紅細胞血型系統(tǒng)及其檢測

關(guān)于紅細胞血型系統(tǒng)及其檢測一、免疫學(xué)基礎(chǔ)原理

第2頁,共56頁，2024年2月25日，星期天（一）抗原（antigen）

免疫原(immunogen）是能夠刺激機體免疫系統(tǒng)引起特異性免疫應(yīng)答的非己物質(zhì)。它可以在體內(nèi)和體外與其特異性抗體或致敏淋巴細胞結(jié)合,產(chǎn)生免疫反應(yīng)。第3頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

完全抗原（antigen，complete）

具有免疫原性、反應(yīng)原性兩種性能的抗原稱為完全抗原。

半抗原

（hapten）

缺乏免疫原性而只有反應(yīng)原性的抗原稱為半抗原。

第4頁,共56頁，2024年2月25日，星期天抗原的基本特征1、外源性2、分子量大，結(jié)構(gòu)復(fù)雜3、特異性

免疫原性（immunogenicity）4、抗原性{

反應(yīng)原性（specificity）

第5頁,共56頁，2024年2月25日，星期天抗原抗體反應(yīng)的特異性第6頁,共56頁，2024年2月25日，星期天抗原的功能

抗原能夠刺激缺乏此物質(zhì)的機體發(fā)生體液免疫（humoralresponse）或細胞免疫（cell-mediatedresponse)反應(yīng)。前者通過漿細胞合成抗體輸送到血液或體液中；后者由淋巴細胞介導(dǎo)，出現(xiàn)延遲性超過敏反應(yīng)或排斥移植物的生物效應(yīng)。第7頁,共56頁，2024年2月25日，星期天影響抗原免疫原性的因素種屬間的抗原性同種間的抗原差異個體間的差別進入途徑抗原分子及量的大小、抗原性的強弱及刺激頻率

第8頁,共56頁，2024年2月25日，星期天紅細胞血型抗原

紅細胞血型抗原分布在紅細胞膜的表面,有不同的外部形態(tài)，有或沒有某一個抗原成份，形成了不同的血型。紅細胞血型抗原必須是用相應(yīng)抗體檢測到的紅細胞表面抗原，屬于遺傳性狀。第9頁,共56頁，2024年2月25日，星期天紅細胞血型抗原的生化結(jié)構(gòu)由結(jié)合到蛋白或脂上的碳水化合物

carbohydrat決定

如：ABO、Lewis、Hh、P、Ii等由蛋白的氨基酸序列決定如：MNSs、Rh、Kell、Kidd等大多數(shù)血型抗原第10頁,共56頁，2024年2月25日，星期天血型系統(tǒng)（bloodgroupsystem）

由單一基因座位控制，或是由二個或更多的緊密連鎖、彼此之間沒有重組發(fā)生的同源基因控制血型集合（bloodgroupcollection）

抗原是以遺傳、生化或血清學(xué)的相關(guān)性進行組合高、低抗原頻率組(highandlowfrequencyantigens

)第11頁,共56頁，2024年2月25日，星期天高頻抗原（highfrequencyantigens)

為大多數(shù)人所具有的血型抗原，表示1000個人中至少有999人存在此抗原。低頻抗原

(lowfrequencyantigens)

為少數(shù)人所具有的血型抗原，表示1000個人中最多只有1人有此抗原。又稱為私有血型組抗原。第12頁,共56頁，2024年2月25日，星期天（二）紅細胞血型抗體(antibody)

抗體是機體對外來抗原刺激所產(chǎn)生的一組具有免疫功能的球蛋白，即免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。第13頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第14頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第15頁,共56頁，2024年2月25日，星期天紅細胞血型抗體的分類

按產(chǎn)生的原因和條件大致可分為三類天然抗體

naturalantibody免疫抗體

immuneantibody自身抗體

autoantibody同種抗體allo-antibody

第16頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第17頁,共56頁，2024年2月25日，星期天按照與相應(yīng)紅細胞是否在鹽水中產(chǎn)生凝集完全抗體（completeantibody）不完全抗體（incompleteantibody）第18頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共56頁，2024年2月25日，星期天自然狀態(tài)下的紅細胞第20頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第21頁,共56頁，2024年2月25日，星期天按抗體與抗原反應(yīng)的最適溫度，分為兩種冷型抗體

coldantibody溫型抗體

warmantibody第22頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第23頁,共56頁，2024年2月25日，星期天按照抗體與相應(yīng)抗原的依存關(guān)系規(guī)則抗體不規(guī)則抗體（意外抗體）第24頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

按免疫球蛋白的生物化學(xué)特性分為五類

IgGIgMIgAIgEIgD第25頁,共56頁，2024年2月25日，星期天IgG的四種亞類第26頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

IgG和IgM免疫球蛋白的特征通過胎盤鹽水反應(yīng)結(jié)合補體被2-Me破壞降低溫度提高反應(yīng)被血型物質(zhì)中和IgG能不能能難否難IgM不能能能易是易第27頁,共56頁，2024年2月25日，星期天補體complement

補體是存在于人和動物血清中的一種正常成分，由球蛋白、糖和磷脂結(jié)合而成，約占血清球蛋白總量的10％。它能補助各種特異性抗體溶解相應(yīng)的細菌和細胞。第28頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

補體系統(tǒng)

complementsystem

補體是由20多種血清蛋白成分組成的具有類似酶性質(zhì)的一組復(fù)雜的血清蛋白系統(tǒng)。各成分均以不活動的酶原形式存在于血清中，只有被激活后，把酶原變成酶，才能發(fā)揮其生物活性作用，所以也叫做補體系統(tǒng)。第29頁,共56頁，2024年2月25日，星期天補體的性質(zhì)

補體的性質(zhì)是非特異性，不穩(wěn)定，易被紫外線、機械振蕩、化學(xué)藥物以及加熱破壞其活性。第30頁,共56頁，2024年2月25日，星期天（三）紅細胞抗原抗體反應(yīng)

抗原抗體反應(yīng)是機體防御系統(tǒng)功能的一部分，借以排除外來物質(zhì)對機體的損害，維持機體內(nèi)環(huán)境的平衡穩(wěn)定，健康生存。不相宜的抗原抗體反應(yīng)也會給機體帶來嚴(yán)重損害，甚至危及生命。第31頁,共56頁，2024年2月25日，星期天抗原抗體反應(yīng)主要類型凝集反應(yīng)agglutination溶血反應(yīng)hemolysis

沉淀反應(yīng)precipitation第32頁,共56頁，2024年2月25日，星期天凝集反應(yīng)的原理

是抗體分子在相鄰的紅細胞表面抗原決定簇之間搭橋，使之形成肉眼可見的顆粒狀凝集團塊。

直接凝集directagglutination

間接凝集indirectagglutination第33頁,共56頁，2024年2月25日，星期天IgM抗體造成的直接凝集第34頁,共56頁，2024年2月25日，星期天第35頁,共56頁，2024年2月25日，星期天間接凝集反應(yīng)的兩個階段第一階段致敏階段

第二階段

真凝集階段第36頁,共56頁，2024年2月25日，星期天IgG抗體借助抗球蛋白試劑產(chǎn)生的間接凝集反應(yīng)第37頁,共56頁，2024年2月25日，星期天試管中紅細胞凝集強度的判斷第38頁,共56頁，2024年2月25日，星期天紅細胞凝集反應(yīng)結(jié)果的判讀評分標(biāo)準(zhǔn)

4+1個凝塊，背景清晰，無游離紅細

3+2~3個凝塊，背景清晰，無游離紅細

2+多個小凝塊，背景清晰，無游離紅細

1+無數(shù)的小顆粒，背景混濁，有游離紅細胞

W+鏡下較少凝集，有較多的游離紅細胞陰性肉眼觀察不到凝集，鏡下全為游離紅細胞第39頁,共56頁，2024年2月25日，星期天抗原抗體反應(yīng)的特點高度特異性可逆性比例性兩個反應(yīng)階段：致敏和凝集階段第40頁,共56頁，2024年2月25日，星期天影響紅細胞凝集反應(yīng)的因素抗原抗體的比例反應(yīng)溫度溶液的pH值孵育時間離子強度紅細胞間距離第41頁,共56頁，2024年2月25日，星期天常用紅細胞抗原和抗體鑒定試驗生理鹽水法salineagglutinationtest抗球蛋白試驗antiglobulintest,Coombs蛋白水解酶試驗enzyme-treatedcellagglutination低離子強度試驗lowionic-strengthsolution,LISS聚凝胺試驗polybrenetechnique凝膠試驗geltechnique吸收放散試驗absorptionelutiontest第42頁,共56頁，2024年2月25日，星期天紅細胞抗體檢測什么情況下對輸血患者做抗體檢測？妊娠史輸血史近期需要多次輸血患者第43頁,共56頁，2024年2月25日，星期天二、紅細胞血型檢測輸血前免疫學(xué)檢查內(nèi)容常用的檢測技術(shù)第44頁,共56頁，2024年2月25日，星期天（一）、輸血前免疫血液學(xué)檢驗輸血前檢查分為兩個方面，一方面是對供血者進行的檢查，另一方面是對實際接受輸血的患者（受血者）進行的檢查。輸血前檢查的目的在于為每一名受血者選擇適合的血液成分，使其有正常的存活時間，并且不引起受血者本身紅細胞臨床上的明顯破壞第45頁,共56頁，2024年2月25日，星期天輸血前檢查的要求

輸入的紅細胞

在受血者體內(nèi)必須不凝集或不溶血輸入的血漿成份

不導(dǎo)致受血者紅細胞的明顯破壞，第46頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

輸血前檢查的主要程序

受血者的病史和血樣本等的檢查、核對及處理。ABO和Rh定型抗體篩選和鑒定交叉配血試驗標(biāo)簽和發(fā)血第47頁,共56頁，2024年2月25日，星期天受血者病史和血樣的檢查、核對及處理

輸血申請單血標(biāo)本要求第48頁,共56頁，2024年2月25日，星期天

受血者血樣本

血液標(biāo)本的要求血液標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記，并和血液申請單上內(nèi)容核對、確定標(biāo)本必須能代表患者的當(dāng)前免疫狀況防止血液標(biāo)本的稀釋和溶血輸血前檢查最好使用血清，也可以使用血漿。每次輸血后標(biāo)本至少保存7天。第49頁,共56頁，2024年2月25日，星期天為什么輸血前檢查用血清比血漿更好？

首先，有時血漿中可形成小的纖維蛋白凝塊使認讀困難。其次，一些通過補體激活才能反應(yīng)的抗體，用血漿不能檢出。因為血漿中抗凝劑乙二胺四乙酸（EDTA）或枸櫞酸鹽能螯和鈣并阻止補體激活。第50頁,共56頁，2024年2月25日，星期天ABO和Rh血型定型ABO血型定型

供血者和受血者常規(guī)ABO血型檢測應(yīng)包括正反定型兩種試驗，并相互驗證。對于已知ABO血型的供血者的ABO血型確認或6個月內(nèi)的嬰兒的ABO定型，可以只檢查紅細胞第51頁,共56頁，2024年2月25日，星期天解決ABO正反定型結(jié)果不一致的基本方法欲解決被檢者自身ABO血型問題了解被檢者的年齡、診斷病癥、輸血史、用藥史、免疫球蛋白水平以及妊娠史等。這種情況比較復(fù)雜欲解決技術(shù)問題應(yīng)洗滌紅細胞3次并配鹽水懸液進行重新正反定型試驗并檢查紅細胞直抗第52頁,共56頁，2024年2月25日，星期天被檢者自身ABO血型問題1、血清異常