腫瘤免疫和檢驗

關(guān)于腫瘤免疫和檢驗

腫瘤免疫和檢驗第2頁,共54頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)概述

實踐表明，內(nèi)在的遺傳因素、免疫狀態(tài)和外部的誘變因子，是構(gòu)成腫瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)和條件。其中，機體的免疫狀態(tài)，尤其是細胞免疫功能的強弱，已被視為是否發(fā)生腫瘤的重要內(nèi)在因素。第3頁,共54頁，2024年2月25日，星期天最普遍的惡性腫瘤死亡原因第4頁,共54頁，2024年2月25日，星期天臨床：病史、體癥物理檢查：X光、CT、磁共振、B超

術(shù)前：穿刺、刮片、拉網(wǎng)術(shù)后：組織切片免疫：腫瘤抗原和代謝物測定分子生物：腫瘤相關(guān)基因分析腫瘤診斷輔助病理第5頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤抗原（tumorantigen）：是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達的抗原物質(zhì)。第6頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤的發(fā)展及診斷期第7頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤的免疫逃避機制？腫瘤細胞缺乏有效的抗原性表位，難以觸發(fā)足夠的抗腫瘤免疫效應(yīng)腫瘤細胞的MHC分子表達發(fā)生改變，異常表達的MHC分子，有礙機體免疫細胞對腫瘤細胞的識別，影響抗原遞呈作用不能正常表達B7等活化免疫細胞的共刺激分子和黏附分子患者血清中存在著封閉因子。腫瘤細胞產(chǎn)生的某些細胞因子對T細胞的產(chǎn)生有抑制作用腫瘤細胞表達FasL，和活化CTL的Fas結(jié)合，介導(dǎo)CTL凋亡第8頁,共54頁，2024年2月25日，星期天體液免疫效應(yīng)（熟悉）激活補體的溶細胞作用介導(dǎo)殺傷細胞的細胞毒作用調(diào)理吞噬作用干擾腫瘤細胞的生物學(xué)行為其他作用第二節(jié)機體的抗腫瘤免效應(yīng)機制第9頁,共54頁，2024年2月25日，星期天細胞免疫效應(yīng)T細胞生物學(xué)效應(yīng)包括T細胞的直接殺傷和對免疫系統(tǒng)其它成分的活化。（1）CD4陽性的輔助T細胞（2）CD8陽性的細胞毒T細胞第10頁,共54頁，2024年2月25日，星期天（1）CD4陽性的輔助T細胞與腫瘤免疫關(guān)系密切的是Th1細胞。Th1的激活：腫瘤抗原+抗原遞呈細胞（樹突狀細胞）+MHCII類分子Th1的效應(yīng)：通過釋放細胞因子（TNF，IFN-γ）發(fā)揮抗腫瘤作用。

第11頁,共54頁，2024年2月25日，星期天（2）CD8陽性的細胞毒T細胞是腫瘤免疫的主要途徑。通過釋放毒性物質(zhì)或促發(fā)靶細胞上的死亡受體，而直接溶解靶細胞，或通過分泌IFN-γ間接殺傷腫瘤細胞。第12頁,共54頁，2024年2月25日，星期天NK細胞

NK細胞是宿主固有免疫或一線防御機制的一部分，非MHC限制性，不需要對宿主或其免疫功能進行調(diào)整適應(yīng)。對腫瘤細胞和病毒感染細胞比對大多數(shù)正常細胞更具有毒性作用。其作用機制類似于CTL，還可分泌大量的細胞因子以調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)。

第13頁,共54頁，2024年2月25日，星期天巨噬細胞

活化的巨噬細胞與腫瘤細胞的結(jié)合可觸發(fā)細胞毒活性，細胞毒性介質(zhì)有細胞溶解蛋白酶、TNF-α及其相關(guān)因子、IFN-α和IFN-γ、IL-1，過氧化氫，NO、精氨酸酶。第14頁,共54頁，2024年2月25日，星期天樹突狀細胞

是一類專職抗原遞呈細胞，輔佐T、B細胞參與特異性殺傷腫瘤的過程。制備腫瘤特異性樹突狀細胞以進行腫瘤的生物治療。第15頁,共54頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)腫瘤抗原的分類腫瘤特異性抗原腫瘤相關(guān)性抗原第16頁,共54頁，2024年2月25日，星期天一、腫瘤特異性抗原（TSA）

為腫瘤細胞所特有，只表達于腫瘤細胞，而不存在于任何處于不同發(fā)育階段的正常細胞。1.化學(xué)物質(zhì)誘發(fā)

第17頁,共54頁，2024年2月25日，星期天2.病毒誘發(fā)

無嚴格的特異性，通常由同一種病毒誘發(fā)的所有腫瘤，都具有相同的TSA。血清學(xué)試驗和腫瘤特異性CTL的檢測，均有助于抗原的檢定。其可誘導(dǎo)機體的免疫應(yīng)答，故又被稱為腫瘤特異性移植抗原。其成分多系病毒基因的表達成分。第18頁,共54頁，2024年2月25日，星期天3.自發(fā)自發(fā)腫瘤系無明顯誘因的腫瘤，很難檢測到特異性的抗原標志物，其原因可能有：早期腫瘤細胞及近親本子代細胞一定時間內(nèi)可以表達，但后代細胞因為染色體的隨機突變而失去表達?？赡艽嬖?，但單獨使用抗原抗體方法難以得到確定答案。第19頁,共54頁，2024年2月25日，星期天二、腫瘤相關(guān)抗原（TAA）

指非腫瘤細胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常細胞，但在腫瘤發(fā)生的機體可異常表達，可分為胚胎性抗原和分化抗原兩種類型。

胚胎抗原分化抗原第20頁,共54頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)常見腫瘤的免疫診斷及應(yīng)用原則第21頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤標志物及其特點

是顯示腫瘤存在的生物化學(xué)指示物，其特點與腫瘤相伴產(chǎn)生抗原或激素或酶蛋白存在于血液、體液及組織中可定量或定性檢測到可以作為辨認和追蹤腫瘤存在和發(fā)展的標志第22頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤標志物研究歷史1845Bence-Jones本周蛋白1930ZondekHCG1959Markert同工酶1963AbelevAFP1965Gold&FreemanCEA1969Hubner&Todaro癌基因1975Kohler&Milstein單克隆抗體1978Herberman提出腫瘤標志物概念1979英國第7屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會議

腫瘤標志物被確認并應(yīng)用臨床1980KoprowskiCA19-91981BastetalCA1251981ColcheretalCA72-41984KufeetalCA15-3…...第23頁,共54頁，2024年2月25日，星期天已建立的腫瘤標志物第24頁,共54頁，2024年2月25日，星期天常用腫瘤標志物聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用

腫瘤首選標志物補充標志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睪丸腫瘤AFP、hCG宮頸癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌無TPA、CEA骨髓瘤β2-M、本周蛋白

第25頁,共54頁，2024年2月25日，星期天腫瘤標志物的分類細胞腫瘤標志物：位于細胞中的物質(zhì)或抗原，如激素受體、白血病表型。體液腫瘤標志物：病理情況下，濃度增加時可在血液、尿液或其他體液中測得的物質(zhì)，如AFP、CA19-9、CEA、CA15-3等。腫瘤表型標志物：酶、胚胎性抗原、異位性蛋白、激素等。出現(xiàn)于癌細胞轉(zhuǎn)化和臨床進展階段。腫瘤基因標志物：基因突變、基因表達異常等，出現(xiàn)于癌前起動階段。第26頁,共54頁，2024年2月25日，星期天體液腫瘤標志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：⑴胚胎抗原類：如AFP，CEA等，⑵糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶激素類：如患甲狀腺髓樣癌時降鈣素升高，患絨毛膜細胞癌時hCG明顯升高。⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。⑸蛋白質(zhì)類：β2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等⑹癌基因產(chǎn)物類:如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。第27頁,共54頁，2024年2月25日，星期天特異性好與腫瘤類型(大小/分期)有關(guān)靈敏度高，能腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)。具有器官特異性監(jiān)測腫瘤治療效果監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)

理想的腫瘤標志物預(yù)測腫瘤的預(yù)后第28頁,共54頁，2024年2月25日，星期天一、常見的腫瘤抗原及其意義第29頁,共54頁，2024年2月25日，星期天1.甲胎蛋白（AFP）AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L第30頁,共54頁，2024年2月25日，星期天①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高；②病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300μg/L以下；③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高；④妊娠三個月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。第31頁,共54頁，2024年2月25日，星期天2.癌胚抗原（CEA）1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標志物。參考值：血清CEA<5.0μg/L第32頁,共54頁，2024年2月25日，星期天①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；在惡性腫瘤的隨訪，病情監(jiān)測，療效評價等方面有重要價值。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高；③吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。CEA陽性見于：第33頁,共54頁，2024年2月25日，星期天3.前列腺特異性抗原(PSA)

參考值：血清t-PSA<4.0μg/L，

f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>25％PSA是一種由前列腺上皮細胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的游離PSA（f-PSA）形式存在；大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、

α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，稱復(fù)合PSA(c-PSA)。總PSA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。第34頁,共54頁，2024年2月25日，星期天4.糖類抗原12-5（CA125）是卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的腫瘤標志物分子量為20萬的糖蛋白可被單克隆抗體OC125所識別在卵巢腫瘤上皮和Mullerian副腎管來源的病理和正常組織中表達，其生物學(xué)功能不明。

第35頁,共54頁，2024年2月25日，星期天正常人血清中CA125的臨界值為35U/ml

CA125的半衰期僅4.8天，在血中很快代謝，所測即時結(jié)果能反映腫瘤近期的變化狀態(tài)第36頁,共54頁，2024年2月25日，星期天CA125在卵巢癌，尤其是上皮性卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌可出現(xiàn)升高，還可在肺癌、宮頸癌等腫瘤狀態(tài)時升高。

CA125在子宮內(nèi)膜異位癥、1%的健康婦女、3%的患良性卵巢疾病婦女及其他非腫瘤患者也可見到升高。第37頁,共54頁，2024年2月25日，星期天CA125的臨床應(yīng)用卵巢癌的輔助診斷觀察病情及預(yù)測預(yù)后

--血清CA125升高（或降低）2倍的患者中大于80%的病例為病情進展（或消退）

--CA125>35U/ml的病人中有95%在第二次手術(shù)時仍有腫瘤存在

第38頁,共54頁，2024年2月25日，星期天5.糖類抗原19-9（CA199）

CA19-9是胰腺、胃和腸癌的標記物。正常人群血清CA19-9陽性的臨界值為

37U/ml第39頁,共54頁，2024年2月25日，星期天診斷可以作為胰腺和膽管癌較好的標志物用于臨床，胰腺癌的陽性率可達70%~92%，膽管癌為66.7%對胃癌、肝癌和結(jié)直腸癌的陽性率分別可達25%~60%、56%~60%，18%~58%CA199的應(yīng)用第40頁,共54頁，2024年2月25日，星期天療效監(jiān)測

治療中及術(shù)后含量下降乃至正常表示治療方案正確復(fù)發(fā)跟蹤升高可作為腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的亞臨床診斷或重要的輔助診斷指標第41頁,共54頁，2024年2月25日，星期天6.神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE）同功酶類腫瘤標志物，正常僅存于神經(jīng)組織和紅細胞中正常人血清值為<13

g/L小細胞肺癌、神經(jīng)母細胞瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤及腦損傷時升高待測標本絕對禁止溶血，溶血可出現(xiàn)

NSE血清水平升高第42頁,共54頁，2024年2月25日，星期天跟蹤監(jiān)測癌腫病情進展和療效判斷

--肺癌NSE高于11.8μg/L預(yù)示肺癌患者生存期較短化療24小時后NSE下降是治療效果良好的標志神經(jīng)原特異性烯醇化酶的臨床應(yīng)用第43頁,共54頁，2024年2月25日，星期天7.人絨毛膜促性腺激素（HCG）

糖蛋白類激素，由蛋白核心與位于羧基端的以唾液酸為終止的側(cè)鏈組成兩個亞基組成:

&

:與

-LH,TSH和FSH相同

:與

-LH有交叉由合胞體滋養(yǎng)層細胞產(chǎn)生被證實是一種原始物質(zhì)

(可作為一種有用的腫瘤標志物)第44頁,共54頁，2024年2月25日，星期天HCG的臨床應(yīng)用：HCG上升：幾乎所有絨毛膜上皮細胞癌、70%的非精原細胞性睪丸癌，胃腸道、肺、乳腺腫瘤時亦可見HCG水平與腫瘤大小、疾病預(yù)后有關(guān)腦脊液中HCG上升提示腫瘤有腦轉(zhuǎn)移可用于監(jiān)測治療第45頁,共54頁，2024年2月25日，星期天二、常見腫瘤標志物檢測的免疫方法第46頁,共54頁，2024年2月25日，星期天

待測物質(zhì)濃度與檢測手段

臨床化學(xué)分析10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mLmg/mLmg/mLg/L免疫分析TherapeuticDrugsThyroidHormoneFertilityHorm