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2023-2024學(xué)年新疆沙雅縣第二中學(xué)高三(最后沖刺)生物試卷考生請(qǐng)注意:1.答題前請(qǐng)將考場(chǎng)、試室號(hào)、座位號(hào)、考生號(hào)、姓名寫(xiě)在試卷密封線(xiàn)內(nèi),不得在試卷上作任何標(biāo)記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫(xiě)在試卷指定的括號(hào)內(nèi),第二部分非選擇題答案寫(xiě)在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.特異性免疫是特異性化學(xué)物質(zhì)引起的機(jī)體特異性免疫應(yīng)答,以下說(shuō)法正確的是()A.HIV識(shí)別輔助性T細(xì)胞體現(xiàn)了細(xì)胞間有細(xì)胞通訊的作用B.單抗可用來(lái)研究相應(yīng)抗原蛋白的細(xì)胞學(xué)分布及功能C.同一個(gè)體的漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能不同,根本原因是DNA不同D.過(guò)敏反應(yīng)是免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能過(guò)弱引起的機(jī)體功能紊亂2.枯草桿菌野生型與某一突變型的差異見(jiàn)下表,下列敘述正確的是枯草桿菌核糖體S12蛋白第55~58位的氨基酸序列鏈霉素與核糖體的結(jié)合在含鏈霉素培養(yǎng)基中的存活率(%)野生型—P—K—K—P—能0突變型—P—R—K—P—不能100注:P脯氨酸;K賴(lài)氨酸;R精氨酸A.S12蛋白結(jié)構(gòu)改變使突變型具有鏈霉素抗性B.鏈霉素通過(guò)與核糖體結(jié)合抑制其轉(zhuǎn)錄功能C.突變型的產(chǎn)生是由于堿基對(duì)的缺失所致D.鏈霉素可以誘發(fā)枯草桿菌產(chǎn)生相應(yīng)的抗性突變3.下列有關(guān)酶的敘述,錯(cuò)誤的是A.低溫能改變酶的活性和結(jié)構(gòu)B.酶的合成不一定需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體C.脂肪酶變性失活后加雙縮脲試劑呈紫色D.葉綠體基質(zhì)中不存在ATP合成酶4.科研工作者發(fā)現(xiàn)某核基因能控制p53蛋白的合成,該蛋白可以判斷DNA損傷的程度,若損傷小,該蛋白就促使細(xì)胞自我修復(fù)(過(guò)程如圖所示);若DNA損傷大,則該蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。下列有關(guān)敘述正確的是()A.p53蛋白被激活,則細(xì)胞會(huì)凋亡B.p53蛋白基因在細(xì)胞周期的合成期復(fù)制C.抑制p53蛋白基因的表達(dá),細(xì)胞將不能分裂D.p53蛋白可使DNA受損的細(xì)胞分裂間期縮短5.下列敘述中,正確的是()A.用臺(tái)盼藍(lán)給動(dòng)物細(xì)胞染色,染成藍(lán)色的是活細(xì)胞B.用雙縮脲與蛋白質(zhì)發(fā)生作用,將使蛋白質(zhì)呈現(xiàn)紫色C.用甲基綠染色劑給細(xì)胞染色,僅使RNA呈現(xiàn)綠色D.用健那綠染液給活細(xì)胞染色,可使線(xiàn)粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色6.下圖表示神經(jīng)纖維某處受到不同刺激后產(chǎn)生的電位變化。下列分析正確的是()A.指尖受到傷害性刺激時(shí)馬上縮手和產(chǎn)生疼痛的過(guò)程是兩種不同的反射B.a(chǎn)~g區(qū)段說(shuō)明刺激不達(dá)到一定強(qiáng)度(閾值)也會(huì)引起神經(jīng)元發(fā)生去極化C.b~c區(qū)段鈉離子內(nèi)流引發(fā)動(dòng)作電位,d~e區(qū)段鉀離子外流恢復(fù)為靜息電位D.圖中動(dòng)作電位的形成和恢復(fù)的全部過(guò)程只需5毫秒,說(shuō)明神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度很快7.下列有關(guān)“21三體綜合征”的敘述,正確的是A.患者體細(xì)胞中含有3個(gè)染色體組B.患者也能產(chǎn)生正常的生殖細(xì)胞C.父方或母方只有減數(shù)第二次分裂異常時(shí)才可能導(dǎo)致子代患病D.高齡產(chǎn)婦產(chǎn)下21三體綜合征患兒的概率并沒(méi)有明顯增加8.(10分)下列實(shí)驗(yàn)操作可達(dá)到預(yù)期目的的是()A.提取綠葉色素,研磨時(shí)加入70%的乙醇用于溶解色素B.將甘蔗研磨液過(guò)濾后加入適量斐林試劑,可觀(guān)察到磚紅色沉淀C.洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞解離后經(jīng)龍膽紫染色,顯微鏡下可觀(guān)察到深色的染色體D.PCR產(chǎn)物中加入二苯胺試劑后加熱,通過(guò)觀(guān)察是否變藍(lán)判斷有無(wú)目的PCR產(chǎn)物生成二、非選擇題9.(10分)探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段,可用于核酸分子雜交以檢測(cè)目標(biāo)核苷酸序列是否存在。如圖(1)所是某實(shí)驗(yàn)小組制備的兩種探針,圖(2)是探針與目的基因雜交的示意圖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題:(1)核酸探針與目標(biāo)核苷酸序列間的分子雜交遵循________________。設(shè)計(jì)核苷酸序列是核酸探針技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。圖(1)所示的兩種核酸探針(探針2只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理,請(qǐng)分別說(shuō)明理由_________________、_________________________。(2)cDNA探針是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針。制備cDNA探針時(shí),首先需提取、分離獲得____________作為模板,在_______________的催化下合成cDNA探針。利用制備好的β-珠蛋白基因的cDNA探針與β-珠蛋白基因雜交后,出現(xiàn)了如圖(2)中甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”,原因是____________________。(3)基因工程中利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶,應(yīng)將構(gòu)建好的重組DNA導(dǎo)入___________中,再利用SRY基因(某一條性染色體上的某性別決定基因)探針進(jìn)行檢測(cè),將檢測(cè)反應(yīng)呈____________(填陽(yáng)或陰)性的胚胎進(jìn)行移植培養(yǎng)。10.(14分)山楂果漿黏度大,含有豐富的果膠。為提高山楂果汁的產(chǎn)量,某興趣小組從土壤中分離產(chǎn)果膠酶的微生物,并探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響,進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)若要分離產(chǎn)果膠酶菌株,需配制以_______________為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基能分離目的菌株的原因是____________________________________________。(2)將從果園采集的土壤放入適量的無(wú)菌水中,振蕩混勻制成土壤懸液,備用。①為獲得均勻分布的單菌落,先將土壤懸液進(jìn)行____________處理,然后將處理后的土壤懸液接種于______________(物理狀態(tài))培養(yǎng)基上。該方法也可用于測(cè)定產(chǎn)果膠酶菌的數(shù)量,但測(cè)定的菌體數(shù)量通常比實(shí)際值______________________。②若增加對(duì)照組可提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,對(duì)照組的設(shè)置為_(kāi)_________________________。(3)為探究不同溫度對(duì)果膠酶活性的影響,某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)步驟①在甲、乙兩支試管中分別加入5mL山楂泥?2mL果膠酶,并置于10℃恒溫水浴鍋中保溫5分鐘;②將步驟①處理后的果膠酶倒入山楂泥中,混勻后10℃保溫20分鐘;③過(guò)濾混合物,收集濾液,測(cè)定果汁量;④將實(shí)驗(yàn)溫度分別設(shè)置為20℃?30℃?40℃?50℃?60℃?70℃?80℃的條件下,重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟①②③,并測(cè)定、記錄果汁量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(略)上述實(shí)驗(yàn)步驟①②中先分別保溫、再混合的目的是____________________,該實(shí)驗(yàn)通過(guò)______________來(lái)判斷果膠酶活性的大小。11.(14分)為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連,導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物,采用__________技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí),分別在引物中加入上圖所示酶的識(shí)別序列,這樣可以用____________________酶處理兩個(gè)基因后,得到____________端(填圖中字母)相連的融合基因。(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建_______________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間,此過(guò)程的目的是_________________________,進(jìn)一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在____________酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增,對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè),可判斷融合基因是否________。12.利用的誘導(dǎo)體系能夠高效地誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向胰島B細(xì)胞的分化。據(jù)此回答有關(guān)該研究工作的問(wèn)題:(1)將胚胎干細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),向培養(yǎng)液中加入誘導(dǎo)物,兩周后鏡檢發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞呈胰島樣細(xì)胞的變化,這一過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)_______________________。(2)進(jìn)行胰島素釋放實(shí)驗(yàn),檢測(cè)上述細(xì)胞是否具有胰島B細(xì)胞的生理功能:控制培養(yǎng)液中葡萄糖的濃度,檢測(cè)細(xì)胞分泌的胰島素的量,圖甲表示所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)此分析干細(xì)胞誘導(dǎo)成功,得到此結(jié)論的依據(jù)是________________________。(3)體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn):將細(xì)胞移植到患糖尿病的小鼠體內(nèi),測(cè)小鼠血糖,結(jié)果如圖乙所示。該實(shí)驗(yàn)是否支持胰島索釋放實(shí)驗(yàn)的結(jié)論?_____________________。在細(xì)胞移植時(shí),需用同一品系的小鼠進(jìn)行移植,其目的是________________________。(4)在胰島組織中,胰島B細(xì)胞分泌胰島素,胰島A細(xì)胞分泌胰高血糖素,這兩種激素對(duì)血糖濃度的調(diào)節(jié)具有____________,從而共同維持機(jī)體血糖濃度的穩(wěn)態(tài)。(5)指出本研究在實(shí)踐方面的一個(gè)意義________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】
當(dāng)病原體侵入體內(nèi)發(fā)生感染時(shí),巨噬細(xì)胞便會(huì)吞噬入侵的病原體,將它們消化。病原體(如細(xì)菌)被消化,其上的抗原分子被降解成肽,然后與巨噬細(xì)胞的MHC蛋白結(jié)合,形成抗原—MHC復(fù)合體。這種復(fù)合體移動(dòng)到細(xì)胞的表面呈遞出來(lái)。這些巨噬細(xì)胞細(xì)胞膜上的抗原—MHC復(fù)合體,一旦與人體中已經(jīng)存在的淋巴細(xì)胞上的相應(yīng)的受體結(jié)合,便會(huì)在其他因素的輔助下,促使淋巴細(xì)胞分裂,產(chǎn)生大量的淋巴細(xì)胞,啟動(dòng)免疫應(yīng)答?!驹斀狻緼、HIV是病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),所以不能體現(xiàn)細(xì)胞間有細(xì)胞通訊的作用,A錯(cuò)誤;B、單抗具有靈敏度高,特異性強(qiáng)的特點(diǎn),故可用來(lái)研究相應(yīng)抗原蛋白的細(xì)胞學(xué)分布及功能,B正確;C、同一個(gè)體的漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能不同,根本原因是選擇性表達(dá)的結(jié)果,其內(nèi)的核DNA是相同的,C錯(cuò)誤;D、過(guò)敏反應(yīng)是免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能過(guò)強(qiáng)引起的機(jī)體功能紊亂,D錯(cuò)誤。故選B。2、A【解析】
分析圖表可知:突變型和野生型的區(qū)別在于核糖體S12蛋白第56位的氨基酸由賴(lài)氨酸變成了精氨酸,導(dǎo)致鏈霉素?zé)o法與核糖體結(jié)合,突變型的存活率達(dá)到了100%,故突變型枯草桿菌具有了抗鏈霉素的特性?!驹斀狻緼、由分析可知:S12蛋白結(jié)構(gòu)改變使的鏈霉素不能與核糖體結(jié)合,故突變型具有鏈霉素抗性,A正確;B、鏈霉素通過(guò)與核糖體結(jié)合抑制其翻譯功能,B錯(cuò)誤;C、突變型的產(chǎn)生是單個(gè)氨基酸的改變,故可知該突變性狀的產(chǎn)生堿基對(duì)的替換所致,C錯(cuò)誤;D、鏈霉素對(duì)枯草桿菌產(chǎn)生的抗性突變進(jìn)行了選擇,D錯(cuò)誤。故選A。3、A【解析】
A.低溫可以抑制酶的活性,但沒(méi)有破壞酶的空間結(jié)構(gòu),A錯(cuò)誤;B.有些酶的合成不需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工,如RNA,B正確;C.脂肪酶變性失活只是改變了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),仍有肽鍵,可以與雙縮脲試劑反應(yīng)呈現(xiàn)紫色,C正確;D.ATP在葉綠體的類(lèi)囊體薄膜上合成,葉綠體基質(zhì)中發(fā)生的暗反應(yīng)只消耗ATP,而不合成ATP,D正確;故選A。4、B【解析】
圖中DNA發(fā)生損傷后,P53蛋白會(huì)和該DNA結(jié)合,此時(shí)細(xì)胞停止分裂,P53蛋白激活DNA修復(fù)酶;修復(fù)后的細(xì)胞再進(jìn)行正常的細(xì)胞分裂。【詳解】A、據(jù)題干信息顯示,當(dāng)DNA損傷較小時(shí),p53蛋白能激活DNA修復(fù)酶,使細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行的細(xì)胞分裂,A錯(cuò)誤;B、基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段,DNA的復(fù)制發(fā)生在細(xì)胞周期的合成期,B正確;C、當(dāng)DNA沒(méi)有損傷時(shí),細(xì)胞還是正常的分裂,不需要p53蛋白的參與,C錯(cuò)誤;D、DNA復(fù)制過(guò)程如出現(xiàn)受損,則P53蛋白修復(fù)過(guò)程需要相應(yīng)的時(shí)間,使間期延長(zhǎng),D錯(cuò)誤。故選B。5、D【解析】
生物組織中化合物的鑒定:(1)斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)。斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉、蔗糖);(2)蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng);(3)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)鑒定,呈橘黃色(或紅色);(4)淀粉遇碘液變藍(lán);(5)甲基綠能使DNA呈綠色,吡羅紅能使RNA呈紅色?!驹斀狻緼、用臺(tái)盼藍(lán)染色,死的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)被染成藍(lán)色,而活的動(dòng)物細(xì)胞不著色,A錯(cuò)誤;B、檢測(cè)蛋白質(zhì)的是雙縮脲試劑,不是雙縮脲,B錯(cuò)誤;C、甲基綠染液主要使DNA染色,C錯(cuò)誤;D、檢測(cè)活細(xì)胞中的線(xiàn)粒體用健那綠染液,其可使線(xiàn)粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,D正確。故選D。6、B【解析】
人體神經(jīng)調(diào)節(jié)的方式是反射,反射的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧,反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器五部分構(gòu)成,興奮在反射弧上單向傳遞,興奮在突觸處產(chǎn)生電信號(hào)到化學(xué)信號(hào)再到電信號(hào)的轉(zhuǎn)變?!驹斀狻緼、指尖受到傷害性刺激時(shí)馬上縮手是非條件反射,產(chǎn)生疼痛是傳至大腦皮層的痛覺(jué)中樞(神經(jīng)中樞)就有的感覺(jué),沒(méi)有完整的反射弧,不屬于反射,A錯(cuò)誤;B、b點(diǎn)為閾電位,是達(dá)到閾刺激后才可能達(dá)到的一個(gè)電位值,a~g區(qū)段沒(méi)有達(dá)到閾刺激,沒(méi)有產(chǎn)生動(dòng)作電位,但是仍然有去極化發(fā)生,說(shuō)明刺激不達(dá)到一定強(qiáng)度(閾值)也會(huì)引起神經(jīng)元發(fā)生去極化,B正確;C、b~c區(qū)段鈉離子內(nèi)流引發(fā)動(dòng)作電位,d~e區(qū)段鉀離子外流發(fā)生超極化,ef段通過(guò)鈉鉀泵恢復(fù)為靜息電位,C錯(cuò)誤;D、圖中動(dòng)作電位的形成和恢復(fù)的全部過(guò)程只需4毫秒,說(shuō)明神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度很快,D錯(cuò)誤。故選B。7、B【解析】
患者體細(xì)胞中含有21號(hào)染色體比正常多了1條,A錯(cuò)誤;理論上該患者能產(chǎn)生正常的生殖細(xì)胞,B正確;精子或卵細(xì)胞中21號(hào)染色體多一條都會(huì)導(dǎo)致受精作用后形成21三體的受精卵,所以異常細(xì)胞既可來(lái)自父方也可來(lái)自母方,也可能是減數(shù)第一次分裂異常,C錯(cuò)誤;高齡孕婦生育21三體綜合征患兒的風(fēng)險(xiǎn)較高,原因是隨著母親年齡的增大,導(dǎo)致卵細(xì)胞形成過(guò)程中21號(hào)染色體發(fā)生不分離的可能性增加,導(dǎo)致卵細(xì)胞多了一條21號(hào)染色體,D錯(cuò)誤。故選:B。8、C【解析】
本題考查綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)、檢測(cè)還原糖的實(shí)驗(yàn)、觀(guān)察植物細(xì)胞的有絲分裂、DNA鑒定等實(shí)驗(yàn)。觀(guān)察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟:解離(解離液由鹽酸和酒精組成,目的是使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái))、漂洗(洗去解離液,便于染色)、染色(用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料)、制片(該過(guò)程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層,使之不相互重疊影響觀(guān)察)和觀(guān)察(先低倍鏡觀(guān)察,后高倍鏡觀(guān)察)。【詳解】A、研磨葉片時(shí),用無(wú)水乙醇或體積分?jǐn)?shù)為
95%的乙醇溶解色素,A錯(cuò)誤;
B、甘蔗含有蔗糖,是非還原性糖,而斐林試劑是鑒定還原性糖的,B錯(cuò)誤;
C、根尖分生區(qū)細(xì)胞解離后染色,再經(jīng)龍膽紫染色,顯微鏡下可觀(guān)察到深色的染色體,C正確;
D、DNA加入二苯胺試劑后水浴加熱,觀(guān)察到溶液變藍(lán)色,說(shuō)明含有DNA,但不能證明是目的DNA,D錯(cuò)誤。
故選C。二、非選擇題9、堿基互補(bǔ)配對(duì)原則探針1堿基序列過(guò)短,特異性差探針2自身會(huì)出現(xiàn)部分堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶β-珠蛋白基因中含有內(nèi)含子(或不表達(dá)序列)受精卵陰【解析】
分析圖(1):探針一序列為-CAGG-,該序列過(guò)短,特異性差;探針二序列為-CGACT--AGTCG-,該序列有自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效。
分析圖(2):探針與目的基因雜交后,出現(xiàn)甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”?!驹斀狻浚?)核酸探針是單鏈DNA分子,其與目標(biāo)核苷酸序列間的分子雜交遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則。圖(1)中探針1堿基序列過(guò)短,特異性差;探針2自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效。因此這兩種探針都不合理。(2)cDNA是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成的,該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。逆轉(zhuǎn)錄法合成的cDNA不含內(nèi)含子,而β-珠蛋白基因中含有不表達(dá)序列,因此探針利用制備好的β-珠蛋白基因的cDNA探針與β-珠蛋白基因雜交后,出現(xiàn)了如圖二中甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)。(3)利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶時(shí),應(yīng)將構(gòu)建好的重組DNA導(dǎo)入受精卵中,再利用SRY探針進(jìn)行檢測(cè),將檢測(cè)反應(yīng)呈陰性(雌性)的胚胎進(jìn)行移植。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力;應(yīng)用能力和關(guān)注對(duì)科學(xué)、技術(shù)和社會(huì)發(fā)展有重大影響和意義的生物學(xué)新進(jìn)展。10、果膠只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能利用果膠生長(zhǎng)繁殖梯度稀釋固體小在無(wú)菌的條件下,將未接種的培養(yǎng)基置于適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng),觀(guān)察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生使果膠酶和山楂泥處于實(shí)驗(yàn)設(shè)置的同一溫度條件下,進(jìn)行酶促反應(yīng)單位時(shí)間、單位體積產(chǎn)生的果汁量【解析】
選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng),欲分離產(chǎn)果膠酶菌株時(shí),應(yīng)以果膠作為唯一的碳源,只有能產(chǎn)生果膠酶的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖?!驹斀狻浚?)要分離出產(chǎn)果膠酶的菌株,需配制以果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基之所以能分離目的菌株是因?yàn)槌摼晖馄渌瓴缓泄z酶,無(wú)法利用果膠,故無(wú)法在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(2)①為獲得較均勻分布的單菌落,還需要將土壤懸液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)雇寥缿乙旱募?xì)菌密度降低,并用稀釋涂布法接種于固體培養(yǎng)基上。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起生長(zhǎng)時(shí),平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落,所以用上述方法測(cè)定的菌體數(shù)量通常比實(shí)際值少。②若要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,需排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性,故應(yīng)該設(shè)置培養(yǎng)基中未接種(或接種等量無(wú)菌水)的培養(yǎng)皿作為空白對(duì)照。(3)將果膠酶作用的底物與果膠酶先分別保溫,再混合的目的是確保在反應(yīng)時(shí)山楂泥和果膠酶是處于同一溫度的,避免為實(shí)驗(yàn)增加其他影響因素。酶的活性大小可用一定時(shí)間內(nèi)生成物的量來(lái)表示,該實(shí)驗(yàn)是通過(guò)單位時(shí)間、單位體積產(chǎn)生的果汁量的多少來(lái)判斷果膠酶活性的大小。【點(diǎn)睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和選擇以及不同溫度對(duì)酶活性影響的實(shí)驗(yàn),意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的綜合運(yùn)用能力。11、PCRClaⅠ(限制酶)和DNA連接A、D表達(dá)載體(或“重組質(zhì)?!保┧沫h(huán)素利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄【解析】
1、基因文庫(kù)包括cDNA文庫(kù)、基因組文庫(kù)等。某個(gè)群體包含一種生物所有的基因的文庫(kù)叫基因組文庫(kù),而用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段屬于cDNA文庫(kù)。2、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi),因此具有專(zhuān)一性。同種限制酶切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端,便于質(zhì)粒和目的基因連接。【詳解】(1)擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)。切割獲得酶D基因和轉(zhuǎn)基因肽基因時(shí),應(yīng)該用同種限制酶,以獲得相應(yīng)的黏性末端。因此,可用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后,得到A、D端相連的融合基因。
(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構(gòu)建基因表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。由于質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因,所以將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。(3)剪取油菜的葉
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