DB21-T 2818-2017水稻抗稻瘟病分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.01

B47

備案號(hào)：58487-2018DB21

遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB21/T2818—2017

水稻抗稻瘟病分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)規(guī)程

Ruleformolecularmarker-assistedselectionbreedingof

blastresistantricevarieties

DB21/T2818—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)村經(jīng)濟(jì)委員會(huì)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院負(fù)責(zé)起草。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：鄭文靜，陸曉春，趙家銘，董欽鵬，叢玲，張麗霞，白春明，王春語，朱振興，李

丹，王平，李金紅，王麗麗等。

本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院負(fù)責(zé)解釋。

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DB21/T2818—2017

水稻抗稻瘟病分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水稻抗稻瘟病分子標(biāo)記輔助育種的方法，包括儀器設(shè)備、試劑和材料及育種程序。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于攜帶抗稻瘟病基因Pita、Pid2、Pid3、pi21、Pi36和Pi37等水稻品種的分子標(biāo)記輔

助育種。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

NY/T1433-2014水稻品種鑒定技術(shù)規(guī)程SSR標(biāo)記法

DB21/T2396-2015水稻品種抗稻瘟病基因檢測(cè)PCR法

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

3.1

抗病親本diseaseresistantparent

指具有較強(qiáng)抗病性的材料，育種中以其為父本或母本，用于改良后代的抗病性。

3.2

人工去雄雜交artificialemasculationhybrid

運(yùn)用人工方式去掉一個(gè)親本的雄蕊，使其喪失自身授粉能力，用另一個(gè)親本的花粉使其受精從而獲

得雜交種子。

3

DB21/T2818—2017

3.3

純合個(gè)體homozygousindividual

指由2個(gè)遺傳型相同的配子結(jié)合形成的合子發(fā)育而成的個(gè)體，自交后代不發(fā)生分離。

3.4

雜合個(gè)體heterozygousindividual

指由2個(gè)遺傳型不同的配子結(jié)合形成的合子發(fā)育而成的個(gè)體，自交后代分離。

3.5

背景標(biāo)記backgroundmarker

可用于檢測(cè)試驗(yàn)材料遺傳背景的分子標(biāo)記。

4儀器設(shè)備

手術(shù)剪、尖頭鑷子及DB21/T2396-2015中規(guī)定的儀器設(shè)備。

5試劑和材料

5.1水稻育種親本

5.1.1抗病供體親本

將抗稻瘟病的水稻品種作為抗病分子育種的供體親本。

5.1.2感病受體親本

將農(nóng)藝性狀優(yōu)良，但對(duì)稻瘟病抗性較差的水稻品種作為抗病育種的受體親本。

5.2DB21/T2396-2015中規(guī)定的試劑和材料

除非另有說明，僅使用分析純?cè)噭┖椭卣麴s水或符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

6育種程序

6.1技術(shù)路線

技術(shù)路線圖見附錄A。

6.2親本選擇

4

DB21/T2818—2017

6.2.1抗病供體親本選擇

將在田間對(duì)稻瘟病表現(xiàn)抗病的水稻資源按《水稻品種抗稻瘟病基因檢測(cè)PCR法》（DB21/T

2396-2015）鑒定，選取具有抗稻瘟病基因的作為抗病供體親本（P1）。

6.2.2感病受體親本選擇

選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良，但對(duì)稻瘟病表現(xiàn)感病的品種（材料）作為受體親本（P2）。

6.3雜交配組

以P2為母本，以P1為父本，人工去雄雜交，獲F1代種子。

6.4回交

以P2為母本，以F1為父本，回交，獲種子50粒~100粒（BC1F1）。

6.5BC1F1自交

BC1F1自交，混收，獲BC1F2代種子（1000粒~1500粒）。

6.6BC1F2抗稻瘟病基因純合個(gè)體篩選

將BC1F2單株栽植于田間，選取農(nóng)藝性狀與P2接近的單株，按照《水稻品種抗稻瘟病基因檢測(cè)PCR

法》（DB21/T2396-2015）篩選攜帶純合抗稻瘟病基因的個(gè)體100個(gè)~200個(gè)。

6.7BC1F2遺傳背景鑒定

根據(jù)NY/T1433-2014，鑒定6.6中獲得的BC1F2個(gè)體遺傳背景，從中篩選與P2基因型相似度最高

的個(gè)體。

6.8BC1F2回交

以P2作為母本，以6.7篩選出的個(gè)體為父本，回交，獲BC2F1（50粒~100粒）。

6.9BC2F1自交

BC2F1自交，混收，獲BC2F2代種子1000粒~1500粒。

6.10BC2F2抗稻瘟病基因純合個(gè)體篩選

5

DB21/T2818—2017

將BC2F2單株栽植于田間，選取農(nóng)藝性狀與P2接近的單株，按照《水稻品種抗稻瘟病基因檢測(cè)PCR

法》（DB21/T2396-2015）篩選攜帶純合抗稻瘟病基因的個(gè)體100個(gè)~200個(gè)。

6.11BC2F2遺傳背景鑒定

根據(jù)NY/T1433-2014，鑒定6.10中獲得的BC2F2個(gè)體遺傳背景，從中篩選與P2基因型相似的個(gè)體

10個(gè)~20個(gè)。

6.12常規(guī)系選

將6.11中獲得的個(gè)體自交，至BC2F4后從中選擇農(nóng)藝性狀與P2相似的材料進(jìn)行穗選、株選，并通過

小區(qū)品比試驗(yàn)選出優(yōu)良品系。

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附錄A

（規(guī)范性附錄）

抗稻瘟病分子育種技術(shù)路線圖

♀P2×P1♂

↓

F1×P2

↓

BC1F1

↓

BC1F2

↓靶基因鑒定

抗病基因純合的BC1F2個(gè)體

↓遺傳背景鑒定

靶基因純合且與P2相似的BC1F2個(gè)體×P2

↓

BC2F1

↓

BC2F2

↓靶基因鑒定

抗病基因純合的BC2F2個(gè)體

↓遺傳背景鑒定

靶基因純合且遺傳背景與P2相似的BC2F2個(gè)體

↓

BC2F3

↓

BC2F4

↓常規(guī)系選

優(yōu)良品系

_________________________________

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目次

前言.............................................................................2

1范圍..............................................................................3

2規(guī)范性引用文件....................................................................3

3術(shù)語和定義........................................................................3

4儀器設(shè)備..........................................................................4

5試劑和材料........................................................................4

6育種程序..........................................................................4

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