DB15-T 3358-2024 綿羊腹腔鏡活體采卵技術規(guī)程

65.020.30CCS

B

4415 DB15/T

3358—2024綿羊腹腔鏡活體采卵技術規(guī)程Technical

code

on

ovum

pick-up

2024-02-23

發(fā)布2024-03-23

實施內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB15/T

3358—2024 本文件按照GB/T

1.1—2020《標準化工作導則

第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標準化技術委員會（SAM/TC

19）歸口。本文件起草單位：內(nèi)蒙古賽諾種羊科技有限公司、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學。怡靜。DB15/T

3358—20241范圍本文件規(guī)定了綿羊腹腔鏡采卵中術語和定義、供體綿羊選擇、抽卵液配制及采卵操作等內(nèi)容。本文件適用于綿羊腹腔鏡活體采卵。2規(guī)范性引用文件文件。NY/T

1571 羊胚胎移植技術規(guī)程3 術語和定義下列術語和定義適用于本文件?；铙w采卵ovum

pick-up借助腹腔鏡及其他裝置在綿羊活體狀態(tài)下采集卵母細胞的一系列過程。供體 donor提供卵母細胞的綿羊個體。4 供體綿羊的選擇及預處理供體綿羊的選擇選擇優(yōu)良品種，譜系清楚的一級以上母羊，發(fā)育正常，以

1.5～6

周歲為宜；產(chǎn)后空懷

d

以上，至少有兩次以上正常發(fā)情周期，繁殖機能正常；無遺傳疾病、生殖系統(tǒng)疾病和傳染性疫病。供體羊預處理供體埋置孕酮海綿栓13

d，撤除海綿栓前3

d24

h分別注射重組

3

mL誘導卵泡發(fā)育,撤除海綿栓前1

d進行采卵。5采卵操作DB15/T

3358—采卵前準備5.1.1 供體羊空腹供體羊空腹，冬季控水控料36

h、夏季控水24

h36

h、羔羊手術前12

h空腹。5.1.2 手術室術前一天清掃手術室并用紫外線消毒

60

min；術前

30

5.1.3 器械與消毒5.1.3.1 器械準備兩把長臂鉗、三個套管、三個穿刺針、腹腔鏡鏡頭和負壓機。5.1.3.2 器械消毒提前

用

75%酒精噴灑長臂鉗、套管、穿刺針和腹腔鏡鏡頭，5

后放入器械杯；術前用新潔爾滅水將創(chuàng)布浸泡

min

并甩干水分。穿刺操作5.2.1 麻醉與保定按照

NY/T

1571

的相關規(guī)定進行術前麻醉。穿刺手術前將動物固定在保定架上，將腹側手術區(qū)域剃毛。保定架呈一定傾斜度，頭部處于低位，用

洗必泰和

碘液進行消毒，用干凈的創(chuàng)布遮蓋在手術部位靠下方的位置，且用創(chuàng)巾鉗固定。5.2.2 腹部穿孔選擇三個穿刺位置，第一個腹腔鏡套管穿刺針在母羊左側乳房基部下方

2

～5

處的位置刺入最佳(靠近腹中線）；第二個穿刺孔位于腹中線兩側，離乳房

cm～15

cm；第三個穿刺孔位于右側乳房基部

3

cm～6

處。穿孔時將腹部外皮向上提起，穿刺針抵住手術位置刺入，刺入時注意皮和腹膜的穿刺點位置不要錯開，注意避開血管。5.2.3 設備放置將腹腔內(nèi)窺鏡放入第一孔，將長臂鉗放入第三孔，觀察穿刺套管是否進入腹腔內(nèi)，如果腹部脂肪過厚，導致視野內(nèi)未看見套管，可用長臂鉗或穿刺針撥開脂肪使套管暴露在視野內(nèi)。第二孔中也放入一支長臂鉗用于輔助右側的長臂鉗將卵巢固定好。如卵巢固定好，第二孔長臂鉗拔出，將采卵針放進套管，準備采卵。采卵5.3.1 準備工作5.3.1.1 采卵液配制采卵液配方見附錄

A。5.3.1.2 準備采卵前將采卵針和吸管用采卵液沖洗一遍，試管內(nèi)采卵液不少于

2

mL。DB15/T

3358—20245.3.2 卵泡穿刺觀察卵巢后，用卵巢固定鉗夾住卵巢的系帶部分，在內(nèi)窺鏡的觀察下使用采卵針依次抽吸

2

mm

以上的有腔卵泡，從下往上抽取，同時記錄抽取卵泡的數(shù)量。抽取大卵泡或抽取的卵泡液多時，要輕輕的晃動采卵液，以防止采卵試管內(nèi)的液體粘連；采卵試管內(nèi)抽到血時要及時進行清洗；采卵完成后迅速將采卵試管送回實驗室內(nèi)進行檢卵與體外培養(yǎng)。5.3.3 術后流程鏈霉素或皮下注射預防劑量的抗生素，注射

mL鹽酸賽拉嗪。傷口噴灑碘酊。DB15/T

3358—2024

附 錄 A（