二次分裂中期);再通過顯微操作去除其中的細(xì)胞核。將人皮膚細(xì)胞的細(xì)胞核植入牛的去核卵母細(xì)胞后,用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,其目的是使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。(3)體外培養(yǎng)重組卵母細(xì)胞用到的技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),故需要在無菌、營養(yǎng)充足、適宜溫度和pH、適宜氣體等條件下進(jìn)行;從早期胚胎或原始性腺中分離出來的細(xì)胞,稱為ES或EK細(xì)胞,這類細(xì)胞在功能上的特點(diǎn)是具有發(fā)育的全能性,可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞;若在ES細(xì)胞培養(yǎng)液中添加
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