江蘇省兩校2023-2024學(xué)年高考仿真模擬生物試卷含解析

江蘇省兩校2023-2024學(xué)年高考仿真模擬生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)生物變異、生物育種的敘述，錯誤的是（）A．不攜帶相關(guān)致病基因的個體也能患有遺傳病B．雜交育種能將兩個物種的優(yōu)良性狀通過交配集中到一起，并能產(chǎn)生可穩(wěn)定遺傳的后代C．用γ射線照射乳酸菌可能會引發(fā)基因突變D．基因重組能產(chǎn)生多種基因組合，提高子代對環(huán)境的適應(yīng)力2．下列對圖中有關(guān)的生物學(xué)意義描述正確的是（）A．圖中體現(xiàn)了激素調(diào)節(jié)方式的分級調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié)，垂體通過合成分泌抗利尿激素作用于腎臟，調(diào)節(jié)水平衡B．圖中該遺傳病一定不是伴X染色體顯性遺傳病，一定是常染色體顯性遺傳病C．圖中，對光彎曲的植物而言，若莖背光側(cè)為B對應(yīng)的生長素濃度，則莖向光側(cè)不可能為C對應(yīng)的濃度D．圖中若B表示5片新鮮土豆片放入等量過氧化氫溶液中的氣體變化，則A表示8片新鮮土豆片放入等量過氧化氫溶液中的氣體變化3．下列有關(guān)細(xì)胞呼吸的敘述，正確的是（）A．細(xì)胞呼吸釋放的能量直接用于各項生命活動B．細(xì)胞呼吸的底物都是葡萄糖C．無氧呼吸只在第一階段生成少量ATPD．線粒體是有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物進(jìn)行有氧呼吸的主要場所4．下列各項特征中與多細(xì)胞生物統(tǒng)一完成生命活動無關(guān)的是（）A．細(xì)胞的分化 B．細(xì)胞的調(diào)亡C．細(xì)胞成分穩(wěn)定不變 D．細(xì)胞間的信息交流5．用射線處理某野生型純合的深眼色果蠅群體后，獲得了甲、乙兩種隱性突變的果蠅（性狀均為淺眼色）。甲的隱性突變基因用a表示，乙的隱性突變基因用b表示，a、b基因分別獨立遺傳?，F(xiàn)用甲品系雄果蠅和乙品系雌果蠅雜交，F(xiàn)1雄性均表現(xiàn)為淺眼色，雌性均表現(xiàn)為深眼色。下列敘述錯誤的是A．兩個隱性突變基因在遺傳過程中能夠自由組合B．野生型雄果蠅突變獲得1個b基因就能出現(xiàn)淺眼色性狀C．F1雌、雄果蠅雜交后代中深眼色果蠅所占比例為3/16D．親本甲、乙果蠅的基因型分別為aaXBY和AAXbXb6．從某二倍體動物的組織中提取一些細(xì)胞，通過測定細(xì)胞中染色體數(shù)目（無染色體變異發(fā)生），將這些細(xì)胞分為三組，每組的細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計如甲圖，乙圖是取自該組織中的一個細(xì)胞。對圖中所示結(jié)果分析正確的是A．甲圖中B組細(xì)胞有些正在進(jìn)行減數(shù)分裂B．甲圖中A組細(xì)胞都是次級性母細(xì)胞C．該組織可能來自卵巢，乙圖細(xì)胞屬于甲圖中B組類型D．甲圖C組中有一部分細(xì)胞可能正在發(fā)生同源染色體的分離二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）植物細(xì)胞壁中存在大量不能被豬消化的多聚糖類物質(zhì)，如半纖維素多聚糖、果膠質(zhì)（富含有半乳糖醛酸的多聚糖）等。研究人員通過基因工程、胚胎工程等技術(shù)培育出轉(zhuǎn)多聚糖酶基因（manA）豬，主要流程如下圖（neo為新霉素抗性基因）。（1）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是_____________________________________________________________。通過①過程獲得的重組質(zhì)粒含有4.9kb個堿基對，其中manA基因含有1.8kb個堿基對。若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯(lián)合酶切割其中一種重組質(zhì)粒，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，若用上述聯(lián)合酶切割同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得__________kb長度兩種的DNA片段。（2）圖2中，豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________________________________，豬的卵母細(xì)胞一般要培養(yǎng)到__________期。（3）在④過程的早期胚胎培養(yǎng)時，通常需要定期更換培養(yǎng)液，目的是______________________________________________，一般培養(yǎng)到__________階段，可向受體移植。（4）⑤過程前，通常需對受體母豬注射孕激素，對其進(jìn)行__________處理。8．（10分）新型冠狀病毒是一種RNA病毒，會導(dǎo)致人患嚴(yán)重的肺炎。2019年末新型冠狀病毒肆虐，全國上下齊心協(xié)力一致抗疫。2020年2月15日，官方宣布新型冠狀病毒疫苗的研發(fā)取得了新進(jìn)展，已完成了基因序列合成，正在進(jìn)行重組質(zhì)粒構(gòu)建和工程菌篩選工作。請聯(lián)系基因工程的相關(guān)知識，回答下列問題：（1）基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和______________________。（2）新型冠狀病毒通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染，在研制疫苗時需要獲取病毒的目的基因是______________________，方法是____________________，然后利用___________技術(shù)擴增。（3）腺病毒是一種DNA病毒，編碼數(shù)十個腺病毒的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，其中E1區(qū)蛋白與腺病毒的復(fù)制有關(guān)而且對宿主細(xì)胞的毒性很強。研究中將E1基因缺失的腺病毒作為運載目的基因的載體，改造后的腺病毒應(yīng)該具備的特點有：______________________（至少答出兩點）。目的基因與腺病毒構(gòu)建重組腺病毒載體必須包括：新型冠狀病毒基因、______________________（至少答出兩點）等。（4）重組腺病毒載體侵染宿主細(xì)胞后，利用宿主細(xì)胞翻譯出____________________，引發(fā)機體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中，識別其啟動子的酶是___________。A．病毒的DNA聚合酶B．宿主的DNA聚合酶C．病毒的RNA聚合酶D．宿主的RNA聚合酶9．（10分）突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素?？茖W(xué)家們利用基因工程對其進(jìn)行定向改造，以得到抗寒性強的優(yōu)良品種。下圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的方法，圖中標(biāo)注的是限制酶的酶切位點，請回答下列問題：（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為____________________，選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免________________。（2）可通過________技術(shù)對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴增，該過程使DNA解旋的方法與細(xì)胞內(nèi)復(fù)制時的差異是________________，體外擴增時使用的酶具有的顯著特點是__________________。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)________（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用________法。10．（10分）下圖是中心法則及其發(fā)展圖解，反映了生物體內(nèi)遺傳信息的流向，回答下列問題：（1）在線粒體和葉綠體中能夠發(fā)生的生理過程有________（填序號），④過程需要的一種特殊的酶是_______。（2）與③過程相比較，②過程特有的堿基配對方式是________。（3）若某基因編碼的氨基酸序列為“色氨酸—苯丙氨酸—……—．絲氨酸—半胱氨酸”，根據(jù)該氨基酸序列及密碼子表________（填“能”或“不能”）推測出該基因的堿基序列，理由是________________。11．（15分）國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過個，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來測定，流程為：用濾膜過濾1ml待測牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目。（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。（2）為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_____________。（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計，結(jié)果如下：培養(yǎng)時間12h24h平板對照組123對照組123大腸桿菌菌落數(shù)（個）01321211450132121145其他細(xì)菌菌落數(shù)（個）112253222244112253222244（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請說明理由：_____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

遺傳病可分為單基因遺傳病、多基因遺傳病和染色體異常遺傳病。雜交育種是將父母本雜交，形成不同的遺傳多樣性，再通過對雜交后代的篩選，獲得具有父母本優(yōu)良性狀，且不帶有父母本中不良性狀的新品種的育種方法。雜交育種的原理是基因重組?！驹斀狻緼、不攜帶相關(guān)致病基因的個體也能患有遺傳病，如染色體異常遺傳病，A正確；B、雜交育種只能將同一物種的優(yōu)良性狀通過交配集中到一起，在兩個物種之間存在生殖隔離，不能進(jìn)行交配，B錯誤；C、用γ射線（物理因素）照射乳酸菌可能會引發(fā)基因突變，C正確；D、基因重組能產(chǎn)生多種基因組合，產(chǎn)生多種變異個體，提高子代對環(huán)境的適應(yīng)力，D正確。故選B。2、C【解析】

生長素對植物的調(diào)節(jié)具有兩重性，低濃度促進(jìn)生長，高濃度抑制生長。酶通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能從而加速化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行，不會改變反應(yīng)的平衡點，據(jù)此分析解答?！驹斀狻緼、抗利尿激素是下丘腦合成，垂體釋放的，A錯誤；B、圖中該遺傳病可能是常染色體顯性遺傳病，也可能是常染色體隱性遺傳病，B錯誤；C、圖中，對向光彎曲的植物而言，若莖背光側(cè)為B對應(yīng)的生長素濃度，由于生長素在單側(cè)光作用下向背光側(cè)橫向運輸，所以莖向光側(cè)不可能為C對應(yīng)的濃度，C正確；D、A、B產(chǎn)生的氣體量不等是由于過氧化氫溶液的量不等，酶的數(shù)量只影響達(dá)到反應(yīng)平衡點的時間，D錯誤。故選C。【點睛】本題考查了神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)、人類遺傳病的類型、生長素和酶促反應(yīng)的相關(guān)知識。意在考查考生的識圖能力、識記能力和理解判斷能力。3、C【解析】

細(xì)胞呼吸是指有機物在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列的氧化分解，生成二氧化碳或其他產(chǎn)物，釋放出能量并生成ATP的過程。根據(jù)是否需要氧氣，把細(xì)胞呼吸分為有氧呼吸和無氧呼吸。【詳解】A、生命活動所需的直接能源物質(zhì)是ATP，細(xì)胞呼吸釋放的能量大部分以熱能的形式散失，少部分轉(zhuǎn)移到ATP中，ATP水解釋放的能量才可用于各項耗能的生命活動，A錯誤；B、細(xì)胞呼吸的底物可以是葡萄糖，也可以是脂肪等，B錯誤；C、無氧呼吸只在第一階段生成少量ATP，C正確；D、線粒體是真核細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸的主要場所，原核細(xì)胞沒有線粒體，進(jìn)行有氧呼吸的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，D錯誤。故選C。4、C【解析】

細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。單細(xì)胞的生物，單個細(xì)胞就能完成各種生命活動。多細(xì)胞的動物植物，他們依賴各種分化的細(xì)胞密切合作，共同完成一系列復(fù)雜的生命活動。【詳解】A、大部分多細(xì)胞生物依賴各種分化的細(xì)胞密切合作，共同完成一系列復(fù)雜的生命活動，A正確；B、在生命延續(xù)過程中，死亡的細(xì)胞要及時更新，細(xì)胞凋亡需要以細(xì)胞為單位而有條不紊的進(jìn)行，對多細(xì)胞生物的生命穩(wěn)定性起重要作用，B正確；C、組成生物體的細(xì)胞不是一成不變的，它們在完成各項生命活動的同時，其內(nèi)在成分不斷發(fā)生變化，C錯誤；D、細(xì)胞間的信息交流依賴于不同的細(xì)胞分工合作，實現(xiàn)生物體功能上的協(xié)調(diào)，與多細(xì)胞生物統(tǒng)一完成生命活動密切相關(guān)，D正確。故選C。5、C【解析】

根據(jù)題干分析，“將純合深眼色果蠅用X射線誘變處理，得到兩種隱性突變品系，性狀均為淺眼色，兩突變品系雜交，子一代雌性均為深眼色，雄性均為淺眼色”，說明兩種突變品系是兩對不同基因分別突變的結(jié)果，且與性別有關(guān)，至少有一對基因位于X染色體上。又由于甲品系雄果蠅和乙品系雌果蠅雜交，F(xiàn)1雄性均表現(xiàn)為淺眼色，雌性均表現(xiàn)為深眼色，可推測親本甲基因型為：aaXBY，乙基因型為：AAXbXb，F(xiàn)1雌性果蠅基因型：AaXBXb，雄性果蠅基因型：AaXbY?！驹斀狻緼、據(jù)分析可知，眼色性狀是由二對等位基因控制，其中一對位于常染色體上，一對位于X染色體上，因此果蠅眼色性狀的遺傳遵循自由組合定律，A正確；B、通過題干信息可知，B/b在X染色體上，故野生型雄果蠅突變獲得1個b基因就能出現(xiàn)淺眼色性狀，B正確；C、F1雌性果蠅AaXBXb，雄性果蠅AaXbY，雜交后代中深眼色果蠅所占比例為3/4×1/2=3/8，C錯誤；D、通過分析可知，親本甲、乙果蠅的基因型分別為aaXBY和AAXbXb，D正確。故選C。6、A【解析】

對甲圖進(jìn)行分析可知：A組細(xì)胞中染色體數(shù)量為N，說明細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂前期、中期或該細(xì)胞為減數(shù)分裂后產(chǎn)生子細(xì)胞；A組細(xì)胞中染色體數(shù)量為2N，說明細(xì)胞處于有絲分裂的間期、前期、中期，或處于減數(shù)第一次分裂時期，或處于減數(shù)第二次分裂后期；C組染色體數(shù)量為4N，表示細(xì)胞處于有絲分裂后期。對乙圖進(jìn)行分析可知，細(xì)胞中存在同源染色體，且紡錘絲牽引著同源染色體分別向細(xì)胞兩極移動，說明該細(xì)胞處于減數(shù)第一次分裂后期?！驹斀狻吭跍p數(shù)第一次分裂時期或處于減數(shù)第二次分裂后期，染色體數(shù)目均為2N，故B組細(xì)胞有些正在進(jìn)行減數(shù)分裂，A正確；A組細(xì)胞只含一半的染色體，所以可能是次級性母細(xì)胞或性細(xì)胞，B錯誤；乙圖細(xì)胞中同源染色體分離，且細(xì)胞質(zhì)均等分裂，所以該細(xì)胞為初級精母細(xì)胞，因此該組織可能來自精巢，C錯誤；由于C組細(xì)胞的染色體為4N，只能是有絲分裂后期，所以C組中不可能有細(xì)胞正在發(fā)生同源染色體的分離，D錯誤。故選A?！军c睛】熟記有絲分裂和減數(shù)分裂過程中染色體數(shù)目的變化規(guī)律，準(zhǔn)確判斷題圖細(xì)胞所處的時期是解答本題的關(guān)鍵。二、綜合題：本大題共4小題7、目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒3.5和1.4保持正常的二倍體核型減數(shù)第二次分裂中清除代謝廢物，補充營養(yǎng)物質(zhì)桑椹胚或囊胚同期發(fā)情【解析】

分析題圖：①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建、②為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、③為體細(xì)胞核移植、④為早期胚胎培養(yǎng)、⑤為胚胎移植?！驹斀狻浚?）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒。上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，說明右側(cè)BamHI和EcoRI之間的長度為1.7；用聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質(zhì)粒，則切割的是BamHI左側(cè)的位點，又因為manA基因含有1.8kb個堿基對，可獲得1.7+1.8=3.5kb和4.9-3.5=1.4kb兩種DNA片段。（2）豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是保持正常的二倍體核型。細(xì)胞在傳至10～50代時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會發(fā)生變化。在核移植時采集的卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才進(jìn)行去核操作。（3）在早期胚胎培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，清除代謝廢物，補充營養(yǎng)物質(zhì)。胚胎一般培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可向受體移植。（4）胚胎移植前，通常需對受體母豬注射孕激素，使其能同期發(fā)情?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的相關(guān)知識、核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，并能夠分析和判斷圖中各個字母代表的過程的名稱，結(jié)合題目的提示分析答題。8、目的基因的檢測與鑒定指導(dǎo)S—蛋白合成的基因以病毒的RNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因（或化學(xué)合成法）PCR能夠侵染宿主細(xì)胞，具有多個限制酶切位點，不能復(fù)制，不易引起機體的免疫反應(yīng)啟動子、終止子、標(biāo)記基因病毒的蛋白（或“S一蛋白”或“病毒的S—蛋白”）D【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞和目的基因的檢測和鑒定。（2）疫苗是通過主動免疫的方式刺激機體產(chǎn)生抗體，因為新型冠狀病毒是通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染，因此S一蛋白是病毒的特異性結(jié)構(gòu)，在研制基因工程疫苗時應(yīng)該要獲取的目的基因是指導(dǎo)S一蛋白合成的基因。由于新型冠狀病毒是RNA病毒，RNA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，需要合成DNA，因此可以采用的方法是以病毒的RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因，或者根據(jù)病毒的基因測序化學(xué)合成相應(yīng)的DNA。體外擴增DNA的技術(shù)是PCR技術(shù)。（3）根據(jù)題干信息中對于腺病毒的分析，E1基因缺失的腺病毒是不能復(fù)制的，同時對宿主細(xì)胞的毒性較弱，不易引起機體的免疫反應(yīng)，同時又要具備運載體的特點，所以需要有能夠插入目的基因的限制性酶切位點，以及侵染宿主細(xì)胞的特性。重組腺病毒載體應(yīng)該要滿足的特點是要保證目的基因要能夠表達(dá)，因此至少受包括新型冠狀病毒目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。（4）重組腺病毒載體侵染宿主細(xì)胞后，利用宿主細(xì)胞翻譯出病毒的S-蛋白，引發(fā)機體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中，識別其啟動子的酶是用于轉(zhuǎn)錄的酶，所以是RNA聚合酶，這個酶是由宿主細(xì)胞提供的?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及各操作步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。9、SmaI和PstI質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接PCR體外擴增目的基因利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋，細(xì)胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）脫分化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化【解析】

分析題圖可知：HindIII的切割位點會破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，AluI會破壞目的基因，故不能用上述兩種酶切割?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖中各種限制酶的切割位點，既可以獲得目的基因又不能破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，故選用SmaI和PstI；選擇兩種酶的優(yōu)勢是可避免含有目的基因的外源DNA自身環(huán)化，可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化，也可避免質(zhì)粒與目的基因的反向連接。（2）對獲得的抗寒基因進(jìn)行體外擴增，可用PCR技術(shù)；在細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制需要解旋酶將雙鏈解開，而PCR技術(shù)利用加熱至90~95℃的高溫使DNA解旋；該技術(shù)使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。（3）軟籽石榴的愈傷組織經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得過程中的脫分化環(huán)節(jié)得到；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法?！军c睛】明確基因工程的基本操作程序是解答本題的關(guān)鍵，且能明確限制酶的選擇依據(jù)，結(jié)合題圖分析作答。10、①②③逆轉(zhuǎn)錄酶T-A不能密碼子具有簡并性，由氨基酸序列