【生物】細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課件 2023-2024學(xué)年高二生物下學(xué)期期中考點(diǎn)大串講人教版2019選擇性必修3

單元復(fù)習(xí)第2章

細(xì)胞工程內(nèi)容網(wǎng)絡(luò)課標(biāo)要求生命觀念:1.結(jié)合“菊花的組織培養(yǎng)”的實(shí)驗(yàn)操作，嘗試設(shè)計(jì)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡(jiǎn)圖。2.用歸納與概括、演繹與推理等方法，用文字和圖示說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程。3.以過(guò)程圖的形式表示受精作用和胚胎發(fā)育的過(guò)程。1.簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的原理和過(guò)程。2.運(yùn)用穩(wěn)態(tài)與平衡觀，分析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件。3.哺乳動(dòng)物在自然條件下受精和早期胚胎的發(fā)育規(guī)律是胚胎工程重要的理論基礎(chǔ)。闡述細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能的適應(yīng)。1.查閱資料，嘗試探究植物生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素使用比例對(duì)植物組織培養(yǎng)的影響。2.對(duì)干細(xì)胞培養(yǎng)用于人類(lèi)疾病治療等社會(huì)熱點(diǎn)問(wèn)題進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià)?？茖W(xué)思維、科學(xué)探究:社會(huì)責(zé)任:考點(diǎn)CONTENTS01植物細(xì)胞工程技術(shù)02

植物細(xì)胞工程應(yīng)用03動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)04動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體05動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物07

胚胎工程應(yīng)用06胚胎工程技術(shù)PART01植物細(xì)胞工程技術(shù)無(wú)組織結(jié)構(gòu)、松散的薄壁細(xì)胞團(tuán)離體條件下已分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)，失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，重新獲得分裂能力考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物組織培養(yǎng)）1.概念:是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。外植體2.流程:接種外植體離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)生芽再分化愈傷組織能重新分化成芽、根等器官誘導(dǎo)生根移栽成活考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物組織培養(yǎng)）脫分化再分化過(guò)程外植體→愈傷組織愈傷組織→幼苗分裂、分化有分裂，無(wú)分化有分裂，無(wú)分化結(jié)果形成愈傷組織形成根、芽需要條件a.離體、適宜的營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例適中d.一般不需光a.離體、適宜的營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例高或低誘導(dǎo)生根或生芽d.光照（誘導(dǎo)葉綠素的合成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。）

生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。它們的濃度、比例都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。3.脫分化與再分化比較:考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物組織培養(yǎng)）外植體愈傷組織試管苗完整植株脫分化芽、根等再分化關(guān)鍵激素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素

芽分化愈傷組織根分化生長(zhǎng)素用量/細(xì)胞分裂素用量結(jié)果比值≈1比值＞1比值＜1促進(jìn)根的分化促進(jìn)芽的分化促進(jìn)愈傷組織的形成

巧記：高根低芽中愈傷4.決定植物脫分化、再分化的關(guān)鍵因素:有光時(shí)，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織?？键c(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物組織培養(yǎng)）5.菊花的組織培養(yǎng):制備外植體接種培養(yǎng)試管苗移栽消毒：切割：（無(wú)菌操作）酒精30S無(wú)菌水2-3次次氯酸鈉溶液30min材料：幼嫩的菊花莖段2-3次無(wú)菌水洗①接種到誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基形成愈傷組織（培養(yǎng)溫度：18-220C、避光）培養(yǎng)15~20天后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗。移栽前先打開(kāi)封口膜或瓶蓋，讓試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日。用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后，將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土。每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開(kāi)花?？键c(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物組織培養(yǎng)）例1．下圖是利用三倍體香蕉的莖尖培養(yǎng)脫毒香蕉植株的過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是（）A．過(guò)程①~③中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂B．對(duì)香蕉進(jìn)行花藥培養(yǎng)可獲得單倍體C．過(guò)程②為脫分化D．X代表愈傷組織D考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物體細(xì)胞雜交技術(shù)）1.概念:將不同來(lái)源的植物細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。B細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體去壁去壁A細(xì)胞2.過(guò)程:去除細(xì)胞壁方法：用纖維素酶和果膠酶水解原理：利用酶的專(zhuān)一性誘導(dǎo)融合正在融合的原生質(zhì)體融合方法：(1)物理方法：

①電融合法，

②離心法等(2)化學(xué)方法：

①聚乙二醇(PEG)融合法，

②高Ca2+—高pH融合法原理：細(xì)胞膜具有流動(dòng)性再生細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁雜種細(xì)胞(1)植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:融合的原生質(zhì)體重新產(chǎn)生細(xì)胞壁，形成雜種細(xì)胞。(2)直接參與細(xì)胞器:高爾基體考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物體細(xì)胞雜交技術(shù)）植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)原理過(guò)程意義聯(lián)系細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織脫分化再分化根、芽或胚狀體植物體生長(zhǎng)發(fā)育植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B原生質(zhì)體A去壁原生質(zhì)體B去壁人工誘導(dǎo)融合的原生質(zhì)體AB雜種細(xì)胞AB愈傷組織脫分化再生細(xì)胞壁雜種植株再分化保持優(yōu)良性狀,繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)提高經(jīng)濟(jì)效益植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)克服不同種生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙3.

植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的比較:考點(diǎn)一：植物細(xì)胞工程技術(shù)（植物體細(xì)胞雜交技術(shù)）例2．農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，獲得異源多倍體植物的常見(jiàn)方式如下圖（A、B、C、D代表不同物種的一個(gè)染色體組），不正確的是（

）

A．圖中丙含有A和B兩個(gè)染色體組，因沒(méi)有同源染色體，不能正常聯(lián)會(huì)導(dǎo)致高度不育B．操作①常處理幼苗，獲得染色體組加倍的丁，恢復(fù)育性C．操作②常采用纖維素酶和果膠酶處理，過(guò)程③通過(guò)脫分化即可形成雜種植株辛D．方法一一般只能用于親緣關(guān)系較近的不同物種，方法二則能實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種CPART02植物細(xì)胞工程應(yīng)用考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）1.快速繁殖:1.概念：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，也叫微型繁殖。2.原理：植物細(xì)胞的全能性3.優(yōu)點(diǎn)：(1)高效、快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。(2)保持優(yōu)良品種的遺傳特性。(3)不受自然生長(zhǎng)季節(jié)的限制，培養(yǎng)周期短。(4)選材少，繁殖率高，便于自動(dòng)化管理。4.生殖方式：一般為無(wú)性生殖快速繁殖經(jīng)濟(jì)苗木、名貴花卉、珍稀瀕危植物等自然繁殖速度緩慢，繁殖效率低下或優(yōu)良性狀不易保持的植物。5.運(yùn)用：考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）例3．菊科植物甜葉菊植株中甜菊糖含量豐富，甜菊糖是用糖行業(yè)青睞的新糖源。甜菊糖生產(chǎn)公司利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁育甜葉菊，滿足用糖行業(yè)的生產(chǎn)需求。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．快速繁殖甜葉菊利用了細(xì)胞全能性原理B．外植體需要用酒精和次氯酸鈉溶液消毒C．快速繁殖過(guò)程始終在無(wú)光照條件下進(jìn)行D．微型繁殖技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是高效、快速和高保真C考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）2.作物脫毒:1.作物脫毒的原因：作物病毒積累取材：分生區(qū)（如莖尖、根尖：病毒極少，甚至無(wú)毒）(植物組織培養(yǎng))脫毒苗2.脫毒部位及方法：4.脫毒苗優(yōu)點(diǎn)：

脫毒作物的產(chǎn)量和品質(zhì)明顯優(yōu)于沒(méi)有脫毒的作物3.原理：植物組織培養(yǎng)（全能性）5.脫毒作物實(shí)例：馬鈴薯、草莓、大蒜、甘蔗、菠蘿和香蕉等。脫毒苗≠抗毒苗考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）例4．超低溫冷凍脫毒法是先用超低溫對(duì)細(xì)胞進(jìn)行選擇性破壞，再用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒植株的方法。以馬鈴薯莖尖為材料，采用超低溫冷凍脫毒法可獲得脫毒苗。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．用莖尖能夠獲得脫毒苗的原因是植物頂端分生區(qū)病毒極少或無(wú)病毒B．經(jīng)超低溫冷凍脫毒培養(yǎng)的馬鈴薯比未脫毒的馬鈴薯抗病毒能力更強(qiáng)C．該技術(shù)利用了莖尖分生組織無(wú)成熟液泡不易形成冰晶的特性D．超低溫處理使大多數(shù)細(xì)胞都受到了損傷而死亡，存活下來(lái)的僅有生長(zhǎng)點(diǎn)的分生組織細(xì)胞B考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:有性雜交單倍體植株矮小且多為不育花藥離體培養(yǎng)優(yōu)良品種花藥花粉P單倍體純合二倍體誘導(dǎo)染色體加倍選擇F1考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:花藥離體培養(yǎng)得到單倍體幼苗，秋水仙素處理抑制有絲分裂前期紡錘體的形成，染色體加倍得到穩(wěn)定遺傳（純合子）的優(yōu)良品種。1.過(guò)程:后代都是純合子，能穩(wěn)定遺傳明顯縮短育種年限，加速育種進(jìn)程作為體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料3.優(yōu)點(diǎn):染色體（數(shù)目）變異、植物細(xì)胞的全能性。2.原理:考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（作物新品種的培育）1.單倍體育種:3.優(yōu)點(diǎn):雜交育種單倍體育種紫色非甜玉米

AASS×白色甜玉米

aass紫色非甜玉米AaSs↓ASAsaSas花藥離體培養(yǎng)單倍體幼苗：ASAsaSas純合體:秋水仙素處理染色體加倍AASSAAssaaSSaass選擇紫甜玉米即為新品種P：紫色非甜玉米

AASS×白色甜玉米

aassF1紫色非甜玉米AaSs第1年×選育出紫甜的純種F2A_S_A_ssaaS_aass紫甜第2年第3年×生長(zhǎng)A_ssF3第4年配子：P：考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）例5．為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無(wú)籽相橘，研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①可使用纖維素酶和果膠酶處理B．過(guò)程②可用高Ca2+—高pH溶液處理C．過(guò)程③的原理是植物細(xì)胞具有全能性D．三倍體植株為可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘的新物種D考點(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）2.突變體育種:組織培養(yǎng)時(shí)，由于培養(yǎng)的細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，易受培養(yǎng)條件和外界壓力（如射線，化學(xué)物質(zhì)等）的影響而產(chǎn)生突變。3.原理：2.過(guò)程：外植體新品種篩選培育愈傷組織脫分化多種突變體誘導(dǎo)分化誘變處理基因突變和植物細(xì)胞的全能性。1.概念：4.優(yōu)點(diǎn)：5.缺點(diǎn)：提高變異的頻率，加速育種進(jìn)程。大幅度地改良某些性狀。難以控制突變方向，有利性狀比較少，需要大量處理實(shí)驗(yàn)材料。6.運(yùn)用：抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿的煙草等?？键c(diǎn)二：植物細(xì)胞工程應(yīng)用（植物繁殖的新途徑）例6．我國(guó)鹽堿地規(guī)模大，但主要糧食作物難以生長(zhǎng)。下圖是某科研小組嘗試?yán)闷胀ㄋ荆?n=24）培育耐鹽水稻新品種的育種方案，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)程①屬于誘變育種，育種原理是基因突變B．秋水仙素作用于有絲分裂的后期，其原理是抑制著絲粒的分裂C．過(guò)程③是單倍體育種，其優(yōu)點(diǎn)是明顯縮短育種年限D(zhuǎn)．過(guò)程②多代自交、篩選的目的是提高純合子的比例BPART03動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。2.培養(yǎng)基：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本條件營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)其他條件<<糖類(lèi)氨基酸無(wú)機(jī)鹽維生素?zé)o菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基。含人類(lèi)未知、細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所必需的物質(zhì)，滿足細(xì)胞對(duì)未知營(yíng)養(yǎng)成分的需求。培養(yǎng)基的構(gòu)成：合成培養(yǎng)基+血清等天然成分一般使用液體培養(yǎng)基，也稱(chēng)為培養(yǎng)液。考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3.培養(yǎng)條件：(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：無(wú)菌①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理②在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作無(wú)毒定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過(guò)程中的微生物污染(2)溫度、PH、滲透壓：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為_(kāi)_______①適宜的溫度：36.5±0.5℃7.2-7.4維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以___________為宜；維持適宜滲透壓的目的______________________②適宜的pH：③適宜的滲透壓：(3)氣體環(huán)境：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有_____和______用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,在含有____________和__________的混合氣體的__________O2CO295%空氣5%CO2CO2培養(yǎng)箱①組成②培養(yǎng)儀器考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)分瓶取動(dòng)物組織用機(jī)械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中傳代培養(yǎng)細(xì)胞分裂受阻懸浮生長(zhǎng)貼壁生長(zhǎng)密度過(guò)大、有害代謝物積累和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等原因接觸抑制原因解決辦法傳代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)取動(dòng)物組織制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進(jìn)行原代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4.過(guò)程：考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)前處理取材培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分特有成分植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖離體用機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶將組織細(xì)胞分散開(kāi)離體植物器官、組織、細(xì)胞動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官固體液體(又稱(chēng)培養(yǎng)液)有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分植物激素糖類(lèi)、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及一些天然成分如血清植物激素血清5.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)例7．對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中必須保證培養(yǎng)環(huán)境是無(wú)菌、無(wú)毒的D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等天然成分B考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（干細(xì)胞）1.干細(xì)胞概念和分布動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留的少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類(lèi)型的細(xì)胞。存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血。2.干細(xì)胞類(lèi)型和特點(diǎn)(1)胚胎干細(xì)胞：ES細(xì)胞分布特點(diǎn)局限性早期胚胎中具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。必須從胚胎中獲取，涉及倫理問(wèn)題；因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。分布特點(diǎn)成體組織或器官內(nèi)具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力(2)成體干細(xì)胞：發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的、應(yīng)用最成熟的實(shí)例面臨的問(wèn)題運(yùn)用展望存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用?？键c(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（干細(xì)胞）(3)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞：iPS細(xì)胞①概念通過(guò)體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞②誘導(dǎo)及流程病人各種類(lèi)型的細(xì)胞導(dǎo)入特定基因?qū)胩囟ǖ鞍仔》肿踊衔锍衫w維細(xì)胞T細(xì)胞B細(xì)胞iPS細(xì)胞分化取出移植③優(yōu)點(diǎn)④運(yùn)用①誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎②iPS細(xì)胞可來(lái)源于病人自身體細(xì)胞，移植回病人體內(nèi)后，理論上可避免免疫排斥反應(yīng)。①可治療鐮狀細(xì)胞貧血癥②在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展⑤問(wèn)題：存在著導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)考點(diǎn)三：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（干細(xì)胞）例9.某學(xué)術(shù)期刊發(fā)表論文稱(chēng)，利用人類(lèi)多能干細(xì)胞培養(yǎng)的皮膚類(lèi)器官在培養(yǎng)4～5個(gè)月后，形成了多層皮膚組織，包含毛囊、皮脂腺和神經(jīng)元回路，是迄今最逼真的人皮膚類(lèi)器官。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A.多能干細(xì)胞形成多層皮膚組織的過(guò)程中，遺傳物質(zhì)通常會(huì)發(fā)生改變B.多能干細(xì)胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織，說(shuō)明動(dòng)物的體細(xì)胞具有全能性C.給燒傷病人移植自身多能干細(xì)胞培養(yǎng)成的皮膚類(lèi)器官可減弱免疫排斥

反應(yīng)D.該項(xiàng)研究結(jié)果表明多能干細(xì)胞可以分化成為人體內(nèi)所需的各種組織和

器官CPART04動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體考點(diǎn)四：動(dòng)物融合技術(shù)和單克隆抗體（動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)）1.概念2.原理3.誘導(dǎo)方法使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性物理法：電融合法化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活病毒誘導(dǎo)法滅活：是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝集，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。4.結(jié)果5.意義6.運(yùn)用形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息的雜交細(xì)胞突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。至今，種間、屬間、科間，甚至動(dòng)物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得成功。考點(diǎn)四：動(dòng)物融合技術(shù)和單克隆抗體（動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)）植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理

步驟酶解法去掉

后，誘導(dǎo)

融合，形成

，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)形成

。

分散成

后誘導(dǎo)細(xì)胞融合，形成

。

方法聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋—高pH融合法、電融合法、離心法PEG融合法、電融合法、

誘導(dǎo)法結(jié)果形成____________

形成

，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品意義打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種突破有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞壁原生質(zhì)體雜種細(xì)胞雜種植株單個(gè)細(xì)胞雜交細(xì)胞滅活病毒雜種植株雜交細(xì)胞考點(diǎn)四：動(dòng)物融合技術(shù)和單克隆抗體（單克隆抗體及其應(yīng)用）單克隆抗體雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞體外或體內(nèi)培養(yǎng)第一次篩選骨髓瘤細(xì)胞

誘導(dǎo)融合分泌特異抗體的雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞群提取已免疫的B淋巴細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備注射抗原選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)第二次篩選克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)既能大量繁殖又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體1.作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速特點(diǎn)2.用于治療疾病和運(yùn)載藥物優(yōu)點(diǎn)：位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小考點(diǎn)四：動(dòng)物融合技術(shù)和單克隆抗體（單克隆抗體及其應(yīng)用）（1）該過(guò)程中應(yīng)用到的技術(shù)_______________________________________（2）原理_______________________________________（3）注射特定抗原的目的___________________________________________________________________________（4）誘導(dǎo)融合方法______________________________________,動(dòng)物細(xì)胞特有的方法為_(kāi)__________________動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖用特定抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠脾中得到產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法滅活病毒誘導(dǎo)法（5）第一次篩選的目的______________________,第一次如何篩選___________________________

原理_________________________________________________________________________________篩選獲得雜交瘤細(xì)胞用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選選擇培養(yǎng)基上，未融合親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)（6）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)__________________________________（7）第二次篩選的目的________________________________________________如何篩選___________________________________________________選擇抗體檢測(cè)呈___性的雜交瘤細(xì)胞，即_____________

_____________（8）抗體檢測(cè)原理_______________________________________獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（進(jìn)行多次篩選）分泌的抗體能與特定的抗原結(jié)合抗原和抗體能夠特異性結(jié)合(分子水平的鑒定）既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體（9）如何獲取大量所需雜交瘤細(xì)胞__________________________________________（10）如何獲取單克隆抗體①體外培養(yǎng)_____________________，②小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)____________________（11）單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)_________________________________________________________________________在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)(接種于培養(yǎng)液中)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取從小鼠腹水中獲取能準(zhǔn)確識(shí)別抗原細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備陽(yáng)考點(diǎn)四：動(dòng)物融合技術(shù)和單克隆抗體例10．新型冠狀病毒可通過(guò)表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。下圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關(guān)敘述，正確的是（）A．研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射刺突蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫以獲得相應(yīng)抗體B．在產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠脾臟細(xì)胞中提取B淋巴細(xì)胞并誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合C．經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)后可直接用于單克隆抗體的生產(chǎn)D．單克隆抗體可用來(lái)治療癌癥的原因是單克隆抗體能殺傷癌細(xì)胞BPART05動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物考點(diǎn)五：動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.概念：

將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。2.原理：3.生殖方式：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性無(wú)性生殖為什么非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物體細(xì)胞核移植非常困難？原因一：供體的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài)，這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低。原因二：非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善。卵母細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞去核取核移入重組細(xì)胞新胚胎克隆動(dòng)物發(fā)育發(fā)育采集卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到MⅡ期從供體高產(chǎn)奶牛身上取體細(xì)胞顯微操作去核對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)去核的卵母細(xì)胞供體細(xì)胞電融合法將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞重構(gòu)胚早期胚胎將胚胎移入受體（代孕）母牛體內(nèi)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛早期胚胎培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合體細(xì)胞核移植用到的技術(shù)早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植激活重構(gòu)胚使其完成

細(xì)胞分裂和發(fā)育過(guò)程考點(diǎn)五：動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.采集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至_____________________2.選擇MⅡ期卵母細(xì)胞的原因：①____________________________________②_________________________

③_________________________3.卵母細(xì)胞去核的方法_________________4.“去核”去的是什么？________________________5.去核的原因________________________________________________________MⅡ期（減數(shù)分裂Ⅱ中期）含有促進(jìn)細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)細(xì)胞體積大，易于操作顯微操作（去核）法紡錘體-染色體復(fù)合物卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富使核移植得到的胚胎或動(dòng)物核內(nèi)遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物6.供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)_____________________________7.誘導(dǎo)融合的方法____________________8.融合的結(jié)果______________________________9.重構(gòu)胚概念_________________________________________對(duì)卵母細(xì)胞損傷較小注意：實(shí)質(zhì)是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞的透明帶內(nèi)電融合法供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力10.激活重構(gòu)胚的方法：①物理方法___________②化學(xué)方法___________________________________11.以上方法處理重構(gòu)胚的目的_____________________________________________________12.實(shí)驗(yàn)結(jié)論__________________________________________________電刺激Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過(guò)程證明了動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性考點(diǎn)五：動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物考點(diǎn)五：動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物例11．下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是（）A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B．作物脫毒依據(jù)的原理是植物頂端成熟區(qū)附近幾乎無(wú)病毒C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA同時(shí)來(lái)自核供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞DPART06胚胎工程技術(shù)考點(diǎn)六：胚胎工程技術(shù)（理論）受精精子獲能受精前的準(zhǔn)備卵子準(zhǔn)備MⅡ期具備受精能力雌性動(dòng)物的生殖道或培養(yǎng)到獲能液(肝素或Ca2+載體)中精子穿過(guò)卵細(xì)胞外結(jié)構(gòu)精子接觸卵細(xì)胞膜精子入卵稱(chēng)為雄原核；卵子釋放第二極體，形成雌原核雌雄原核靠近核膜消失桑葚胚受精卵每個(gè)細(xì)胞能發(fā)育成組成個(gè)體的任何細(xì)胞類(lèi)型及胚外組織囊胚原腸胚卵裂細(xì)胞在透明帶內(nèi)分裂，胚胎總體積并不增加孵化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)滋養(yǎng)層組成個(gè)體的各種組織細(xì)胞胎盤(pán)、胎膜等胚外組織細(xì)胞外胚層內(nèi)胚層中胚層考點(diǎn)六：胚胎工程技術(shù)（體外受精）卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)成熟卵母細(xì)胞精子獲能處理獲能的精子體外受精受精卵雌性哺乳動(dòng)物雄性哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的采集精子的獲取MⅡ期卵母細(xì)胞離心：去除精清，以利于精子獲能(提取純度較高精子)在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程考點(diǎn)六：胚胎工程技術(shù)（胚胎移植）優(yōu)良供體母牛受體母牛受體發(fā)情同期發(fā)情處理超數(shù)排卵處理發(fā)情配種或人工受精胚胎移植收集胚胎并檢查對(duì)受體進(jìn)行妊娠檢查具有優(yōu)良性狀的后代優(yōu)良公牛利用某些激素人為地控制并調(diào)整一群母畜發(fā)情周期的進(jìn)程，使之在預(yù)定時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情。使他們處于相同的生理環(huán)境，這樣供體的胚胎移入受體后不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。注射外源促性腺激素誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子。沖卵排出早期胚胎問(wèn)題1:什么是同期發(fā)情處理？問(wèn)題2:同期發(fā)情處理的目的是什么？問(wèn)題3:如何進(jìn)行超數(shù)排卵？問(wèn)題4:超數(shù)排卵的目的是什么？問(wèn)題5:沖卵的目的是什么？正常繁殖或兩三個(gè)月后進(jìn)行另一次移植考點(diǎn)六：胚胎工程技術(shù)（胚胎移植）（1）該過(guò)程中兩次使用激素：第一次對(duì)受、供體進(jìn)行同期發(fā)情處理；第二次用于供體的超數(shù)排卵。（2）該過(guò)程中的兩次檢查：第一次對(duì)收集的胚胎進(jìn)行檢查；第二次對(duì)受體母牛是否妊娠進(jìn)行檢查。（3）胚胎移植成功與否要有兩個(gè)條件：