關(guān)于口腔鱗癌中Ets-2、MMP-9表達(dá)及其意義

關(guān)于口腔鱗癌中Ets-2、MMP-9表達(dá)及其意義

【摘要】目的探討Ets-2、MMP-9在口腔鱗癌中的表達(dá)。方法應(yīng)用PV-9000兩步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)Ets-2、MMP-9在68例口腔鱗癌組織、19例口腔粘膜上皮異常增生組織和15例正?？谇徽衬そM織的表達(dá)情況，分析其在口腔粘膜癌變過(guò)程中的變化趨勢(shì)及在各組間表達(dá)的差異。結(jié)果1.Ets-2三組總體及組間比較均有顯著性差異(P＜0.05)；在OSCC患者按年齡、性別、瘤體大小等分組間比較Ets-2的表達(dá)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；在按有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等分組間比較Ets-2的表達(dá)差異有顯著性差異(P＜0.05)。2.MMP-9的表達(dá)三組總體差異及組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在OSCC患者按年齡、性別、瘤體大小等分組間比較MMP-9表達(dá)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；在按有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等分組間比較MMP-9的表達(dá)差異有顯著性差異(P＜0.05)。3.在口腔鱗癌組織中，Ets-2與MMP-9的表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.153，P＜0.05)。結(jié)論Ets-2、MMP-9的異常表達(dá)可能在口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用?！娟P(guān)鍵詞】口腔鱗狀細(xì)胞癌Ets-2MMP-9免疫組織化學(xué)【Abstract】AimToinvestigatetheexpressionofEts-2、MMP-9inoralsquamouscellcarcinorma.MethodsThetwo-stepimmunohistochemistrytechnique(PV-9000)，wasusedtodiscovertheexpressionofEts-2andMMP-9in68OSCCtissues，19DOMtissuesand15NOMtissues，andtoanalyzetheirexpressionsindifferenttissues.Results1AstotheexpressionofEts-2，statisticalsignificancewasobservedbetweenthehighlyandmoderatelyaswellaspoorlygroups(P＜0.05)，butnotbetweenmoderatelyandpoorlygroups(P=0.534).Theresultsshowedtherewasnosignificantdifferencebetweenthegroupspidedbysex，ageandsizeoftumor(P＞0.05)，butitlinkedwithlymphnodemetastasisandTNMstage(P＜0.05).2AstotheexpressionofMMP-9，statisticalsignificancewasobservedbetweenthehighlyandmoderatelyaswellaspoorlygroups(P＜0.05)，butnotbetweenmoderatelyandpoorlygroups(P=0.589).Theresultsshowedtherewasnosignificantdifferencebetweenthegroupspidedbysex，ageandsizeoftumor(P＞0.05)，butitrelatedwithlymphnodemetastasisandTNMstage(P＜0.05).3TherewaspositivecorrelationbetweenEts-2andMMP-9inoralsquamouscellcarcinorma(r=0.153，P＜0.005).ConclusionTheimbalanceofEts-2、MMP-9mayplayanimportantorlintheoccurrenceanddevelopmentoforalsquamouscellcarcinorma.【Keywords】OralsquamouscellcarcinomaEts-2;MMP-9immunohisto-chemistryEts-2（人紅血細(xì)胞增多癥病毒致癌基因同源體2）是Ets家族轉(zhuǎn)錄因子的一員，它在腫瘤、骨發(fā)育和免疫應(yīng)答中扮演重要角色[1]。它在膀胱癌、肝癌、乳腺癌等中高表達(dá)，故而有學(xué)者把它列為一種致癌基因。MMP-9則屬于Ⅳ型膠原酶或明膠酶。在正常的生理情況下，基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(TissueInhibitorsofMetalloproteinases，TIMPs)保持在一定的平衡狀態(tài)，從而維持機(jī)體的正常狀，使組織屏障的完整性得以維護(hù)[2]。在腫瘤發(fā)展的過(guò)程中，MMP-9通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)(ExtracellularMatrix，ECM)中的型膠原使癌細(xì)胞突破原發(fā)部位正常的基底膜(BasementMembrane，BM)而發(fā)生浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。1資料與方法1.1臨床資料選取鄭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院、河南省腫瘤醫(yī)院、鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2005-2008年手術(shù)切除的，且術(shù)后經(jīng)病理檢查確診的原發(fā)口腔鱗狀細(xì)胞癌(OralSquamousCellCarcinoma，OSCC)石蠟包埋標(biāo)本68例。其中患者年齡35-79歲，男性40例，女性28例；所有患者均為首次治療，且手術(shù)前未行放療或化療。全部標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定，石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，分別用HE染色及免疫組化染色。腫瘤直徑小于4cm者44例，不小于4cm者24例；有淋巴轉(zhuǎn)移38例，無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例；按鱗癌病理分級(jí)法，其中高分化鱗癌29例、中分化鱗癌25例、低分化鱗癌14例；腫瘤分期根據(jù)UICC2002標(biāo)準(zhǔn)，按TNM分期，Ⅰ期-Ⅱ期38例、Ⅲ期-Ⅳ期30例。1.2主要試劑鼠抗人Ets-2單克隆抗體（即用型），鼠抗人MMP-9單克隆抗體濃縮液，PV-9000通用型兩步法免疫組化染色試劑盒，均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。1.3免疫組化檢測(cè)采用PV-9000兩步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)，用已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，均以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。1.4結(jié)果判定Ets-2:陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞漿；MMP-9陽(yáng)性染色于細(xì)胞胞膜或胞漿。于顯微鏡下隨機(jī)記數(shù)4個(gè)視野(10×40倍)，至少計(jì)數(shù)共400個(gè)細(xì)胞，計(jì)算平均每個(gè)視野下的陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)。用LI評(píng)價(jià)其表達(dá)水平。以陽(yáng)性細(xì)胞比率＜5%為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞比率5-20%為(+)，陽(yáng)性細(xì)胞比率＞20%為(++)[3]。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，兩組間比較、多組間的兩兩比較采用秩和檢驗(yàn)(Wilcoxon兩樣本比較法)，x2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。取α=0