《中式風(fēng)格設(shè)計(jì)手法》課件

性激素簡(jiǎn)介與其常見(jiàn)的檢測(cè)方法

——qing.Yuan

2016-08-1212021/3/12性激素簡(jiǎn)介與其常見(jiàn)的檢測(cè)方法生殖激素Reproductivehormone生殖激素(Reproductivehormone)是直接作用于升至活動(dòng)，并以調(diào)節(jié)升值過(guò)程為主要生理功能的激素。生殖激素由內(nèi)分泌腺產(chǎn)生，又稱生殖內(nèi)分泌激素。人體主要生殖激素：

促性腺激素釋放激素（GnRH）

促黃體生成素（LH）

垂體生成

促卵泡生成素（FSH）泌乳素（RPL）22021/3/12生殖激素Reproductivehormone雄激素性激素

雌激素

孕激素孕酮（PGN）雌二醇（E2）雌酮（E1）睪酮（TTE）32021/3/12雄激素性激素雌激素孕激素孕酮（PGN下丘腦—垂體—性腺軸下丘腦Hypothaiamus促性腺激素釋放素GnRH垂體PituitaryLH、FSHLH、FSH卵巢：E2、PGN 睪丸：TTE促卵子生成、子宮發(fā)育、促陰道上皮的增生角化促精子發(fā)生、促男性第二性征出現(xiàn)負(fù)反饋負(fù)反饋42021/3/12下丘腦—垂體—性腺軸下丘腦Hypothaiamus促性腺激素一、促性腺激素釋放素(gonadotropin-relasinghormone,GnRH)促性腺激素釋放素是由10個(gè)氨基酸組成的多肽。主要分布于下丘腦的視前區(qū)、弓狀核和結(jié)節(jié)區(qū)，促進(jìn)腺垂體促性腺細(xì)胞合成和釋放卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)。52021/3/12一、促性腺激素釋放素(gonadotropin-relasi二、FSH、LH的生理效應(yīng)與臨床應(yīng)用

FSH的生理效應(yīng)女性：促進(jìn)卵泡的生長(zhǎng)和卵巢顆粒細(xì)胞的增生，與LH協(xié)同促使卵泡分泌雌激素（E2）。男性：作用于睪丸的支持細(xì)胞，促進(jìn)精子成熟。LH的生理效應(yīng)女性：促使卵巢排卵和黃體生成，促使黃體分泌雌激素（E2）和孕激素（PGN）。男性：刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌雄激素（TTE）。62021/3/12二、FSH、LH的生理效應(yīng)與臨床應(yīng)用

青春期前成人月經(jīng)中期絕經(jīng)期FSH（血清）2～12mU／mL4～20mU／mLNA＞40～200mU／mLLH（血清）2～12mU／mL4～20mU／mL＞30～200mU／mL＞40～200mU／mL女性FSH、LH含量的變化LH在男性中參考值:男性兒童：2.0～2.5U/L男性成人：3～30U/L72021/3/12女性FSH、LH含量的變化LH在男性中參考值:72021/3LH、FSH臨床意義FSH、LH增高常見(jiàn)于性腺原發(fā)性病變，常見(jiàn)有：多囊卵巢綜合征卵巢功能早衰性腺發(fā)育不全原發(fā)性閉經(jīng)原發(fā)性性功能減退曲細(xì)精管發(fā)育障礙完全性（真性）性早熟。LH、FSH分泌過(guò)低垂體或下丘腦性閉經(jīng)不完全性（假性）性早熟腦垂體功能障礙-席漢氏癥等。82021/3/12LH、FSH臨床意義FSH、LH增高常見(jiàn)于性腺原發(fā)性病變，常泌乳素RPL

泌乳素也叫催乳素。在垂體前葉中合成分泌，作用于乳腺。孕期會(huì)增高與雌激素孕激素協(xié)同作用使乳腺進(jìn)入分泌期。非妊娠期下丘腦細(xì)胞會(huì)分泌多巴胺抑制泌乳素的分泌使得泌乳素量處于較低水平。參考范圍：男性：0～18.4ng/ml

女性：2～29.9ng/ml妊娠期女性：妊娠早期<3.64mmol/L，

妊娠中期<7.28mmol/L,

妊娠晚期<18.20mmol/L

92021/3/12泌乳素RPL泌乳素也叫催乳素。在垂體前葉中合成分泌，導(dǎo)致PRL過(guò)高原因有：1、垂體障礙2、甲狀腺功能減退3、胸部創(chuàng)傷4、下丘腦腫瘤5、作用中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物可抑制泌乳素抑制因子釋放102021/3/12導(dǎo)致PRL過(guò)高原因有：102021/3/12PRL過(guò)高臨床病癥女性1、PRL過(guò)高可抑制FSH與LH的分泌，導(dǎo)致卵泡發(fā)育不良、排卵障礙2、Forbes-Albringt綜合征3、催乳素瘤prolactin-producingtumor4、功能性下丘腦性閉經(jīng)5、Stein-Leventhal綜合征男性下丘腦-垂體-睪丸軸功能障礙，造成LH、FSH分泌減少導(dǎo)致生殖功能障礙-不育。112021/3/12PRL過(guò)高臨床病癥女性1、PRL過(guò)高可抑制FSH與LH的分泌性激素Sexhormone1、雌激素Estrogen

女性卵巢

男性睪丸激素轉(zhuǎn)化雌激素

腎上腺皮質(zhì)雌二醇E2（活性最強(qiáng)）雌酮E1雌三醇E3（活性最弱）降解122021/3/12性激素Sexhormone1、雌激素Estrogen雌二雌二醇E21、促使子宮發(fā)育，增加血流，增強(qiáng)收縮力；2、促使子宮內(nèi)膜功能層上皮、腺體、螺旋小動(dòng)脈的增生，維持正常月經(jīng)周期；3、松弛宮頸口利于精子通過(guò)；4、促使女性第二性征發(fā)育；5、對(duì)下丘腦-垂體有正負(fù)反饋?zhàn)饔茫{(diào)控腺垂體促性腺激素的合成與分泌。132021/3/12雌二醇E21、促使子宮發(fā)育，增加血流，增強(qiáng)收縮力；13202雌二醇（血清）參考值女性：卵泡期37~330pmo/L

排卵期367~1835pmol/L

黃體期184~881pmol/L男性：50~200pmol/L142021/3/12雌二醇（血清）參考值142021/3/12雌二醇E2水平降低：1、女性發(fā)育不全2、卵巢功能障礙：卵巢功能早衰、多囊卵巢綜合癥、完全或部分性葡萄胎、妊娠高血壓綜合癥等。

3、下丘腦-垂體功能障礙：席漢氏綜合征4、先天性腎上腺皮質(zhì)功能不全（無(wú)腦兒、唐氏兒）152021/3/12雌二醇E2水平降低：152021/3/12雌二醇E2水平升高：

E2升高可導(dǎo)致顆粒細(xì)胞瘤、漿液性囊腺癌，女性多見(jiàn)于：性早熟、OHSS（卵巢過(guò)度刺激綜合癥）、卵巢功能性腫瘤等。在男性中可見(jiàn)男性女性化，肝硬化、SLE、冠心病、吸煙者的E2水平比較高。162021/3/12雌二醇E2水平升高：162021/3/12孕激素——孕酮PRL

女性孕酮主要由卵巢和胎盤(pán)產(chǎn)生。孕酮的主要功能有：1、促進(jìn)子宮內(nèi)膜增厚，腺體增生，為受精做準(zhǔn)備；2、與雌激素共同作用，促使入房發(fā)育為產(chǎn)乳作準(zhǔn)備；3、使宮頸口閉合，減少宮頸粘液分泌；4、對(duì)體溫，產(chǎn)熱增多，排卵后體溫維持升高0.5℃左右，維持在整個(gè)分泌期。

172021/3/12孕激素——孕酮PRL女性孕酮主要由卵巢和胎盤(pán)產(chǎn)生。孕PRL臨床意義PRL增高常見(jiàn)于葡萄胎、糖尿病孕婦、腎上腺癌、庫(kù)欣綜合征、多發(fā)性排卵、原發(fā)性高血壓、先天性17α-羥化酶缺乏癥、先天性腎上腺皮質(zhì)增生、卵巢脂肪樣瘤等患者。

降低常見(jiàn)于排卵障礙、卵巢功能減退癥、無(wú)排卵性月經(jīng)、閉經(jīng)、全垂體功能減退癥、胎兒發(fā)育遲緩、死胎、嚴(yán)重妊娠高血壓綜合征等患者中。182021/3/12PRL臨床意義PRL增高常見(jiàn)于葡萄胎、糖尿病孕婦雄激素Androgen性激素又稱男性激素，主要促進(jìn)男性生殖器官成熟以與第二性征出現(xiàn)并維持正常性欲與生殖功能的激素。有睪丸酮（Testo）、二輕睪丸酮(DHT)、脫氫睪酮與脫氫表雄酮等，主要以睪丸分泌的睪酮為主。睪酮是對(duì)男性女性都很重要的激素，女性雄激素主要來(lái)源于卵巢和腎上腺皮質(zhì)。192021/3/12雄激素Androgen性激素又稱男性激素，主雄激素——睪酮(TTE)睪酮生理作用1、對(duì)下丘腦-垂體具有調(diào)控作用；2、促進(jìn)男胎兒性腺結(jié)構(gòu)分化；3、促進(jìn)性生理的發(fā)育以與第二性征的發(fā)育；4、促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，從而使尿氮減少，呈現(xiàn)正氮平衡；5、維持正常的性功能；6、與雌激素共同作用控制女性剃毛的生長(zhǎng)和分布。202021/3/12雄激素——睪酮(TTE)睪酮生理作用202021/3/12睪酮（T）的臨床意義病理情況下，T分泌過(guò)多見(jiàn)于睪丸良性間質(zhì)細(xì)胞瘤，先天性腎上腺皮質(zhì)增生，女性皮質(zhì)醇增多癥，女性男性化腫瘤，女性特發(fā)性多毛，多囊卵巢綜合征，睪丸女性化綜合征，中晚期孕婦等血中Ｔ均增加，肥胖者也可稍增加。

Ｔ分泌不足見(jiàn)于垂體病變時(shí)，因促性腺激素減少使間質(zhì)細(xì)胞發(fā)育不良所致。手術(shù)，感染病理?yè)p傷等因素造成睪丸功能低下，Ｔ分泌減少。男性性功能低下，原發(fā)性睪丸發(fā)育不全性幼稚，陽(yáng)痿，甲狀腺功能減退，高泌乳素血癥，部分男性乳腺發(fā)育，肝硬化，慢性腎功能不全等患者血中Ｔ均減低。212021/3/12睪酮（T）的臨床意義病理情況下，T分泌過(guò)多見(jiàn)于睪常用激素檢測(cè)方法生物活性法01免疫法（CLIA、RIA、ELISA）02受體結(jié)合法03HPLC、GC-MS、LC-MS/MS04222021/3/12常用激素檢測(cè)方法生物活性法01免疫法（CLIA、RIA、EL生物活性法：反應(yīng)因素受生物反應(yīng)性影響較大，趨于淘汰。受體結(jié)合法：受體結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)因需要復(fù)雜的受體制備，在臨床常規(guī)檢測(cè)中難以推廣。免疫法：因?yàn)槠鋼碛泻芨叩倪x擇性與很低的檢測(cè)限，目前廣泛應(yīng)用在臨床常規(guī)檢測(cè)中。但是由于檢測(cè)方法和檢測(cè)試劑盒的不同，TSH、FSH、LH之間存在交叉抗原性，所以檢測(cè)結(jié)果往往差異較大。質(zhì)譜聯(lián)用法：由于需要專門(mén)的儀器，以與繁瑣的樣品預(yù)處理程序，所以未能夠在臨床的常規(guī)檢測(cè)中推廣。232021/3/12生物活性法：反應(yīng)因素受生物反應(yīng)性影響較大，趨于淘汰。2320A免疫法測(cè)定性激素242021/3/12A免疫法測(cè)定性激素242021/3/12化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)CLIA化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)微量抗原抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)?；瘜W(xué)發(fā)光：是在常溫下由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光的發(fā)射。其機(jī)制為某些化合物可以利用一個(gè)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的能量使其產(chǎn)物分子或反應(yīng)中間態(tài)分子上升至電子基態(tài)。當(dāng)此產(chǎn)物分子或中間分子衰退至基態(tài)時(shí)以發(fā)射光子形式釋放能量，即發(fā)光。252021/3/12化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)CLIA化學(xué)發(fā)光免疫分析252021/3/1CLIA優(yōu)點(diǎn)1、靈敏度高：其靈敏度可達(dá)10-16mol/L(RIA為10-12mol/L).2、光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)3、分析方法簡(jiǎn)便快捷4、結(jié)果穩(wěn)定、誤差小5、安全性好與使用時(shí)間長(zhǎng)262021/3/12CLIA優(yōu)點(diǎn)1、靈敏度高：其靈敏度可達(dá)10-16mol/L(Radioimmunoassayorradioimmunoassay

放射免疫測(cè)定/放射免疫分析(Radioimmunoassayorradioimmunoassay，RIA)在放射免疫分析的實(shí)驗(yàn)中，加入超量的標(biāo)記抗原*Ag與未標(biāo)記抗原Ag（即：待測(cè)抗原）與較少量的抗體（Ab）競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果所計(jì)量到的結(jié)合物（*Ag-Ab）放射活性較高，表示待測(cè)物的濃度較低。如果所計(jì)量到的結(jié)合物放射活性較低，則表示待測(cè)物的濃度較高。藉由標(biāo)準(zhǔn)曲線圖的分析，可以推算出待測(cè)物的濃度。272021/3/12RadioimmunoassayorradioimmunRIA優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)靈敏度高檢出極限≤10ng特異性強(qiáng)，抗原-抗體免疫反應(yīng)專一強(qiáng)應(yīng)用范圍廣：應(yīng)用于激素、蛋白質(zhì)、藥物等。操作簡(jiǎn)便缺點(diǎn)只能檢測(cè)具有免疫活性的物質(zhì)受多種生物因素影響競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，被測(cè)物與標(biāo)準(zhǔn)誤不能全部參與反應(yīng)，測(cè)得值為相對(duì)量存在放射線敷設(shè)和污染282021/3/12RIA優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)靈敏度高檢出極限≤10ng缺點(diǎn)只能檢測(cè)具酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme

Linked

ImmunoSorbent

Assay），簡(jiǎn)稱ELISA，采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，對(duì)受檢物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的一種檢測(cè)方法。抗原抗體反應(yīng)：可逆性Ag+Ab→Ag·Ab高度特異性-不需要分離待測(cè)物最適比例-Ag/Ab比例敏感性——高度敏感292021/3/12酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme

Linked

ImmunoELISA類型1、雙抗體夾心法測(cè)抗原2、雙抗原夾心法測(cè)抗體3、間接法測(cè)抗體4、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體5、競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)抗原6、捕獲包被法測(cè)抗體7、ABS-ELISA法302021/3/12ELISA類型1、雙抗體夾心法測(cè)抗原302021/3/12ELISA試劑的組成常見(jiàn)的組成如下：

已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

酶的底物；

陰性對(duì)照品或陽(yáng)性對(duì)照品，參考標(biāo)準(zhǔn)品；

結(jié)合物與標(biāo)本的稀釋液；

洗滌液；

酶反應(yīng)終止液；312021/3/12ELISA試劑的組成常見(jiàn)的組成如下：

312021/3/12加樣A保溫B洗滌C顯色D比色EELISA操作步驟322021/3/12加樣A保溫B洗滌C顯色D比色EELISA操作步驟322021結(jié)果分析肉眼觀察：顯色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性儀器測(cè)定：測(cè)OD值進(jìn)行計(jì)算。臨界值CO的計(jì)算：臨界值=N×2.1N為陰性對(duì)照孔OD均值，N大于0.1時(shí)重新試驗(yàn)，小雨0.05時(shí)以0.05計(jì)算。結(jié)果判定：樣品OD值/臨界值CO≥1陽(yáng)性

樣品OD值/臨界值CO＜1

陰性332021/3/12結(jié)果分析肉眼觀察：顯色為陽(yáng)性，無(wú)色為陰性332021/3/1ELISA常用的酶和底物342021/3/12ELISA常用的酶和底物342021/3/12ALC-MS/MS檢測(cè)內(nèi)源性激素方法352021/3/12ALC-MS/MS檢測(cè)內(nèi)源性激素方法352021

除去臨床常用免疫法，現(xiàn)在已經(jīng)有很多實(shí)驗(yàn)室建立色譜質(zhì)譜方法對(duì)內(nèi)源性激素進(jìn)行定性。定量分析研究。高相液相色譜法HPLC氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS/MS)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-M/MS）362021/3/12除去臨床常用免疫法，現(xiàn)在已經(jīng)有很多實(shí)驗(yàn)室建立色

其中，GC-MS和GC-MS/MS要求被測(cè)組分具有揮發(fā)性、低沸點(diǎn)等較少用于人體內(nèi)源性激素的測(cè)定。LC-MS多用于單一組別內(nèi)