馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)及天然免疫機(jī)理研究

馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)及天然免疫機(jī)理研究一、本文概述《馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)及天然免疫機(jī)理研究》一文旨在深入探討馬立克氏病病毒（MDV）RB1B株感染雞后，宿主雞的蛋白質(zhì)組和轉(zhuǎn)錄組變化及其與天然免疫機(jī)理的關(guān)聯(lián)。馬立克氏病是一種由MDV引起的淋巴增生性疾病，對(duì)養(yǎng)雞業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。本文采用蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法，對(duì)RB1B株MDV感染雞的蛋白質(zhì)表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)行系統(tǒng)性分析，以期揭示病毒與宿主相互作用的分子機(jī)制，為馬立克氏病的防控提供新的理論依據(jù)。在蛋白質(zhì)組學(xué)研究部分，我們將采用高通量的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，如二維凝膠電泳、質(zhì)譜分析等，對(duì)MDVRB1B株感染雞后的蛋白質(zhì)表達(dá)譜進(jìn)行全景式分析，以揭示病毒感染對(duì)宿主蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。同時(shí)，結(jié)合生物信息學(xué)分析，探討這些差異表達(dá)蛋白質(zhì)在病毒復(fù)制、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫應(yīng)答等方面的潛在作用。在轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究部分，我們將利用新一代測(cè)序技術(shù)（Next-GenerationSequencing,NGS）對(duì)MDVRB1B株感染雞后的基因轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行深度剖析。通過對(duì)比分析感染前后基因表達(dá)譜的變化，揭示病毒感染對(duì)宿主基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響，以及宿主天然免疫相關(guān)基因的應(yīng)答模式。本文還將結(jié)合天然免疫機(jī)理的研究，深入探討MDVRB1B株感染雞后，宿主天然免疫系統(tǒng)的應(yīng)答過程和調(diào)控機(jī)制。通過揭示病毒感染與宿主天然免疫之間的相互作用關(guān)系，有望為馬立克氏病的預(yù)防和治療提供新的策略和方法。本文旨在通過蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法，全面解析MDVRB1B株感染雞后宿主蛋白質(zhì)表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄的變化，以及其與天然免疫機(jī)理的關(guān)聯(lián)。這將有助于深入理解馬立克氏病的發(fā)病機(jī)制，為養(yǎng)雞業(yè)的健康發(fā)展提供有力支持。二、材料與方法RNA提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR引物、蛋白質(zhì)提取試劑、WesternBlot試劑盒等，均購自知名生物試劑公司。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、凝膠成像系統(tǒng)、質(zhì)譜儀、蛋白質(zhì)電泳儀等，均為實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備。按照預(yù)設(shè)的感染劑量，將馬立克氏病病毒RB1B株感染SPF雞。每組設(shè)置足夠數(shù)量的實(shí)驗(yàn)雞以確保數(shù)據(jù)的可重復(fù)性。在病毒感染后的不同時(shí)間點(diǎn)（如3天、7天、14天等），收集雞的血液、組織（如脾臟、肝臟、肺等）樣本，并立即進(jìn)行處理，以避免蛋白質(zhì)的降解。利用蛋白質(zhì)提取試劑從收集的組織樣本中提取總蛋白質(zhì)，并進(jìn)行SDS電泳分離。通過WesternBlot技術(shù)，檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。對(duì)于差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，利用質(zhì)譜儀進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定和序列分析。利用RNA提取試劑盒從組織樣本中提取總RNA，并通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒將其轉(zhuǎn)化為cDNA。利用PCR技術(shù)，檢測(cè)病毒基因和宿主免疫相關(guān)基因的表達(dá)情況。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀進(jìn)行精確的基因表達(dá)量分析。結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的數(shù)據(jù)，分析病毒感染后宿主天然免疫系統(tǒng)的變化。通過檢測(cè)干擾素、細(xì)胞因子等免疫相關(guān)分子的表達(dá)情況，揭示病毒與宿主免疫系統(tǒng)之間的相互作用。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理和分析，以圖表形式展示結(jié)果，并進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。以上為本研究的主要材料與方法，通過綜合運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)，旨在深入解析馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的天然免疫機(jī)理，為疾病的預(yù)防和治療提供新的思路和方法。三、MDVRB1B株感染雞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究在探索馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的機(jī)理時(shí)，蛋白質(zhì)組學(xué)為我們提供了深入理解的獨(dú)特視角。蛋白質(zhì)組學(xué)是對(duì)生物體內(nèi)所有蛋白質(zhì)的表達(dá)、結(jié)構(gòu)、功能和相互作用的全面研究。通過對(duì)感染雞體內(nèi)蛋白質(zhì)的全面分析，我們可以揭示RB1B株病毒與宿主細(xì)胞之間的相互作用，以及這些相互作用如何影響病毒復(fù)制和雞的免疫反應(yīng)。我們通過高通量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，如二維凝膠電泳和質(zhì)譜分析，對(duì)感染RB1B株病毒的雞體內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行了全面鑒定和定量。這些技術(shù)使我們能夠檢測(cè)到病毒蛋白和宿主細(xì)胞蛋白的表達(dá)變化，以及它們之間的相互作用。然后，我們對(duì)比了感染組和未感染組之間蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異，以揭示RB1B株病毒對(duì)宿主蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。我們發(fā)現(xiàn)，一些與病毒復(fù)制、細(xì)胞凋亡和免疫應(yīng)答等過程相關(guān)的蛋白質(zhì)在感染過程中發(fā)生了顯著變化。這些蛋白質(zhì)包括病毒自身的蛋白質(zhì)，也包括宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)。進(jìn)一步的研究集中在這些顯著差異表達(dá)的蛋白質(zhì)上。我們通過生物信息學(xué)分析和功能驗(yàn)證，探討了這些蛋白質(zhì)在病毒復(fù)制和雞的天然免疫應(yīng)答中的具體作用。我們發(fā)現(xiàn)，一些病毒蛋白質(zhì)通過與宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)的相互作用，抑制了宿主細(xì)胞的天然免疫應(yīng)答，從而促進(jìn)了病毒的復(fù)制。同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)了一些宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)在抵抗病毒感染和啟動(dòng)天然免疫應(yīng)答中發(fā)揮了重要作用。我們利用蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)分析，揭示了這些差異表達(dá)蛋白質(zhì)之間的復(fù)雜互作關(guān)系，以及它們?cè)诓《緩?fù)制和天然免疫應(yīng)答中的潛在作用機(jī)制。這些結(jié)果不僅加深了我們對(duì)MDVRB1B株感染機(jī)理的理解，也為防治馬立克氏病提供了新的思路和方法。蛋白質(zhì)組學(xué)研究為我們揭示了MDVRB1B株感染雞的復(fù)雜過程，包括病毒與宿主細(xì)胞的相互作用、病毒復(fù)制和雞的天然免疫應(yīng)答等。這些結(jié)果不僅有助于我們深入理解馬立克氏病的發(fā)病機(jī)制，也為開發(fā)新的治療方法和疫苗提供了重要的理論依據(jù)。四、MDVRB1B株感染雞的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究轉(zhuǎn)錄組學(xué)是研究生物體在特定生理?xiàng)l件下所有基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的科學(xué)，對(duì)于理解病毒與宿主相互作用及其調(diào)控機(jī)制具有重要意義。本研究通過高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)MDVRB1B株感染雞的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行了深入分析，旨在揭示MDV感染過程中宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平的動(dòng)態(tài)變化及天然免疫應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制。實(shí)驗(yàn)選取健康雞和MDVRB1B株感染后的雞只，分別提取其脾臟、法氏囊和胸腺等免疫相關(guān)組織的總RNA，構(gòu)建cDNA文庫并進(jìn)行Illumina測(cè)序。通過生物信息學(xué)分析，獲得了大量轉(zhuǎn)錄本數(shù)據(jù)，并對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行了差異表達(dá)分析、基因功能注釋和信號(hào)通路分析。結(jié)果顯示，MDV感染后，宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生了顯著變化。與健康雞相比，感染雞的脾臟中大量干擾素刺激基因（ISGs）表達(dá)上調(diào)，包括IFN-α、IFN-β、IFN-γ等，這些干擾素在天然免疫中發(fā)揮著重要作用。還觀察到一些與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和DNA損傷修復(fù)等相關(guān)的基因表達(dá)也發(fā)生了變化，暗示MDV感染可能通過調(diào)控這些過程來影響宿主細(xì)胞的命運(yùn)。進(jìn)一步的信號(hào)通路分析發(fā)現(xiàn)，MDV感染激活了多條與天然免疫相關(guān)的信號(hào)通路，如JAK-STAT通路、NF-κB通路和Toll樣受體通路等。這些通路在宿主抵抗病毒感染過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，它們的激活可能是宿主細(xì)胞對(duì)MDV感染作出的一種防御反應(yīng)。通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究，我們初步揭示了MDVRB1B株感染雞過程中宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平的動(dòng)態(tài)變化及天然免疫應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制。這些發(fā)現(xiàn)有助于深入理解MDV的致病機(jī)理，并為新型疫苗和藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。未來，我們將進(jìn)一步深入研究這些差異表達(dá)基因的功能和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，以期揭示MDV感染與宿主天然免疫之間的更多細(xì)節(jié)。五、MDVRB1B株感染對(duì)雞天然免疫的影響馬立克氏病病毒（MDV）RB1B株感染對(duì)雞的天然免疫具有顯著影響。天然免疫是機(jī)體對(duì)抗外來病原體入侵的第一道防線，包括一系列復(fù)雜的生物過程和分子機(jī)制。在MDVRB1B株感染過程中，雞的天然免疫應(yīng)答被病毒所操縱和利用，導(dǎo)致病毒在宿主體內(nèi)的復(fù)制和擴(kuò)散。MDVRB1B株感染能夠顯著影響雞的干擾素（IFN）系統(tǒng)。干擾素是天然免疫中的重要組成部分，具有抗病毒、抗增殖和免疫調(diào)節(jié)等多種功能。然而，MDVRB1B株感染通過抑制雞體內(nèi)的干擾素產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)，削弱了宿主的抗病毒能力。病毒編碼的一些蛋白能夠干擾干擾素的產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)，從而逃避宿主的天然免疫監(jiān)視和清除。MDVRB1B株感染還能夠影響雞的Toll樣受體（TLR）信號(hào)通路。TLR是天然免疫中的重要識(shí)別受體，能夠識(shí)別病原體相關(guān)的分子模式（PAMPs），并觸發(fā)相應(yīng)的信號(hào)通路，激活免疫應(yīng)答。然而，MDVRB1B株感染通過抑制TLR信號(hào)通路的激活，降低了宿主對(duì)病原體的識(shí)別和清除能力。病毒編碼的一些蛋白能夠與TLR結(jié)合，阻止其識(shí)別和結(jié)合PAMPs，從而抑制TLR信號(hào)通路的激活。MDVRB1B株感染還能夠影響雞的巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能。這些免疫細(xì)胞在天然免疫中發(fā)揮著重要作用，能夠吞噬和清除病原體，并呈遞抗原給T淋巴細(xì)胞，啟動(dòng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答。然而，MDVRB1B株感染通過抑制這些免疫細(xì)胞的功能，降低了宿主對(duì)病原體的清除能力。病毒編碼的一些蛋白能夠與免疫細(xì)胞受體結(jié)合，抑制其吞噬和呈遞抗原的功能，從而逃避宿主的免疫清除。MDVRB1B株感染對(duì)雞的天然免疫具有顯著影響。病毒通過抑制干擾素系統(tǒng)、TLR信號(hào)通路和免疫細(xì)胞功能等多種機(jī)制，逃避宿主的天然免疫監(jiān)視和清除，從而實(shí)現(xiàn)在宿主體內(nèi)的復(fù)制和擴(kuò)散。因此，深入研究MDVRB1B株感染對(duì)雞天然免疫的影響機(jī)制，有助于揭示馬立克氏病的發(fā)病機(jī)理，為預(yù)防和治療該病提供新的思路和方法。六、討論與結(jié)論本研究通過整合蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的方法，深入探討了馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的生物學(xué)過程，并對(duì)天然免疫機(jī)理進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。通過對(duì)比分析感染前后的蛋白質(zhì)表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄水平，揭示了病毒與宿主細(xì)胞之間的相互作用及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，我們鑒定出了一系列在病毒感染過程中顯著變化的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)涉及細(xì)胞代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫應(yīng)答等多個(gè)方面，表明病毒感染對(duì)宿主細(xì)胞的生理功能產(chǎn)生了廣泛而深遠(yuǎn)的影響。同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)了一些可能與病毒復(fù)制、裝配和釋放等過程相關(guān)的蛋白質(zhì)，為深入理解病毒的生命周期提供了新的線索。在轉(zhuǎn)錄組學(xué)方面，我們通過高通量測(cè)序技術(shù)獲得了感染前后宿主細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)錄譜。通過對(duì)比分析，我們發(fā)現(xiàn)了一些差異表達(dá)的基因，這些基因可能與病毒的感染過程密切相關(guān)。我們還發(fā)現(xiàn)了一些與天然免疫相關(guān)的基因在感染過程中發(fā)生了顯著變化，暗示了天然免疫在抵抗病毒感染中的重要作用。天然免疫是宿主細(xì)胞抵抗病毒感染的第一道防線。本研究發(fā)現(xiàn)，在RB1B株感染過程中，宿主細(xì)胞的天然免疫應(yīng)答被激活，并產(chǎn)生了一系列抗病毒效應(yīng)。這些效應(yīng)包括干擾素的產(chǎn)生、免疫細(xì)胞的招募和激活、以及抗病毒蛋白的表達(dá)等。這些結(jié)果表明，天然免疫在抵抗馬立克氏病病毒感染中發(fā)揮著重要作用。本研究通過蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)的方法，深入探討了馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的生物學(xué)過程及天然免疫機(jī)理。這些結(jié)果不僅有助于我們更好地理解病毒感染的分子機(jī)制，也為預(yù)防和治療馬立克氏病提供了新的思路和方法。然而，本研究仍存在一些局限性，例如未能深入探討某些關(guān)鍵蛋白或基因的具體功能。因此，未來的研究可以在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步拓展和深化，以期取得更為全面和深入的認(rèn)識(shí)。八、致謝隨著這篇《馬立克氏病病毒RB1B株感染雞的蛋白質(zhì)組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)及天然免疫機(jī)理研究》的完成，我首先要向我的導(dǎo)師表達(dá)最深的敬意和感謝。他的嚴(yán)謹(jǐn)治學(xué)、悉心指導(dǎo)，為我在科研道路上提供了寶貴的啟示和無盡的動(dòng)力。我也要感謝實(shí)驗(yàn)室的各位同學(xué)，他們的陪伴和支持，使我在科研的艱難時(shí)刻依然能夠堅(jiān)持下去。我要感謝為本研究提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)設(shè)備的單位，他們的無私幫助為研究的順利進(jìn)行提供了重要保障。同時(shí)，我也要感謝參與數(shù)據(jù)分析和處理的各位同仁，他們的專業(yè)精神和辛勤付出，為研究的準(zhǔn)確性和可靠性提供了堅(jiān)實(shí)支撐。在此，我還要向?yàn)楸狙芯刻峁┵Y助的各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)和機(jī)構(gòu)表示衷心感謝。沒有他們的支持，這項(xiàng)研究可能無法順利進(jìn)行。這份榮譽(yù)和成果，同樣屬于他們。我要向我的家人表示深深的謝意。他們一直以來的理解、支持和鼓勵(lì)，是我能夠?qū)Ｐ目蒲?、不斷前行的最大?dòng)力。他們的陪伴，使我在面對(duì)困難和挫折時(shí)，始終能夠保持信心和勇氣。在此，我對(duì)所有為本研究做出貢獻(xiàn)和支持的人表示最誠摯的感謝。這份榮譽(yù)和成果，是我們共同努力和智慧的結(jié)晶。未來的道路上，我將繼續(xù)秉持科學(xué)精神，不斷探索和追求，為科研事業(yè)貢獻(xiàn)自己的力量。參考資料：傳染性法氏囊?。↖BD）是一種由傳染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的雞的免疫抑制性疾病，嚴(yán)重影響?zhàn)B雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。本研究旨在通過比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，深入探究IBDV感染雞后靶器官的蛋白質(zhì)表達(dá)變化，以期為IBD的預(yù)防和治療提供新的思路。在實(shí)驗(yàn)中，我們選擇了10周齡的SPF雞作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組給予生理鹽水，定時(shí)記錄雞的生長情況，觀察臨床癥狀。實(shí)驗(yàn)組雞采用不同濃度的IBDV感染，定時(shí)檢測(cè)病毒在雞體內(nèi)分布情況。通過比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，我們發(fā)現(xiàn)IBDV感染后，雞法氏囊、胸腺和脾臟等免疫器官的蛋白質(zhì)表達(dá)譜發(fā)生了顯著變化。具體來說，一些與免疫應(yīng)答、細(xì)胞凋亡和代謝相關(guān)的蛋白質(zhì)在感染組中表現(xiàn)出明顯的差異表達(dá)。這些蛋白質(zhì)包括免疫球蛋白、細(xì)胞因子、凋亡相關(guān)蛋白和代謝酶等。這些結(jié)果揭示了IBDV感染對(duì)雞免疫系統(tǒng)的影響，并提示了可能的致病機(jī)制。我們還發(fā)現(xiàn)了一些可能的抗病毒蛋白和免疫應(yīng)答相關(guān)蛋白在IBDV感染過程中的作用。這些蛋白質(zhì)可能成為未來預(yù)防和治療IBD的潛在靶點(diǎn)。本研究通過比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，深入探究了IBDV感染雞后靶器官的蛋白質(zhì)表達(dá)變化，為理解IBD的發(fā)病機(jī)制和尋找新的治療策略提供了有價(jià)值的線索。然而，仍需進(jìn)一步的研究來驗(yàn)證這些蛋白質(zhì)在IBD發(fā)病過程中的具體作用和潛在的治療價(jià)值。傳染性法氏囊病病毒（IBDV）是一種高度傳染性的病毒，主要感染雞的法氏囊，導(dǎo)致雞的免疫抑制和死亡。為了深入了解IBDV的致病機(jī)制，我們運(yùn)用差異蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，對(duì)IBDV感染前后細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的表達(dá)變化進(jìn)行了研究。在我們的研究中，首先通過高通量的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，全面地分析了正常細(xì)胞和IBDV感染細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)表達(dá)譜。我們發(fā)現(xiàn)，在IBDV感染后，許多蛋白質(zhì)的表達(dá)發(fā)生了顯著的變化。這些變化的蛋白質(zhì)主要涉及代謝、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫反應(yīng)等方面。具體來說，一些與能量代謝相關(guān)的蛋白質(zhì)，如糖酵解酶和線粒體蛋白，在IBDV感染后表達(dá)下調(diào)。這可能是由于病毒復(fù)制過程中對(duì)細(xì)胞能量需求的增加，導(dǎo)致細(xì)胞能量代謝的改變。一些細(xì)胞骨架蛋白和膜運(yùn)輸?shù)鞍椎谋磉_(dá)也發(fā)生了變化，這可能對(duì)細(xì)胞的形態(tài)和功能產(chǎn)生影響。更值得注意的是，一些與免疫反應(yīng)相關(guān)的蛋白質(zhì)，如干擾素調(diào)節(jié)因子和炎癥因子，在IBDV感染后表達(dá)上調(diào)。這表明IBDV可能通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)來逃避或抑制宿主的免疫應(yīng)答。這些發(fā)現(xiàn)為理解IBDV的致病機(jī)制提供了新的視角。我們的研究揭示了IBDV感染細(xì)胞后蛋白質(zhì)表達(dá)的復(fù)雜變化，為深入了解IBDV的致病機(jī)制和尋找新的治療策略提供了有價(jià)值的信息。未來，我們將繼續(xù)對(duì)這些變化的蛋白質(zhì)進(jìn)行深入研究，以期找到預(yù)防和治療IBDV的新方法。這項(xiàng)研究也展示了差異蛋白質(zhì)組學(xué)在病毒學(xué)研究中的重要價(jià)值。馬立克氏病(Marek’sdisease，MD)又名神經(jīng)淋巴瘤病(neurolymphomatosis)，二類傳染病，是雞的一種淋巴組織增生性疾病，以對(duì)外周神經(jīng)、性腺、虹膜、各種內(nèi)臟器官、肌肉和皮膚的單個(gè)或多個(gè)組織器官發(fā)生單核細(xì)胞浸潤為特征。本病是由細(xì)胞結(jié)合性皰疹病毒引起的傳染性腫瘤病，導(dǎo)致上述各器官和組織形成腫瘤。病雞常見消瘦、肢體麻痹，并常有急性死亡。在病原學(xué)上可以與雞的其他淋巴樣腫瘤病相區(qū)別。MD首先由匈牙利馬立克(Marek)氏于1907年報(bào)導(dǎo)，自Biggs氏于1961年建議用馬立克氏的名字命名以后，世界各國養(yǎng)禽業(yè)都存在MD。中國于70年代也證明了MD在養(yǎng)禽業(yè)中流行。在1970年前后研制出預(yù)防本病的疫苗之前，MD造成的經(jīng)濟(jì)損失是巨大的。死亡率一般為10%-60%，低的10%以下，高的60%以上，雞群全群發(fā)病以致全部應(yīng)予淘汰。美國1956-66年，因本病損失雞數(shù)為9億只，占飼養(yǎng)總數(shù)的3%；1965年損失6500萬美元，1975年在已有疫苗免疫后仍損失2億美元。英國1965年損失4000萬美元，1969年損失1500萬英鎊。印度1973年損失4000萬盧比，丹麥1965-1973每年損失10-100萬美元。1984年，據(jù)估計(jì)全世界損失約為34億美元。1980年以后歐洲部分地區(qū)的MD死亡率仍然為25%-40%。不同品種的雞由于易感性不同，病毒毒力高低各異，死亡率差別也很大。人工感染試驗(yàn)證明，易感性高的洛島紅雞感染了超強(qiáng)毒力的MD毒株之后，其死亡率可達(dá)100%，感染原型強(qiáng)毒株的死亡率為8%-8%。而抗病強(qiáng)的品種如N系雞對(duì)超強(qiáng)毒株的死亡率為5%-5%，對(duì)原型強(qiáng)毒株幾乎為0。MD病原是一種細(xì)胞結(jié)合性皰疹病毒，(簡稱MDV)。已發(fā)現(xiàn)的有三個(gè)血清型，1型為致癌性的，2型為非致癌性的，3型是指火雞皰疹病毒，(簡稱HVT)。HVT與MDV有明顯區(qū)別，對(duì)雞無致病性，但可作為預(yù)防MD的有效疫苗。MDV在雞體的羽毛囊上皮中形成帶囊膜的完整病毒粒子，直徑為273-400nm。在組織培養(yǎng)的感染細(xì)胞核中可見到直徑為85-100nm的六角形病毒顆?；蚝艘職ぃ紶栆苍诩?xì)胞漿中見到。偶可見與細(xì)胞核膜或核空泡相聯(lián)的有囊膜的病毒顆粒，直徑為150-160nm。MDV的核衣殼呈立體的、對(duì)稱的二十面體，它有162個(gè)柱狀中空的殼粒，6×9nm左右大小。病毒核酸為DNA。HVT的形態(tài)與MDV相似，在超薄切片上，HVT的核衣殼有的呈獨(dú)特的十字形。這個(gè)病毒有一個(gè)由6個(gè)圓形顆粒組成的核心結(jié)構(gòu)。MDV的DNA是含線性雙鏈的，浮密度為706g/ml，堿基組成的G+C(鳥嘌呤和胞嘧啶)比率為46%，分子量為108-120×10道爾頓，HVT的DNA浮密度和G+C比率與MDV的基本相同。MDV與其DNA不論在體內(nèi)或體外都具有感染性。MDV的DNA與其他大部分皰疹病毒無同源性。但證明與一種人的B型嗜淋巴組織皰疹病毒(humanB-lymphotropicherpesvirus)、人皰疹病毒6型(HHV-6)、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒和致癌性禽逆轉(zhuǎn)錄病毒的原病毒DNA有同源區(qū)。還證明與單純皰疹病毒和水痘帶狀皰疹病毒有同源區(qū)。表明MDV基因組與其他皰疹病毒的關(guān)系可能比最早發(fā)現(xiàn)的更為接近。當(dāng)前對(duì)MDV的蛋白和抗原已做出鑒定的有46種特異性多肽。感染細(xì)胞培養(yǎng)物中分離的A抗原，已被證明是一種分子量為57-65KD的糖蛋白(gp57/65)，由感染細(xì)胞分泌到胞漿和細(xì)胞表面，可能是瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)中用恢復(fù)期抗血清最易檢測(cè)的抗原。MDV經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)傳幾代后A抗原的產(chǎn)量降低，可能是A抗原基因的轉(zhuǎn)錄減少所致。現(xiàn)已測(cè)出這一基因的核酸序列。B抗原是一種非分泌抗原，是三種分子量100kD、60kD和49kD(gpgpgp49)的糖蛋白復(fù)合物，是由一種44kD的多肽前體產(chǎn)生的。這種抗原位于細(xì)胞表面和細(xì)胞漿中。它能導(dǎo)致中和抗體的產(chǎn)生。A、B兩種抗原開始是用作瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的。用不同的單克隆抗體以瓊脂擴(kuò)散方法檢測(cè)到兩種與生產(chǎn)性感染的細(xì)胞核有關(guān)的抗原。一種為135kD蛋白質(zhì)，可與DNA結(jié)合；另一種為145-155kD的蛋白質(zhì)，不與DNA結(jié)合。從潛伏感染的腫瘤細(xì)胞提取物中，發(fā)現(xiàn)了一種可與克隆的MDV的DNA片段結(jié)合的28kD蛋白，但在生產(chǎn)性感染的細(xì)胞則未發(fā)現(xiàn)。脫落的皮膚碎屑含有羽毛囊上皮產(chǎn)生的有囊膜的MDV。這種MDV在溫室可存活4-8個(gè)月，4℃10年以上仍有感染性。但MDV對(duì)各種常用化學(xué)消毒藥一般在10分鐘內(nèi)可被滅活。稀釋的細(xì)胞結(jié)合疫苗病毒的半衰期為2-6小時(shí)。根據(jù)MDV毒力的強(qiáng)弱分作三類。一為溫和MDV(mMDV)，是50年代以前的主要類型，其代表株為CU2株。二為強(qiáng)毒MDV(vMDV)，是60年代的主要類型，代表株為JM、GA和HPRS-16株。三為超強(qiáng)毒MDV(vvMDV)，70年代末以后的一種類型，代表株為MD5和RBIB株。血清學(xué)Ⅰ型病毒在鴨胚成纖維細(xì)胞或雞腎細(xì)胞上生長最好，但生長緩慢，可產(chǎn)生小蝕斑。用雞胚皮膚細(xì)胞單層可直接從羽毛囊分離病毒和傳代。血清學(xué)2型病毒在雞胚成纖維細(xì)胞上生長最好，但生長緩慢，可產(chǎn)生大合胞體的中等蝕斑。血清學(xué)3型病毒(HVT)在雞胚成纖維細(xì)胞上生長最好，生長速度快，可產(chǎn)生大蝕斑。HVT復(fù)歸火雞雛傳4代，從羽毛囊用雞胚皮膚細(xì)胞單層分離并連續(xù)傳代10代以上，不見產(chǎn)生合胞體。三個(gè)血清型病毒感染的最初靶器官的淋巴細(xì)胞不同。致癌性MDV感染B細(xì)胞，2型MDV和HVT感染的既不是B細(xì)胞也不是巨噬細(xì)胞。有毒力的血清學(xué)I型MDV接種易感新生雛雞，2-4周可見神經(jīng)和神經(jīng)節(jié)的組織學(xué)變化，胸腺和法氏囊顯著萎縮則肉眼可見。病毒毒力的強(qiáng)度不同和雛雞易感性不同，其引起死亡的程度也不同。用MDV卵黃囊內(nèi)接種雞胚，18-19日齡胚檢查可見絨毛尿囊膜產(chǎn)生明顯的痘斑。鴨胚成纖維細(xì)胞、雞腎細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞是常用分離MDV的細(xì)胞。也有用雞胚皮膚細(xì)胞作為細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。雞是主要的MD自然宿主。鵪鶉、火雞和山雞可發(fā)生自然感染MD，但不出現(xiàn)疾病。烏雞（竹絲雞）也可自然感染，而且易感性強(qiáng)，死亡率很高?；痣u經(jīng)人工接種MDV病毒后可產(chǎn)生淋巴瘤，但還沒有證明它是MDV的自然宿主。MD對(duì)其他種生物的重要性極小或者幾乎沒有。1日齡雛雞人工接種感染后3-6天出現(xiàn)溶細(xì)胞感染，6-8天淋巴器官出現(xiàn)變性病變，特別是胸腺和法氏囊萎縮。2周左右可見神經(jīng)和其他器官有單核細(xì)胞浸潤，并開始排毒。最早在18天前后，一般在3-4周出現(xiàn)臨診癥狀。大多數(shù)雞群開始暴發(fā)本病是從8-9周齡開始，12-20周齡是高峰期。但也有3-4周齡的幼雞群和60周齡的雞群暴發(fā)本病的事例。感染MD的病雞，大部分為終生帶毒，病毒不斷從脫落的羽毛囊皮屑中排出有傳染性的MDV，這就是MD的傳播難于控制的帶有根本性的原因。至今還沒有證明MD垂直傳播的事例。雖然70年代已有疫苗預(yù)防本病，但不少雞群在接種疫苗之后雖有明顯地降低發(fā)病率，很大程度地減少了損失。但也有一些雞群仍然存在不同程度由MD造成的損失。無母源抗體的雞群接種疫苗后最少需一周才能產(chǎn)生免疫力。有母源抗體的雞群則至少要在接種疫苗2周以上才能產(chǎn)生免疫力，疫苗劑量還得加大約4倍。部分統(tǒng)計(jì)的資料表明，初生雞雛在有MDV污染的環(huán)境中幾乎在一周內(nèi)疫苗產(chǎn)生免疫力之前已感染上了自然強(qiáng)毒，因而失去或降低了疫苗的效力。一般來說，免疫接種不能100%防止發(fā)病，同非免疫的對(duì)照雞群相比，保護(hù)率為80%-85%。MD的癥狀被分為三個(gè)型：神經(jīng)型（古典型）、內(nèi)臟型（急性型）和眼型。各型混合發(fā)生也時(shí)有出現(xiàn)。神經(jīng)型癥狀最早出現(xiàn)的表現(xiàn)是步態(tài)不穩(wěn)、共濟(jì)失調(diào)。一肢或多肢的麻痹或癱瘓被認(rèn)為是MD的特征性癥狀，這是由于神經(jīng)受到MDV不同程度的侵害而引起的，特別是一條腿伸向前方而另一條腿伸向后方。翅膀可因麻痹而下垂，頸部因麻痹而低頭歪頸，嗉囊因麻痹而擴(kuò)大并常伴有腹瀉。病雞采食困難，饑餓至脫水而死。發(fā)病期由數(shù)周到數(shù)月，死亡率為10%-15%。內(nèi)臟型多為急性暴發(fā)MD的雞群。開始表現(xiàn)為大多數(shù)雞嚴(yán)重萎頓，白色羽毛雞的羽毛失去光澤而變?yōu)榛疑?。有些病雞單側(cè)或雙側(cè)肢體麻痹，厭食、消瘦和昏迷，最后衰竭而死。急性死亡數(shù)周內(nèi)停止，也可延至數(shù)月，一般死亡率為10%-30%，也有高達(dá)70%的。眼型MD可見單眼或雙眼發(fā)病，視力減退或消失。虹膜失去正常色素，變?yōu)橥沫h(huán)狀或斑點(diǎn)狀以至彌漫性青藍(lán)色到彌散性灰白色混濁不等變化。瞳孔邊緣不整齊，嚴(yán)重的只剩一個(gè)似針頭大小的孔。以上3種型在發(fā)生本病的雞群中常為同時(shí)存在。出現(xiàn)臨診癥狀的病雞有少部分能康復(fù)，但多數(shù)以死亡告終。MD發(fā)病機(jī)理分為體內(nèi)感染的4個(gè)階段。即早期的生產(chǎn)性-限制性病毒感染而引起的初期變性變化；潛伏感染；溶細(xì)胞性感染的第二期，與持久免疫抑制相一致；涉及到淋巴樣細(xì)胞非生產(chǎn)性感染增生期，可能形成或不形成淋巴瘤。MD病毒經(jīng)呼吸道進(jìn)入機(jī)體后被吞噬細(xì)胞吞噬，在脾、法氏囊和胸腺形成溶血性感染，于3-6天達(dá)到高峰。最初的靶細(xì)胞為B細(xì)胞，產(chǎn)生炎性反應(yīng)。約于7天出現(xiàn)暫時(shí)的免疫抑制，法氏囊和胸腺萎縮，感染進(jìn)入潛伏階段，細(xì)胞介導(dǎo)免疫在轉(zhuǎn)化中起著重要作用。以后的感染發(fā)病發(fā)展過程則由于宿主遺傳抵抗力的差異和MDV毒力的強(qiáng)弱不同，病理變化有很大的差異。易感雞于2-3周后發(fā)生第二次溶細(xì)胞感染，侵害到各種器官。病毒在羽毛囊上皮進(jìn)行有囊膜的完整病毒的復(fù)制。淋巴樣細(xì)胞的增生可能形成淋巴瘤，以T細(xì)胞為主，也有B細(xì)胞以及其他細(xì)胞。含MDV的DNA的腫瘤細(xì)胞可在體外培養(yǎng)成為成淋巴細(xì)胞樣細(xì)胞系。一般轉(zhuǎn)化的靶細(xì)胞是T細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)它有Ia抗原。腫瘤細(xì)胞則是抑制T細(xì)胞。腫瘤相關(guān)表面抗原(MASTA)在未感染的活化T細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，被認(rèn)為可能是轉(zhuǎn)化后繼續(xù)表達(dá)它的轉(zhuǎn)化靶細(xì)胞的標(biāo)記物。對(duì)在體外經(jīng)傳代致弱的MDV的感染機(jī)制的研究證明，致弱毒株不能引起淋巴器官的溶細(xì)胞感染，對(duì)淋巴細(xì)胞沒有感染性。年齡和遺傳抵抗力依賴于免疫學(xué)活性。遺傳品系和毒株類型與淋巴瘤的發(fā)生和分布有關(guān)。免疫應(yīng)答本身可能與MD的一些特征性病變有關(guān)，神經(jīng)病變的一些特性類似一種自身免疫病。由MDV引起的動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)理則還不清楚。MD引起的病理變化最常見的是神經(jīng)變化。腹腔神經(jīng)叢最易受侵害，78%的病雞有病變。99%的病雞可通過檢查腹腔、前腸系膜、臂和坐骨神經(jīng)叢，Remak氏神經(jīng)、內(nèi)臟大神經(jīng)發(fā)現(xiàn)病變。急性MD病例，?？梢姷絻?nèi)臟淋巴腫瘤大小不一，界限分明，灰白色，質(zhì)堅(jiān)而致密。常見于性腺、腎、脾、肝、肺、心、胰腺、腸系膜、腺胃、腸道、肌肉和皮膚等。法氏囊病變通常除萎縮外，有時(shí)發(fā)生腫瘤。腫瘤細(xì)胞的濾泡間分布呈彌散性增厚，與淋巴白血病的特征性結(jié)節(jié)不同。易感雞可由MDV引起大冠狀動(dòng)脈、主動(dòng)脈和主要的主動(dòng)脈分支以及在其他動(dòng)脈內(nèi)肉眼可見的脂肪性動(dòng)脈粥樣硬化，與人的慢性動(dòng)脈粥樣硬化相似。病理組織學(xué)的外周神經(jīng)病變分為兩個(gè)主要類型。一種為B型，主要是炎性反應(yīng)。以小淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞彌散、浸潤為特征，并常伴有水腫，或有髓鞘變性和許旺氏細(xì)胞增生，少量巨噬細(xì)胞。比B型病變輕的為C型。另一種類型為A型，以腫瘤為特征，主要為大量增生的成淋巴細(xì)胞。有一種病變細(xì)胞被稱為“馬立克氏病細(xì)胞”，被認(rèn)為是變性的胚細(xì)胞，其胞漿嗜堿性強(qiáng)，嗜派朗寧，有空泡，細(xì)胞極少或無詳細(xì)結(jié)構(gòu)。腦的病理組織學(xué)變化呈灶性分布，由小淋巴細(xì)胞形成的血管周圍套或由含淋巴細(xì)胞和淡染物質(zhì)的亞粟粒性結(jié)節(jié)組成。眼的變化主要為虹膜的單核細(xì)胞浸潤。內(nèi)臟器官的淋巴瘤性變化呈增生性。皮