微生物學(xué)檢驗(yàn)課件

腸道桿菌

埃希菌屬埃希菌屬種類大腸埃希菌蟑螂埃希菌弗格森埃希菌赫爾曼埃希菌傷口埃希菌形態(tài)染色革蘭陰性短桿菌，多數(shù)有周鞭毛，有莢膜或微莢膜，有菌毛，均無(wú)芽孢培養(yǎng)特性兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高圓形光滑菌落菌落特征

SS平板－－紅色菌落

Mac平板－－紅色菌落

EMB平板－－紫黑色有金屬光澤菌落生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)（－）分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖等，（個(gè)別菌株遲分解乳糖或不分解乳糖）KIA：AA＋－MIU：＋＋－IMViC：＋＋－－抗原結(jié)構(gòu)抗原種類：O、H、K抗原意義：表示大腸埃希菌血清型血清型表示式：O:K:H舉例：O111:K58:H2抵抗力膽鹽、煌綠對(duì)該菌有抑制作用對(duì)氯霉素、鏈霉素、慶大霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性臨床意義致病物質(zhì)：K抗原、菌毛、內(nèi)毒素、腸毒素（LT、ST）所致疾?。耗c外感染：多為機(jī)會(huì)感染，表現(xiàn)為泌尿系感染（多見(jiàn)），膽囊炎、腹膜炎等

腸內(nèi)感染：由致病大腸埃希菌引起，表現(xiàn)為腹瀉。微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集：

腸外感染：根據(jù)病變部位不同采集不同標(biāo)本，如血液、尿液、分泌物等腸內(nèi)感染：采集新鮮糞便檢驗(yàn)程序

腸內(nèi)感染糞便腸道弱選擇培養(yǎng)基分解乳糖菌落ETEC生化反應(yīng)毒素測(cè)定EPECEIECEHEC與O、K多價(jià)診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)生化反應(yīng)和血清學(xué)分型檢驗(yàn)程序

腸外感染膿、尿、腦脊液等革蘭染色鏡檢接種血平板分離培養(yǎng)可疑菌落生化反應(yīng)氧化酶、KIAMIU報(bào)告結(jié)果血液增菌菌落涂片染色檢驗(yàn)方法－腸外感染標(biāo)本直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)：標(biāo)本接種血平板和Mac或EMB平版，經(jīng)18～24小時(shí)培養(yǎng)，挑取可疑菌落作進(jìn)一步鑒定。血標(biāo)本先增菌，再分離培養(yǎng)。鑒定：菌落涂片生化反應(yīng)氧化酶：－（與非發(fā)酵菌鑒別）

KIA：AA＋/－－

MIR：＋＋－

IMViC＋＋－－尿菌落計(jì)數(shù)：＞10萬(wàn)／ml尿液有診斷意義檢驗(yàn)方法－腸內(nèi)感染分離培養(yǎng)：糞便標(biāo)本接種Mac或EMB平版，經(jīng)18～24小時(shí)培養(yǎng)，挑取可疑菌落作進(jìn)一步鑒定。生化反應(yīng)：KIA、MIU、IMViC符合大腸埃希菌致病大腸埃希菌鑒定ETEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸埃希菌毒素檢測(cè)方法LTST生物學(xué)方法家兔或小白鼠腸袢試驗(yàn)家兔或小白鼠腸袢試驗(yàn)皮膚毛細(xì)血管通透性試驗(yàn)乳鼠灌胃試驗(yàn)免疫學(xué)法ELISAELISA固相放免分子生物學(xué)法基因探針基因探針EPEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸埃希菌血清學(xué)分型先用多價(jià)診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)，如凝集再用單價(jià)診斷血清確定血清型EIEC的鑒定生化反應(yīng)特點(diǎn)（與志賀菌相似）發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣不發(fā)酵或遲分解乳糖多數(shù)菌株動(dòng)力陰性與志賀菌的鑒別：毒力測(cè)定：豚鼠眼結(jié)膜試驗(yàn)血清學(xué)分型：O152、O124EHEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸桿菌血清學(xué)分型：有50多個(gè)型，代表為O157:H7O157:H7不發(fā)酵山梨醇，有助于選擇性分離培養(yǎng)鑒定依據(jù)在腸道選擇平板上為發(fā)酵乳糖的有色菌落在KIA上多為＋＋＋－IMViC為＋＋－－尿酶試驗(yàn)－致病性大腸桿菌需作血清學(xué)鑒定或毒力測(cè)定LT與ST的比較特性不耐熱腸毒素耐熱腸毒素分子量較大，73000較小，1500～5000耐熱性不耐熱耐熱免疫原性有無(wú)B亞單位受體腸黏膜GM1神經(jīng)節(jié)苷酯腸黏膜GM1神經(jīng)節(jié)苷酯致病機(jī)理活化細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶，細(xì)胞內(nèi)cAMP含量升高，分泌功能亢進(jìn)，引起腹瀉活化細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶，細(xì)胞內(nèi)cGMP含量升高，分泌功能亢進(jìn)，引起腹瀉致病大腸埃希菌種類菌株侵襲部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉、嬰幼兒腹瀉、水樣便、腹痛等LT、STEPEC小腸嬰幼兒腹瀉、水樣便發(fā)熱、嘔吐病菌黏附、破壞細(xì)胞EIEC結(jié)腸志賀樣腹瀉，膿血便黏附、內(nèi)毒素破壞細(xì)胞EHEC結(jié)腸出血性結(jié)腸炎等志賀樣毒素（VERO毒素）EAggec小腸嬰兒腹瀉、水樣便、脫水黏附、毒素大腸埃希菌生化反應(yīng)結(jié)果KIAMIUIMViC氧化酶斜面底層氣體H2S動(dòng)力吲哚尿酶IMViCAA＋/-－＋/-＋－＋＋－－－KA－－＋＋－＋＋－－－KA－－－＋－＋＋－－－KA＋－＋/-＋－＋＋－－－與志賀菌的鑒別生化反應(yīng)鑒別試驗(yàn)EIEC志賀菌粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸＋－醋酸鹽利用＋－賴氨酸脫羧＋－病

毒病毒是個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，只含一種核酸，在細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖的非細(xì)胞型微生物。

病毒特征體積微小：能通過(guò)濾菌器，需用電子顯微鏡觀察非細(xì)胞結(jié)構(gòu)：無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由蛋白質(zhì)和核酸組成，核酸類型單一：只含一種核酸嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式增殖抵抗力特殊：耐冷不耐熱，對(duì)抗生素不敏感病毒的基本性狀和分類病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成病毒的大小與形態(tài)病毒體：指完整的、成熟的具有感染性的病毒顆粒。病毒的測(cè)量單位：納米（nm）病毒形態(tài)：球形、桿形、絲狀、彈狀、磚形蝌蚪形等研究病毒大小和形態(tài)的方法：電子顯微鏡超濾膜法超速離心法病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成病毒結(jié)構(gòu)

基本結(jié)構(gòu)（核衣殼）輔助結(jié)構(gòu)核心衣殼（殼?！職ぃ┌ず诵闹缓环N核酸，DNA或RNA（分別稱DNA病毒和RNA病毒）控制病毒的增殖、變異、毒力等性狀除去病毒衣殼仍具有感染性的核酸稱感染性核酸

衣殼化學(xué)成分為蛋白質(zhì)構(gòu)型：螺旋對(duì)稱、20面體立體對(duì)稱、復(fù)合對(duì)稱具有保護(hù)核酸的作用具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答通過(guò)與宿主細(xì)胞表面受體結(jié)合參與感染包膜化學(xué)成分：類脂、多糖和蛋白質(zhì)類脂、多糖來(lái)自宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)由病毒基因編碼包膜蛋白形成刺突包膜蛋白的作用：具有抗原性參與病毒感染可引起機(jī)體發(fā)熱

病毒的增殖病毒的增殖周期吸附穿入脫殼生物合成組裝與釋放病毒的增殖周期吸附：特異性吸附穿入：通過(guò)胞飲、融合、轉(zhuǎn)位作用方式脫殼：生物合成：病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄復(fù)制子代病毒核酸轉(zhuǎn)譯子代病毒蛋白組裝與釋放芽生釋放、破胞釋放病毒增殖示意圖吸附宿主細(xì)胞穿入脫殼生物合成組裝釋放病毒的異常增殖和干擾現(xiàn)象病毒的異常增殖：頓挫感染、缺陷病毒病毒的干擾現(xiàn)象概念：兩種病毒同時(shí)或先后感染同一宿主細(xì)胞，可發(fā)生一種病毒干擾另一種病毒增殖的現(xiàn)象。干擾機(jī)理誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素、競(jìng)爭(zhēng)干擾干擾類型：同種干擾、異種干擾、自身干擾實(shí)際意義：指導(dǎo)疫苗的合理使用理化因素對(duì)病毒的影響溫度：病毒耐冷不耐熱，應(yīng)低溫保存病毒輻射：破壞病毒核酸結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致病毒滅活脂溶劑：有包膜病毒對(duì)脂溶劑敏感消毒劑：可滅活病毒抗生素：病毒對(duì)抗生素不敏感，抗生素治療病毒性疾病無(wú)效病毒的變異變異類型：毒力變異耐藥性變異抗原性變異溫度敏感性變異變異機(jī)制基因突變基因重組病毒的分類根據(jù)宿主不同分類動(dòng)物病毒、植物病毒、昆蟲病毒、細(xì)菌病毒根據(jù)核酸類型分類：

DNA病毒、RNA病毒根據(jù)有無(wú)包膜分類：有包膜病毒、無(wú)包膜病毒臨床分類呼吸道病毒、消化道病毒、肝炎病毒、蟲媒病毒、出血熱病毒、腫瘤病毒亞病毒類病毒：只有單股RNA，無(wú)蛋白質(zhì)衣殼主要引起植物疾病朊粒只含具有感染性的蛋白質(zhì)（分子量3.0×104

）與老年性癡呆、多發(fā)性硬化癥、腦組織海綿狀淀粉樣變（瘋牛?。┑扔嘘P(guān)病毒的感染與免疫病毒的感染方式水平傳播：通過(guò)黏膜表面：呼吸道、消化道、泌尿生殖道通過(guò)皮膚傳播：媒介昆蟲叮咬皮膚醫(yī)源性傳播：經(jīng)輸血、注射、拔牙、手術(shù)等垂直傳播：經(jīng)胎盤傳播經(jīng)產(chǎn)道傳播病毒感染的類型隱性感染：成為病毒攜帶者；獲得免疫顯性感染：急性感染持續(xù)性感染慢性感染潛伏感染：慢發(fā)感染病毒的致病機(jī)制一、病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用影響細(xì)胞的生命力殺細(xì)胞感染非殺細(xì)胞感染細(xì)胞融合形成包涵體：有些病毒感染的細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下可觀察到胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)圓形或卵圓形的斑塊狀結(jié)構(gòu)細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞凋亡二、病毒感染的免疫病理?yè)p傷體液免疫損傷通過(guò)Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)引起損傷細(xì)胞免疫損傷通過(guò)Tc細(xì)胞和Th1細(xì)胞殺傷病毒感染的細(xì)胞，同時(shí)造成組織細(xì)胞損傷病毒直接損傷淋巴細(xì)胞或淋巴器官艾滋病毒直接殺傷CD4T細(xì)胞抗病毒免疫干擾素干擾素概念：干擾素是個(gè)體出生后，由病毒或干擾素誘導(dǎo)劑刺激多種細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白。種類：

Ⅰ型干擾素：α干擾素、β干擾素

Ⅱ型干擾素：γ干擾素（免疫干擾素）干擾素的產(chǎn)生及干擾素的作用機(jī)制干擾素的生物學(xué)活性：抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤NK細(xì)胞非特異性殺傷不受MHC限制通過(guò)依賴抗體的殺傷作用（ADCC）不依賴抗體的殺傷作用（自然殺傷）干擾素可調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的殺傷作用特異性免疫體液免疫的保護(hù)作用中和抗體：阻止病毒吸附依賴抗體的細(xì)胞毒作用（ADCC）：殺傷病毒寄生的細(xì)胞細(xì)胞免疫的保護(hù)作用

TH1：釋放細(xì)胞因子效應(yīng)Tc（CTL）：特異性殺傷病毒寄生的細(xì)胞微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集與送檢：用于培養(yǎng)：注意時(shí)間、部位、處理、保存血清學(xué)診斷：雙份血清標(biāo)本檢查方法：顯微鏡觀察：電鏡、光鏡血清學(xué)：查病毒標(biāo)記物、檢測(cè)特異性抗體病毒基因檢測(cè)病毒的分離培養(yǎng)組織細(xì)胞培養(yǎng)：將組織或細(xì)胞模擬體內(nèi)的生理?xiàng)l件在試管或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，使其生存或生長(zhǎng)，稱組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)方法原代培養(yǎng)：如原代猴腎細(xì)胞等次代培養(yǎng)：二倍體細(xì)胞株：如人胚肺成纖維細(xì)胞傳代株W1-38傳代細(xì)胞系：多為腫瘤細(xì)胞或突變的二倍體細(xì)胞，如Hela細(xì)胞、Hep-2細(xì)胞等雞胚接種雞胚接種的優(yōu)點(diǎn)雞胚接種的缺點(diǎn)雞胚接種部位卵黃囊接種尿囊腔接種絨毛尿囊膜接種動(dòng)物接種病毒的鑒定－－初步鑒定動(dòng)物感染：根據(jù)病毒感染動(dòng)物的表現(xiàn)初步判斷雞胚接種：根據(jù)接種部位不同，收獲不同材料，進(jìn)行觀察細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞病變效應(yīng)紅細(xì)胞吸附干擾作用物理化學(xué)實(shí)驗(yàn)病毒的鑒定－－最后鑒定中和試驗(yàn)已知抗體＋待檢病毒－→細(xì)胞培養(yǎng)－→觀察有無(wú)細(xì)胞病變交叉保護(hù)試驗(yàn)病毒免疫動(dòng)物－→2周后，用標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物作攻擊試驗(yàn)不接種病毒的動(dòng)物－→2周后，用標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物作攻擊試驗(yàn)病毒的血清學(xué)診斷標(biāo)本采集：早期和恢復(fù)期雙份血清急性期單份血清IgM的測(cè)定雙份血清的IgG的測(cè)定常用方法

中和試驗(yàn)

補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

血凝抑制試驗(yàn)免疫熒光試驗(yàn)酶免試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)特異性預(yù)防人工主動(dòng)免疫滅活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗人工被動(dòng)免疫抗病毒免疫血清丙球藥物治療金剛烷胺：抑制病毒脫殼-----預(yù)防感冒

病毒蛋白酶的抑制物：indinavir核苷類藥物：皰疹凈，阿昔洛韋抗病毒藥物特異性抗體治療性疫苗免疫制劑其他：干擾素及干擾素誘生劑，中草藥抗病毒基因治療：asODN，asON，核酶補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)抗原-抗體

＋補(bǔ)體

＋綿羊紅細(xì)胞-溶血素溶血不溶血病毒與抗體對(duì)應(yīng)病毒與抗體不對(duì)應(yīng)血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)血凝試驗(yàn)：血凝素＋雞紅細(xì)胞－→紅細(xì)胞凝集血凝抑制試驗(yàn)：血凝素－抗體＋雞紅細(xì)胞－→紅細(xì)胞不凝集20面體立體對(duì)稱RNACapsomere(殼粒)螺旋對(duì)稱病毒的分離培養(yǎng)三大培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物接種雞胚接種細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。干擾素的產(chǎn)生及作用機(jī)制病毒結(jié)構(gòu)示意圖核心衣殼包膜無(wú)包膜病毒有包膜病毒吸附病毒釋放示意圖病毒形態(tài)病毒體結(jié)構(gòu)模式DNA病毒的合成親代DNA依賴DNA的RNA聚合酶mRNA

早期蛋白（DNA聚合酶）親代DNA子代DNA子代mRNA

晚期蛋白（衣殼蛋白）轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)譯復(fù)制轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)譯RNA病毒的合成單股正鏈RNA

（mRNA）

早期蛋白（RNA多聚酶）親代RNA子代RNA

晚期蛋白（衣殼蛋白）單股負(fù)鏈RNA

正鏈RNA（mRNA）

早期蛋白（RNA多聚酶）逆轉(zhuǎn)錄病毒的合成RNA逆轉(zhuǎn)錄酶互補(bǔ)DNARNA:DNA雙股DNA整合宿主細(xì)胞DNARNA腸道病毒屬小核糖核酸病毒科有72型人類腸道病毒：脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩奇病毒?？刹《拘滦湍c道病毒（甲型肝炎病毒為72型）腸道病毒共同特征球形，20面體立體對(duì)稱，無(wú)不包膜單股正鏈RNA細(xì)胞中增殖，引起細(xì)胞病變對(duì)脂溶劑敏感，耐酸經(jīng)糞口途徑傳播臨床表現(xiàn)多樣化腸道病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集:糞便、肛拭、咽拭、腦脊液檢驗(yàn)程序：病毒鑒定：中和試驗(yàn)分子生物學(xué)方法：檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中病毒基因組血清學(xué)試驗(yàn)：取雙份血清進(jìn)行中和試驗(yàn)檢測(cè)抗體脊髓灰質(zhì)炎病毒是引起脊髓灰質(zhì)炎（小兒麻痹癥）的病原體生物學(xué)形狀形態(tài)結(jié)構(gòu)：球形，無(wú)包膜，單股正鏈RNA，有四種核衣殼蛋白培養(yǎng)特性：采用細(xì)胞培養(yǎng)，引起典型的細(xì)胞病變分型：采用中和試驗(yàn)將Polio病毒分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，各型間無(wú)交叉反應(yīng)抵抗力：在外界環(huán)境中抵抗力較強(qiáng)，在酸性環(huán)境中較穩(wěn)定，對(duì)濕熱、紫外線較敏感致病性與免疫性傳染源：病人、帶毒者傳染途徑：糞口途徑致病機(jī)制：臨床特征

90％的感染為隱性感染

1％～2％為非麻痹性脊髓灰質(zhì)炎或無(wú)菌性腦膜炎僅約0.1%出現(xiàn)永久性弛緩性肢體麻痹極少數(shù)發(fā)展為延髓麻痹病后對(duì)同型Polio.v有牢固免疫力微生物學(xué)檢查糞便標(biāo)本細(xì)胞培養(yǎng)中和試驗(yàn)血清標(biāo)本中和試驗(yàn)病毒培養(yǎng)血清學(xué)診斷基因檢測(cè)核酸雜交技術(shù)聚合酶聯(lián)反應(yīng)（PCR）防治原則接種疫苗小兒麻痹糖丸（口服）滅活疫苗（注射）柯薩奇病毒和埃可病毒柯薩奇病毒分A、B兩組，共29個(gè)血清型?？刹《居?1個(gè)血清型消化道感染，很少引起腸道癥狀臨床表現(xiàn)多樣血清學(xué)檢查核核酸檢測(cè)有助于病原學(xué)診斷尚無(wú)疫苗進(jìn)行預(yù)防疾病柯薩奇病毒?？刹《緹o(wú)菌性腦膜炎＋＋麻痹疾?。捳钚匝蕧{炎＋－普通感冒＋＋流行性肌痛＋＋手足口病＋報(bào)道不一心包炎＋＋新生兒心肌炎＋＋不明原因發(fā)熱＋－皮疹＋＋嬰幼兒腹瀉－＋柯薩奇病毒與?？刹《舅录膊≥啝畈《緦佥啝畈《究魄蛐?；雙股RNA；雙層衣殼，，有放射狀突起，呈輪狀經(jīng)糞口途徑傳播，引起腹瀉以糞便為標(biāo)本，查糞便中的病毒顆?；虿《究乖呙缟性谘兄浦休啝畈《痉纸M及其致病性A組引起嬰幼兒腹瀉B組感染人----成人C組感染豬，偶爾也感染人D組感染鳥類E組感染豬輪狀病毒電鏡圖項(xiàng)目活疫苗死疫苗接種方法口服糖丸肌肉注射抗體產(chǎn)生血清抗體、分泌型抗體血清抗體細(xì)胞免疫有無(wú)間接免疫通過(guò)接種者糞便排毒無(wú)穩(wěn)定性差，不易保存易保存副作用極少數(shù)引起疫苗相關(guān)脊灰無(wú)免疫效果更好好減毒活疫苗與滅活疫苗的比較致病機(jī)制Polio病毒糞口途徑小腸粘膜、淋巴結(jié)入血

第一次病毒血癥

單核吞噬細(xì)胞

第二次病毒血癥

脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)原小兒麻痹癥脊髓灰質(zhì)炎病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)腸道桿菌是一大群生物學(xué)性狀相近的革蘭陰性桿菌。

與醫(yī)學(xué)關(guān)系密切的腸道桿菌正常菌群埃希菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬沙雷菌屬枸櫞酸菌屬致病菌致病性大腸埃希菌志賀菌屬沙門菌屬耶爾森菌屬腸道桿菌共同特性形態(tài)染色：均為革蘭陰性桿菌，無(wú)芽孢，有菌毛，多數(shù)有鞭毛，少數(shù)有莢膜培養(yǎng)特性：需氧、兼性厭氧；營(yíng)養(yǎng)要求不高；光滑型菌落；生化反應(yīng)：☆氧化酶－；觸酶＋；硝酸鹽還原試驗(yàn)＋發(fā)酵葡萄糖☆非致病菌多數(shù)分解乳糖，致病菌多數(shù)不分解乳糖抗原結(jié)構(gòu)☆O抗原：化學(xué)成分為脂多糖；耐熱；種屬特異性；與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)顆粒狀凝集；共同抗原可引起交叉反應(yīng)☆H抗原：化學(xué)成分為蛋白質(zhì)；不耐熱；與相應(yīng)抗體出現(xiàn)絮狀凝集☆表面抗原：化學(xué)成分為多糖；不耐熱；可阻斷O凝集遺傳變異：S-R變異、H-O變異臨床意義：☆致病物質(zhì)：菌毛、表面抗原、內(nèi)毒素、腸毒素☆傳染途徑：腸道傳染、腸道外傳染☆所致疾病：○腸道致病菌引起腸道傳染?。?xì)菌性痢疾、傷寒等）○條件致病菌：是醫(yī)院感染的主要病原常用培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基：

☆SS平板：含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠、硫代硫酸鈉等

☆Mac平板：含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽等

☆中國(guó)藍(lán)平板：含乳糖、中國(guó)藍(lán)和玫瑰紅酸指示劑、

☆EMB平板：含乳糖、伊紅和美藍(lán)指示劑選擇性平板的特點(diǎn)均含有乳糖和酸堿指示劑：細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基pH降低，指示劑呈酸性變色，指示劑不同，菌落呈現(xiàn)不同的顏色。分解乳糖的細(xì)菌呈有色菌落，不分解乳糖的細(xì)菌為無(wú)色菌落含有不同的抑制劑：對(duì)革蘭陽(yáng)性菌和非致病菌有不同程度的抑制作用，因此可以選擇性的培養(yǎng)腸道致病菌。選擇平板細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象雙糖鐵培養(yǎng)基（KIA）配方：含蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵、瓊脂、酚紅、乳糖1％、葡萄糖0.1％用途：主要用于觀察腸桿菌科細(xì)菌是否分解乳糖、葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、是否產(chǎn)生H2S。KIA結(jié)果觀察：發(fā)酵葡萄糖：底層呈酸性反應(yīng)（黃色），斜面為堿性反應(yīng)（紅色），若發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，底層同時(shí)有氣泡發(fā)酵葡萄糖和乳糖：底層和斜面均呈酸性反應(yīng)（黃色）產(chǎn)生H2S：培養(yǎng)基變黑1.未接種細(xì)菌3.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性（AA＋－）2.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性（AA－－）4.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性（KA－－）5.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陽(yáng)性（KA－＋）微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集腸道標(biāo)本：新鮮糞便腸外標(biāo)本：根據(jù)感染部位不同采集不同標(biāo)本檢驗(yàn)程序糞便腸道選擇培養(yǎng)基可疑菌落生化反應(yīng)血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告藥敏試驗(yàn)?zāi)c道標(biāo)本血平板、弱選擇平板鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/發(fā)酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢腸道桿菌的生化反應(yīng)鑒定與其他科細(xì)菌鑒別：苯丙氨酸（－）葡萄酸鹽（－）苯丙氨酸（＋）葡萄酸鹽（－）苯丙氨酸（－）葡萄酸鹽（＋）埃希菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬沙門菌屬普羅威登斯菌屬腸桿菌屬志賀菌屬摩根菌屬沙雷菌屬枸櫞酸菌屬哈夫尼亞菌屬愛(ài)德華菌屬耶爾森菌屬初步分群菌屬KIAMIU斜面底層氣體H2S動(dòng)力吲哚脲酶埃希菌屬A/KA＋/-－+/-+-志賀菌屬KA-－-+/--沙門菌屬KA+D/++--變形桿菌屬KA++/－+-/++克雷伯菌屬AA+－-d+腸道桿菌屬間鑒定微量生化反應(yīng)系統(tǒng)鑒定將細(xì)菌的多項(xiàng)生化反應(yīng)的2進(jìn)制數(shù)結(jié)果數(shù)，轉(zhuǎn)換成8進(jìn)制編碼而匯集成冊(cè)，叢編碼的檢索表中檢索而確定細(xì)菌菌名．－＋－－＋＋＋－－－＋＋＋－－010011100011100010

011

100

011

100000

0010

1001

2011

3100

4101

5110

6

111

713434蟲媒病毒

蟲媒病毒是一大群通過(guò)吸血節(jié)肢動(dòng)物，叮咬人、家畜及野生動(dòng)物而傳播疾病的病毒，具有自然疫源性。

共同點(diǎn)球形，RNA病毒，有包膜以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介所致疾病有季節(jié)性和地區(qū)性流行性乙型腦炎病毒是引起乙型腦炎的病原體生物學(xué)性狀形態(tài)結(jié)構(gòu)：球形，RNA病毒，有包膜培養(yǎng)特性：易感動(dòng)物為小白鼠；可做細(xì)胞培養(yǎng)只有一個(gè)血清型較少變異傳播途徑傳播媒介：三帶喙庫(kù)蚊傳染源已感染的家畜和家禽是乙腦病毒的主要傳染源（主要為幼豬）三帶喙庫(kù)蚊既是乙腦病毒的傳播媒介又是儲(chǔ)存宿主致病性與免疫性隱性感染普遍致病機(jī)制免疫性：病后免疫力牢固主要依靠中和抗體乙腦病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本：患者血液、腦脊液、尸檢腦組織動(dòng)物接種：乳鼠腦內(nèi)接種－－發(fā)病細(xì)胞培養(yǎng)：原代地鼠腎細(xì)胞、雞胚細(xì)胞－－紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)抗原抗體檢測(cè)：采用免疫標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中抗原采用雙份血清檢測(cè)特異性抗體防治原則接種乙腦疫苗防蚊滅蚊登革病毒是引起登革熱的病原體生物學(xué)特性球形單股正鏈RNA，有包膜流行病學(xué)特征儲(chǔ)存宿主：人和猴傳染源：患者和隱性感染者傳播媒介：

伊蚊流行于熱帶、亞熱帶地區(qū)，特別是東南亞、西太平洋及中南美洲引起登革熱表現(xiàn):普通登革熱、登革休克綜合癥發(fā)病機(jī)制帶毒伊蚊叮咬網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)增殖病毒血癥普通型出血/休克型登革熱病人皮下出血漢坦病毒（HFRSV）又稱腎綜合征出血熱病毒是腎綜合征出血熱的病原體引起由鼠類傳播的自然疫源性疾病生物學(xué)性狀球形，單股RNA有包膜易感動(dòng)物為鼠類對(duì)脂溶劑敏感，對(duì)酸、熱抵抗力弱流行病學(xué)特征有明顯的地區(qū)性和季節(jié)性鼠類是主要的傳播媒介人通過(guò)呼吸道、消化道、傷口接觸帶毒動(dòng)物的分泌物被感染致病性與免疫性潛伏期一般為兩周左右，起病急，發(fā)展快典型病例具有三大主癥，即發(fā)熱、出血和腎臟損害病程分為發(fā)熱期、低血壓休克期、少尿期、多尿期和恢復(fù)期病后免疫力牢固微生物學(xué)檢查病毒分離血清學(xué)診斷檢測(cè)特異性lgM抗體檢測(cè)特異性lgG抗體注意防護(hù)皰疹病毒雙股DNA，有包膜在細(xì)胞內(nèi)形成包函體感染類型增殖性感染潛伏感染整合感染先天性感染單純皰疹病毒（HSV）致病性與免疫性傳染源：病人和健康帶毒者感染方式：

HSV-1：通過(guò)口腔或污染的手及飛沫傳播

HSV-2：性接觸傳播隱性感染多見(jiàn)感染類型原發(fā)感染：齒齦炎、皰疹性角膜結(jié)膜炎等潛伏感染：

HSV-1：潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)－－唇皰疹

HSV-2：潛伏于骶神經(jīng)節(jié)先天性感染：流產(chǎn)、胎兒畸形、新生兒皰疹防治原則尚無(wú)特異性預(yù)防方法注射丙種球蛋白進(jìn)行緊急預(yù)防藥物治療原發(fā)感染（唇皰疹）先天感染EB病毒（EBV）主要侵犯B細(xì)胞是引起傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體致病性傳染源：病人、隱性感染者傳播方式：主要經(jīng)唾液傳播，也可經(jīng)血液傳播隱性感染多見(jiàn)EB病毒在口咽部上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，繼而感染B淋巴細(xì)胞，感染的B細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)可造成全身性感染；病毒可以非增殖狀態(tài)長(zhǎng)期潛伏于B細(xì)胞所致疾病傳染性單核細(xì)胞增多癥鼻咽癌非洲兒童惡性淋巴瘤本章內(nèi)容結(jié)束帶毒蚊蟲叮咬毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及淋巴節(jié)內(nèi)增殖少量入血

肝、脾單核巨噬細(xì)胞內(nèi)增殖二次病毒血癥突破血腦屏障中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛病變

（乙型腦炎）頓挫感染乙腦病毒

電鏡圖微生物學(xué)檢查檢測(cè)EBV抗體檢測(cè)異嗜性抗體檢測(cè)EBV基因組及其表達(dá)產(chǎn)物水痘帶狀皰疹病毒（VZV）只有一個(gè)血清型人是VZV的唯一自然宿主皮膚是病毒的主要靶細(xì)胞可由同一種病毒引起兩種不同的病癥兒童初次感染引起水痘潛伏體內(nèi)的病毒受到某些刺激后復(fù)發(fā)引起帶狀皰疹，多見(jiàn)于成年人和老年人水痘病毒

呼吸道等途徑局部淋巴結(jié)增殖血液丘疹、水皰疹、膿皰疹皮膚帶狀皰疹兒童時(shí)期水痘痊愈潛伏在脊髓后根神經(jīng)節(jié)免疫力下降病毒沿感覺(jué)神經(jīng)蔓延在皮膚細(xì)胞內(nèi)增殖形似帶狀的水皰疹防治原則接種VZV減毒活疫苗藥物治療巨細(xì)胞病毒（CMV）CMV感染普遍多為隱性感染可長(zhǎng)期帶毒形成潛伏感染潛伏部位：唾液腺、乳腺、腎等傳播途徑：接觸感染、先天感染、血源性感染、性感染等感染類型先天感染新生兒感染免疫力低下的病人易感染輸血感染細(xì)胞轉(zhuǎn)化防治原則疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因疫苗藥物治療非發(fā)酵菌是一大群不發(fā)酵葡萄糖或以氧化形式利用糖、需氧或兼性厭氧、無(wú)芽孢的革蘭陰性桿菌

非發(fā)酵菌主要種類銅綠假單胞菌不動(dòng)桿菌屬產(chǎn)堿桿菌屬莫拉菌屬黃桿菌屬金氏桿菌屬土壤桿菌屬等非發(fā)酵菌主要特點(diǎn)氧化酶：＋；不動(dòng)桿菌屬除外O/F試驗(yàn)：O/－動(dòng)力試驗(yàn)：多數(shù)有鞭毛，但半固體動(dòng)力試驗(yàn)不明顯，常采用鏡檢或鞭毛染色葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O/F）O/F培養(yǎng)基（半固體高層）指示劑：溴麝香草酚藍(lán)培養(yǎng)基pH：7.0O/F：OO/F：F葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O/F）O/F：OO/F：FO/F：－腸道桿菌、非發(fā)酵菌、弧菌科鑒別鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/發(fā)酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢假單胞菌屬假單胞菌科細(xì)菌根據(jù)rRNA-DNA同源性分為5群，其中Ⅰ群屬于假單胞菌屬，共7種細(xì)菌，代表菌種為銅綠假單胞菌。多為條件致病菌，是醫(yī)院感染的主要病原菌假單胞菌屬共同點(diǎn)革蘭陰性桿菌，無(wú)芽孢、無(wú)莢膜，單或叢鞭毛專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求不高氧化酶：＋O/F：OMac生長(zhǎng)：＋產(chǎn)生水溶性色素銅綠假單胞菌－－形態(tài)染色革蘭陰性桿菌，無(wú)芽孢、無(wú)莢膜，單或叢鞭毛銅綠假單胞菌－－培養(yǎng)特性專性需氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高最適溫度35℃，42℃生長(zhǎng)，4℃不生長(zhǎng)產(chǎn)生熒光素和藍(lán)綠色水溶性的綠膿素，培養(yǎng)物呈藍(lán)綠色。培養(yǎng)物有生姜?dú)馕躲~綠假單胞菌－－菌落特征典型菌落：扁平濕潤(rùn)，邊緣不規(guī)則，菌落和培養(yǎng)基灰綠色，表面有金屬光澤大腸菌樣菌落：菌落圓形凸起，似大腸桿菌黏液型菌落：菌落凸起，呈粘液狀侏儒型菌落：細(xì)小，無(wú)光澤在血平板上形成透明溶血環(huán)在SS、Mac上形成不發(fā)酵乳糖菌落銅綠假單胞菌－－生化反應(yīng)氧化酶＋O/F：O枸櫞酸鹽利用＋精氨酸雙水解＋乙酰胺酶＋明膠液化＋銅綠假單胞菌－－抗原結(jié)構(gòu)和抵抗力抗原結(jié)構(gòu)O抗原：包括外膜蛋白和脂多糖H抗原S抗原抵抗力：對(duì)外界環(huán)境抵抗力強(qiáng)對(duì)多種抗生素不敏感銅綠假單胞菌－－臨床意義致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、胞外酶、菌毛、莢膜所致疾病條件致病菌醫(yī)院感染的重要病原菌大面積燒傷創(chuàng)面感染的重要病原菌銅綠假單胞菌－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板）最后鑒定可疑菌落（性狀、色素）初步鑒定涂片染色鏡檢血標(biāo)本涂片鏡檢氧化酶菌落特征綠膿素氣味色素鑒定生化反應(yīng)42℃生長(zhǎng)分型O/F：O枸櫞酸鹽利用＋精氨酸雙水解＋乙酰胺酶＋明膠液化＋銅綠假單胞菌－－檢驗(yàn)方法顯微鏡檢查：標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡檢；鞭毛染色鏡檢培養(yǎng)：標(biāo)本接種血平板、Mac平板分離培養(yǎng)，血標(biāo)本先增菌，再轉(zhuǎn)種鑒定：初步鑒定：菌落特征、水溶性綠色色素、生姜?dú)馕?、氧化酶、O/F全面鑒定：色素不典型者需全面鑒定銅綠假單胞菌－－分型檢查血清學(xué)分型噬菌體分型質(zhì)粒指紋圖譜分析脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型檢查意義：對(duì)醫(yī)院感染的流行病學(xué)調(diào)查有重要意義熒光假單胞菌革蘭陰性桿菌，單端叢鞭毛專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通平板、Mac平板可生長(zhǎng)最適生長(zhǎng)溫度25～30℃，4℃生長(zhǎng)，35℃、42℃不生長(zhǎng)產(chǎn)生水溶性熒光素（青膿素），不產(chǎn)綠膿素氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶＋；明膠液化＋具有嗜冷性，可在冰箱儲(chǔ)存血中繁殖惡臭假單胞菌革蘭陰性桿菌，單端叢鞭毛專性需氧最適生長(zhǎng)溫度25～30℃，4℃生長(zhǎng)，35℃、42℃不生長(zhǎng)產(chǎn)生水溶性熒光素（青膿素），不產(chǎn)綠膿素；陳舊培養(yǎng)物有腥臭味氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶－；明膠液化－斯氏假單胞菌革蘭陰性桿菌，單端叢鞭毛或側(cè)生鞭毛最適溫度35℃，42℃生長(zhǎng)，4℃不生長(zhǎng)菌落特征：干燥、粗糙、皺縮，可產(chǎn)生黃色色素，無(wú)綠膿素和熒光素產(chǎn)堿桿菌屬糞產(chǎn)堿桿菌木糖氧化產(chǎn)堿桿菌木糖氧化產(chǎn)堿桿菌氧化亞種木糖氧化產(chǎn)堿桿菌脫硝亞種產(chǎn)堿桿菌屬－－主要特征革蘭陰性桿菌、有周鞭毛、無(wú)芽孢、無(wú)莢膜專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通平板和Mac平板上可生長(zhǎng)氧化酶＋、O/F：K、不分解任何糖是醫(yī)院感染病原菌之一，糞產(chǎn)桿菌多見(jiàn)檢驗(yàn)程序產(chǎn)堿桿菌屬－－鑒定要點(diǎn)革蘭陰性桿菌氧化酶＋O/F：－硝酸鹽還原－；亞硝酸鹽還原＋KIA：底層斜面不變色注意與不動(dòng)桿菌鑒別不動(dòng)桿菌屬－－主要特征現(xiàn)已命名6個(gè)生物種，代表菌為醋酸鈣不動(dòng)桿菌革蘭陰性球桿菌，成雙排列，無(wú)鞭毛，動(dòng)力陰性專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通平板、Mac平板上可生長(zhǎng)氧化酶－；O/F：O／－；硝酸鹽還原－臨床標(biāo)本分離率僅次于銅綠假單胞菌檢驗(yàn)程序不動(dòng)桿菌屬－－鑒定要點(diǎn)革蘭陰性球桿菌無(wú)動(dòng)力氧化酶－硝酸鹽還原－KIA：底層斜面不變色注意與形態(tài)相似的奈瑟菌鑒別注意與不分解糖的產(chǎn)堿桿菌鑒別嗜麥芽窄食黃單胞菌革蘭陰性桿菌，叢鞭毛專性需氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通平板生長(zhǎng)良好，麥康凱平板可生長(zhǎng)氧化酶－葡萄糖O/F：－麥芽糖O/F：＋賴氨酸脫羧＋明膠液化＋黃桿菌科革蘭陰性桿菌，無(wú)鞭毛專性需氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通平板上生長(zhǎng)，形成黃色色素麥康凱平板上不生長(zhǎng)氧化酶＋O/F：O莫拉菌屬革蘭陰性球桿菌，不易脫色，成雙排列（與奈瑟菌相似），無(wú)鞭毛，部分菌株有莢膜專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求高，普通平板上不生長(zhǎng)氧化酶＋O/F：－非發(fā)酵菌－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、麥康凱）可疑菌落涂片染色鏡檢血標(biāo)本涂片動(dòng)力觀察革蘭染色鞭毛染色氧化酶O/F硝酸鹽還原KIA斜面底層不變色其他生化反應(yīng)測(cè)驗(yàn)1關(guān)于銅綠假單胞菌，錯(cuò)誤的是

A

革蘭陰性桿菌

B

氧化酶－、觸酶－

C

硝酸鹽還原－

D

產(chǎn)生水溶性藍(lán)綠色素

E

菌落有金屬光澤測(cè)驗(yàn)2下列哪項(xiàng)是非發(fā)酵菌的主要特征

A需氧或兼性厭氧

B

革蘭陰性桿菌

C

營(yíng)養(yǎng)要求不高

D

無(wú)芽孢

E

不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用糖測(cè)驗(yàn)3對(duì)革蘭陰性桿菌出現(xiàn)下列哪種特征，可懷疑為非發(fā)酵菌

A氧化酶＋

B

發(fā)酵葡萄糖

C

動(dòng)力陰性

D

觸酶＋

E

氧化利用麥芽糖測(cè)驗(yàn)4假單胞菌屬中營(yíng)養(yǎng)要求不高，新分離菌株在培養(yǎng)基上形成特征性干燥、皺縮樣菌落，并黏附于平板表面難以移動(dòng)，可產(chǎn)生黃色色素的細(xì)菌可能是

A銅綠假單胞菌

B

斯氏假單胞菌

C

產(chǎn)堿假單胞菌

D

熒光假單胞菌

E

惡臭假單胞菌測(cè)驗(yàn)5關(guān)于不動(dòng)桿菌錯(cuò)誤的是

A氧化酶＋

B

硝酸鹽還原—

C

革蘭陰性桿菌，形態(tài)多為球桿狀

D

無(wú)動(dòng)力

E

專性需氧分枝桿菌屬

分枝桿菌屬主要特點(diǎn)是一類直或微彎曲、有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)的桿菌。細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，主要為分枝菌酸。具有抗酸性，革蘭染色不易著色，常用抗酸染色。專性需氧營(yíng)養(yǎng)要求特殊，大多數(shù)生長(zhǎng)緩慢。不產(chǎn)內(nèi)、外毒素和侵襲性酶等致病物質(zhì)，所致疾病呈慢性。分枝桿菌屬種類結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群結(jié)核分枝桿菌牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌田鼠分枝桿菌非典型分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌光產(chǎn)色分枝桿菌暗產(chǎn)色分枝桿菌不產(chǎn)色分枝桿菌迅速生長(zhǎng)分枝桿菌分枝桿菌屬結(jié)核分枝桿菌－－形態(tài)染色細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，部分菌株有莢膜革蘭染色陽(yáng)性，不易著色抗酸染色陽(yáng)性結(jié)核分枝桿菌－－培養(yǎng)特性生長(zhǎng)條件：專性需氧、細(xì)胞內(nèi)寄生菌、最適pH6.5～6.8、營(yíng)養(yǎng)要求高、培養(yǎng)基含雞蛋、馬鈴薯粉、甘油、孔雀綠等生長(zhǎng)現(xiàn)象：※生長(zhǎng)緩慢※改良羅氏培養(yǎng)基菌落特征：干燥、淡黃色、質(zhì)地較硬的R型菌落※液體培養(yǎng)基：形成菌膜，有毒株呈索狀生長(zhǎng)結(jié)核分枝桿菌－－生化反應(yīng)生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類與非結(jié)核分枝桿菌鑒別：

耐熱觸酶試驗(yàn)－；（非結(jié)核分枝桿菌＋）與牛分枝桿菌鑒別煙酸試驗(yàn)＋；（牛分枝桿菌－）結(jié)核分枝桿菌－－抵抗力與變異性抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏”※耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1：13000）※對(duì)濕熱、70％乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性）變異性

※典型形態(tài)－→多形性※R型菌落－→S型菌落※有毒－→無(wú)毒（用于制備疫苗）※抗結(jié)核藥敏感－→耐藥結(jié)核分枝桿菌－－致病物質(zhì)脂質(zhì)索狀因子:與該菌毒力有密切關(guān)系磷脂:分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)蠟質(zhì)D:具有佐劑作用硫酸腦苷脂蛋白質(zhì)糖類結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，不產(chǎn)生侵襲性酶結(jié)核分枝桿菌－－所致疾病與免疫性經(jīng)多途徑感染，引起結(jié)核病，以肺結(jié)核多見(jiàn)類型：原發(fā)感染和繼發(fā)感染免疫性※抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主※抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫※抗結(jié)核免疫與Ⅳ型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌－－結(jié)核菌素試驗(yàn)原理：用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)的試驗(yàn)。結(jié)果：根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果＜5mm為陰性≥＞5mm為陽(yáng)性＞15mm為強(qiáng)陽(yáng)性應(yīng)用：選擇卡介苗接種對(duì)象；判斷卡介苗接種效果；輔助診斷嬰幼兒結(jié)核病；測(cè)定腫瘤患者細(xì)胞免疫狀態(tài)結(jié)核分枝桿菌－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本核酸檢測(cè)接種固體培養(yǎng)基可疑菌落涂片抗酸染色鏡檢抗體檢測(cè)慢性生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌菌種鑒定標(biāo)本前處理接種液體培養(yǎng)基接種小白鼠豚鼠臟器涂片鏡檢抗酸染色鑒定試驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌－－涂片檢查直接涂片薄涂片厚涂片集菌涂片沉淀集菌法漂浮集菌法熒光顯微鏡檢查法：金剛胺O染色→熒光顯微鏡下檢查抗酸染色－－報(bào)告方式報(bào)告方式鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌±300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~2條抗酸菌＋100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌2＋10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌3＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌4＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌結(jié)核分枝桿菌－－分離培養(yǎng)標(biāo)本前處理：※目的：殺死雜菌；液化標(biāo)本※方法：4％NaOH法；4％H2SO2法；胰酶-新潔爾滅法等培養(yǎng)基選擇：羅氏培養(yǎng)基、米氏培養(yǎng)基、小川培養(yǎng)基等接種培養(yǎng)培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法報(bào)告方式培養(yǎng)結(jié)果＋斜面20個(gè)菌落以上，占斜面1/4以下2＋斜面上菌落生長(zhǎng)面積占1/4以上，1/2以下3＋斜面上菌落面積占斜面1/2以上，3/4以下4＋斜面上菌落生長(zhǎng)密集，成菌苔非典型分枝桿菌是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。大多為環(huán)境中的腐生菌對(duì)酸堿比較敏感對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù)合分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌－－生物學(xué)性狀為抗酸桿菌細(xì)胞內(nèi)寄生有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱為麻風(fēng)細(xì)胞體外人工培養(yǎng)尚未成功犰狳是動(dòng)物感染模型麻風(fēng)分枝桿菌－－臨床意義與微檢經(jīng)呼吸道、接觸感染引起麻風(fēng)病瘤型麻風(fēng)（開(kāi)放型）：傳染性強(qiáng)結(jié)核樣型（閉鎖性）：傳染性弱微檢：標(biāo)本涂片抗酸染色是診斷麻風(fēng)的主要依據(jù)麻風(fēng)桿菌犰狳抗酸染色染液組成：石炭酸復(fù)紅、3％鹽酸酒精、美蘭染色步驟

※石炭酸加溫染5分鐘，水洗

※3％鹽酸酒精脫色致無(wú)紅色脫下為止，水洗

※美藍(lán)染1分鐘，水洗，干后鏡檢染色結(jié)果

※抗酸菌：紅色

※非抗酸菌：藍(lán)色染色意義：區(qū)別抗酸菌與非抗酸菌結(jié)核分枝桿菌菌落結(jié)核分枝桿菌（抗酸染色）麻風(fēng)病人肝炎病毒

是引起病毒性肝炎的病原體

已知的肝炎病毒：甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型肝炎病毒甲型肝炎病毒是引起甲型肝炎的病原體生物學(xué)形狀屬腸道病毒72型形態(tài)：呈球形結(jié)構(gòu)：直徑27~32nm,單股正鏈RNA，無(wú)包膜動(dòng)物模型：黑猩猩對(duì)HAV易感細(xì)胞培養(yǎng)：原代獼猴肝細(xì)胞、猴胚腎細(xì)胞，一般不產(chǎn)生細(xì)胞病變抗原型別單一抵抗力：抵抗力強(qiáng)，對(duì)乙醚、酸、熱等較穩(wěn)定致病性與免疫性傳染源：病人傳染方式：糞口途徑致病機(jī)制：在肝細(xì)胞內(nèi)增殖，不直接造成肝細(xì)胞損傷，免疫病理作用導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷免疫性：刺激機(jī)體產(chǎn)生抗HAVIgG和IgM

抗HAVIgG對(duì)再感染具有免疫力微生物學(xué)檢查免疫電鏡檢測(cè)病毒顆粒免疫學(xué)方法檢測(cè)病毒抗原檢測(cè)抗HAVIgM是確診甲型肝炎的依據(jù)方法：ELISA法和放射免疫測(cè)定PCR法：檢測(cè)病毒核酸檢測(cè)抗HAVIgG主要用于流行病學(xué)調(diào)查防治原則特異性預(yù)防：接種甲型肝炎病毒減毒活疫苗緊急預(yù)防：肌肉注射丙種球蛋白一般性預(yù)防：加強(qiáng)飲水和食品的衛(wèi)生監(jiān)督管理乙型肝炎病毒是引起乙型肝炎的病原體乙型肝炎易發(fā)展為慢性乙肝乙肝病毒在世界范圍內(nèi)傳播乙肝病毒攜帶者達(dá)10％以上生物學(xué)形狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)大球形顆粒:又稱Dane顆粒，是完整的HBV小球形顆粒:是病毒組裝后過(guò)剩的衣殼蛋白管形顆粒：由小球形顆粒串連而成

乙肝病毒的基因短鏈：為正鏈，長(zhǎng)度是長(zhǎng)鏈的50％～100％長(zhǎng)鏈：為負(fù)鏈，含HBV全部遺傳信息

S區(qū)：編碼HBsAg和前S1抗原和前S2抗原

C區(qū)：編碼HBcAg和HBeAgP區(qū)：編碼DNA多聚酶

X區(qū)：編碼HBxAg(可能與肝癌發(fā)生有關(guān))乙肝病毒的復(fù)制方式吸附、穿入肝細(xì)胞脫殼轉(zhuǎn)譯外衣殼蛋白轉(zhuǎn)譯內(nèi)衣殼蛋白前基因組復(fù)制子代核酸組裝釋放HBV的抗原組成

HBsAg:以三種不同形式存在于患者血清中HBsAg亞型的分布有明顯地區(qū)差異,并與種族有關(guān)血清HBsAg是感染HBV的重要標(biāo)志HBsAg刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗-HBs是中和抗體,對(duì)機(jī)體有保護(hù)作用關(guān)于前S1和前S2抗原

HBcAg存在于Dane顆粒中不易在血液中檢出可在感染的肝細(xì)胞表面存在刺激機(jī)體產(chǎn)生抗-HBc（IgG、IgM）血清抗-HBcIgM的檢出，表明病毒在肝細(xì)胞中復(fù)制

HBeAg存在于Dane顆粒中游離存在于血液中是病毒復(fù)制及強(qiáng)傳染性的指標(biāo)產(chǎn)生抗－HBe，是預(yù)后良好的征象突變株可不產(chǎn)生HBeAgHBV其他生物學(xué)性狀培養(yǎng):

◆黑猩猩是HBV最敏感的動(dòng)物模型

◆細(xì)胞培養(yǎng)已獲成功抵抗力:強(qiáng)

◆能耐受低溫、紫外線、干燥和一般消毒劑100℃10分鐘、高壓蒸汽滅菌、0.5％過(guò)氧乙酸等能使HBV滅活傳染源與傳播途徑傳染源：乙肝病人、無(wú)癥狀病毒攜帶者傳播途徑：血液、血制品等途徑傳播母嬰垂直傳播臨床表現(xiàn)：無(wú)癥狀攜帶者急性乙肝慢性乙肝暴發(fā)性肝炎肝外表現(xiàn)：發(fā)熱、皮疹、血管炎等致病機(jī)制細(xì)胞免疫介導(dǎo)的免疫損傷免疫復(fù)合物性的免疫損傷：肝外損傷自身免疫反應(yīng)的免疫損傷病毒變異：逃逸免疫免疫性抗-HBs：一般于感染后4～5月陽(yáng)轉(zhuǎn)，持續(xù)6個(gè)月或數(shù)年，是保護(hù)性抗體抗-HBc：一般于感染后3～5周陽(yáng)轉(zhuǎn)，無(wú)保護(hù)作用，IgM可作為急性一干的診斷指標(biāo)，IgG是HBV既往感染的指標(biāo)抗-HBe：一般在HBeAg消失時(shí)出現(xiàn)，是病情開(kāi)始恢復(fù)的征兆HBV誘導(dǎo)免疫應(yīng)答對(duì)機(jī)體的雙重作用免疫保護(hù)作用抗－HBS和抗前S對(duì)病毒的中和作用

CTL對(duì)細(xì)胞內(nèi)病毒的清除作用免疫損傷作用肝細(xì)胞損傷肝外損傷機(jī)體免疫狀態(tài)與HBV感染的轉(zhuǎn)歸免疫功能正常－－隱性感染或急性乙肝，病毒被清除免疫低下－－慢性乙肝免疫過(guò)強(qiáng)－－暴發(fā)性肝炎免疫耐受－－HBV無(wú)癥狀攜帶HBV與原發(fā)性肝癌流行病學(xué)方面動(dòng)物模型病毒分子結(jié)構(gòu)微生物學(xué)檢查HBV抗原抗體系統(tǒng)的檢測(cè)HBV五項(xiàng)指標(biāo)

HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe

抗HBcHBV抗原抗體檢測(cè)的應(yīng)用乙型肝炎的診斷判斷傳染性判斷預(yù)后篩選獻(xiàn)血員檢測(cè)疫苗接種效果流行病學(xué)調(diào)查HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc結(jié)果分析HBV抗原抗體檢測(cè)結(jié)果的臨床分析＋－－－－HBV感染或無(wú)癥狀攜帶＋＋－－－急慢性乙肝或無(wú)癥狀攜帶＋＋－－＋急慢性乙肝（大三陽(yáng)）＋－－＋＋趨于恢復(fù)（小三陽(yáng)）－－＋＋＋－－＋＋－既往感染恢復(fù)期－－－－＋－－＋－－既往感染或接種過(guò)疫苗防治原則控制傳染源，切斷傳播途徑人工自動(dòng)免疫：疫苗（血源性、基因工程)人工被動(dòng)免疫：高效價(jià)人血清球蛋白（HBIg）丙型肝炎病毒（HCV）球形，有包膜，屬RNA病毒傳染源：病人、病毒攜帶者傳播途徑：輸血、注射、性接觸等引起丙型肝炎比乙型肝炎更易轉(zhuǎn)為慢性病后免疫力不牢固ELISA法檢測(cè)抗HCV抗體丁型肝炎病毒（HDV）屬缺陷病毒，由HBsAg構(gòu)成其外殼經(jīng)輸血等途徑傳播只感染HBsAg陽(yáng)性的人與HBV協(xié)同或同時(shí)感染戊型肝炎病毒（HEV）球形，無(wú)包膜，屬RNA病毒傳染源：病人傳播途徑：糞口途徑病情較重，孕婦感染死亡率高乙肝病毒感染經(jīng)過(guò)與免疫反應(yīng)關(guān)系（隱性感染）HBsAg抗HBs抗HBc(IgG)抗HBeHBeAg03月5月8月1年5年乙肝病毒感染經(jīng)過(guò)與免疫反應(yīng)關(guān)系（慢性持續(xù)性肝炎）HBsAg抗HBc(IgG)抗HBe03月1年10年20年30年HBeAgHBV基因結(jié)構(gòu)環(huán)狀雙股不完全閉合的DNA長(zhǎng)鏈有4個(gè)開(kāi)放讀碼框架，分別為：S區(qū)C區(qū)P區(qū)X區(qū)長(zhǎng)鏈短鏈DNA聚合酶乙肝病毒的復(fù)制乙肝病毒的三種顆粒Dane顆粒核心：雙股不完全閉合的DNA

和DNA聚合酶內(nèi)衣殼：20面立體對(duì)稱外衣殼：相當(dāng)于病毒的包膜Dane結(jié)構(gòu)HBV感染的分布甲型肝炎病程HAV體內(nèi)過(guò)程HAV電鏡圖HAV病毒結(jié)構(gòu)呼吸道病毒

種類正粘病毒：流感病毒副粘病毒：麻疹病毒腮腺炎病毒風(fēng)疹病毒呼吸道合胞病毒流行性感冒病毒屬正粘病毒科是引起流行性感冒的病原體分甲、乙、丙三型甲型流感病毒常引起流感的大流行生物學(xué)特性形態(tài)結(jié)構(gòu)：球形；屬RNA病毒；有包膜結(jié)構(gòu)核心：RNA（分階段）、核蛋白、

RNA聚合酶基質(zhì)蛋白（M蛋白）：具有型的特異性包膜血凝素（HA）神經(jīng)氨酸酶(NA)血凝素與神經(jīng)氨酸酶是流感病毒的表面抗原是流感病毒分亞型的依據(jù)抗原性極不穩(wěn)定，常發(fā)生變異流感病毒分型與變異分型根據(jù)核蛋白和M蛋白抗原的不同，流感病毒分甲、乙、丙三型。根據(jù)HA、NA抗原不同分若干亞型變異：甲型流感病毒的HANA極易變異

抗原性漂移：變異幅度小，常造成流感中小流行抗原性轉(zhuǎn)變：變異幅度大，常引起流感大流行流行年代亞型類別1947H1N1（亞甲型）1957H2N2（亞洲甲型）1968H3N2（香港甲型）1977H1NI、H3N2甲型流感病毒亞型類別、流行年代培養(yǎng)特性雞胚培養(yǎng)：不引起雞胚出現(xiàn)病變，取羊水或尿囊液做血凝試驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)：紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)抵抗力：較弱，不耐熱，對(duì)干燥、乙醚、甲醛和乳酸等敏感。致病性傳染源：病人傳播途徑：呼吸道致病機(jī)制流感病毒呼吸道毒性物質(zhì)進(jìn)入血流呼吸道炎癥全身中毒癥狀免疫性病后對(duì)同型流感病毒產(chǎn)生免疫力抗HA、抗NA抗體為中和抗體微生物學(xué)檢查病毒分離：

標(biāo)本：取患者咽漱液或鼻咽拭

分離方法：雞胚接種：尿囊腔接種－－收獲尿囊液－－血凝試驗(yàn)－－血凝抑制試驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)微生物學(xué)檢查血清學(xué)診斷血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶免疫測(cè)定抗原檢測(cè)直接從病人呼吸道分泌物、脫落細(xì)胞中檢測(cè)抗原分型鑒定核酸雜交、PCR、序列分析防治原則一般性預(yù)防：空氣消毒特異性預(yù)防:接種疫苗滅活三價(jià)疫苗亞單位疫苗減毒活疫苗禽流感病毒禽流感病毒是流感病毒屬的一個(gè)成員禽流感病毒具有A型抗原,屬于A型流感毒,列為禽流感病毒類。本病毒顆粒呈球形、桿狀或長(zhǎng)絲狀,為多形性。其直徑為80一120nm。具有血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸（NA）歷史上高致病性的禽流感都是由H5和H7引起的禽流感病毒致病性禽流感在家禽中以雞和火雞及某些野禽的易感性最高一般認(rèn)為帶毒的候鳥使禽流感病毒成世界性傳播人可通過(guò)與病禽接觸而感染麻疹病毒屬副粘病毒科球形病毒，單股RNA，有包膜只有一個(gè)血清型在細(xì)胞中形成嗜酸性包涵體經(jīng)呼吸道傳播，引起麻疹嚴(yán)重的并發(fā)癥－－肺炎、亞急性硬化性全腦炎病后免疫力牢固接種麻疹疫苗進(jìn)行特異性預(yù)防（8個(gè)月、7歲）丙種球蛋白可進(jìn)行緊急預(yù)防

麻疹臨床表現(xiàn)發(fā)熱

畏光、流淚

口腔粘膜出現(xiàn)柯氏斑

皮膚出現(xiàn)紅色斑丘疹

冠狀病毒屬冠狀病毒科包括人冠狀病毒、禽傳染性支氣管炎病毒、鼠肝炎病毒嚴(yán)重急性呼吸衰竭綜合癥（SARS）是新冠狀病毒引起的急性呼吸道傳染病生物學(xué)特性形態(tài)結(jié)構(gòu)：多形性，單股正鏈RNA,有包膜，病毒外形呈日冕狀抵抗力：較弱，對(duì)濕熱、脂溶劑、消毒劑敏感SARS病毒致病性腮腺炎病毒屬副粘病毒科球形，有包膜，單股正鏈RNA只有一個(gè)血清型經(jīng)呼吸道飛沫傳播，引起腮腺炎可引起睪丸炎、卵巢炎、腦膜炎等并發(fā)癥病后免疫力牢固接種腮腺炎減毒活疫苗進(jìn)行特異性預(yù)防風(fēng)疹病毒屬披膜病毒科球形，單股正鏈RNA，有包膜只有一個(gè)血清型經(jīng)呼吸道傳播，引起風(fēng)疹成人：出疹、關(guān)節(jié)疼痛等兒童：發(fā)熱、出疹、耳后淋巴結(jié)腫大經(jīng)胎盤傳播，引起先天性風(fēng)疹綜合癥接種風(fēng)疹減毒活疫苗進(jìn)行特異性預(yù)防NAHA包膜M2M1基質(zhì)蛋白41235678核心RNA核蛋白R(shí)NA聚合酶流感病毒電鏡圖

弧菌科常規(guī)檢驗(yàn)

弧菌科種類弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬發(fā)光菌屬等弧菌科共同特征革蘭陰性菌需氧兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高氧化酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/-+-鳥氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生長(zhǎng)+--嗜鹽性+/---霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株形態(tài)染色革蘭陰性弧形或逗點(diǎn)狀單鞭毛，運(yùn)動(dòng)呈“穿梭樣”或“流星樣”無(wú)芽孢，無(wú)莢膜在新鮮糞便中成“魚群樣”排列霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色培養(yǎng)特性兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高耐堿不耐酸，常用pH8.4～9.2堿性培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中形成菌膜菌落圓形、較大、扁平霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水堿性瓊脂平板硫代硫酸鈉-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）慶大霉素瓊脂平板（含亞碲酸鉀）生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱結(jié)果試驗(yàn)名稱結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡萄糖+賴氨酸+蔗糖+鳥氨酸+甘露醇+精氨酸雙水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明膠液化+霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型兩種生物型具有相同的抗原結(jié)構(gòu)兩種生物型多數(shù)生物學(xué)性狀相似霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V-P-+羊紅細(xì)胞溶解-+50U多粘菌素SR雞紅細(xì)胞凝集-+Ⅳ組噬菌體裂解+-Ⅴ組噬菌體裂解-+霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)根據(jù)O抗原不同分為139個(gè)血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群稱為非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（見(jiàn)下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻葉型（AC）+-+彥島型（ABC）+++抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，在水中存活時(shí)間長(zhǎng)對(duì)酸性物質(zhì)敏感對(duì)慶大霉素耐受多次傳代可失去典型形態(tài)而成為桿狀臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，分泌大量腸液。所致疾?。航?jīng)腸道傳染，引起烈性腸道傳染?。魜y，為甲類傳染病。典型病人糞便呈“米泔水”樣病后可獲得牢固免疫，以SIgA為主。我國(guó)霍亂流行菌株以ElTor小川型為主。微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本以“米泔水”樣便為主，及時(shí)送檢卡－布培養(yǎng)基保存嚴(yán)密包裝，專人送檢檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)堿性蛋白胨水分離培養(yǎng)（TCBS、堿性平板）生化鑒定分型血清學(xué)鑒定確診報(bào)告初步報(bào)告快速診斷直接涂片動(dòng)力、制動(dòng)試驗(yàn)檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形態(tài)、排列動(dòng)力觀察：壓滴法或暗視野鏡檢，注意運(yùn)動(dòng)方式制動(dòng)試驗(yàn)：O1診斷血清與菌體結(jié)合，動(dòng)力消失分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶大霉素瓊脂，TCBS：出現(xiàn)黃色菌落慶大霉素瓊脂：出現(xiàn)中心灰褐色的菌落鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)確定血清群：O1群診斷血清與可疑菌落作玻片凝集，以確定是否為O1群確定血清型：與分型診斷血清作玻片凝集，以確定血清型別確定生物型：第Ⅳ組噬菌體裂解試驗(yàn)多粘菌素B敏感試驗(yàn)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)溶血試驗(yàn)副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜營(yíng)養(yǎng)要求不高，嗜鹽性，最適鹽濃度3.5％NaCl，無(wú)鹽培養(yǎng)基不生長(zhǎng)TCBS：形成不發(fā)酵蔗糖的綠色菌落神奈川現(xiàn)象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔紅細(xì)胞，不溶解馬紅細(xì)胞副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐熱相關(guān)溶血素）所致疾病：食入副溶血性弧菌污染的鹽腌食品，引起食物中毒氣單胞菌屬形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，或球桿狀、絲狀，極端鞭毛，無(wú)芽孢生長(zhǎng)條件：兼性厭氧；營(yíng)養(yǎng)要求不高生長(zhǎng)溫度較寬，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生長(zhǎng)嗜溫菌10～42℃生長(zhǎng)氣單胞菌屬生長(zhǎng)現(xiàn)象TCBS上不生長(zhǎng)血平板：灰白、光滑、凸起菌落腸道選擇平板：形成不發(fā)酵乳糖菌落生化反應(yīng)氧化酶＋、觸酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣6.5％NaCl不生長(zhǎng)O129不敏感多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素所致疾?。耗c道感染：是夏季腹瀉常見(jiàn)病原菌腸外感染：敗血癥、傷口感染等多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落腸毒素測(cè)定初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長(zhǎng)O/129耐鹽試驗(yàn)鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非發(fā)酵菌鑒別與鄰單胞菌屬和弧菌屬鑒別氣單胞菌屬種間鑒別腸道桿菌、非發(fā)酵菌、弧菌科鑒別鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/發(fā)酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢鑒定依據(jù)革蘭陰性桿菌，叢鞭毛腸道選擇平板上無(wú)色透明菌落氧化酶＋、葡萄糖發(fā)酵＋O/129：RTCBS：－6.5％NaCl：－鄰單胞菌屬－－主要性狀只有一個(gè)菌種：類志賀鄰單胞菌革蘭陰性桿菌，單鞭毛或叢鞭毛，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高在SS平板形成不發(fā)酵乳糖菌落氧化酶＋，葡萄糖發(fā)酵＋O/129：STCBS：不生長(zhǎng)6.5％NaCl：不生長(zhǎng)賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸雙水解均＋多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥鄰單胞菌屬－－臨床意義腹瀉、食物中毒，多見(jiàn)于夏季敗血癥、腦膜炎等，多見(jiàn)于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。鄰單胞菌屬－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長(zhǎng)O/129耐鹽試驗(yàn)鄰單胞菌屬－－鑒定與志賀菌屬鑒別：氧化酶、動(dòng)力、血清學(xué)與氣單胞菌屬鑒別：O/129，肌醇試驗(yàn)與弧菌屬鑒別：TCBS、6.5％NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)鏈球菌屬

分布：自然界、人和動(dòng)物腸道、健康人鼻咽部所致疾病：致病鏈球菌引起各種化膿性炎癥、猩紅熱、風(fēng)濕熱等疾病。生物學(xué)性狀形態(tài)染色培養(yǎng)特點(diǎn)生化反應(yīng)抗原構(gòu)造分類抵抗力形態(tài)染色革蘭陽(yáng)性球菌，鏈狀排列，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢，可形成莢膜

在液體培養(yǎng)基中易形成長(zhǎng)鏈致病性強(qiáng)的菌株多為長(zhǎng)鏈在膿汁標(biāo)本中多為短鏈培養(yǎng)特點(diǎn)－－生長(zhǎng)條件營(yíng)養(yǎng)要求高，在含血液、血清培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好

需氧、兼性厭氧D群鏈球菌可在10℃、45℃生長(zhǎng)培養(yǎng)特點(diǎn)－－生長(zhǎng)現(xiàn)象液體培養(yǎng)基：呈沉淀生長(zhǎng)現(xiàn)象血平板：灰白色、細(xì)小、圓形、光滑的、有不同溶血現(xiàn)象的菌落分類菌落特征甲型（α）溶血性鏈球菌灰色、針尖狀菌落、周圍有草綠色溶血環(huán)（α溶血）乙型（β）溶血性鏈球菌灰白色、細(xì)小菌落、周圍有寬大透明溶血環(huán)（β溶血）丙型（γ）鏈球菌灰白色小菌落、無(wú)溶血環(huán)鏈球菌在血平板上菌落特征甲鏈乙鏈丙鏈分類－－根據(jù)溶血現(xiàn)象分類甲型鏈球菌：屬條件致病菌乙型溶血性鏈球菌：致病力強(qiáng)丙型鏈球菌：無(wú)致病力分類－－根據(jù)抗原構(gòu)造分類群特異性抗原（C抗原）：細(xì)胞壁多糖抗原，可將鏈球菌分為20群（A、B、C、D、E、D、E等），引起人類感染的鏈球菌90％為A群。

型特異性抗原（表面抗原）：細(xì)胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四種，根據(jù)M抗原不同，可將A群分為100型。生化反應(yīng)觸酶試驗(yàn)（－）A群鏈球菌：桿菌肽敏感試驗(yàn)（+）B群鏈球菌：CAMP試驗(yàn)（+）、馬尿酸鈉水解試驗(yàn)（+）D群鏈球菌：膽汁七葉苷試驗(yàn)（+）肺炎鏈球菌生物學(xué)特性形態(tài)染色：革蘭陽(yáng)性球菌，矛尖狀，成雙排列，在人和動(dòng)物體內(nèi)形成莢膜血平板上菌落特征：菌落細(xì)小、周圍有草綠色溶血環(huán)，48小時(shí)后，由于菌落自溶，呈現(xiàn)“臍窩狀”生化反應(yīng)：Optochin敏感試驗(yàn)（+）膽汁溶菌試驗(yàn)（+）菊糖分解試驗(yàn)（+）動(dòng)物試驗(yàn)：小白鼠毒力試驗(yàn)（+）臨床意義－－A群鏈球菌致病物質(zhì):致熱外毒素：致熱、細(xì)胞毒作用、使皮膚產(chǎn)生紅疹、抗原性強(qiáng)溶血素：溶解紅細(xì)胞、破壞血小板和白細(xì)胞，分為溶血素O和溶血素S兩種侵襲性酶：透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、鏈道酶，有利于細(xì)菌在體內(nèi)擴(kuò)散M蛋白：具有抗吞噬作用；與腎小球基底膜有共同抗原成分，與超敏反應(yīng)有關(guān)鏈球菌溶素O對(duì)氧敏感、抗原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗O抗體，抗O試驗(yàn)可用于風(fēng)濕熱等鏈球菌感染所致超敏反應(yīng)性疾病的輔助診斷臨床意義－－A群鏈球菌所致疾病化膿性感染：扁桃體炎、丹毒、蜂窩織炎、淋巴管炎、敗血癥等猩紅熱風(fēng)濕熱、鏈球菌感染后腎小球腎炎臨床意義－－其他鏈球菌B群鏈球菌：條件致病菌，是新生兒敗血癥和腦膜炎主要致病菌肺炎鏈球菌：引起大葉性肺炎等疾病甲型鏈球菌：條件致病菌，在一定條件下引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。變異鏈球菌：與齲齒有密切關(guān)系鏈球菌常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本采集根據(jù)臨床標(biāo)本不同采集不同標(biāo)本細(xì)菌鑒定的基本程序標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡檢分離培養(yǎng)取可疑菌落鑒定試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告膿、痰、咽拭腦脊液血液增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)直接涂片染色觀察菌落及溶血現(xiàn)象觸酶試驗(yàn)（－）Optochin敏感試驗(yàn)肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌桿菌肽膽汁七葉苷A群鏈球菌D群鏈球菌腸球菌6.5％NaCl血清學(xué)分類檢驗(yàn)方法—直接鏡檢方法:取標(biāo)本直接涂片,革蘭染色后鏡檢初步報(bào)告:“查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性球菌”“查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性矛尖狀雙球菌，有莢膜，疑似肺炎鏈球菌”莢膜腫脹試驗(yàn)可確診，“找到肺炎鏈球菌”檢驗(yàn)方法—分離培養(yǎng)膿、痰、腦脊液標(biāo)本－→接種血平板，進(jìn)行分離培養(yǎng)菌落特征：

甲型鏈球菌：針尖樣菌落、周圍有草綠色溶血環(huán)；

乙型鏈球菌：灰白色小菌落、周圍有透明溶血環(huán)；

丙型鏈球菌：灰白色菌落、無(wú)溶血環(huán)肺炎鏈球菌：灰白色扁瓶小菌落、周圍有草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)較久形成臍窩樣菌落檢驗(yàn)方法—增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)基：葡萄糖肉湯、硫酸鎂肉湯血液與培養(yǎng)基比例：1：10，即5ml標(biāo)本，50ml增菌液。拮抗劑：硫酸鎂（拮抗多種抗生素）、對(duì)氨基苯甲酸（拮抗磺胺）等培養(yǎng)時(shí)間：常規(guī)培養(yǎng)：18～24小時(shí)至1周；亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎：觀察7天至1月鏈球菌鑒定細(xì)菌形態(tài)及染色性菌落特征鑒定試驗(yàn)桿菌肽敏感試驗(yàn)CAMP試驗(yàn)?zāi)懼呷~苷試驗(yàn)Optochin敏感試驗(yàn)血清學(xué)分群快速膠乳凝集試驗(yàn)肺炎鏈球菌與甲型鏈球菌的鑒別菌名形態(tài)菌落膽汁溶菌Optochin菊糖分解小白鼠毒力肺鏈矛尖狀、成雙排列、有莢膜臍窩狀、草綠色溶血環(huán)+++/－+甲鏈圓形、短鏈、無(wú)莢膜針尖狀、草綠色溶血環(huán)－－－－乙型溶血性鏈球菌的鑒定β-溶血環(huán)包括A、B、C、D、F、G群C群可采用血清學(xué)鑒定其它群采用生化反應(yīng)或其他鑒定試驗(yàn)非β-溶血性鏈球菌鑒定包括肺炎鏈球菌牛鏈球菌無(wú)乳鏈球菌草綠色鏈球菌營(yíng)養(yǎng)變異鏈球菌草綠色鏈球菌鑒定α溶血或不溶血，膽汁七葉苷陰性，包括變異鏈球菌群唾液鏈球菌群血液鏈球菌群咽峽炎鏈球菌群鑒定依據(jù)A群鏈球菌－－桿菌肽敏感試驗(yàn)（+）B群鏈球菌－－CAMP試驗(yàn)（+）、馬尿酸鈉水解試驗(yàn)（+）D群鏈球菌－－膽汁七葉苷（+）、6.5％氯化鈉生長(zhǎng)（－）肺炎鏈球菌－－Optochin敏感試驗(yàn)（+）、膽汁溶菌試驗(yàn)（+）、形態(tài)和菌落特征典型甲型鏈球菌－－Optochin敏感試驗(yàn)（－）、膽汁溶菌試驗(yàn)（－）腸球菌革蘭陽(yáng)性球菌，短鏈排列營(yíng)養(yǎng)要求高在10℃、45℃、pH9.6條件下均可生長(zhǎng)血平板上溶血現(xiàn)象不定觸酶試驗(yàn)（-）膽汁七葉苷試驗(yàn)（+）6.5％NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)（+）PYR試驗(yàn)（+）血清學(xué)分類屬D群腸球菌臨床意義引起的醫(yī)院感染僅次于葡萄球菌腸球菌感染以糞腸球菌為主以尿路感染多見(jiàn)有不同程度耐藥奈瑟菌屬

共同點(diǎn)：革蘭陰性球菌、單個(gè)或成雙排列、無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛、有菌毛觸酶試驗(yàn)（+）氧化酶試驗(yàn)（+）種類：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9種致病菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌形