臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全管理課件(PPT50張)

臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全管理2021/10/10星期日1某醫(yī)大附院報(bào)告了2例感染SARS的病例病例1：女，31歲，檢驗(yàn)師

患者2003年4月10日出現(xiàn)發(fā)熱，體溫持續(xù)性升高，達(dá)39-40℃。白細(xì)胞計(jì)數(shù)波動(dòng)在2-4×109/L。于門(mén)診拍胸片示雙肺未見(jiàn)異常。發(fā)熱后第6天以高熱原因待查收入呼吸科病房，予以抗生素治療未見(jiàn)好轉(zhuǎn)。患者在發(fā)病前一周曾給本院一名發(fā)熱護(hù)士查便常規(guī)，未戴口罩，該護(hù)士后被確診為SARS。高熱第8天側(cè)位胸片見(jiàn)心后緣左肺片狀陰影，疑似SARS住院。入院后呼吸困難，兩肺陰影增多，確診為SARS。2021/10/10星期日2病例2：男，54歲，主管檢驗(yàn)師患者于2003年4月18日晚出現(xiàn)寒戰(zhàn)，次日感覺(jué)全身酸痛，當(dāng)晚自測(cè)體溫37.2℃。于4月20日清晨5點(diǎn)發(fā)熱至38.5℃，遂來(lái)本院就診?；颊?月7日起多次收集SARS患者分泌物（痰和咽拭子）及排泄物（大便）并進(jìn)行鏡檢，雖然戴有口罩，但鏡檢時(shí)未罩嚴(yán)鼻孔，也未戴防護(hù)鏡、穿隔離衣。入院第4天確診為SARS。2021/10/10星期日3一、生物安全基本知識(shí)什么叫實(shí)驗(yàn)室生物安全？Laboratorybilsafety

實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來(lái)訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任的要求?！皩?shí)驗(yàn)室生物安全”一詞用來(lái)描述那些用以防止發(fā)生病原體或毒素?zé)o意中暴露及意外釋放的防護(hù)原則、技術(shù)以及實(shí)踐。2021/10/10星期日4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)（biosafetyprotectionforlaboratories)

是指當(dāng)實(shí)驗(yàn)室工作人員所處理的實(shí)驗(yàn)對(duì)象含有致病性微生物及其毒素時(shí)，通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、使用個(gè)體防護(hù)設(shè)施、嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)化工作及操作程序等方面采取綜合措施，以確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)室對(duì)象侵染，確保周?chē)h(huán)境不受污染。2021/10/10星期日5一、生物安全基本知識(shí)實(shí)驗(yàn)室生物安全保障（laboratorybiosecurity）

“實(shí)驗(yàn)室生物安全保障”則是指單位和個(gè)人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉(zhuǎn)移或有意釋放而采取的安全措施。2021/10/10星期日6氣溶膠aerosols

懸浮于氣體介質(zhì)中的粒徑一般為0.001~100μm

的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對(duì)穩(wěn)定的分散體系。2021/10/10星期日7一、生物安全基本知識(shí)

——感染性微生物的危險(xiǎn)度等級(jí)分類(lèi)危險(xiǎn)度1級(jí)（無(wú)或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）不太可能引起人或動(dòng)物致病的微生物。危險(xiǎn)度2級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低）病原體能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染，但對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險(xiǎn)有限。危險(xiǎn)度3級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)高，群體危險(xiǎn)低）病原體通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)發(fā)生感染個(gè)體向其他個(gè)體的傳播，并且對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施。危險(xiǎn)度4級(jí)（個(gè)體和群體的危險(xiǎn)均高）病原體通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個(gè)體之間的直接或間接傳播，對(duì)感染一般沒(méi)有有效的預(yù)防和治療措施。2021/10/10星期日8一、生物安全基本知識(shí)

——

實(shí)驗(yàn)室分級(jí)實(shí)驗(yàn)室可以分為：基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室——生物安全防護(hù)水平一級(jí)（BSL-1）基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室——生物安全防護(hù)水平二級(jí)（BSL-2）防護(hù)實(shí)驗(yàn)室——生物安全防護(hù)水平三級(jí)（BSL-3）最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室——生物安全防護(hù)水平四級(jí)（BSL-4）根據(jù)操作不同危險(xiǎn)度等級(jí)微生物所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn)、建筑構(gòu)造、防護(hù)設(shè)施、儀器、操作以及操作程序來(lái)決定實(shí)驗(yàn)室的生物安全水平。表1敘述了與不同危險(xiǎn)度等級(jí)相對(duì)應(yīng)的（而非“等同的”）各危險(xiǎn)度等級(jí)微生物所要求的實(shí)驗(yàn)室生物安全水平。2021/10/10星期日9危險(xiǎn)度等級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室類(lèi)型實(shí)驗(yàn)室操作安全設(shè)施1級(jí)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室——生物安全水平一級(jí)基礎(chǔ)的教學(xué)、研究GMT不需要；開(kāi)放實(shí)驗(yàn)臺(tái)2級(jí)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室——生物安全水平二級(jí)初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)；診斷、研究加防護(hù)服、生物危害標(biāo)志開(kāi)放實(shí)驗(yàn)臺(tái)，此外需BSC用于防護(hù)可能生成的氣溶膠3級(jí)防護(hù)實(shí)驗(yàn)室——生物安全水平三級(jí)特殊的診斷、研究在二級(jí)生物安全防護(hù)水平上增加特殊防護(hù)服、進(jìn)入制度、定向氣流BSC和／或其他所有實(shí)驗(yàn)室工作所需要的基本設(shè)備4級(jí)最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室——生物安全水平四級(jí)危險(xiǎn)病原體研究在三級(jí)生物安全防護(hù)水平上增加氣鎖入口、出口淋浴、污染物品的特殊處理Ⅲ級(jí)BSC或Ⅱ級(jí)BSC并穿著正壓服、雙開(kāi)門(mén)高壓滅菌器（穿過(guò)墻體）、經(jīng)過(guò)濾的空氣生物安全水平、操作和設(shè)備

BSC:生物安全柜；GMT:微生物操作技術(shù)規(guī)范2021/10/10星期日10生物安全水平1級(jí)2級(jí)3級(jí)4級(jí)實(shí)驗(yàn)室隔離a不需要不需要需要需要房間能夠密閉消毒不需要不需要需要需要通風(fēng)——向內(nèi)的氣流——通過(guò)建筑系統(tǒng)的通風(fēng)設(shè)備——HEPA過(guò)濾排風(fēng)不需要不需要不需要最好有最好有不需要需要需要需要/不需要b需要需要需要雙門(mén)入口不需要不需要需要需要?dú)怄i不需要不需要不需要需要帶淋浴設(shè)施的氣鎖不需要不需要不需要需要通過(guò)間不需要不需要需要/不同生物安全水平對(duì)設(shè)施的要求

a在環(huán)境與功能上與普通流動(dòng)環(huán)境隔離b取決于排風(fēng)位置2021/10/10星期日11生物安全水平1級(jí)2級(jí)3級(jí)4級(jí)帶淋浴設(shè)施的通過(guò)間不需要不需要需要/不需要不需要污水處理不需要不需要需要需要高壓滅菌器——現(xiàn)場(chǎng)——實(shí)驗(yàn)室內(nèi)——雙門(mén)不需要不需要不需要最好有不需要不需要需要最好有最好有需要需要需要生物安全柜不需要最好有需要需要人員安全監(jiān)控條件d不需要不需要最好有需要不同生物安全水平對(duì)設(shè)施的要求c取決于實(shí)驗(yàn)室中所使用的微生物因子

d例如：觀察窗、閉路電視、雙向通訊設(shè)備2021/10/10星期日12個(gè)體防護(hù)裝備裝備避免的危害安全性特征實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣污染衣服背面開(kāi)口罩在日常服裝外塑料圍裙污染衣服防水鞋襪碰撞和噴濺不露腳趾護(hù)目鏡碰撞和噴濺防碰撞鏡片（必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡）側(cè)面有護(hù)罩安全眼鏡碰撞防碰撞鏡片（必須有視力校正）側(cè)面有護(hù)罩面罩碰撞和噴濺罩住整個(gè)面部發(fā)生意外時(shí)易于取下防毒面具吸入氣溶膠在設(shè)計(jì)上包括一次性使用的、整個(gè)面部或一半面部空氣凈化的、整個(gè)面部或加罩的動(dòng)力空氣凈化（poweredairpurifying，PAPR）的以及供氣的防毒面具手套直接接觸微生物劃破得到微生物學(xué)認(rèn)可的一次性乳膠、乙烯樹(shù)脂或聚腈類(lèi)材料·保護(hù)手·網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)2021/10/10星期日13一級(jí)和二級(jí)生物安全水平安全指南2021/10/10星期日14主要內(nèi)容實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施實(shí)驗(yàn)室的基本規(guī)范健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備檢測(cè)過(guò)程安全防護(hù)廢棄物處理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急程序2021/10/10星期日15一、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室和安排某些類(lèi)型的實(shí)驗(yàn)工作時(shí)，對(duì)于那些可能造成安全問(wèn)題的情況要加以特別關(guān)注，這些情況包括：1、氣溶膠的形成2、處理大容量和∕或高濃度微生物3、儀器設(shè)備過(guò)度擁擠和過(guò)多4、嚙齒動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物的侵?jǐn)_5、未經(jīng)允許人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室6、工作流程：一些特殊標(biāo)本和試劑的使用。設(shè)施和設(shè)備要求詳見(jiàn)GB/T19489-2008中的要求2021/10/10星期日16典型的一級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室2021/10/10星期日17典型的二級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。

門(mén)保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開(kāi)。2021/10/10星期日18二、實(shí)驗(yàn)室的基本規(guī)范

BSL-Ⅰ和BSL-Ⅱ?qū)嶒?yàn)室：1．進(jìn)入規(guī)定

2．工作人員的防護(hù)要求

3.有關(guān)安全操作

4.實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)5.生物安全管理2021/10/10星期日191.進(jìn)入規(guī)定1、在處理危險(xiǎn)度2級(jí)或更高危險(xiǎn)度級(jí)別的微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室門(mén)上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志（圖1）。2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。3、實(shí)驗(yàn)室的門(mén)應(yīng)保持關(guān)閉。4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。5、進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)特別批準(zhǔn)。6、與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。2021/10/10星期日202021/10/10星期日212.人員防護(hù)1、在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，任何時(shí)候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。5、嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書(shū)館、員工休息室和衛(wèi)生間）。6、不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。9、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。2021/10/10星期日223.有關(guān)安全操作1、嚴(yán)禁用口吸移液管。2、嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn)行。4、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液，皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存這些事件或事故的書(shū)面報(bào)告。6、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書(shū)面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果，可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實(shí)驗(yàn)室的手寫(xiě)文件必須保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒(méi)有受到污染。2021/10/10星期日234.實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺(tái)面的污染。3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。4、在進(jìn)行包裝和運(yùn)輸時(shí)必須遵循國(guó)家和∕或國(guó)際的相關(guān)規(guī)定。5、如果窗戶可以打開(kāi)，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入的紗窗。2021/10/10星期日245.生物安全管理1、實(shí)驗(yàn)室主任（對(duì)實(shí)驗(yàn)室直接負(fù)責(zé)的人員）負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及安全或操作手冊(cè)。2、實(shí)驗(yàn)室主管（向?qū)嶒?yàn)室主任匯報(bào)）應(yīng)當(dāng)保證提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)。3、要將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員，同時(shí)要求他們閱讀生物安全或操作手冊(cè)，并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作和規(guī)程。實(shí)驗(yàn)室主管應(yīng)當(dāng)確保所有實(shí)驗(yàn)室人員都了解這些要求。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊(cè)。4、應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的控制方案。5、如有必要，應(yīng)為所有實(shí)驗(yàn)室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)和治療，并應(yīng)妥善保存相應(yīng)的醫(yī)學(xué)記錄。2021/10/10星期日25三、健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)主管機(jī)構(gòu)有責(zé)任通過(guò)實(shí)驗(yàn)室主任來(lái)確保實(shí)驗(yàn)室全體工作人員接受適當(dāng)?shù)慕】当O(jiān)測(cè)。監(jiān)測(cè)的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。為達(dá)到這些目的，應(yīng)進(jìn)行如下工作：1、根據(jù)需要提供主動(dòng)或被動(dòng)免疫（工作人員的免疫接種）2、促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室感染的早期檢測(cè)3、應(yīng)禁止高度易感人群（如孕婦或免疫損傷人員）在高危險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)室中工作4、提供有效的個(gè)體防護(hù)裝備和方法。2021/10/10星期日26在二級(jí)生物安全水平操作微生物的實(shí)驗(yàn)室工作人員的監(jiān)測(cè)指南：1、必須有錄用前或上崗前的體檢。記錄個(gè)人病史，并進(jìn)行一次有目的的職業(yè)健康評(píng)估。2、實(shí)驗(yàn)室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄。3、育齡期婦女應(yīng)知道某些微生物（如風(fēng)疹病毒）的職業(yè)暴露對(duì)未出生孩子的危害。保護(hù)胎兒的正確措施因婦女可能接觸的微生物而異。2021/10/10星期日27四、培訓(xùn)

進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn),方能取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織,熟悉實(shí)驗(yàn)室工作和操作規(guī)范的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括:1.實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)定、自身防護(hù)的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定；2.實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)儀器裝備的使用方法；3.正確的著裝方法；4.微生物學(xué)操作基本技術(shù)及無(wú)菌操作方法；5.實(shí)驗(yàn)室清潔及消毒方法；6.意外事故處理方法；7.國(guó)內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。2021/10/10星期日28培訓(xùn)的實(shí)施細(xì)則

1.理論培訓(xùn):(l)培訓(xùn)目標(biāo):①熟悉本實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度和操作規(guī)范,形成初步的實(shí)驗(yàn)室工作概念。②了解本實(shí)驗(yàn)室從事工作的特點(diǎn)以及各種微生物的危害評(píng)估文件。(2)培訓(xùn)方式:

講解。(3)培訓(xùn)內(nèi)容:①本實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)成文的規(guī)章制度:生物安全防護(hù)、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購(gòu)制度、儀器使用制度等。②實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度和生物安全管理手冊(cè)。(4)考核:

由本實(shí)驗(yàn)室三位工作人員組織對(duì)理論學(xué)習(xí)的書(shū)面考試和面試工作。書(shū)面考試注重其掌握的準(zhǔn)確程度,面試主要測(cè)試其熟練程度和靈活應(yīng)變能力?？己吮竞细裾唔氈匦聦W(xué)習(xí),不能進(jìn)入下一步的培訓(xùn)。2021/10/10星期日29培訓(xùn)的實(shí)施細(xì)則

2.常規(guī)技能培訓(xùn):

(l)培訓(xùn)目標(biāo):①熟練基本實(shí)驗(yàn)操作和儀器的使用；②初步培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基本觀念和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。(2)培訓(xùn)方式:

現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。(3)培訓(xùn)內(nèi)容: ①衛(wèi)生打掃:實(shí)驗(yàn)室地面、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、超凈臺(tái)面、垃圾處理以及打掃得先后順序；工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。②實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作技術(shù):包括無(wú)菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌（毒）種保存等。③ 小型儀器的使用：微量移液器和移液管的使用、pH計(jì)和試紙、天平、混勻器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。④大型儀器的使用:普通冰箱和低溫冰箱(存放和處理樣品)、高壓鍋、離心機(jī)、液氮罐、生物安全柜、培養(yǎng)箱、顯微鏡等。⑤消毒和滅菌方法:物理滅菌（紫外、過(guò)濾、灼燒、高壓)法、化學(xué)滅菌(熏蒸、酒精、消毒液)法等。

2021/10/10星期日30五、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備選擇設(shè)備時(shí)應(yīng)符合一些基本原則，即：1、在設(shè)計(jì)上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸2、建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求3、設(shè)備裝配后應(yīng)無(wú)毛刺、銳角以及易松動(dòng)的部件4、設(shè)備的設(shè)計(jì)、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護(hù)、清潔、清除污染和進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。需要詳細(xì)咨詢(xún)?cè)O(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格，以確保設(shè)施具備必要的安全特性。2021/10/10星期日31基本生物安全設(shè)備1、移液輔助器——避免用口吸的方式移液。有不同設(shè)計(jì)的多種產(chǎn)品可供使用。2、生物安全柜，在以下情況使用：——處理感染性物質(zhì)；如果使用密封的安全離心杯，并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣，則這類(lèi)材料可在開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室離心——空氣傳播感染的危險(xiǎn)增大時(shí)——進(jìn)行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(shí)（包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動(dòng)、超聲破碎、打開(kāi)內(nèi)部壓力和周?chē)h(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動(dòng)物鼻腔接種以及從動(dòng)物或卵胚采集感染性組織）。3、一次性塑料接種環(huán)，也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠。4、螺口蓋試管及瓶子。5、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當(dāng)工具。6、一次性巴斯德塑料移液管，盡量避免使用玻璃制品。7、在投入使用前，像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進(jìn)行驗(yàn)收。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說(shuō)明書(shū)定期檢測(cè)。2021/10/10星期日32六、運(yùn)輸過(guò)程

——安全操作注意事項(xiàng)感染性物質(zhì)（菌種）的儲(chǔ)存、包裝與運(yùn)輸

食品微生物檢測(cè)中使用的標(biāo)準(zhǔn)（參照菌種）的包裝與運(yùn)輸應(yīng)按照《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《人間傳染的病原微生物名錄》有關(guān)規(guī)定進(jìn)行。以食品微生物檢測(cè)中常見(jiàn)的沙門(mén)氏菌屬為例，其屬于第三類(lèi)病原微生物，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別為二級(jí)。運(yùn)輸包裝分類(lèi)為B類(lèi)。具體要求如下：1.運(yùn)輸專(zhuān)用名稱(chēng)為：診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本或生命物質(zhì)B類(lèi)。英文運(yùn)輸專(zhuān)用名稱(chēng)為：Biologicalsubstance，categoryB。UN編號(hào)為：UN3373。2.應(yīng)有三層包裝：第一層包裝要求用保存標(biāo)本的原始容器(外螺旋管),稱(chēng)為主容器(見(jiàn)圖1)，需將蓋口密封，主容器單包裝最大運(yùn)輸量液體1L，固體4kg；運(yùn)輸標(biāo)本的主容器2021/10/10星期日33第二層包裝可以采用專(zhuān)用二級(jí)包裝桶或耐高壓塑料袋，稱(chēng)為輔助容器(見(jiàn)圖2)，應(yīng)防水、防破損、防泄漏，并含吸收材料；運(yùn)輸標(biāo)本的輔助容器(吸收材料)

2021/10/10星期日34七、廢棄物處理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立廢棄物處理程序要對(duì)感染性物質(zhì)及其包裝物進(jìn)行鑒別并分別進(jìn)行處理，相關(guān)工作要遵守國(guó)家和國(guó)際規(guī)定。廢棄物可以分成以下幾類(lèi)：1、可重復(fù)或再使用，或按普通“家庭”廢棄物丟棄的非污染（非感染性）廢棄物2、污染（感染性）銳器——皮下注射用針頭、手術(shù)刀、刀子及破碎玻璃；這些廢棄物應(yīng)收集在帶蓋的不易刺破的容器內(nèi)，并按感染性物質(zhì)處理3、通過(guò)高壓滅菌和清洗來(lái)清除污染后重復(fù)或再使用的污染材料4、高壓滅菌后丟棄的污染材料5、直接焚燒的污染材料。2021/10/10星期日35八、實(shí)驗(yàn)室安全應(yīng)急程序意外事故應(yīng)對(duì)方案應(yīng)當(dāng)提供以下操作規(guī)范：1、防備自然災(zāi)害，如火災(zāi)、洪水、地震和爆炸2、生物危害的危險(xiǎn)度評(píng)估3、意外暴露的處理和清除污染4、人員和動(dòng)物從現(xiàn)場(chǎng)的緊急撤離5、人員暴露和受傷的緊急醫(yī)療處理6、暴露人員的醫(yī)療監(jiān)護(hù)7、暴露人員的臨床處理8、流行病學(xué)調(diào)查9、事故后的繼續(xù)操作。2021/10/10星期日36在制定意外事故應(yīng)對(duì)方案時(shí)應(yīng)考慮以下幾方面問(wèn)題：1、高危險(xiǎn)度等級(jí)微生物的鑒定2、高危險(xiǎn)區(qū)域的地點(diǎn)，如實(shí)驗(yàn)室、儲(chǔ)藏室和動(dòng)物房3、明確處于危險(xiǎn)的個(gè)體和人群4、明確責(zé)任人員及其責(zé)任，如生物安全官員、安全人員、地方衛(wèi)生部門(mén)、臨床醫(yī)生、微生物學(xué)家、獸醫(yī)學(xué)家、流行病學(xué)家以及消防和警務(wù)部門(mén)5、列出能接受暴露或感染人員進(jìn)行治療和隔離的單位6、暴露或感染人員的轉(zhuǎn)移7、列出免疫血清、疫苗、藥品、特殊儀器和物資的來(lái)源8、應(yīng)急裝備的供應(yīng)，如防護(hù)服、消毒劑、化學(xué)和生物學(xué)的溢出處理盒、清除污染的器材物品。2021/10/10星期日37二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（1）手套的損壞、污染1.手套被污染時(shí)應(yīng)立即用消毒劑噴灑手套；2.脫下手套，放入黃色垃圾袋內(nèi)，待消毒，脫手套的方法為：a.用一手捏起另一只手套近手腕處的外緣；b.將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)；c.用戴著手套的手拿住該手套；d.用脫去手套的手指插入另一手套腕部?jī)?nèi)面；e.脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個(gè)由兩個(gè)手套組成的袋狀；f.丟棄在高溫消毒袋中待消毒處理；g.更換新手套繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。注意：以上操作要遠(yuǎn)離面部。

2021/10/10星期日38二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（2）衣物污染1.盡快脫掉最外層防護(hù)服，并注意防止感染性物質(zhì)進(jìn)一步擴(kuò)散；2.將已污染的防護(hù)服放入黃色垃圾袋內(nèi)，待高壓滅菌；3.脫掉手套，到污染區(qū)出口處洗手；4.更換防護(hù)服和手套；5.必要時(shí)對(duì)發(fā)生污染及脫防護(hù)服的地方進(jìn)行消毒處理（如果內(nèi)衣被污染，應(yīng)立即脫掉已污染的衣物，消毒處理）。2021/10/10星期日39二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（3）感染性物質(zhì)濺灑污染皮膚及粘膜a.感染性液體（主要指增菌培養(yǎng)液）外溢到皮膚，應(yīng)立即停止工作，脫掉手套，用75%的酒精進(jìn)行皮膚消毒，再用大量水沖洗。手部清洗消毒的方法：應(yīng)推薦使用肘動(dòng)式或自動(dòng)式洗手開(kāi)關(guān)，用流動(dòng)水沖洗手部多次，然后用液體皂滴在手上，反復(fù)撮手，再用水徹底沖洗（動(dòng)作輕揉，水不要開(kāi)的太大），清洗完畢，用干凈的紙巾或手巾擦干，可以用75%的酒精擦手來(lái)清除雙手的輕度污染，在沒(méi)有洗手池的地點(diǎn)，可以使用含酒精的“免洗”手部清潔產(chǎn)品替代。b.感染性液體濺入眼睛，應(yīng)立即停止工作，脫掉手套，迅速到緩沖區(qū)用洗眼器沖洗，再用生理鹽水沖洗（注意動(dòng)作輕柔，勿損傷眼睛）。洗眼器的使用方法為：取下洗眼器罩，受感染者的眼睛部位擺放到?jīng)_眼器花灑正上方，將洗眼器開(kāi)關(guān)打開(kāi)，洗眼器花灑即有清水噴出。以上兩種情況都應(yīng)做適當(dāng)?shù)念A(yù)防治療和醫(yī)學(xué)觀察，并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全員進(jìn)行事故記錄。2021/10/10星期日40二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（4）刺傷、切割傷或擦傷應(yīng)急處理要保持鎮(zhèn)靜，立即停止實(shí)驗(yàn)，脫掉手套，用清水和肥皂水清洗傷口，盡量擠出傷口處的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗傷口，適當(dāng)?shù)陌?。及時(shí)就醫(yī)，告知醫(yī)生受傷原因及可能的微生物污染，必要時(shí)要進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。2021/10/10星期日41二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（5）潛在危害性氣溶膠的釋放操作中生物安全柜突然停機(jī)或轉(zhuǎn)為正壓；大量感染性物質(zhì)溢出、濺灑；非封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂都有可能造成氣溶膠的釋放。此時(shí)所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，報(bào)告實(shí)驗(yàn)室安全員，在1小時(shí)內(nèi)任何人不得進(jìn)入事發(fā)實(shí)驗(yàn)室，以使氣溶膠排出和重粒子沉降；無(wú)中央通風(fēng)系統(tǒng)則應(yīng)推遲進(jìn)入（如24小時(shí)），貼出標(biāo)識(shí)以示禁止入內(nèi)，過(guò)后由專(zhuān)業(yè)人員指導(dǎo)清除污染，如甲醛蒸汽熏蒸，操作時(shí)注意防護(hù)，暴露人員應(yīng)進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察，必要時(shí)及時(shí)就醫(yī)。2021/10/10星期日42二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（6）生物安全柜內(nèi)溢灑當(dāng)生物安全柜內(nèi)發(fā)生溢灑時(shí)，處理溢灑物不要將頭伸入安全柜內(nèi)，也不要將臉直接面對(duì)前操作口，而應(yīng)處于前視面板的后方。選擇消毒劑時(shí)需要考慮消毒劑對(duì)生物安全柜的腐蝕性（使用含氯制劑后再用清水擦拭）。當(dāng)溢灑的量不足1mL時(shí)，可直接用消毒劑浸濕的紙巾（或其它材料）擦拭。使用消毒劑時(shí)，要從溢出區(qū)域的外圍開(kāi)始，向中心進(jìn)行處理。當(dāng)生物安全柜內(nèi)大量溢出時(shí)，要1.使生物安全柜保持開(kāi)啟狀態(tài)；2.在溢灑物上從外圍向中心覆蓋浸有消毒劑的吸收材料，作用一定時(shí)間以發(fā)揮消毒作用。（必要時(shí)，用消毒劑浸泡工作表面以及排水溝和接液槽）；3.消毒后脫下手套。如果防護(hù)服已被污染，脫掉污染的防護(hù)服后，洗手；4.穿好新的防護(hù)裝備，如手套、防護(hù)服、護(hù)目鏡等；5.小心將吸收了溢灑物的吸收材料和溢灑物收集到專(zhuān)用的收集袋或容器中，并反復(fù)用新的吸收材料將剩余物質(zhì)吸凈；6.破碎的玻璃或其它銳器要用鑷子或鉗子處理；7.用消毒劑擦拭或噴灑安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)，作用一定時(shí)間后，用潔凈水擦去消毒劑；8.必要時(shí)，使用甲醛熏蒸。2021/10/10星期日43二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（7）感染性物質(zhì)溢灑在臺(tái)面、地面感染性物質(zhì)溢灑在臺(tái)面、地面，此時(shí)，需要準(zhǔn)備的處理工具為：

——對(duì)感染性物質(zhì)有效的消毒液：消毒液需要按使用要求定期配制（次氯酸鈉溶液的使用濃度為0.5－1%）；

——消毒液盛放容器（如噴壺）；

——鑷子或鉗子

——耐高壓的掃帚和簸箕，或其他處理銳器的機(jī)械裝置；

——足量的紙巾或其他適宜的吸附材料；

——用于盛放感染性溢出物以及清理物品的生物危害袋；

——橡膠手套；

——面部防護(hù)裝備，如面罩、護(hù)目鏡、一次性口罩等；

——溢灑處理警示標(biāo)識(shí)，如“禁止進(jìn)入”、“生物危險(xiǎn)”等。

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當(dāng)發(fā)生生物危險(xiǎn)物質(zhì)溢灑時(shí)，要立即通知房間內(nèi)的無(wú)關(guān)人員迅速離開(kāi)，在撤離房間的過(guò)程中注意防護(hù)氣溶膠。關(guān)門(mén)并張貼“禁止進(jìn)入”、“溢灑處理”的警告標(biāo)識(shí)，撤離人員脫去個(gè)體防護(hù)裝備，用適當(dāng)?shù)南緞┖退逑幢┞镀つw并立即通知實(shí)驗(yàn)室安全員。至少30min后準(zhǔn)備好清理工具和物品，穿著適當(dāng)?shù)膫€(gè)體防護(hù)裝備（鞋、防護(hù)服、口罩、雙層手套、護(hù)目鏡等）后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。此時(shí)需要兩人共同處理溢灑物。用紙巾等吸收材料覆蓋溢灑物，從外圍向中心傾倒適當(dāng)量的消毒劑，使消毒劑與溢灑物混合并作用30分鐘，而后小心將吸收了溢灑物的吸收材料連同溢灑物收集到專(zhuān)用的收集袋或容器中，并反復(fù)用新的吸收材料將剩余物質(zhì)吸凈。破碎的玻璃或其它銳器要用鑷子或鉗子處理。并將它們置于可防刺透的容器（利器盒）中。處理的溢灑物以及處理工具（包括收集銳器的鑷子等）全部置于專(zhuān)用的收集袋或容器內(nèi)封好。用消毒劑噴灑或擦拭可能被污染的區(qū)域，包括手套和防護(hù)服前部。脫去個(gè)體防護(hù)裝備，將暴露部位向內(nèi)折，置于專(zhuān)用的收集袋或容器中封好，洗手。所有處理用具及廢物送于高壓滅菌。2021/10/10星期日45二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（8）離心機(jī)內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂1.非封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)帶有感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂時(shí)：離心機(jī)正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉電源，密閉30min使氣溶膠沉降。離心機(jī)停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即蓋上蓋子密閉30min。而后戴結(jié)實(shí)的手套（如厚橡膠手套）及口罩（避免吸入氣溶膠），必要時(shí)可在外面戴一次性手套。使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著的棉花來(lái)清理。破碎的離心管及離心桶、轉(zhuǎn)軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無(wú)腐蝕性的、對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅作用的消毒劑內(nèi)浸泡60min以上。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中適當(dāng)浸泡，或用消毒劑徹底擦拭后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭（使用含氯消毒劑后，應(yīng)再用清水擦拭，并干燥）。清理時(shí)所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。最后向?qū)嶒?yàn)室安全員報(bào)告，進(jìn)行事故記錄。2021/10/10星期日462.在可封閉的離心桶（安全杯）內(nèi)離心管發(fā)生破裂時(shí)：如果懷疑封閉的離心桶內(nèi)有管子破裂，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)離心桶蓋子察看。確有破裂時(shí)，松開(kāi)離心桶（安全杯）蓋子，但不要打開(kāi)，放入黃色垃圾袋，直接高壓滅菌；或者采用化學(xué)消毒法：將離心桶及內(nèi)容物放到對(duì)該種微生物有效的無(wú)腐蝕性消毒劑里浸泡60min以上。離心杯在使用消毒劑浸泡后，應(yīng)再用清水洗凈后干燥。最后向?qū)嶒?yàn)室安全員報(bào)告，進(jìn)行事故記錄。2021/10/10星期日47二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（9）發(fā)現(xiàn)相關(guān)癥狀若實(shí)驗(yàn)操作者或其所在實(shí)驗(yàn)室的工作人員出現(xiàn)與被操作病原微生物導(dǎo)致疾病類(lèi)似的癥狀，則應(yīng)被視為可能發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染，應(yīng)及時(shí)到指定醫(yī)院就診，并如實(shí)說(shuō)明工作性質(zhì)和發(fā)病情況。在就診過(guò)程中，應(yīng)采取必要的隔離防護(hù)措施，以免疾病傳播。2021/10/10星期日48檢驗(yàn)科生物安全事件案例一例傷寒桿菌感染90年代初期，我院檢驗(yàn)科細(xì)菌室一位工作人員在檢驗(yàn)操作時(shí)，不慎將長(zhǎng)有傷寒桿菌的