新高考生物一輪復(fù)習(xí)課后檢測(cè)42基因工程

課后定時(shí)檢測(cè)案42基因工程[基礎(chǔ)鞏固練]——學(xué)業(yè)水平一、二1．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是()A．目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B．限制性?xún)?nèi)切核酸酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)2．在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，對(duì)DNA提取量影響較小的是()A．使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂并釋放出DNA等核物質(zhì)B．?dāng)嚢钑r(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)C．在析出DNA黏稠物時(shí)，要緩緩加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻[提能強(qiáng)化練]——學(xué)業(yè)水平三、四3．[經(jīng)典高考]北極比目魚(yú)中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()A．過(guò)程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序B．將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C．過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D．應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)4．[2021·天津一中高三月考]為提高大豆對(duì)磷元素的吸收能力，研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將水稻的耐低磷基因OsPTF轉(zhuǎn)移到大豆植株中，下圖為重組Ti質(zhì)粒上T－DNA的序列結(jié)構(gòu)示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是()A．以水稻RNA為模板通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增可獲得大量OsPTF基因B．RNA聚合酶與啟動(dòng)子1識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄C．可通過(guò)含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的基因的大豆愈傷組織D．用EcoRⅠ、BamHⅠ酶同時(shí)切重組Ti質(zhì)粒后，經(jīng)電泳分離至少得到兩條不同長(zhǎng)度的帶5.(多選)如圖為某種質(zhì)粒的簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性?xún)?nèi)切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，P為轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，受體細(xì)胞為無(wú)任何抗藥性的原核細(xì)胞。下列有關(guān)敘述不正確的是()A．將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種B．DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來(lái)，形成一個(gè)重組質(zhì)粒時(shí)形成兩個(gè)磷酸二酯鍵C．為了防止目的基因反向連接和質(zhì)粒自行環(huán)化，酶切時(shí)可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠD．受體細(xì)胞能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞6．(多選)根據(jù)某基因上游和下游的堿基序列，設(shè)計(jì)合成了該基因的兩段引物(單鏈DNA)。引物與該基因變性DNA(單鏈DNA)結(jié)合為雙鏈DNA的過(guò)程稱(chēng)為復(fù)性。如圖是兩引物的Tm(引物熔解溫度，即50%的引物與其互補(bǔ)序列形成雙鏈DNA分子時(shí)的溫度)測(cè)定結(jié)果，下列敘述正確的是()A．通常引物1和引物2不能有堿基互補(bǔ)配對(duì)關(guān)系B．兩引物分別是子鏈延伸的起點(diǎn)，并可以反復(fù)利用C．若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，則可推測(cè)引物2的GC含量較高D．復(fù)性所需溫度與時(shí)間，取決于引物的長(zhǎng)度、堿基組成及其濃度等因素[大題沖關(guān)練]——綜合創(chuàng)新·求突破7．[2021·江蘇省常熟市高三階段抽測(cè)]新冠病毒是一種單鏈RNA病毒，常用“熒光RT—PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè)，方法是取檢測(cè)者的mRNA逆轉(zhuǎn)錄出cDNA，并大量擴(kuò)增，時(shí)，用熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)“熒光RT—PCR技術(shù)”所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有：____________、____________________、熒光標(biāo)記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。(2)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因，則試劑盒中的引物應(yīng)該有________種。下圖為新冠病毒的“ORFlab基因”對(duì)應(yīng)的cDNA片段結(jié)構(gòu)示意圖，則與之對(duì)應(yīng)的引物結(jié)合的部位應(yīng)該是圖中的________(子鏈延伸方向?yàn)槠渥陨淼?′→3′，用圖中數(shù)字作答)。若已知該基因的引物I，能否依據(jù)其堿基序列設(shè)計(jì)出另一種引物Ⅱ？________，理由是________________________________________。(3)在檢測(cè)過(guò)程中，隨著PCR的進(jìn)行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加?？赏ㄟ^(guò)熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如下圖)。①“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②理論上，在檢測(cè)過(guò)程中，有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn)，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈________(填“陰”或“陽(yáng)”)性，但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，一般要達(dá)到或超過(guò)閾值時(shí)才確診?，F(xiàn)有兩個(gè)待檢樣本，檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線，但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請(qǐng)給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常，操作過(guò)程規(guī)范且準(zhǔn)確)：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．[2021·汾湖高級(jí)中學(xué)教學(xué)反饋測(cè)試]枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株(B菌)，從中克隆得到了一種纖維素酶(C1酶)基因。將獲得的C1酶基因與高效表達(dá)載體(HT質(zhì)粒)連接，再導(dǎo)入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。(1)纖維素屬于________糖，因此經(jīng)過(guò)一系列酶催化最終可降解成單糖，該單糖是________。(2)對(duì)克隆到的C1酶基因測(cè)序，與數(shù)據(jù)庫(kù)中的C1酶基因編碼序列相比有兩個(gè)堿基對(duì)不同，但兩者編碼出的蛋白的氨基酸序列相同，這是因?yàn)開(kāi)_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?′→3′。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接，克隆C1酶基因時(shí)在其兩端添加了SmaI和BamHI的酶切位點(diǎn)。該基因內(nèi)部沒(méi)有這兩種酶切位點(diǎn)。圖1中酶切位點(diǎn)1和2所對(duì)應(yīng)的酶分別是__________________。(4)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組，一組接種工程菌，對(duì)照組1不進(jìn)行處理，對(duì)照組2進(jìn)行相應(yīng)處理。在相同條件下培養(yǎng)96小時(shí)，檢測(cè)培養(yǎng)基中纖維素的含量。結(jié)果(圖2)說(shuō)明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)。對(duì)照組2的處理應(yīng)為_(kāi)_____________________________。(5)預(yù)期該工程菌在處理廢棄物以保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用__________________________________________________。(舉一例)9．[2021·廣州市高三年級(jí)階段訓(xùn)練]蟲(chóng)草中的超氧化物歧化酶(PSSOD)具有抗衰老作用。研究人員培育了能合成PSSOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌。結(jié)合下圖回答下列問(wèn)題。注：HindⅢ和ApaLⅠ是兩種限制酶，箭頭表示酶的切割位置。(1)將圖中的重組DNA分子用HindⅢ和ApaLⅠ完全酶切后，可得到________種DNA片段。(2)作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基________(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為_(kāi)_______。為了確定受體細(xì)胞中PSSOD基因是否轉(zhuǎn)錄，可用標(biāo)記的________________作探針與從受體細(xì)胞中提取的RNA進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，分子雜交的原理是________________________。(4)利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的PSSOD時(shí)，需根據(jù)所設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)其氨基酸序列，最終確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列并經(jīng)____________________獲得所需的基因。10．[2021·江西省梧州市臨川一中高三月考]玉米是世界上的第三大糧食作物，廣泛種植于世界各地。研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)玉米中的細(xì)菌Bt基因能表達(dá)一種毒蛋白，這種毒蛋白能有效殺死玉米螟(一種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng))。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)Bt基因在基因工程中稱(chēng)為_(kāi)___________。在基因表達(dá)載體中，除了要有Bt基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子和____________。若將Bt基因插入到Ti質(zhì)粒的________上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使其導(dǎo)入玉米細(xì)胞并將其插入到玉米細(xì)胞中的染色體上。(2)Bt基因與載體結(jié)合過(guò)程中需要限制性?xún)?nèi)切核酸酶和DNA連接酶。若某限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是eq\x(↓,,,—GGATCC—)，請(qǐng)畫(huà)出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端________________。DNA連接酶對(duì)所連接的兩端堿基序列________(填“有”或“沒(méi)有”)專(zhuān)一性要求。(3)為了防止抗蟲(chóng)玉米通過(guò)花粉傳播帶來(lái)的生態(tài)學(xué)問(wèn)題，科研小組考慮將抗蟲(chóng)基因?qū)氲接衩赘饧?xì)胞的________中以防止基因污染，同時(shí)在大規(guī)模種植的抗蟲(chóng)玉米田中設(shè)置一個(gè)或多個(gè)避難所種植普通玉米，目的是________________________。11．[2021·廣東省茂名市五校聯(lián)盟高三聯(lián)考]大約有超過(guò)1/3的非洲人靠木薯獲取超過(guò)一半的熱量，然而以木薯為主食會(huì)營(yíng)養(yǎng)不均衡，鐵和鋅的缺乏在非洲非常常見(jiàn)，嚴(yán)重影響了人體健康。科學(xué)家從植物擬南芥中獲得IRTⅠ基因(編碼鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)和FERⅠ基因(編碼鐵儲(chǔ)存蛋白)，從而獲得鐵、鋅含量高的木薯?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)從擬南芥細(xì)胞中獲得IRTⅠ基因的mRNA通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，該cDNA不包括基因中的________________部分，用該cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)需要設(shè)計(jì)兩種引物，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，其目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________，一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是________________________________。(3)將目的基因?qū)肽臼砑?xì)胞中常用______________法，生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，損傷的木薯植物更容易被轉(zhuǎn)化，原因是傷口處的細(xì)胞分泌大量的__________，利于農(nóng)桿菌的侵染。(4)IRTⅠ基因和FERⅠ基因已經(jīng)整合到轉(zhuǎn)基因植株的基因組中，但運(yùn)輸鐵的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則的內(nèi)容分析，最可能的原因是__________________________________。12．[2021·廣東省名校聯(lián)盟高三聯(lián)考]質(zhì)粒通常用來(lái)構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的核心。構(gòu)建基因表達(dá)載體前首先要獲取目的基因，PCR是獲取大量目的基因的一種方法，如一個(gè)DNA片段上有10種基因，現(xiàn)只需要其中的某個(gè)基因，PCR技術(shù)就可以實(shí)現(xiàn)在生物體外復(fù)制特定DNA片段(目的基因)的目的。(1)PCR反應(yīng)體系的成分中有兩種引物，在復(fù)性時(shí)引物會(huì)結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈，對(duì)兩種引物的設(shè)計(jì)要求之一是：兩種引物之間不能堿基互補(bǔ)配對(duì)，試分析原因________________________________________________________________________________________________________________________________________________；PCR反應(yīng)體系的成分中能夠決定復(fù)制特定DNA片段的是________(填“模板”“引物”或“Taq酶”)；從引物設(shè)計(jì)的角度考慮，如果目的基因兩側(cè)沒(méi)有酶切位點(diǎn)，用PCR技術(shù)________(填“可以”或“不可以”)為目的基因設(shè)置酶切位點(diǎn)。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子和終止子，啟動(dòng)子的本質(zhì)是____________，其為_(kāi)___________識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。(3)圖1表示質(zhì)粒載體，圖2表示插入了目的基因的重組質(zhì)粒，被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有兩種，分別是含有質(zhì)粒載體和含有插入目的基因的重組質(zhì)粒，結(jié)合圖示，這兩種大腸桿菌可以用圖中________抗性基因進(jìn)行篩選。課后定時(shí)檢測(cè)案421．解析：目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物，A正確；限制性?xún)?nèi)切核酸酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶，B正確；胰島素具有生物活性，胰島素原不具有生物活性，所以人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性，C正確；載體上的抗性基因可用于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，D錯(cuò)誤。答案：D2．解析：A項(xiàng)的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子，使進(jìn)入濾液中的DNA盡量的多；C、D項(xiàng)是讓DNA充分沉淀，保證DNA的量；B項(xiàng)的操作并不能使DNA增多或減少。答案：B3．解析：過(guò)程①獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚(yú)基因組測(cè)序，A錯(cuò)誤；多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因表達(dá)的是多個(gè)抗凍蛋白的重復(fù)序列，而不是抗凍蛋白中11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入番茄細(xì)胞，C錯(cuò)誤；DNA探針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá)，目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。答案：B4．解析：以水稻RNA為模板通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄可以合成cDNA，然后再以cDNA為模板利用PCR技術(shù)可獲得大量OsPTF基因，A正確；識(shí)圖分析可知，抗除草劑基因位于啟動(dòng)子2的后面，因此RNA聚合酶與啟動(dòng)子2識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；由于圖中T－DNA的序列中含有目的基因和抗除草劑基因，故可通過(guò)含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的基因的大豆愈傷組織，C正確；用EcoRⅠ、BamHⅠ雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，會(huì)得到三種片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、含有除草劑基因的片段和只含啟動(dòng)子1的片段，因此經(jīng)電泳分離至少得至兩條帶，即含耐低磷基因OsPTF的片段和含有除草劑基因的片段，D正確。答案：B5．解析：DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來(lái)，因此將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物共有3種，即質(zhì)粒與質(zhì)粒的連接、目的基因與目的基因的連接、目的基因與質(zhì)粒的連接，A錯(cuò)誤；DNA連接酶的作用是將酶切后得到的具有相同黏性末端的DNA片斷連接起來(lái)，形成一個(gè)重組質(zhì)粒時(shí)可形成4個(gè)磷酸二酯鍵，B錯(cuò)誤；EcoRⅠ和BamHⅠ切割形成的黏性末端不同，而DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來(lái)，因此為了防止目的基因反向連接和質(zhì)粒自行環(huán)化，酶切時(shí)可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ，C正確；題圖顯示，在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中質(zhì)粒中的青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都不會(huì)被破壞，導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌和導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌都能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，因此能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞不一定含有目的基因，D錯(cuò)誤。答案：ABD6．解析：通常引物1和引物2不能有堿基互補(bǔ)配對(duì)關(guān)系，以免二者結(jié)合，A正確；兩引物參與子鏈的形成，不能反復(fù)利用，B錯(cuò)誤；若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，引物2的熔解溫度較高，推測(cè)GC含量較高，C正確；結(jié)合以上分析可知，復(fù)性所需溫度與時(shí)間，取決于引物的長(zhǎng)度、堿基組成及其濃度等因素，D正確。答案：ACD7．解析：(1)根據(jù)題目信息可知，熒光PCR法基本原理是：將新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為DNA，通過(guò)采用多重?zé)晒釸T－PCR技術(shù)，因此熒光PCR法所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有：逆轉(zhuǎn)錄酶、熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶)、引物、四種脫氧核苷酸、緩沖體系。(2)根據(jù)PCR技術(shù)的原理，在擴(kuò)增DNA分子時(shí)每一條鏈均需與相應(yīng)的引物結(jié)合才能進(jìn)行擴(kuò)增，因此如果要成功將上述兩個(gè)獨(dú)立基因分別擴(kuò)增出來(lái)，則在試劑盒中的引物應(yīng)該有4種；在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA分子過(guò)程中，DNA聚合酶只能從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，又由于DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，所以引物與DNA分子單鏈的3′端(—OH)相結(jié)合即圖示中的1和4所示部位。由于兩段引物的堿基序列沒(méi)有相關(guān)性，既不相同，也不互補(bǔ)，因此不能根據(jù)該基因的引物Ⅰ的堿基序列設(shè)計(jì)出另一種引物Ⅱ。(3)①分析熒光擴(kuò)增曲線圖，圖中曲線通過(guò)熒光強(qiáng)度變化反映產(chǎn)物量的變化，因此曲線中“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能原因是試劑盒中的原料和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)數(shù)后，熒光標(biāo)記的雜交雙鏈不再增加。②理論上，在檢測(cè)過(guò)程中，有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn)，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，一般要達(dá)到或超過(guò)閾值時(shí)才確診。先檢測(cè)結(jié)果甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移，說(shuō)明甲樣本中的新冠病毒含量更高達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄酶熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶)(2)44、1不能兩段引物的堿基序列沒(méi)有相關(guān)性(既不相同，也不互補(bǔ))(3)試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)數(shù)后，熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加陽(yáng)甲樣本中的新冠病毒含量更高達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少8．解析：(1)纖維素是葡萄糖聚合形成的多糖，所以經(jīng)過(guò)酶的催化作用，最終降解為葡萄糖。(2)由于密碼子具有簡(jiǎn)并性，所以即使克隆到的C1酶基因測(cè)序，與數(shù)據(jù)庫(kù)中的C1酶基因編碼序列相比有兩個(gè)堿基對(duì)不同，仍然可以編碼相同的氨基酸。(3)根據(jù)題干信息“以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?′→3′”，所以B鏈的方向是從3′→5′，根據(jù)質(zhì)粒上啟動(dòng)子的方向，所以B鏈3′應(yīng)該用BamHⅠ進(jìn)行切割，而其5′端應(yīng)該用Sma′進(jìn)行切割。(4)本實(shí)驗(yàn)的目的是證明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)，所以對(duì)照組1不作處理，組3是添加工程菌，組2的處理是用直接用纖維素酶進(jìn)行分解纖維素，即向培養(yǎng)基中接種纖維素酶(C1酶)。(5)該工程菌可以高效降解纖維素，所以可以降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來(lái)的空氣污染。答案：(1)多葡萄糖(2)密碼子具有簡(jiǎn)并性，發(fā)生堿基的改變?nèi)匀痪幋a同一種氨基酸(3)BamHⅠ、SmaⅠ(順序不能調(diào)換)(4)向培養(yǎng)基中接種纖維素酶(C1酶)(5)降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來(lái)的空氣污染9．解析：(1)圖中基因表達(dá)載體含有1個(gè)HindⅢ切割位點(diǎn)和2個(gè)ApaLⅠ切割位點(diǎn)，因此將圖中的基因表達(dá)載體用HindⅢ和ApaLⅠ完全酶切后，可得到3種DNA片段。(2)作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此，圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為標(biāo)記基因，供鑒定和選擇；因?yàn)橹挥泻兄亟M質(zhì)粒的酵母菌才能在該培養(yǎng)基上生存，因此為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基不需要添加尿嘧啶。(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。為了確定受體細(xì)胞中PSSOD基因是否轉(zhuǎn)錄，可用標(biāo)記的PSSOD基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，由于該檢測(cè)中是RNA與DNA單鏈進(jìn)行雜交，因此分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)。(4)利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的PSSOD時(shí)，需根據(jù)所設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)其氨基酸序列，最終確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，確定下來(lái)之后需要在原基因基礎(chǔ)上進(jìn)行基因修飾或者基因改造，甚至直接人工合成獲得所需的基因。答案：(1)3(2)不需要成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌具有URA3基因(意思相同的其他表述亦可得分)(3)轉(zhuǎn)化PSSOD基因的片段(“PSSOD基因”)堿基互補(bǔ)配對(duì)(4)基因修飾或“基因合成”“人工合成”10．解析：(1)根據(jù)題干意思，Bt基因?yàn)槟康幕?；基因表達(dá)載體，需要目的基因、啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因；若將Bt基因插入到Ti質(zhì)粒的T－DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使其導(dǎo)入玉米細(xì)胞并將其插入到玉米細(xì)胞中的染色體上。(2)根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端為，DNA連接酶作用的位點(diǎn)是磷酸二酯鍵，故沒(méi)有專(zhuān)一性。(3)為了防止抗蟲(chóng)玉米通過(guò)花粉傳播帶來(lái)的生態(tài)學(xué)問(wèn)題，科研小組考慮將抗蟲(chóng)基因?qū)氲接衩赘饧?xì)胞的線粒體中以防止基因污染，同時(shí)在大規(guī)模種植的抗蟲(chóng)玉米田中設(shè)置一個(gè)或多個(gè)避難所種植普通玉米，目的是延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)(或減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速度)。答案：(1)目的基因標(biāo)記基因T－DNA(2)沒(méi)有(3)線粒體延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)(或減緩害蟲(chóng)抗性基因頻率增加的速度)1