2.1 《實驗用羊管理規(guī)范》報批稿

Q/LB.□XXXXX-XXXXDB44/TXXXX—202X目次TOC\o"1-1"\h\t"標準文件_一級條標題,2,標準文件_附錄一級條標題,2,"前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術語和定義 14總體要求 24.1基本要求 24.2人員 34.3管理體系文件 35設施與環(huán)境 35.1分類 35.2生產(chǎn)設施基本要求 35.3實驗設施基本要求 35.4總體布局 35.5環(huán)境技術指標 45.6籠具圍欄 55.7料盤 55.8福利用品 56實驗用羊質(zhì)量管理 56.1微生物與寄生蟲學等級 56.2檢測指標和項目 66.3檢測程序 76.4檢測方法 96.5檢測規(guī)則 96.6結果判定 97動物實驗管理 97.1總體要求 97.2遵循福利倫理原則 97.3福利倫理審查 107.4麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜 107.5安樂死 108動物運輸 109廢棄物處理 10附錄A（資料性）實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法 11附錄B（資料性）實驗用羊常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物 13參考文獻 14前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由廣東省科學技術廳提出并組織實施。本文件由廣東省實驗動物標準化技術委員會（GD/TC93）歸口。本文件起草單位：廣東省實驗動物監(jiān)測所、深圳漢諾醫(yī)療科技有限公司、華南農(nóng)業(yè)大學、深圳市領先醫(yī)療服務有限公司、深圳市藥品檢驗研究院（深圳市醫(yī)療器械檢測中心）。本文件主要起草人：張鈺、李軼江、賈坤、唐華、劉堯、葉建平、陳小曲、穆盈、臧德躍、魏遠征、王靜、潘金春。實驗用羊管理規(guī)范范圍本文件規(guī)定了實驗用羊的生產(chǎn)和開展動物實驗的總體要求、設施與環(huán)境、實驗用羊質(zhì)量管理、動物實驗管理、動物運輸、廢棄物處理等要求。本文件適用于實驗用羊，包括綿羊和山羊的生產(chǎn)和使用管理。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T14924.2實驗動物配合飼料衛(wèi)生標準GB14925實驗動物環(huán)境及設施GB18871電離輻射防護與輻射源安全基本標準GB19489實驗室生物安全通用要求GB/T27416實驗動物機構質(zhì)量和能力的通用要求GB/T34791實驗動物質(zhì)量控制要求GB/Z34792實驗動物引種技術規(guī)程GB/T35823實驗動物動物實驗通用要求GB/T35892實驗動物福利倫理審查指南GB/T39760實驗動物安樂死指南GB/T39915動物飼養(yǎng)場防疫準則GB50346生物安全實驗室建筑技術規(guī)范NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術規(guī)范NY/T682畜禽場場區(qū)設計技術規(guī)范NY/T816肉羊營養(yǎng)需要量NY/T1167畜禽場環(huán)境質(zhì)量及衛(wèi)生控制規(guī)范NY/T3052舍飼肉羊飼養(yǎng)管理技術規(guī)范NY/T3236活動物跨省調(diào)運風險分析指南NY/T3467牛羊飼養(yǎng)場獸醫(yī)衛(wèi)生規(guī)范NY/T5339無公害農(nóng)產(chǎn)品畜禽防疫準則RB/T061實驗動物安樂死技術規(guī)范術語和定義下列術語和定義適用于本文件。

實驗用羊experimentalsheepandgoat用于科學研究、教學、檢驗檢測以及其他科學實驗的羊。

實驗用羊生產(chǎn)設施breedingfacilityforexperimentalsheepandgoat用于實驗用羊生產(chǎn)的建筑物和設備的總和。

實驗用羊實驗設施experimentalfacilityforexperimentalsheepandgoat以研究、試驗、教學、生物制品和藥品及相關產(chǎn)品生產(chǎn)、檢驗檢測等為目的而進行實驗用羊試驗的建筑物和設備的總和。

普通環(huán)境conventionalenvironment通過人工控制，滿足普通級實驗動物生產(chǎn)或使用要求的各種因素總和。[來源：GB14925—2023,3.4]

屏障環(huán)境barrierenvironment滿足無特定病原體（specificpathogenfree，SPF）級實驗動物生產(chǎn)或使用要求的各種因素總和。[來源：GB14925—2023,3.5]

普通級實驗用羊conventional（CV）sheepandgoat普通實驗用羊不攜帶所規(guī)定的對動物和（或）人健康造成嚴重危害的人獸共患病原體和動物烈性傳染病病原體的實驗用羊。

無特定病原體級實驗用羊specificpathogenfree（SPF）sheepandgoat無特定病原體實驗用羊SPF實驗用羊除普通級實驗用羊應排除的病原體外，不攜帶對動物健康危害大和（或）對科學研究干擾大的病原體的實驗用羊。總體要求基本要求實驗用羊的防疫和衛(wèi)生應符合GB/T39915、NY/T5339和NY/T3467要求。實驗用羊引種按照GB/Z34792的規(guī)定執(zhí)行，符合核心育種場管理規(guī)范要求。選擇行業(yè)認可的種子中心或種源基地進行引種。實驗用羊生產(chǎn)按照引進羊的品種要求設立羊群結構、飼養(yǎng)密度，開展種公羊、母羊（后備母羊、妊娠母羊、泌乳母羊等）、羔羊、育成羊的飼養(yǎng)管理。實驗用羊生產(chǎn)區(qū)與畜牧養(yǎng)殖區(qū)應相互獨立或隔離，并做好實驗用羊生產(chǎn)繁殖記錄，保障遺傳背景明確。用于開展動物實驗的羊應來源于培育和飼養(yǎng)的動物群體，保障動物質(zhì)量，防止人獸共患病。實驗用羊飼養(yǎng)管理按照NY/T3052執(zhí)行。飼料應滿足實驗用羊的正常生理需求，營養(yǎng)指標和衛(wèi)生指標應分別符合NY/T816和GB/T14924.2的要求。進入屏障環(huán)境的飼料應經(jīng)消毒滅菌處理。動物飲水應符合GB14925飲水的要求。開展動物實驗應符合GB/T35823的要求。遵循福利倫理原則。開展動物實驗的環(huán)境設施應符合GB14925要求。負壓屏障設施應符合病原微生物實驗室安全管理條例及相關標準要求。人員人員應符合GB/T27416和GB/T34791規(guī)定。管理體系文件機構宜按照GB/T27416規(guī)定建立管理體系文件。設施與環(huán)境分類按照設施的使用功能，分為實驗用羊生產(chǎn)設施和實驗用羊實驗設施。按照空氣凈化的控制程度，實驗用羊環(huán)境分為普通環(huán)境和屏障環(huán)境，見表1。實驗用羊的環(huán)境分類環(huán)境分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境—生產(chǎn)、實驗、檢疫普通級屏障環(huán)境正壓生產(chǎn)、實驗、檢疫SPF級負壓實驗、檢疫普通級、SPF級表中“—”表示不作要求。生產(chǎn)設施基本要求應獲得《動物防疫條件合格證》。生產(chǎn)場區(qū)設計應符合NY/T682的規(guī)定，環(huán)境質(zhì)量與衛(wèi)生控制應符合NY/T1167的規(guī)定。屏障環(huán)境生產(chǎn)設施應滿足實驗用羊生產(chǎn)繁殖特性，工藝布局宜包括隔離檢疫室、緩沖間、風淋室、育種室、擴大群飼養(yǎng)室、生產(chǎn)群飼養(yǎng)室、待發(fā)室、清潔物品貯存室、消毒后室、走廊。實驗設施基本要求選址宜遠離有嚴重空氣污染、振動或有噪聲干擾的鐵路、碼頭、飛機場、交通要道、工廠、貯倉、屠宰場、堆場等區(qū)域。實驗室外環(huán)境整潔，便于清掃和消毒。排水暢通，無廢物堆積和污水積存。應有防止野生動物進入的裝置。實驗設施排水口還應采取防止害蟲進入的措施。實驗設施走廊凈寬宜不小于1.5m。門大小應滿足設備進出和日常工作需要，凈寬宜不小于1.0m。排水溝、槽、管坡度應保證排水通暢，無污物積存。排水管道管徑不宜小于DN150。宜設置環(huán)境監(jiān)控系統(tǒng)?？傮w布局應根據(jù)實驗用羊的生理需要和行為特征，設計建造適合其居住的設施，并能控制人員和動物進出。一般分為前區(qū)、實驗區(qū)和輔助區(qū)。前區(qū)：宜包括辦公室、接待室、檔案資料室、維修室、庫房、飼料室、配電室、一般走廊和動物裝卸平臺等。實驗區(qū)：宜包括緩沖間、風淋室、檢疫間、隔離室、操作室、手術室、飼育間、清潔物品貯存室、消毒后室、走廊。輔助區(qū)：宜包括倉庫、洗刷消毒室、廢棄物處理室（設備）、解剖室、機械設備室、淋浴間、工作人員休息室、更衣室等。實驗用羊實驗設施應與生產(chǎn)設施分開設置。實驗用羊的隔離檢疫間應與實驗用羊實驗區(qū)分開設置。開展放射性實驗，設施還應符合GB18871要求。開展實驗用羊生物安全實驗，設施還應符合GB19489和GB50346的要求。飼料和墊料儲藏室應實行環(huán)境控制，防止寄生蟲污染和野生動物進入，并進行必要的溫濕度控制。飼養(yǎng)間宜設實驗用羊活動空間。環(huán)境技術指標實驗用羊的環(huán)境技術指標應符合表2的要求。實驗用羊的環(huán)境技術指標項目普通環(huán)境（生產(chǎn)設施）普通環(huán)境（使用設施）屏障環(huán)境溫度/℃—16～2820～26日溫差/℃，≤—4相對濕度/%—30～70相通區(qū)域靜壓差/Pa，≥——10氣流速度/（m/s），≤—0.2換氣次數(shù)/（次/h），≥—815空氣潔凈度級別/級——7沉降菌平均濃度/（CFU/0.5h·Φ90mm平皿），≤——3氨氣濃度/（mg/m3），≤14噪聲/dB(A)，≤60照度/lx工作照度，≥—150動物照度—100～200光照明暗交替時間/h—12/12或14/10表2實驗用羊的環(huán)境技術指標（續(xù)）生產(chǎn)設施的待發(fā)室、檢疫間和隔離室主要技術指標應符合表2的規(guī)定。實驗設施的檢疫間和隔離室主要技術指標應符合表2的規(guī)定。正壓屏障環(huán)境的單走廊設施應保證動物生產(chǎn)區(qū)、動物實驗區(qū)壓力最高；雙走廊或多走廊設施應保證潔凈走廊的壓力高于動物生產(chǎn)區(qū)、動物實驗區(qū)，且動物生產(chǎn)區(qū)、動物實驗區(qū)的壓力高于污物走廊。所有負壓屏障環(huán)境應保證動物實驗區(qū)壓力最低。表中“—”表示不作要求。氨濃度指標為有實驗用羊時的指標?？諝鉂崈舳?、沉降菌平均濃度為靜態(tài)時的指標。檢測項目按照GB14925執(zhí)行。屏障環(huán)境設施的潔凈輔助區(qū)環(huán)境指標應符合GB14925的要求。設備環(huán)境技術指標應按GB14925所列方法檢測。檢測指標包括設備內(nèi)部技術指標和設備所處房間的溫度、相對濕度和噪聲?；\具圍欄籠具圍欄應符合實驗用羊的生理、健康及福利要求，滿足GB14925籠具的要求。實驗用羊籠具圍欄應符合表3的要求。實驗用羊籠具圍欄最小尺寸飼養(yǎng)數(shù)量/頭體重/kg底板面積/（m2/頭）籠內(nèi)高度/m1＜250.90.825～501.351.0＞50≥1.81.22～5＜250.760.825～501.121.0＞50≥1.531.2＞5＜250.670.825～501.021.0＞50≥1.351.2料盤選用無毒、易沖洗、耐高溫、耐酸堿、易消毒滅菌的材料制作料盤。料盤的大小應滿足同欄所有動物同時進食的要求。自動落料料盤應保證實驗用羊能自主無障礙采食到飼料。福利用品應符合GB14925福利用品的要求。實驗用羊質(zhì)量管理微生物與寄生蟲學等級實驗用羊按微生物、寄生蟲學等級分類分為普通級和無特定病原體級。檢測指標和項目臨床檢查可根據(jù)需求選擇外觀、血常規(guī)、血生化、影像等檢查方法，實驗用羊臨床檢查應無異常。檢測項目實驗用羊病原微生物及寄生蟲檢測項目按表4的要求。實驗用羊病原微生物及寄生蟲檢測項目動物等級檢測項目檢測要求無特定病原體級普通級布魯氏菌Brucella●炭疽芽孢桿菌Bacillusanthracis○溶血性曼氏桿菌Mannheimiahaemolytica○溶血性鏈球菌Hemolyticstreptococcus○鉤端螺旋體Leptospira○皮膚病原真菌Pathogenicdermalfungi○貝氏柯克斯體Coxiellaburnetii○口蹄疫病毒Footandmouthdiseasevirus▲小反芻獸疫病毒Pestedespetitsruminantsvirus▲綿羊/山羊痘病毒Sheep/Goatpoxvirus○體外寄生蟲Ectoparasites○弓形蟲Toxoplasmagondii●棘球蚴Echinococcus▲山羊支原體Mycoplasmacapricolum●副結核分枝桿菌Mycobacteriumparatuberculosis●胎兒彎曲桿菌Campylobacterfetus●衣原體Chlamydia●藍舌病病毒Bluetonguevirus○口瘡病毒Orfvirus●偽狂犬病毒Pseudorabiesvirus●綿羊梅迪-維納斯病毒和山羊關節(jié)炎-腦炎病毒Maedi-visnavirusandCaprinearthritisencephalitisvirus○綿羊肺腺瘤病毒Ovinepulmonaryadenomatosisvirus○球蟲Coccidia○隱孢子蟲Cryptosporidium○新孢子蟲Neospora●梨形蟲Piroplasma●錐蟲Trypanosome○賈第蟲Giardia●表4實驗用羊病原微生物及寄生蟲檢測項目（續(xù)）動物等級檢測項目檢測要求無特定病原體級蠕蟲Helminths●羊泰勒蟲OvineTheileria●羊附紅細胞體Eperythrozoonovis（Mycoplasmaoviscomb.nov.）●巴貝斯蟲Babesiaovis●●必須檢測，要求陰性；▲必須檢測，普通級可以免疫，無特定病原體級不能免疫；○必要時檢測。必須檢測項目：指在實驗動物用羊質(zhì)量評價、等級確定時必須檢測的項目。必要時檢測項目：指相關行政部門要求時，本病流行時、進出口時，或特殊實驗要求時需要檢測的項目。因動物疫病防控需要對布魯氏菌、炭疽芽孢桿菌進行免疫的，普通級可以免疫，無特定病原體級不能免疫。檢測程序檢測程序見圖1。檢測程序檢測方法實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法見附錄A。檢測規(guī)則檢測頻率普通級實驗用羊每6個月應至少檢測1次；無特定病原體級實驗用羊每3個月應至少檢測1次。取樣要求應選擇2月齡以上的實驗用羊。根據(jù)實驗用羊群體大小，取樣數(shù)量見表5。取樣數(shù)量群體大小/頭取樣數(shù)量/頭＜100≥5100～500≥10＞500≥15動物送檢容器應按動物級別要求編號和標識，包裝好，安全送達實驗室，并附送檢單，寫明動物品種品系、等級、數(shù)量和檢測項目。采樣方法應按照NY/T541進行。結果判定存在多種檢測方法，任何一種方法檢測陽性將判定為陽性。免疫項目，免疫動物應群體免疫合格率不低于70%，其中口蹄疫群體免疫合格率應達到80%以上，開展動物實驗時宜加強核酸檢測。非免疫項目，抗體陰性判定為合格。結果評價：在檢測的各等級實驗用羊中，如有某項指標不符合該等級指標，則判定為不符合該等級。動物實驗管理通用要求動物實驗管理按照GB/T35823執(zhí)行。遵循福利倫理原則使用實驗用羊應符合“替代、減少、優(yōu)化”原則。使用合格的實驗用羊，保障人和動物的健康。在生產(chǎn)、使用和運輸過程中應當維護實驗用羊福利，關愛實驗用羊不得虐待實驗用羊。采取有效措施，保障實驗用羊處于舒適、健康、快樂等自然生活狀態(tài)的五項自由，包括免于饑渴的自由，免于不適的自由，免于痛苦、傷害和疾病的自由，表達主要天性的自由，免于恐懼和焦慮的自由。在不影響實驗結果判定的情況下，盡可能減少實驗用羊的痛苦或縮短動物承受痛苦的時間。在對實驗用羊進行手術或其他活體操作時，應進行有效的麻醉、鎮(zhèn)靜或止痛；實驗用羊處于手術后、患病等疼痛、痛苦狀態(tài)時應實施有效的治療、止痛；處死實驗用羊時應實施安死術。福利倫理審查按照GB/T35892有關規(guī)定，對使用實驗用羊的必要性、合理性和規(guī)范性進行檢查和審定。麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜應選用藥用級化合物，選用非藥用級化合物的，應獲得福利倫理審查通過。麻醉劑種類分為注射麻醉劑和氣體麻醉劑。注射麻醉劑適用于短期手術，氣體麻醉劑適用于較長時間手術。使用氣體麻醉劑前通常使用注射麻醉劑誘導麻醉，再使用氣體麻醉劑維持麻醉。氣體麻醉不宜作為首選麻醉方式單獨使用。懷孕羊長時間使用氣體麻醉（＞1h）會增加胎兒血液二氧化碳水平，應減少25%～40%的使用量。止痛藥一般用于減輕動物疾病或手術后疼痛的嚴重程度和持續(xù)時間。根據(jù)動物疼痛級別、藥物作用等因素綜合確定給藥頻次和時間。鎮(zhèn)靜劑主要用于動物化學保定、手術前期麻醉等過程，可以減少動物焦慮、恐懼和過度活動。常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物見附錄B。安樂死按照GB/T39760、RB/T061規(guī)范執(zhí)行。動物運輸實驗用羊的運輸條件應充分考慮動物安全性和舒適度，保證動物健康和福利。按照GB14925動物運輸規(guī)定執(zhí)行。當跨省運輸動物時，宜按照NY/T3236開展風險分析。廢棄物處理按照GB14925廢棄物處理規(guī)定執(zhí)行。

（資料性）

實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法見表A.1。實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法病原體推薦檢測標準檢測方法布魯氏菌GB/T18646抗體檢測、核酸檢測、病原檢測炭疽芽孢桿菌NY/T561核酸檢測、抗體檢測溶血性曼氏桿菌DB15/T2907—2023病原分離、核酸檢測、抗體檢測（參考標準中的病原檢測方法）溶血性鏈球菌GB/T14926.16病原分離（參考標準中的病原分離方法）鉤端螺旋體GB/T14926.46抗體檢測皮膚病原真菌GB/T14926.4培養(yǎng)鑒定貝氏柯克斯體SN/T1087、SN/T3395抗體檢測、核酸檢測口蹄疫病毒GB/T18935抗體檢測、核酸檢測、病原檢測小反芻獸疫病毒GB/T27982抗體檢測、核酸檢測綿羊/山羊痘病毒NY/T576抗體檢測、核酸檢測體外寄生蟲GB/T18448.1鏡檢弓形蟲NY/T573抗體檢測、核酸檢測棘球蚴NY/T1466抗體檢測、核酸檢測山羊支原體NY/T1468抗體檢測、核酸檢測副結核分枝桿菌GB/T27637核酸檢測、抗體檢測胎兒彎曲桿菌GB/T18653病原分離衣原體NY/T562抗體檢測、核酸檢測藍舌病病毒GB/T18636抗體檢測、核酸檢測口瘡病毒NY/T1244、SN/T5194抗體檢測、核酸檢測偽狂犬病病毒GB/T18641抗體檢測、核酸檢測綿羊梅迪-維納斯病毒和山羊關節(jié)炎-腦炎病毒SN/T1171抗體檢測、核酸檢測綿羊肺腺瘤病毒SN/T3484核酸檢測球蟲GB/T18647鏡檢隱孢子蟲NY/T1949、GB/T35942鏡檢、核酸檢測新孢子蟲SN/T3499抗體檢測、核酸檢測梨形蟲SN/T3485抗體檢測、核酸檢測錐蟲GB/T23239鏡檢、抗體檢測賈第蟲GB/T19526、GB/T18448.10鏡檢表A.1實驗用羊病原微生物和寄生蟲的檢測方法（續(xù)）病原體推薦檢測標準檢測方法蠕蟲GB/T19526、GB/T18448.6鏡檢羊泰勒蟲GB/T42117鏡檢、核酸檢測羊附紅細胞體NY/T1953鏡檢、核酸檢測巴貝斯蟲SN/T2974鏡檢、抗體檢測羊邊蟲SN/T2021鏡檢、核酸檢測

（資料性）

實驗用羊常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物實驗用羊常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物見表B.1。實驗用羊常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物類別使用方式藥品名麻醉劑呼吸異氟烷（isoflurane）、七氟烷（sevoflurane）注射單用：氯胺酮（ketamine）、硫噴妥鈉（thiopentalsodium）、丙泊酚（propofol）聯(lián)合使用：氯胺酮（ketamine）/賽拉嗪（xylazine）、地西泮（diazepam）/氯胺酮（ketamine）、替來他明（tiletamine）/唑拉西泮（zolazepam）等止痛藥注射丁丙諾啡（buprenorphine）、布托菲諾（butorphanol）鎮(zhèn)靜劑注射α-2腎上腺素能藥物：賽拉嗪（xylazine）、美托咪啶（medetomidine)、地托咪定（detomidine）等酚噻嗪類藥物：乙酰丙嗪（acepromazine）等苯二氮卓類藥物：地西泮（diazepam）等參考文獻[1]GB14922實驗動物微生物、寄生蟲學等級及監(jiān)測[2]GB/T14926.4實驗動物皮膚病原真菌檢測方法[3]GB/T14926.16實驗動物乙型溶血性鏈球菌檢測方法[4]GB/T14926.46實驗動物鉤端螺旋體檢測方法[5]GB/T18448.1實驗動物體外寄生蟲檢測方法[6]GB/T18448.6實驗動物蠕蟲檢測方法[7]GB/T18448.10實驗動物腸道鞭毛蟲和纖毛蟲檢測方法[8]GB/T18636藍舌病診斷技術[