醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課件

細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一第一部分醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求四、認(rèn)真分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，探討實(shí)驗(yàn)原理，得出可能的結(jié)論。若實(shí)驗(yàn)結(jié)果與理論不符合時(shí)，要加以分析討論，以逐步提高自己的科學(xué)思維能力。認(rèn)真分析五、實(shí)驗(yàn)課后，須按時(shí)按要求遞交實(shí)驗(yàn)報(bào)告。提交報(bào)告六、防止發(fā)生各種事故。防止事故一、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則，嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。無菌操作二、實(shí)驗(yàn)前做好預(yù)習(xí)，做到心中有數(shù)。課前預(yù)習(xí)三、示教的實(shí)驗(yàn)要仔細(xì)觀察，聯(lián)系有關(guān)理論積極思考。仔細(xì)觀察醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求01第二部分醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則02一進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿實(shí)驗(yàn)服，必要的文具應(yīng)放在抽屜里，個(gè)人物品如書包、衣物等一律不得帶入實(shí)驗(yàn)室。用過的滴管、玻片等帶菌器材，應(yīng)放在指定的地方，不得將帶菌液體傾入水槽。若發(fā)生割破手指、菌液進(jìn)入眼等事故時(shí)，應(yīng)立即報(bào)告老師，及時(shí)進(jìn)行預(yù)防處理。二三四愛護(hù)公物，節(jié)約使用實(shí)驗(yàn)材料。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則02五離開實(shí)驗(yàn)室前，用消毒液將手浸泡5～10分鐘，并用自來水沖洗干凈后，方可離室。值日生負(fù)責(zé)整理清潔實(shí)驗(yàn)室，關(guān)好水、電、門、窗。未經(jīng)許可，不得將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何物品（特別是菌種）帶出室外。六七八實(shí)驗(yàn)完畢，應(yīng)清理桌面，把用過的物品放回原處（如顯微鏡、接種環(huán)、染色液等），需培養(yǎng)物品按要求放溫箱。第三部分實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫0102030506040708實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫03實(shí)驗(yàn)材料結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)意義第四部分實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響能了解水和空氣中細(xì)菌的分布；能說出存在皮膚、咽喉的主要菌種；能舉出常用的皮膚化學(xué)消毒劑種類以及闡述出這些消毒劑的作用濃度和作用原理；能熟練、規(guī)范、正確地進(jìn)行皮膚消毒操作。能夠理解高壓蒸汽滅菌法、紫外線滅菌法及藥物敏感實(shí)驗(yàn)的原理；能熟練、規(guī)范、正確地進(jìn)行高壓蒸汽滅菌、紫外線滅菌法及藥物敏感實(shí)驗(yàn)；能正確判斷解釋藥物敏感實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷及解釋臨床意義實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響教學(xué)目標(biāo)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響實(shí)驗(yàn)內(nèi)容１.空氣中細(xì)菌的檢查２.水中細(xì)菌的檢查３.皮膚消毒試驗(yàn)４.飛沫中細(xì)菌的檢查１.高壓蒸汽滅菌法２.紫外線殺菌試驗(yàn)３.藥物敏感試驗(yàn)細(xì)菌的分布檢查一二外界因素對(duì)細(xì)菌的影響實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響細(xì)菌的分布檢查一、細(xì)菌的分布檢查目的：了解微生物在自然界及正常人體的分布，對(duì)于在醫(yī)療實(shí)踐及科學(xué)實(shí)驗(yàn)中樹立無菌觀念有著重要的意義。

材料：普通瓊脂平板血瓊脂平板

MH瓊脂平板３７℃溫箱無菌棉簽等普通瓊脂平板血瓊脂平板實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（一）空氣中細(xì)菌的檢查（示教）細(xì)菌的分布檢查未被過濾空氣中的細(xì)菌菌落過濾后空氣中的細(xì)菌菌落實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（二）水中細(xì)菌的檢查（示教）細(xì)菌的分布檢查取水樣1ml注入無菌空平皿內(nèi)融化并冷卻至約45℃的培養(yǎng)基將15ml培養(yǎng)基加入平皿倒置于37℃溫箱培養(yǎng)18-24小時(shí)觀察結(jié)果實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（三）皮膚細(xì)菌的檢查1.分區(qū)標(biāo)記

2.接種

3.培養(yǎng)細(xì)菌的分布檢查空白對(duì)照消毒后消毒前常用的皮膚消毒劑實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（四）飛沫中細(xì)菌的檢查用咳碟法將咽喉部細(xì)菌接種于血平板細(xì)菌的分布檢查實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生巨大改變，可導(dǎo)致微生物的主要代謝活動(dòng)發(fā)生障礙，生長停頓，甚至死亡。外界因素對(duì)細(xì)菌的影響實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（一）高壓蒸汽滅菌法（示教）1.原理：利用密閉的金屬鍋，密閉加熱使鍋內(nèi)蒸汽壓力增大，溫度隨之升高，殺菌力增強(qiáng)。外界因素對(duì)細(xì)菌的影響手提式高壓蒸汽滅菌器實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響高壓蒸汽滅菌器構(gòu)造：外界因素對(duì)細(xì)菌的影響高壓蒸汽滅菌器是一個(gè)雙層的金屬圓筒，兩層之間盛水，外層堅(jiān)厚，其上方或前方有金屬厚蓋。蓋旁附有螺旋，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽壓力升高，其溫度亦相應(yīng)的增高。實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響2.高壓蒸汽滅菌器使用方法外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（1）

加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。（2）

蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。（3）

加熱，同時(shí)打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(shí)(103.4kPa,121.3℃)，保持壓力和溫度維持15～30min。（4）

待壓力自行降至零時(shí)，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時(shí)突然打開排氣閥門，以免瓶內(nèi)液體等沖出外溢。

實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響3.高壓蒸汽滅菌器用途外界因素對(duì)細(xì)菌的影響凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（二）紫外線殺菌試驗(yàn)外界因素對(duì)細(xì)菌的影響1.原理：通過紫外線的照射，破壞及改變微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖后代，達(dá)到殺菌的目的。紫外線殺菌特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

簡單便捷、廣譜高效、無二次污染、便于治理和實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)穿透能力弱實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響2.材料外界因素對(duì)細(xì)菌的影響普通瓊脂平板18-24h細(xì)菌培養(yǎng)物紫外線燈等實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響2.方法外界因素對(duì)細(xì)菌的影響普通瓊脂平板18-24h細(xì)菌培養(yǎng)物紫外線燈等細(xì)菌接種于普通瓊脂平板上打開皿蓋，放置于紫外燈下約30cm處，用蓋子蓋住半邊做對(duì)照，照射半小時(shí)后蓋好蓋子。培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（三）藥物敏感實(shí)驗(yàn)外界因素對(duì)細(xì)菌的影響目前臨床微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的方法主要有紙片擴(kuò)散法、稀釋法、抗生素濃度法、自動(dòng)化儀器等實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（三）藥物敏感實(shí)驗(yàn)——標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）外界因素對(duì)細(xì)菌的影響1.原理：將含有定量抗生素的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散，隨著擴(kuò)散距離的增加抗生素的濃度呈對(duì)數(shù)減少,在藥物濃度到達(dá)的范圍內(nèi)對(duì)此藥敏感的細(xì)菌不能生長而形成透明的抑菌圈，不同細(xì)菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映了測試菌對(duì)該藥的敏感程度，并與該藥物對(duì)測試菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)。實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響（三）藥物敏感實(shí)驗(yàn)——標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）外界因素對(duì)細(xì)菌的影響2.材料菌種：葡萄球菌、大腸桿菌菌液培養(yǎng)基：水解酪蛋白瓊脂（MH瓊脂）試劑：各種抗菌藥物紙片（PEN、GEN、STR、CHL)實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響3.方法外界因素對(duì)細(xì)菌的影響用滅菌棉試蘸取試驗(yàn)菌涂抹在MH培養(yǎng)基表面，要均勻涂抹3次，室溫下待干燥以無菌鑷子(燒灼滅菌，注意鑷子要冷卻）取各抗生素紙片貼于表面培養(yǎng)各紙片中心距>24mm,紙片距平板邊緣應(yīng)>15mmPENGENSTRCHL實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響4.結(jié)果判斷外界因素對(duì)細(xì)菌的影響用毫米尺量取抑菌圈直徑，參考實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)表3-6的標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，按敏感（S）、中介（I）、耐藥（R）報(bào)告。

實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響紙片法藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果解釋外界因素對(duì)細(xì)菌的影響抗菌藥物耐藥（mm）中介（mm）敏感（mm）青霉素≤28－≥29慶大霉素≤1213-14≥15鏈霉素≤1112-14≥15氯霉素≤1213-17≥18一、光學(xué)顯微鏡油鏡的使用和保護(hù)法一、光學(xué)顯微鏡油鏡的使用和保護(hù)法顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造圖顯微鏡的使用方法油鏡頭的辨認(rèn)顯微鏡的維護(hù)一、光學(xué)顯微鏡油鏡的使用和保護(hù)法油鏡加香柏油的原理玻璃折射率：

n=1.52香柏油折射率：

n=1.515二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法

細(xì)菌個(gè)體微小，無色半透明，染色后能在顯微鏡下識(shí)別其各種不同結(jié)構(gòu)，并鑒別細(xì)菌。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法（一）革蘭染色法

丹麥細(xì)菌學(xué)家Gram于1884年發(fā)明的一種鑒別細(xì)菌的染色法?？蓪⒓?xì)菌鑒別為革蘭氏陽性G+菌和革蘭氏陰性G-菌兩大類。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法原理1.原理（1）通透性學(xué)說革蘭氏陽性菌細(xì)胞膜的通透性比陰性菌低，進(jìn)入細(xì)胞的染料和碘液結(jié)合生成沉淀，脫色劑較易通過革蘭氏陰性菌的細(xì)胞膜，將碘和染料的復(fù)合物溶解洗出，故易脫色；陽性菌細(xì)胞膜透通性低，故不易脫色。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法原理1.原理（2）等電點(diǎn)學(xué)說

革蘭陽性菌等電點(diǎn)（PI2~3）比革蘭陰性菌的等電點(diǎn)（PI4~5）低。在同一PH條件下，陽性菌比陰性菌所帶負(fù)電荷要多，與帶正電荷的堿性染料結(jié)合力較牢固，不易脫色。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法原理1.原理（3）化學(xué)學(xué)說

革蘭氏陽性菌細(xì)胞內(nèi)含有某種特殊化學(xué)成份，一般認(rèn)為是核糖核酸鎂鹽與多糖的復(fù)合物，它能和料染一煤染劑復(fù)合物相互結(jié)合，使已著色的細(xì)菌不易脫色。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法實(shí)驗(yàn)材料2.實(shí)驗(yàn)材料（1）菌種培養(yǎng)18~24h的葡萄球菌、大腸桿菌及白色念珠菌。（2）試劑生理鹽水、革蘭氏染色液。（3）儀器及用具接種環(huán)、酒精燈、玻片、顯微鏡、香柏油等。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法實(shí)驗(yàn)方法3.實(shí)驗(yàn)方法（1）細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作制備涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片干燥固定二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作3.實(shí)驗(yàn)方法1）涂片①接種環(huán)置于酒精燈的外焰中燒灼滅菌。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作3.實(shí)驗(yàn)方法1）涂片②取1～2環(huán)生理鹽水（NS)置于載玻片上，接種環(huán)用火焰燒灼滅菌。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作3.實(shí)驗(yàn)方法1）涂片③小指和手掌小魚肌側(cè)拔掉棉塞，并燒灼試管口滅菌。用已滅菌冷卻的接種環(huán)伸入試管中取適量菌，注意勿使沾有菌液的接種環(huán)觸及試管壁及試管口。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作3.實(shí)驗(yàn)方法1）涂片④再次滅菌試管口，棉塞略加燒灼放回原處。

⑤將接種環(huán)上之菌涂于載玻片的NS上，制成的菌膜直徑約1cm左右均勻薄層。⑥接種環(huán)用火焰燒灼滅菌放回原處。注：取菌量不應(yīng)過多，以免造成菌體重疊。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法細(xì)菌涂片標(biāo)本的制作3.實(shí)驗(yàn)方法２）干燥①室溫中自然干燥。②加速干燥，將標(biāo)本離火焰半尺高處略烘。注：不宜離火焰過近，以免造成菌體過熱變形。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法3.實(shí)驗(yàn)方法（２）革蘭染色法二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法操作步驟3.實(shí)驗(yàn)方法結(jié)晶紫、初染，60秒碘液媒染60秒丙酮酒精數(shù)滴，脫色約60秒堿性復(fù)紅液2～3滴，30秒鐘待干，鏡檢。注：每一步均需細(xì)流水沖洗。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法結(jié)果觀察４.結(jié)果觀察油鏡觀察結(jié)果（1000×）放大倍數(shù)：10×100二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法結(jié)果觀察４.結(jié)果觀察白色念珠菌革蘭染色（1000×）放大倍數(shù)：10×100二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法意義５.革蘭氏染色意義（1）鑒別細(xì)菌（2）選擇抗菌藥物（3）研究細(xì)菌致病性

G+菌能產(chǎn)生外毒素，G-菌能產(chǎn)生內(nèi)毒素，兩者的致病作用不同。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法革蘭染色法注意事項(xiàng)６.注意事項(xiàng)（1）脫色過度，可使G+菌被誤染為G-菌；（2）脫色時(shí)間的長短還與涂片厚薄有關(guān)，以涂片薄而均勻?yàn)楹?；?）多種因素如菌齡、染色時(shí)間、pH等影響結(jié)果。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法１.原理：

分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高，特別是其中大量分枝菌酸可影響染料穿入。一旦著色后不易被鹽酸酒精脫色。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法２.材料:（1）結(jié)核病人的痰液標(biāo)本（2）抗酸染色液試劑盒（3）試管夾、玻片等。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法２.方法

（1）涂片制備挑取痰液在玻片上涂成痰膜干燥固定二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法２.方法(２）染色方法初染：石炭酸復(fù)紅染液(加染料然后加熱至蒸汽冒出后放至一邊繼續(xù)染色至5min)，水洗。脫色：鹽酸酒精脫至無色，水洗。復(fù)染：堿性美蘭（1min)，水洗。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法２.結(jié)果觀察:抗酸陽性菌為紅色抗酸陰性菌為藍(lán)色二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法抗酸染色法（二）抗酸染色法２.結(jié)果結(jié)果報(bào)告方式（直接涂片法）仔細(xì)觀察300視野(觀察時(shí)間不少于4min)，未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌。

士：可疑。發(fā)現(xiàn)抗酸菌l～2條／300視野。

+：發(fā)現(xiàn)抗酸菌3～9條／100視野。

++：發(fā)現(xiàn)抗酸菌1～9條／10視野。

+++：發(fā)現(xiàn)抗酸菌1～9條／每視野。

++++：發(fā)現(xiàn)抗酸菌≥10條／每視野。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法1.原理

新型隱球菌的莢膜較厚，一般不易著色，同時(shí)菌體折光性較強(qiáng)，用墨汁負(fù)染色法可在黑色背景下看到透亮的菌體。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法2.材料（1）菌種新型隱球菌（2）試劑優(yōu)質(zhì)墨汁（3）其他載玻片、蓋玻片、鑷子二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法2.材料（1）菌種新型隱球菌（2）試劑優(yōu)質(zhì)墨汁（3）其他載玻片、蓋玻片、鑷子二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法3.方法（1）滴一滴墨汁于載玻片,取菌并混勻。（2）蓋蓋玻片（覆蓋于菌液上，注意先將蓋玻片一邊接觸菌液緩緩斜放下，以免產(chǎn)生氣泡）。（3）先低倍鏡找好視野，再換高倍鏡／油鏡觀察。二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法4.結(jié)果觀察二、細(xì)菌標(biāo)本染色檢查法墨汁負(fù)染色法（二）墨汁負(fù)染色法4.臨床意義新型隱球菌可引起全身各組織器官炎癥，最易侵犯的是中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起慢性腦膜炎。墨汁負(fù)染色法可鑒別新型隱球菌。三、細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的觀察三、細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)的觀察細(xì)菌特殊染色法：鞭毛染色法芽胞染色法四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫0102030506040708實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫03實(shí)驗(yàn)材料結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)意義四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求（一）實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容要求1.繪圖葡萄球菌、大腸桿菌及白色念珠菌的基本示意圖，記錄革蘭氏染色結(jié)果，分辨出革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。2.

如果染色結(jié)果不理想，請分析原因。四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求（二）細(xì)菌形態(tài)示意圖繪圖要求1.選擇形態(tài)典型的部分細(xì)菌，紅蘭色筆繪圖。2.繪細(xì)菌的形態(tài)、排列，細(xì)菌的大小比例應(yīng)適宜，輪廓上（如球菌、桿菌）應(yīng)有所區(qū)分。注明菌名：大腸桿菌染色法：放大倍數(shù)：10×100一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)1.細(xì)菌人工培養(yǎng)的目的感染性疾病的病原學(xué)診斷

鑒定細(xì)菌，指導(dǎo)臨床用藥。細(xì)菌學(xué)研究

用于細(xì)菌生理、遺傳變異、致病性和耐藥性等研究。生物制品的制備

疫苗、抗毒素等的制備。一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)2.細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本步驟制備培養(yǎng)基接種培養(yǎng)一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)3.細(xì)菌培養(yǎng)基的種類根據(jù)營養(yǎng)組成和用途可分為基礎(chǔ)、增菌、選擇、鑒別、厭氧根據(jù)物理狀態(tài)分為液體、固體、半固體鑒別培養(yǎng)基一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)3.細(xì)菌培養(yǎng)基的種類普通平板血平板半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)4.培養(yǎng)基的制備調(diào)配成分溶解矯正pH過濾澄清分裝滅菌質(zhì)量檢查和保存一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)5.細(xì)菌培養(yǎng)方法需氧培養(yǎng)法二氧化碳培養(yǎng)法厭氧培養(yǎng)法一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)5.細(xì)菌培養(yǎng)方法需氧培養(yǎng)法二氧化碳培養(yǎng)法厭氧培養(yǎng)法二氧化碳培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)基本知識(shí)（一）細(xì)菌人工培養(yǎng)的基本知識(shí)5.細(xì)菌培養(yǎng)方法燭缸二氧化碳培養(yǎng)法厭氧袋一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)操作內(nèi)容（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作1.操作內(nèi)容操作內(nèi)容目的平板分區(qū)劃線分離細(xì)菌斜面純培養(yǎng)增菌及菌種保存半固體培養(yǎng)觀察動(dòng)力和菌種保存一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作2.材料工具：接種環(huán)、接種針菌種：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌培養(yǎng)基：普通平板培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作2.材料斜面培養(yǎng)基(2-3%瓊脂)半固體培養(yǎng)基(0.2-0.5%瓊脂)普通平板培養(yǎng)基(2-3%瓊脂)一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)操作流程（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作3.操作流程領(lǐng)取菌種及培養(yǎng)基分別進(jìn)行平板、斜面及半固體培養(yǎng)基接種，然后貼上標(biāo)簽。37度恒溫箱培養(yǎng)18～24小時(shí)后觀察結(jié)果。一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作4.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果平板分區(qū)劃線法分區(qū)劃線結(jié)果一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作4.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果斜面純培養(yǎng)一、細(xì)菌的人工培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果（二）細(xì)菌人工培養(yǎng)操作4.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果半固體培養(yǎng)結(jié)果穿刺接種二、細(xì)菌的生化反應(yīng)二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（一）生化反應(yīng)基本原理基本原理不同的細(xì)菌含有不同的分解代謝的酶具有不同的分解代謝途徑對(duì)同一營養(yǎng)物質(zhì)的分解代謝及其產(chǎn)物有所不同知識(shí)點(diǎn)

利用生化方法檢測代謝產(chǎn)物以判斷細(xì)菌的分解代謝特征，從而達(dá)到鑒定細(xì)菌的目的。稱：細(xì)菌的生化反應(yīng)檢測法二、細(xì)菌的生化反應(yīng)常見的生化反應(yīng)基本原理對(duì)糖的發(fā)酵甲基紅試驗(yàn)單糖發(fā)酵試驗(yàn)VP試驗(yàn)對(duì)蛋白質(zhì)的分解吲哚試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)其他試驗(yàn)二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（二）實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料1.菌種大腸埃希菌、沙門氏菌2.微量生化反應(yīng)管葡萄糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、甘露醇、蛋白胨水（靛基質(zhì)）、硫化氫。3.試劑吲哚試劑二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)（1）原理大腸埃希菌：分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣致病性腸道細(xì)菌：大多數(shù)不分解乳糖CO2↑+H2↑糖\醇類細(xì)菌產(chǎn)生的酶酸（HCOOH)脫氫酶（培養(yǎng)基含葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇或蔗糖等一種糖類，并加酸堿指示劑，如溴甲酚紫）二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)（2）方法大腸埃希菌、沙門氏菌37℃培養(yǎng)18～24h接種針穿刺接種5種糖生化反應(yīng)管觀察結(jié)果二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)（3）結(jié)果判斷——觀察培養(yǎng)基顏色變化與氣體產(chǎn)生情況溴甲酚紫紫色黃色中性或堿性酸性對(duì)照+-+有細(xì)菌生長培養(yǎng)基呈混濁，可能出現(xiàn)3種結(jié)果。二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)2.靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)（1）原理玫瑰吲哚（紅色）色氨酸色氨酸酶吲哚（無色）吲哚試劑培養(yǎng)基中加入色氨酸二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)2.靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)（2）結(jié)果判斷——觀察培養(yǎng)基與吲哚試劑交界處顏色變化陽性陰性(+）

（-)二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容

硫化氫試驗(yàn)3.硫化氫試驗(yàn)（1）原理硫化鐵或硫化鉛（黑褐色）含硫氨基酸酶硫化氫（無色）+鐵離子或+鉛離子培養(yǎng)基中加入含硫氨基酸、鉛離子、鐵離子二、細(xì)菌的生化反應(yīng)（三）實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容

硫化氫試驗(yàn)3.硫化氫試驗(yàn)（2）結(jié)果判斷分組與材料分配分組與材料分配分組兩人一組操作內(nèi)容細(xì)菌的人工培養(yǎng)細(xì)菌的生化反應(yīng)菌種金葡菌、大腸桿菌各一支沙門氏菌、大腸桿菌各一支培養(yǎng)基1塊普通平板/人7種生化反應(yīng)管/人1支斜面培養(yǎng)基/人1支半固體培養(yǎng)基/人一、病例的分析方法一、病例的分析方法病例分析病例主訴：持續(xù)發(fā)熱、腹瀉3天。病史：一周前外出旅游，回來后食欲不振，開始發(fā)熱，第一次量體溫是38℃，而后多次量體溫都是39.5℃。發(fā)熱的同時(shí)有腹?jié)q、腹瀉，大便剛開始成形，后成水樣，一天四到五次。曾服用氟哌酸，無效。查體：患者表情淡漠，體溫39℃，脈搏50次/分，腹部觸疹肝脾腫大，其他無異常。二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序（二）腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序血液標(biāo)本糞便標(biāo)本分離培養(yǎng)SS/EMB生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)增菌培養(yǎng)純培養(yǎng)KIA二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序（一）腸桿菌科細(xì)菌分離鑒定常用培養(yǎng)基分離培養(yǎng)——選擇性培養(yǎng)基SS:分解乳糖——菌落呈粉紅色不分解乳糖——菌落呈無色半透明SSEMB二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒別培養(yǎng)基傷寒沙門菌SS大腸桿菌SSSS:分解乳糖——菌落呈粉紅色不分解乳糖——菌落呈無色半透明福氏志賀菌SS二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒別培養(yǎng)基EMB:分解乳糖——菌落呈深紫色并有金屬光澤不分解乳糖——菌落呈無色或淡黃色半透明大腸桿菌EMB平板二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序（一）腸桿菌科細(xì)菌分離鑒定常用培養(yǎng)基2.純培養(yǎng)——KIA培養(yǎng)基下層觀察顏色、產(chǎn)氣：變黃——分解葡萄糖產(chǎn)酸變黃且培養(yǎng)基斷裂——產(chǎn)酸產(chǎn)氣2.觀察黑色沉淀——產(chǎn)生硫化氫上層觀察顏色：變黃——分解乳糖產(chǎn)酸變紅——不分解乳糖二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序KIA培養(yǎng)基結(jié)果可作出初步鑒定葡萄糖乳糖硫化氫大腸埃希菌＋＋－沙門菌屬＋－＋志賀菌屬＋－－二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序陰性對(duì)照銅綠假單胞菌宋內(nèi)志賀菌傷寒沙門菌大腸桿菌變形桿菌二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序3.腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定管二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序生化編碼鑒定管基本原理氨基酸脫羧酶試驗(yàn)賴氨酸鳥氨酸氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基pH↑尸胺腐胺+CO2

為防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果，必須同時(shí)接種氨基酸對(duì)照管，并且接種后在氨基酸管內(nèi)滴加液體石蠟。結(jié)果：指示劑為溴甲酚紫，堿性呈紫色為陽性酸性呈黃色為陰性注意：對(duì)照管應(yīng)為陰性，否則實(shí)驗(yàn)失敗二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序生化編碼鑒定管基本原理②苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)苯丙氨酸苯丙氨酸脫氨酶深綠色反應(yīng)苯丙酮酸結(jié)果：綠色——陽性不變色——陰性+FeCl3二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序生化編碼鑒定管基本原理③脲酶試驗(yàn)（尿素分解試驗(yàn)）尿素尿素酶碳酸銨培養(yǎng)基pH↑結(jié)果：指示劑為酚紅粉紅色——陽性不變色——陰性陽性陰性對(duì)照2NH3+CO2+H2O2NH4OH+CO2二、腸桿菌科細(xì)菌鑒定程序鑒定程序生化編碼鑒定管基本原理④枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)

——培養(yǎng)基中只有枸櫞酸鹽一種碳源，細(xì)菌能利用枸櫞酸鹽則可以生長，并分解氨基酸。枸櫞酸鹽氮源（氨基酸）培養(yǎng)基pH↑溴麝香草酚藍(lán)指示劑變藍(lán)色結(jié)果：藍(lán)色——陽性不變色——陰性對(duì)照+-三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)鑒定菌種血清學(xué)鑒定血清學(xué)診斷診斷疾病玻片凝集反應(yīng)試管凝集反應(yīng)三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理（一）實(shí)驗(yàn)原理根據(jù)抗原抗體反應(yīng)具有高度特異性的特點(diǎn)，用已知抗體來檢測未知抗原（細(xì)菌）；或用已知的抗原（細(xì)菌抗原）來檢測血清中未知抗體的效價(jià)（肥達(dá)反應(yīng)），從而輔助診斷疾病。三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)——沙門氏菌為例沙門氏菌的主要抗原組成O抗原：至少58種,含相同抗原組分歸為一組，引起人類疾病的沙門菌大多數(shù)在A~F組。H抗原：分為Ⅰ、Ⅱ相，Ⅰ相以a、b、c等表示，Ⅱ相以1、2、3等表示。Vi抗原：抗原性弱，不穩(wěn)定，可阻止O抗原與其相應(yīng)抗體的凝集反應(yīng)。三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理1.血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)5050505050505050501:401:801:1601:3201:64050棄掉1234550650NS(μl

)待測血清對(duì)照管①②③④滅活的傷寒菌液（已知抗原）50μl

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待測血清稀釋度徹底混勻52℃,1h100100100100100三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)——肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果判斷與分析（1）

觀察凝集程度上清沉淀凝集程度清亮大的凝集塊++++輕度混濁大多凝集管底+++中等混濁小、部分凝集塊++混濁很小的凝集顆粒+與對(duì)照相同無凝集現(xiàn)象-三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)——肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果判斷與分析（2）判定效價(jià)（滴度）：產(chǎn)生明顯凝集反應(yīng)（++）的最高血清稀釋度為血清中所測抗體的效價(jià)。效價(jià)愈高，表示血清中所含該抗體愈多。如血清的最低稀釋度仍無凝集，或血清效價(jià)低于1：80，則為陰性，應(yīng)報(bào)“<1：80”；如果血清的最高稀釋度1：1280仍呈“++”或更強(qiáng)凝集，則血清效價(jià)應(yīng)報(bào)“>1：1280”。三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)——肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果判斷與分析（3）

人體血清中H與O抗體的性質(zhì)及其消長意義抗體類型體內(nèi)出現(xiàn)特征體內(nèi)出現(xiàn)情況O抗體IgM出現(xiàn)較早，維持時(shí)間短高高低H抗體IgG出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間長高低高患腸熱癥可能性大感染早期、其他沙門菌引起的交叉反應(yīng)預(yù)防接種；非特異性回憶反應(yīng)三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理思考題1.李某發(fā)熱、全身不適，體溫持續(xù)升高，最高達(dá)40℃，采血進(jìn)行肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)檢測，檢測結(jié)果是O抗體凝集效價(jià)是1:80，H抗體凝集效價(jià)是1:320。請根據(jù)肥達(dá)氏試驗(yàn)檢測結(jié)果分析李某的感染情況。三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理沙門氏菌屬國內(nèi)常見菌型診斷抗原表群別菌型抗原OHA甲型副傷寒沙門菌1,2,12a:-B乙型副傷寒沙門菌德比沙門菌鼠傷寒沙門菌1,4,5,121,4,121,4,5,12b:1,2f,g:-i:1,2C

豬霍亂（或丙型副傷寒）沙門菌6,7,(Vi)c:1,5D傷寒沙門氏菌9,12,Vid:-E鴨沙門氏菌3,10e,h:1,6F阿伯丁沙門氏菌11i:1,22.細(xì)菌的血清學(xué)鑒定——玻片凝集反應(yīng)三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)原理沙門氏菌診斷血清（11種已知抗體）O2O4O7O9HaHbHcHdHiViA-F群多價(jià)OA-F群多價(jià)O三、細(xì)菌的血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)（4）結(jié)果分析群別菌型抗原oHA甲型副傷寒沙門菌1,2,12a:-B乙型副傷寒沙門菌德比沙門菌鼠傷寒沙門菌1,4,5,121,4,121,4,5,12b:1,2f,g:-i:1,2C豬霍亂（或丙型副傷寒）沙門菌6,7,(Vi)c:1,5D傷寒沙門氏菌9,12,Vid:-E鴨沙門氏菌3,10e,h:1,6F阿伯丁沙門氏菌11i:1,2四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定（一）腸桿菌科細(xì)菌鑒定1.材料菌種1號(hào)菌、2號(hào)菌培養(yǎng)基SS平板、EMB平板、KIA培養(yǎng)基、腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定管試劑液體石蠟、吲哚試劑、FeCl3四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定2.分組與材料分配（1）2人/組（2）1種待檢菌/人（3）SS、EMB各1個(gè)/人（4）1支KIA/人（5）生化編碼管1套/人四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定3.方法（1）將待檢細(xì)菌分別接種相應(yīng)培養(yǎng)基平板分區(qū)劃線KIA先穿刺接種底層再在斜面劃線接種

微量管直接穿刺接種（2）7℃培養(yǎng)18~24小時(shí)（3）觀察結(jié)果四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定4.微量管使用方法（1）按順序排列（2）標(biāo)簽、液面在膠布外（3）在所有微量管中接種細(xì)菌四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定糖、醇+黃色硫化氫+黑色-紫色-不變色黃色，氣泡吲哚+粉紅色賴氨酸鳥氨酸+紫色-不變色-黃色枸櫞酸鹽+藍(lán)色苯丙氨酸+綠色-淺綠色-不變色尿素酶+粉紅色-不變色+各項(xiàng)生化編碼鑒定管結(jié)果判斷四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定5.結(jié)果判斷記錄各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果填入腸桿菌科11E編碼鑒定結(jié)果記錄表計(jì)算總值查詢腸桿菌科11E編碼鑒定手冊得出菌種名稱。如果有必要應(yīng)做補(bǔ)充試驗(yàn)。四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定腸桿菌科生化編碼鑒定管結(jié)果記錄方法AG++++-----470AG470大腸埃希菌+四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容腸桿菌科細(xì)菌鑒定腸桿菌科生化編碼鑒定管結(jié)果記錄方法A+-++-++--730沙門菌屬A730+四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容血清學(xué)試驗(yàn)（二）血清學(xué)試驗(yàn)——血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定材料分配分組4人/組菌種待測菌種一支診斷血清1盒/組四、實(shí)驗(yàn)操作內(nèi)容血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)鑒定流程A-F群多價(jià)及ViA-F群多價(jià)-Vi-非沙門氏菌，無需繼續(xù)鑒定A-F群多價(jià)+Vi-初步判斷為沙門氏菌屬繼續(xù)鑒定O抗原、H抗原成分。A-F群多價(jià)-Vi+初步判斷為沙門氏菌屬去除菌體Vi莢膜繼續(xù)鑒定其他抗原成分。病例分析的書寫要求病因，病史、主要病癥體格檢查輔助檢查分析結(jié)論病例1王某某，女，51歲，農(nóng)民主訴：右手指割傷5天，發(fā)熱、頭疼2天病史：患者于5天前手指被鐮刀割傷，除稍加包扎外未作任何處置。包扎傷口因洗菜等多次被水弄濕，次日手指腫痛，開始服用去痛片及磺胺等，近兩天自覺發(fā)熱、頭疼、全身不適而求醫(yī)。體檢：右手食指傷口紅腫，有少許粘稠黃白色分泌物，右液窩淋巴結(jié)可觸及，余均正常。體溫37.8℃，白細(xì)胞總數(shù)12000/mm3，中性粒細(xì)胞80%。病例分析中年女性2.右手指割傷5天，手指腫痛4天，發(fā)熱、頭疼2天。查體：T37.8℃；右手指紅腫，有黃色膿液；右腋窩淋巴結(jié)腫大。輔助檢查：白細(xì)胞總數(shù)12000/mm3，中性粒細(xì)胞80%。右手指割傷后化膿性炎癥

需氧菌：葡萄球菌、鏈球菌、銅綠假單胞菌等厭氧菌：產(chǎn)氣莢膜梭菌、無芽胞厭氧菌等創(chuàng)傷感染化膿菌病例2任某某，男，21歲，醫(yī)學(xué)院學(xué)生主訴：持續(xù)發(fā)熱5天，伴全身不適。病史：患者于2周前到校外的小食店進(jìn)食涼菜，于5天前無明顯誘因出現(xiàn)發(fā)冷發(fā)燒，全身不適，多汗，食欲不振等。體檢：患者呈急性面容、潮紅、神清但略有呆滯，前胸見散在的細(xì)小紅色丘疹。體溫39.4℃，脈緩52次/min，心、肺無陽性體癥，睥可觸及，白細(xì)胞3600/mm3，中性粒細(xì)胞60%。

病例分析青年男性進(jìn)食涼菜后發(fā)熱，伴全身不適5天。查體：體溫39.4℃，脈緩52次/min；表情淡漠；前胸皮膚玫瑰疹；脾大。輔助檢查：白細(xì)胞3600/mm3，中性粒細(xì)胞60%。疑似沙門菌感染所導(dǎo)致的腸熱癥

病例3

患者黃××，男，65歲，因外傷手術(shù)后持續(xù)發(fā)熱，腹痛，于2007年3月31日再次會(huì)診?；颊哂谝恢芮耙蜍嚨?，造成腹部外傷，腸穿孔，緊急送醫(yī)院作腸吻合術(shù)，輸入青霉素?；颊咝g(shù)后體溫仍高達(dá)39℃，腹部有明顯壓痛，危重病容。遂由內(nèi)、外科醫(yī)師大會(huì)診。經(jīng)化驗(yàn)檢查，白細(xì)胞總數(shù)5000/mm3，中性粒細(xì)胞90%，淋巴細(xì)胞10%，血培養(yǎng)有革蘭氏陰性桿菌生長。病例分析老年男性腹部外傷手術(shù)后持續(xù)發(fā)熱，腹痛一周。查體：體溫39℃；危重病容；腹部明顯壓痛。輔助檢查：白細(xì)胞5000/mm3，中性粒細(xì)胞90%，淋巴細(xì)胞10%，血培養(yǎng)有革蘭氏陰性桿菌生長。疑似腸道細(xì)菌引起的腸道外感染病例4患者：男，27歲。主訴：左下頜腫痛伴發(fā)熱5天?，F(xiàn)病史：7天前患者左下后牙出現(xiàn)持續(xù)性鈍痛，逐漸加重，后發(fā)展為劇烈跳痛；5天前左下頜突然腫脹，疼痛更加劇烈，并向同側(cè)耳顳部放射。經(jīng)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生院連續(xù)4天抗菌治療（靜脈滴注青霉素），未見好轉(zhuǎn)，局部疼痛和腫脹更加明顯，并有吞咽痛及開口輕度受限?；颊唧w溫升高，食欲減退，精神疲憊。既往史：左下后牙反復(fù)疼痛史1年；每次發(fā)作時(shí)，均可經(jīng)抗生素治療后好轉(zhuǎn)。體檢：患者急性痛苦面容，體溫38.6度，左頜面部腫脹，下頜骨下緣輪廓消失，皮膚緊張，壓痛，皮溫增高，膚色發(fā)紅，有波動(dòng)感。開口度3cm。齦及前庭溝黏膜充血水腫，齦袋內(nèi)有膿液?？诘尊つこ溲[，舌運(yùn)動(dòng)輕度受限。實(shí)驗(yàn)室檢查：白細(xì)胞15000/mm3，中性粒細(xì)胞90％。病例分