法醫(yī)物證學(xué)(11選修)市公開課一等獎省賽課微課金獎?wù)n件

歡迎1/77法醫(yī)物證學(xué)南方醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)系臺運春yctai@020-627891012/77法醫(yī)物證學(xué)、法醫(yī)物證、法醫(yī)物證判定概念法醫(yī)物證學(xué)任務(wù)和意義概述3/77

法醫(yī)物證學(xué)是利用醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和其它自然科學(xué)理論與技術(shù)，研究并處理與法律相關(guān)生物性檢材檢驗與判定一門學(xué)科。4/77法醫(yī)物證：對案件真實情況有證實作用物品和痕跡。與人體相關(guān)組織器官或其分泌物、排泄物作案工具和致傷物日慣用具及其附著物藥品、毒品、生草藥等指紋、掌紋、趾紋、足跡、鞋印等印鑒、票證、字跡、文件、遺書及偽造品等5/77

法醫(yī)物證判定：對與案件相關(guān)生物性檢材進行專門檢驗，判斷它們在該案件中能否作為證據(jù)過程。符正當(dāng)律程序6/77任務(wù)個體識別意義為偵察提供線索親權(quán)判定為審判提供證據(jù)為行政提供依據(jù)7/77親子判定

Paternitytesting8/779/7710/7711/7712/7713/77“親子判定熱”摧毀家庭基石造福人類還是戕害家庭？親子判定殺死了中國人家庭忠誠“親子判定”折射家庭信任危機親子判定拷問“真實謊言”親子判定有什么錯14/77

應(yīng)用醫(yī)學(xué)和生物學(xué)理論和技術(shù)判斷父母與兒女是否有親生關(guān)系。1.1概念15/771.2發(fā)展史》古代三國：滴骨驗親（《會稽先賢傳》）明代：滴血認(rèn)親（“合血法”）電視劇《洗冤錄》中滴骨驗親劇照電影《九品芝麻官》中滴血認(rèn)親劇照16/771920年，歐洲將血型用于親子判定1935年，美國開始親子判定1985年，PCR技術(shù)創(chuàng)造/使親子判定從排除走向認(rèn)定1.2發(fā)展史》當(dāng)代17/77基于PCRSTR分型已成為非常成熟技術(shù)伎倆，商業(yè)化試劑盒開發(fā)和自動測序儀應(yīng)用，結(jié)果科學(xué)可靠。案件量（例/年）：美國，0；德法，3000余；我們中心年1800余。1.2發(fā)展史》當(dāng)代18/771.3親子判定類型包括民事糾紛包括刑事案件包括行政事務(wù)兒女撫養(yǎng)、財產(chǎn)繼承懷疑產(chǎn)院調(diào)錯嬰兒強奸致孕案生父確認(rèn)碎尸案身源認(rèn)定殺嬰或拐賣兒童案孩子身源認(rèn)定移民涉外公證失散親人親緣關(guān)系認(rèn)定計劃外生育責(zé)任人確認(rèn)或上戶口19/77妊娠期限：280±14天，早產(chǎn)兒、過熟兒性交能力和生殖能力：受精期間遺傳特征（遺傳性狀）：最主要依據(jù)1.4親子判定依據(jù)20/77多基因遺傳特征單基因遺傳特征遺傳特征是生物體表現(xiàn)一切形態(tài)特征、生理特征和代謝類型統(tǒng)稱。受多個基因控制和環(huán)境原因影響，如相貌、身高、智力受單個基因控制，遺傳方式明確，不受環(huán)境影響遺傳標(biāo)識可檢測、遺傳方式明確性狀或基因1.4親子判定依據(jù)遺傳特征21/77紅細(xì)胞型、白細(xì)胞型、血小板型基因產(chǎn)物水平遺傳標(biāo)識DNA水平遺傳標(biāo)識血液細(xì)胞表面遺傳標(biāo)識血液蛋白質(zhì)遺傳標(biāo)識紅細(xì)胞酶型、血清酶型、血清型長度多態(tài)性序列多態(tài)性RFLP，VNTR，STR

SNP、mtDNA1.4親子判定依據(jù)遺傳標(biāo)識分類22/77用于親權(quán)判定遺傳標(biāo)識要求遺傳方式明確遺傳標(biāo)識分型終生不變，含有體細(xì)胞穩(wěn)定性和遺傳穩(wěn)定性檢測方法穩(wěn)定。不一樣試驗室、不一樣批次結(jié)果相同含有遺傳多態(tài)性1.4親子判定依據(jù)23/77基因產(chǎn)物水平遺傳標(biāo)識不足為基因編碼產(chǎn)物，多態(tài)信息容量小，應(yīng)用價值有限在基因表示過程中受許多原因影響，不能正確反應(yīng)DNA多態(tài)性情況一些血型系統(tǒng)存在生理性變異和病理性變異，使判型錯誤易受環(huán)境中各種理化原因影響而失活，檢材難以保留檢測方法多樣、復(fù)雜，技術(shù)、人為誤差較大1.4親子判定依據(jù)24/77DNA遺傳標(biāo)識優(yōu)點直接檢測遺傳物質(zhì)DNA組成，不受表示過程步驟影響是顯性遺傳標(biāo)識，遺傳路徑明確多態(tài)性程度高，可到達必定和否定結(jié)論檢材類型廣泛可進行復(fù)雜親權(quán)關(guān)系判定比較穩(wěn)定，不易受生理、病理影響1.4親子判定依據(jù)25/77DNA標(biāo)識發(fā)展1980：White首次描述限制片段長度多態(tài)性(RFLP)標(biāo)識1985：Jeffreys發(fā)覺可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)(VNTR)1985：聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)第一篇論文發(fā)表1988：FBI開始利用DNA分析幫助辦案1991：短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)第一篇論文發(fā)表1995：英國開始建立DNA數(shù)據(jù)庫1998：美國開啟CODIS（DNA檢索系統(tǒng)）數(shù)據(jù)庫：人類基因組計劃HGP完成/同時發(fā)覺300萬SNP……1.4親子判定依據(jù)26/77即DNA結(jié)構(gòu)在不一樣個體或等位基因之間存在差異。其本質(zhì)就是因為進化過程中各種原因引發(fā)染色體DNA中核苷酸排列次序發(fā)生了改變/即產(chǎn)生DNA片段和DNA序列在個體間差異。長度多態(tài)性序列多態(tài)性1.5DNA多態(tài)性27/77短串聯(lián)重復(fù)序列（shorttandemrepeat/STR）也叫微衛(wèi)星DNA/是由2-6bp長“關(guān)鍵序列”串聯(lián)重復(fù)組成。STR在人類基因組中分布廣泛/平均每6-10kb就出現(xiàn)一個。絕大多數(shù)位于非編碼區(qū)/極少數(shù)在編碼區(qū)域。長度多態(tài)性28/77重復(fù)單位長度2CA3AAT4AGAT5AAAGA二核苷三核苷四核苷五核苷29/77TH01/asimplelocus

(TCAT)3-14516961737177818191851018911193Allele:*AmpFlSTR9.3188=TCA30/77STRsHighlydiscriminatingAbundantingenomeAmenabletoautomationDiscreteallelesNon-isotopicLow-quantityDNAPCR-basedDegradedDNARapidtypingadvantages31/77是指基因組內(nèi)特定核苷酸位置上存在著2種不一樣堿基/其中較少一個在群體頻率不少于1%。通常表現(xiàn)出二態(tài)性。

優(yōu)勢：豐富遺傳穩(wěn)定性序列多態(tài)性單核苷酸多態(tài)性

（singlemucleotidepolymorphisms/SNPs）32/772.1總體思緒

檢測遺傳標(biāo)識表型/觀察否符合對應(yīng)遺傳規(guī)律，并進行統(tǒng)計學(xué)計算，判斷血緣關(guān)系33/77DNA核DNA線粒體DNA常染色體性染色體X染色體Y染色體父系遺傳母系遺傳22對/孟德爾DNA類型奶→父→孫女34/77慣用STR基因座及在染色體上位置CSF1POD5S818D21S11TH01TPOXD13S317D7S820D16S539D18S51D8S1179D3S1358FGAVWAAMELAMELD2S1338D19S433PentaDPentaE35/77在必定孩子某一遺傳基因必定來自生父（生父基因obligatorygene/OG）/而假設(shè)父（allegedfather/AF）不帶有這個基因時/能夠排除他是孩子生父。14/1513/1715/17否定親生2.2基本原理36/77在必定孩子某一遺傳基因必定來自生父/而AF也帶有這個基因時/不能排除他是孩子生父/這時能夠計算他與孩子含有親生關(guān)系相對機會有多大。13/1513/1715/17不排除親生必定親生？×2.2基本原理37/77父權(quán)指數(shù)（paternityindex/PI）

PI＝AF提供OG成為小孩生父可能性RM提供OG成為小孩生父可能性H0：爭議父是孩子生物學(xué)父親H1：隨機無關(guān)男子是孩子生物學(xué)父親兩個概念38/7713/1513/1715/17PI=1/2p13=12×0.1797=2.7821/2×p17+0×p13p13×p17+p17×p13==1.391PI=12p13=14p1339/77

父權(quán)相對機會（relativechanceofpaternity/RCP/W）

RCP＝πPIπ

PI＋(1-π)PIPI＋1=π=0.5前概率（π）：非遺傳學(xué)證據(jù)相信爭議父是孩子生父概率40/77父權(quán)相對機會意義RCP值（%）意義99.73～能夠必定有親子關(guān)系99～99.73極可能有親子關(guān)系95～99非?？赡苡杏H子關(guān)系90～95可能有親子關(guān)系80～90傾向有親子關(guān)系50～80不能必定是否有親子關(guān)系10～50傾向排除親子關(guān)系5～10不大可能有親子關(guān)系0.27～5不可能有親子關(guān)系

～0.27能夠排除親子關(guān)系1、結(jié)果準(zhǔn)確性更高99.73%→99.95%→99.99%2、結(jié)論嚴(yán)謹(jǐn)性更強能夠必定（排除）被檢男子是孩子生物學(xué)父親→被檢男子是（不是）孩子生物學(xué)父親/從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信。41/77DNA提取PCR擴增電泳分離檢測結(jié)果分析評定普通流程圖Chelex法、酚-氯仿法單基因座或復(fù)合擴增激光誘導(dǎo)熒光檢測或銀染各種檢材血液、唾液、精斑、毛發(fā)、肌肉、骨骼、牙齒等依據(jù)等位基因ladder分型2.3親子判定方法42/7743/7744/7745/77分型結(jié)果違反Mendelian定律突變（親生）不違反Mendelian定律非親生親生多個遺傳標(biāo)識聯(lián)合檢測非親生/巧合2.4結(jié)果評定累積非父排除概率超出0.9999雙親判定：15個以上單親判定：18個以上46/77多個遺傳標(biāo)識聯(lián)合檢測結(jié)果沒有基因座違反/W＞99.99%1~3個基因座違反3個以上基因座違反雙親判定排除親權(quán)關(guān)系單親判定必定親權(quán)關(guān)系不排除親權(quán)關(guān)系增加更多基因座/計算PI無違反/W＞99.99%新違反被檢男子是孩子生物學(xué)父親/從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信被檢男子不是孩子生物學(xué)父親/從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信雙親判定單親判定不排除被檢男子是孩子生物學(xué)父親47/77案例分析48/77案例一父權(quán)概率為99.99999957%。結(jié)論：爭議父是子生物學(xué)父親，從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信。簡明案情：父懷疑子是否為其親生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539爭議父12/152910/1210/121510/128/1111/13生母16/1729/3011/1212/1315/1611/12811/13子12/162911/1212/1315128/1111D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL爭議父20/231516/1818/241413/1418/26X/Y生母19/2413.2/1416/1920/2216/1814/1823/24X子19/2313.2/1516/1822/2414/1613/1418/24X/Y49/77案例二簡明案情：父懷疑子是否為其親生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539爭議父12/1330/318/127/1214/189/108/1111/12生母14/1529/30111216118/1011/12子11/14301110/1215/1611811/12D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL爭議父18/2313/1414/1818/2016/1814/1822/25X/Y生母18/1914/15.214/1719/221611/1921/24.2X子17/1913/15.217/2019/22161124/24.2X/Y10個基因座違反遺傳規(guī)律。結(jié)論：爭議父把是子生物學(xué)父親，從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信。50/77案例三D3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D8S1179D21S11D7S820父315/16710/119/1418/2412/14298/10母315/178/99/119/122412/1330/31.211/12子315/177/810/1112/152412/1429/31.210/12CSF1POD19S433vWATPOXD18S51AMELD5S818FGA父310/1213/15.217/18813/19X/Y1124.2/25母311/1213/14.2148/1113/14X10/1222/26子310/1114.2/15.214/18813/14X/Y10/1125/26PentaDPentaELPLF13BFESFPSF13A01父39/12111010123.2/5母311/135/11109/10113.2子312/135/11101011/123.2/5簡明案情：父懷疑子是否為其親生。僅D16S539違反孟德爾遺傳規(guī)律，父權(quán)概率99.99876357%

。結(jié)論：爭議父把是子生物學(xué)父親，從遺傳學(xué)角度已經(jīng)得到科學(xué)合理確實信。51/77檢測系統(tǒng)

被檢母親

嬰兒

被檢父親

D3S1358

15/19

17/19

17/18

vWA

14/17

15/16

14/14

FGA

22/24

21/27

20/21

D8S1179

10/16

10/14

13/14

D21S11

32.2/33.2

30/33.2

30/30

D18S51

14/15

15/16

15/17

D5S818

12/13

13/13

10/11

D13S317

9/11

11/11

8/9

D7S820

8/11

8/10

8/10

D16S539

9/14

9/9

9/11

THO1

9/9

9/9

7/9

TPOX

11/11

8/11

8/11

CSF1PO

11/12

12/12

10/12

D2S1338

17/18

19/23

23/24

D19S433

13/16.2

12/13

14/15.2

案例四簡明案情：父母懷疑子在醫(yī)院報錯。52/77檢測系統(tǒng)

被檢父1

(父親)

被檢父2

（爺爺）

孩子

D3S1358

15/16

16/16

15/16

vWA

16/16

14/16

14/16

FGA

21/26

24/26

21/25

D8S1179

12/14

14/16

14/14

D21S11

31.2/32

29/31.2

30/31.2

D18S51

14/19

13/14

14/17

D5S818

11/11

11/12

11/11

D13S317

9/11

11/11

11/12

D7S820

9/10

10/12

9/12

D16S539

9/9

9/12

9/11

THO1

7/9

7/9

7/9

TPOX

8/11

8/11

8/10

CSF1PO

10/13

10/12

12/13

PentaD

10/12

10/12

9/10

PentaＥ

11/16

11/16

16/18

簡明案情：被檢父1（父親）懷疑孩子是其妻子與其父親（被檢父2）所生。53/77簡明案情：劉某自稱是呂某包養(yǎng)二奶/且與其生有非婚生孩子陳某某（男）。呂某與其妻子張某生有一子呂某某（男）?，F(xiàn)呂某意外死亡/因為包括遺產(chǎn)糾紛事宜/張某和劉某共同委托要求判定陳某某是否是呂某親生孩子。1、有沒有確信是呂某生物性檢材遺留2、有沒有更多近親屬？目標(biāo)：反推出呂某基因型組合3、同一父系判定，必要時可結(jié)合常染色體STR進行同胞關(guān)系判定假如為一男一女或者均為女孩，能否判定？54/77個體識別

IndividualIdentification55/77

應(yīng)用醫(yī)學(xué)和生物學(xué)理論和技術(shù)判斷生物性檢材是否同一起源。概念56/77概述生物性檢材個體識別意義生物性檢材通常細(xì)小且分布范圍廣罪犯難以徹底毀掉或掩蓋身份不明尸體、活體或檢材辨明身份現(xiàn)場遺落血液、毛發(fā)、皮膚、指甲、牙齒、精液、唾液等災(zāi)難性事故、水浮尸被拐賣婦女、兒童被追捕罪犯蠟塊、切片、組織等為偵查提供線索為審判提供證據(jù)57/77生物性檢材是經(jīng)歷了環(huán)境調(diào)整作用人體組織與器官或人體體液、分泌物、排泄物及由它們形成生物性斑痕，因為環(huán)境作用使生物性檢材含有不確定性，對法醫(yī)判定人是一個嚴(yán)峻考驗。生物性檢材法醫(yī)學(xué)特點58/77血痕：現(xiàn)場地面、墻壁、家俱、衣服、兇器、指甲縫等。黑暗現(xiàn)場用魯米諾噴射（發(fā)出熒光）。精斑：可附于衣褲、被褥、草紙、被害人腹壁、大腿和陰毛上。必要時用紫外線照射（銀白色帶淡紫暈熒光）毛發(fā)：常見于地面、被褥、兇器上；死者手中、口中和衣服；強奸案被害人內(nèi)衣、外陰和大腿間唾液：現(xiàn)場煙頭、口香糖、牙簽、飲料容器及咬痕上皮膚及其它臟器組織碎片：可見于被害人或罪犯指甲內(nèi)；交通事故車輪、擋泥板、車廂棱角、底盤生物性檢材尋找、采集、包裝和送檢生物性檢材尋找59/77新鮮血：活體，靜脈血，EDTA抗凝；尸體，末梢血管血。4℃保留或潔凈紗布、濾紙上晾干血痕：必須同時取周圍無斑痕部分做對照小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整塊取下，襯以消毒棉花于盒內(nèi)以防震碎體液、分泌液、排泄物、器官組織奸殺或死因不明女性尸體：取陰道內(nèi)容物，必要時取肛門、會陰、口腔標(biāo)本毛發(fā)用鑷子夾取，勿損壞附著物皮膚、碎骨、臟器碎塊及煙頭，用鑷子或手套搜集，不可加防腐劑生物性檢材采集60/77低溫或晾干保留，盡快送檢紙帶、紗布或玻璃容器包裝或存放，勿用塑料膜袋包裝物外注明物品名稱、起源、數(shù)量、采集日期等送檢同時附必要對照樣本，如被害人或嫌疑人血液、唾液必須附有委托書，且寫明送檢機關(guān)和聯(lián)絡(luò)人、送檢物品清單、案情介紹、送檢目標(biāo)要求等。包裝和送檢61/77個體識別普通程序肉眼檢驗預(yù)試驗確證試驗種屬判定個體識別精斑檢驗血痕檢驗數(shù)量、分布、形狀、色澤，重構(gòu)現(xiàn)場確定部位和分布，便于準(zhǔn)確取材，提升檢出率篩除非血痕檢材聯(lián)苯胺試驗、酚酞試驗篩選可疑精斑酸性磷酸酶法證實檢材是血痕血色原結(jié)晶試驗確證檢材是精斑精子檢出法、環(huán)狀沉淀反應(yīng)確定是否是人血ELISA、Alu序列檢測確定是否人精斑抗p-30血清血型測定（吸收試驗）DNA檢測（STR、MtDNA）血型測定（中和試驗）DNA檢測（STR、MtDNA）62/77一個案例引發(fā)我注意63/77委托判定女式內(nèi)褲襠部顯著斑痕是否含精液成份試紙條檢測陽性，但陽性區(qū)域條帶顏色較質(zhì)控區(qū)條帶和陽性對照略弱沉渣涂片鏡檢未發(fā)覺精子細(xì)胞，僅見上皮細(xì)胞二步消化法上清和沉渣分別用ID試劑盒擴增，結(jié)果：上清一女性基因型，無三帶；沉渣無基因