5-粗脂肪的測(cè)定

/五飼料中粗脂肪的測(cè)定1適用范圍本方法規(guī)定了動(dòng)物飼料脂肪含量的測(cè)定方法，本方法適用于油籽和油籽殘?jiān)酝獾膭?dòng)物飼料。為了本方法的測(cè)定效果，將動(dòng)物飼料分為下列兩類；B類產(chǎn)品的樣品提取前需要水解。B類：

―純動(dòng)物性原料，包括乳制品；

―脂肪不經(jīng)預(yù)先水解不能提取的純植物性飼料，如谷蛋白、酵母、大豆及馬鈴薯蛋白以及加熱處理的飼料；

―含有一定數(shù)量加工產(chǎn)品的配合飼料，其脂肪含量至少有20％來(lái)自這些加工產(chǎn)品。A類：B類以外的動(dòng)物飼料。

對(duì)于油籽，在ISO659中介紹了一種己烷提取的“油含量”測(cè)定方法。2方法原理2.1脂肪含量較高的樣品（至少200g/kg）預(yù)先用石油醚提取。2.2B類樣品用鹽酸加熱水解，水解溶液冷卻、過(guò)濾，洗滌殘?jiān)⒏稍锖笥檬兔烟崛?，蒸餾、干燥除去溶劑，殘?jiān)Q量。2.3A類樣品用石油醚提取，通過(guò)蒸餾和干燥除去溶劑，殘?jiān)Q量。3試劑本方法所用試劑，未注明要求時(shí)，均指分析純?cè)噭?.1水至少應(yīng)為GB／T6682規(guī)定的3級(jí)；3.2硫酸鈉，無(wú)水；3.3石油醚，分析純，沸點(diǎn)范圍為40℃～60℃。3.4玻璃細(xì)珠；3.5丙酮；3.6鹽酸：c（HCl）=3mol/L；3.7濾器輔料：例如硅藻土（kieselguhr），在鹽酸[c(HCl)=6mol/L]中消煮30min，用水洗至中性，然后在130℃下干燥。4儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備，特別是下列各件。4.1提取套管，無(wú)脂肪和油，用乙醚洗滌。4.2索氏提取器，虹吸容積約100mL，或用其他循環(huán)提取器。4.3恒溫水浴鍋，有溫度控制裝置，不能有火源。4.4干燥箱，溫度能保持在（103±2）℃。4.5電熱真空箱，溫度能保持在（80±2）℃，并減壓至13.3kPa以下，配有引入干燥空氣的裝置，或內(nèi)盛干燥劑，例如氧化鈣。4.6干燥器，內(nèi)裝有效的干操劑。5分析步驟5.1分析步驟的選擇如果試樣不易粉碎，或因脂肪含量高（超過(guò)200g/kg）而不易獲得均質(zhì)的縮減的試樣，按5.2處理。其他情況下，則按5.3處理。5.2預(yù)先提取（膨化大豆）5.2.1稱取10g左右(精確至1mg）制備的試樣（m0），與10g無(wú)水硫酸鈉混合，轉(zhuǎn)移至一提取套管中，并用一小塊脫脂棉覆蓋提取套管。將一內(nèi)部放有幾粒玻璃珠的干燥燒瓶與提取器連接，再將裝有樣品的套管置于索氏提取器中，調(diào)節(jié)加熱裝置使每小時(shí)至少循環(huán)10次，回流2h。取出底部燒瓶，把所有溶液充分震蕩混勻，轉(zhuǎn)移到500mL容量瓶中，并用石油醚洗滌燒瓶中的石油醚提取物且一并轉(zhuǎn)移到容量瓶中。對(duì)另一個(gè)盛有玻璃細(xì)珠的干燥燒瓶進(jìn)行稱量，準(zhǔn)確至1mg，吸取50mL容量瓶中的石油醚溶液移人此燒瓶中。5.2.2蒸餾除去溶劑，加2mL丙酮至燒瓶中，轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶并在加熱裝置上緩慢加溫以除去丙酮，用吹風(fēng)機(jī)吹去痕量丙酮。殘?jiān)?03℃干燥箱（80℃真空烘箱）內(nèi)干燥10min（1.5h），在干燥器中冷卻，稱量（m2），準(zhǔn)確至0.1mg。5.2.3取出套管中提取的殘?jiān)诳諝庵辛栏桑⒎湃?03℃的烘箱烘3h，干燥殘?jiān)Q量（m3），準(zhǔn)確至0.1mg。將殘?jiān)鬯槌?mm大小的顆粒，按5.3處理。5.3試料處理選擇稱取5g(m4）制備的試樣，準(zhǔn)確至1mg。

對(duì)B類樣品按5.4處理。

對(duì)A類樣品，將試料移至提取套管并用一小塊脫脂棉覆蓋，按5.5處理。5.4水解（魚粉、肉骨粉、大豆、谷蛋白、酵母、馬鈴薯蛋白）試料轉(zhuǎn)移至一個(gè)400mL燒杯，加100mL3mol/L鹽酸和玻璃珠，用表面皿覆蓋，在火焰上或電熱板上加熱至微沸，保持lh，每10min旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)一次，防止產(chǎn)物粘附于容器壁上。取下冷卻，加一定量的濾器輔料，防止過(guò)濾時(shí)脂肪丟失，在布氏漏斗中通過(guò)濕潤(rùn)的無(wú)脂的雙層濾紙抽吸過(guò)濾，殘?jiān)美渌礈熘林行浴Ｐ⌒娜〕鰹V器并將含有殘?jiān)碾p層濾紙放入一個(gè)提取套管中，在80℃電熱真空箱中于真空條件下干燥60min，從電熱真空箱中取出套管并用一小塊脫脂棉覆蓋。5.5提取5.5.1將一些玻璃珠轉(zhuǎn)移至一干燥燒瓶，稱量（m5），準(zhǔn)確至1mg。將燒瓶與提取器連接，收集石油醚提取物。將套管置于提取器中，用石油醚提取6h。使用索氏提取器，則調(diào)節(jié)加熱裝置使每小時(shí)至少循環(huán)10次。5.5.2蒸餾除去溶劑，直至燒瓶中幾無(wú)溶劑，加2mL丙酮至燒瓶中，轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶并在加熱裝置上緩慢加溫以除去丙酮，吹去痕量丙酮。殘?jiān)?03℃干燥箱內(nèi)（80℃真空烘箱）干燥10min（1.5h），在干燥器中冷卻，稱量（m6），準(zhǔn)確至0.lmg。6計(jì)算6.1預(yù)先提取測(cè)定法試樣的脂肪含量W1，按下式計(jì)算，%式中：m０——在5.2中稱取的試樣質(zhì)量，g；m１——在5.2中裝有金剛砂的燒瓶的質(zhì)量，g；m２——在5.2中帶有玻璃珠的燒瓶和干燥的石油醚提取物殘?jiān)馁|(zhì)量，g；m３——在5.2中獲得的干燥提取殘?jiān)馁|(zhì)量，g；

m４——試料（5.3中）的質(zhì)量，g；

m５——在5.5中使用的盛有金剛砂的燒瓶的質(zhì)量，g；m６——在5.5中盛有金剛砂的燒瓶和獲得的干燥石油醚提取殘?jiān)馁|(zhì)量，g；ｆ——校正因子單位，g/kg（ｆ＝1000g/kg）。結(jié)果表示準(zhǔn)確至1g/Kg。6.2無(wú)預(yù)先提取的測(cè)定法

試樣的脂肪含量W2：按下式計(jì)算，以克每千克表示：式中：ｍ４——試料（5.3中）的質(zhì)量，g；

ｍ５——在（5.5中）中使用的帶有玻璃珠的燒瓶的質(zhì)量，g；

ｍ６——在（5.5中）中盛有金剛砂的燒瓶和獲得的石油醚提取干燥殘?jiān)馁|(zhì)量，g；ｆ——校正因子單位，g/kg（f=1000g/kg）。結(jié)果表示準(zhǔn)確至1g/kg。7重復(fù)性A類樣品兩個(gè)平行試樣測(cè)定結(jié)果之間的絕對(duì)值不大于2.5g/kg，對(duì)于B類樣品樣品，兩個(gè)平行試樣測(cè)定結(jié)果之間的絕對(duì)值不大于5g/kg。8注意事項(xiàng)8.1石油醚易揮發(fā)、易燃且具有一定毒性，需要在通風(fēng)櫥中操作。且隔離火源。8.2丙酮有毒，需要在通風(fēng)櫥中操作。8.3水解時(shí)必須要加入玻璃珠，防止溶液暴沸，發(fā)生燙傷，且造成實(shí)驗(yàn)失敗?；鹪匆却蠛笮。詈蟊３治⒎袪顟B(tài)。9結(jié)果準(zhǔn)確度的保證9.1所用無(wú)水石油醚不能用乙醚代替，因?yàn)橐颐褎《荆乙颐烟崛∵^(guò)程中可能會(huì)因?yàn)闃悠分泻械乃侄斐蓸悠分械奶穷惡蜔o(wú)機(jī)物被抽提出來(lái)。9.2樣品冷卻時(shí)間要一致。9.3帶手套操作，手上的汗油漬會(huì)附于提取套管上，影響結(jié)果。9.4提取不完全則有誤差,要求必須做平行樣。我國(guó)規(guī)定