生物堿類藥物分析

關(guān)于生物堿類藥物分析一類存在于生物體內(nèi)的含氮有機化合物，絕大部分存在于植物體內(nèi)，少數(shù)存在于動物體內(nèi)。生物堿第2頁,共51頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、苯烴胺類本類藥物的結(jié)構(gòu)特征為N在側(cè)鏈上，為脂肪胺。性質(zhì)：1.堿性較強，與酸易成鹽：鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿2.旋光性：鹽酸麻黃堿，左旋；鹽酸偽麻黃堿，右旋3.紫外吸收：芳環(huán)4.氨基醇結(jié)構(gòu)：雙縮脲反應(yīng)鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿第3頁,共51頁，2024年2月25日，星期天二、托烷類硫酸阿托品氫溴酸山莨菪堿性質(zhì)：1.水解性：水解產(chǎn)生莨菪酸和莨菪堿2.堿性較強，與酸易成鹽：硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿3.旋光性，氫溴酸山莨菪堿為左旋體，阿托品為外消旋體第4頁,共51頁，2024年2月25日，星期天三、喹啉類硫酸奎寧性質(zhì)：1.堿性組成：喹啉環(huán)+喹核堿喹核堿堿性較強，與硫酸成鹽2.旋光性奎寧左旋體，奎尼丁右旋體第5頁,共51頁，2024年2月25日，星期天鹽酸嗎啡磷酸可待因四異喹啉類性質(zhì)1.嗎啡結(jié)構(gòu)：酚羥基顯酸性，叔胺基團顯堿性2.嗎啡溶解性：既可溶于氫氧化鈉溶液又可溶于鹽酸溶液3.可待因：無酚羥基，不能溶于氫氧化鈉溶液第6頁,共51頁，2024年2月25日，星期天硝酸士的寧利血平1122五、吲哚類性質(zhì)：1堿性：均含有兩個堿性氮原子，士的寧N1堿性較強，與硝酸成鹽；利血平N1空間位阻，堿性較弱，不能成鹽。2水解性：利血平含有酯鍵，弱堿或受熱條件下易水解3還原性和熒光性：利血平在光照和氧氣存在下極易被氧化，氧化產(chǎn)物為黃色，并帶有黃綠色熒光，進一步氧化，顯藍色熒光第7頁,共51頁，2024年2月25日，星期天咖啡因茶堿性質(zhì)：幾乎不顯堿性茶堿顯酸性，可溶于堿性水溶液六、黃嘌呤類第8頁,共51頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)鑒別試驗一、一般鑒別試驗（一）沉淀反應(yīng)：生物堿類藥物在酸性水溶液中，可與生物堿沉淀劑反應(yīng)，生成難溶于水的物質(zhì)常用的生物堿沉淀試劑為：K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞、磷鉬酸、硅鎢酸等。第9頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（二）顯色反應(yīng)生物堿+生物堿顯色試劑=呈現(xiàn)不同顏色顯色試劑：濃硫酸、濃硝酸、鉬硫酸、甲醛硫酸等磷酸可待因的鑒別：取本品1mg，置白瓷板上，加含亞硒酸2.5mg的硫酸0.5ml，立即顯綠色，漸變藍色。第10頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（三）熔點測定法例：磷酸可待因（10版藥典）

加入20％NaOH溶液至白色沉淀出現(xiàn)，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，濾過；沉淀用水洗凈，在105℃干燥1小時，依法測定，熔點為154℃-158℃。第11頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（四）紫外吸收光譜法（五）紅外吸收光譜法（六）薄層色譜法第12頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（1）雙縮脲反應(yīng)芳環(huán)側(cè)鏈氨基醇結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng)鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿藍紫色二、特征鑒別試驗**第13頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（2）Vitali反應(yīng)托烷類生物堿的特征反應(yīng)莨菪酸結(jié)構(gòu)硫酸阿托品，氫溴酸東莨菪堿硫酸阿托品加發(fā)煙硝酸5滴水浴蒸干放冷加乙醇2－3滴潤濕加固體KOH一粒顯深紫色第14頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（3）綠奎寧反應(yīng)C6位含氧喹啉類生物堿在此生物堿的微酸水溶液中，加微過量溴水或者氯水，再加氨溶液，應(yīng)呈翠綠色。硫酸奎寧溴水或者氯水氨試液翠綠色第15頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（4）紫脲酸銨反應(yīng)黃嘌呤類生物堿第16頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（五）與芳醛縮合顯色反應(yīng)吲哚類生物堿的特征反應(yīng)與香草醛縮合：利血平+香草醛=玫瑰紅色與對二甲氨基苯甲醛縮合：取利血平約0.5mg，加對二甲氨基苯甲醛5mg，冰醋酸0.2ml與硫酸0.2ml，混勻，即顯綠色，再加冰醋酸1ml，轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色。第17頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（六）嗎啡生物堿的特征反應(yīng)1、甲醛-硫酸反應(yīng)Marquis反應(yīng)含酚羥基的異喹啉生物堿的特征反應(yīng)：鹽酸嗎啡2、還原反應(yīng)鹽酸嗎啡+稀鐵氰化鉀=偽嗎啡+亞鐵氰化鉀亞鐵氰化鉀+三氯化鐵=亞鐵氰化鐵，顯藍色第18頁,共51頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查

一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異硫酸奎寧中“氯仿-乙醇中不溶物”的檢查硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查*利血平中“氧化產(chǎn)物”的檢查利用旋光度的差異利用溶解行為的差異利用對光選擇性吸收的差異第19頁,共51頁，2024年2月25日，星期天二、利用藥物和雜質(zhì)在化學性質(zhì)上的差異

（一）酸堿性的差異硫酸阿托品中其他生物堿的檢查原理：其他生物堿的堿性比阿托品弱方法：取本品0.25g，加鹽酸溶液1ml溶解，用水稀釋成15ml，分取5ml，加氨試液2ml，不得立即發(fā)生渾濁。第20頁,共51頁，2024年2月25日，星期天二、利用藥物和雜質(zhì)在化學性質(zhì)上的差異

1、鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查本品2、磷酸可待因中嗎啡的檢查原理：嗎啡與亞硝酸鈉反應(yīng)產(chǎn)物在氨堿性條件下顯黃棕色方法：取本品0.1g，加鹽酸溶液使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15分鐘，加氨試液3ml如顯色，與嗎啡標準液5.0ml，用同一方法制成的對照液比較，不得更深。加水溶解加NaHCO3+碘試液加乙醚振搖乙醚層不得顯紅色水層不得顯綠色第21頁,共51頁，2024年2月25日，星期天三、色譜法硫酸奎寧中其它金雞納堿的檢查（p147自學）

檢查方法：供試品溶液自身稀釋對照法有關(guān)物質(zhì)的檢查方法：HPLC第22頁,共51頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)含量測定非水溶液滴定法提取酸堿滴定法酸性染料比色法置換酸堿滴定法紫外分光光度法第23頁,共51頁，2024年2月25日，星期天一、非水滴定法（非水堿量法）(一)原理指示劑或電位法確定終點置換反應(yīng)：強酸置換弱酸

BH+·A-+HClO4BH+·ClO4-+HA第24頁,共51頁，2024年2月25日，星期天一、非水滴定法（非水堿量法）(二)測定方法取供試品，加冰醋酸10-30ml溶解。供試品若為氫鹵酸鹽，應(yīng)再加5%醋酸汞的冰醋酸溶液3-5ml加指示劑，用高氯酸滴定液滴定

第25頁,共51頁，2024年2月25日，星期天一、非水滴定法（非水堿量法）(三)注意事項除水：加入酸酐，吸收冰醋酸及高氯酸中的水分溫度：滴定液濃度受溫度影響滴定終點：電位法或指示劑法

第26頁,共51頁，2024年2月25日，星期天一、非水滴定法（非水堿量法）(四)適用范圍Kb＜10

-8pKb8-10時，宜選冰醋酸作為溶劑；pKb為10-12時，宜選冰醋酸與醋酐的混合液作為溶劑；pKb為12以上時，選用醋酐作為溶劑。

第27頁,共51頁，2024年2月25日，星期天一般均預(yù)先在溶液中加入Hg(Ac)2的冰醋酸溶液，以消除氫鹵酸對滴定的干擾?！碚摿?～3倍1.氫鹵酸鹽的測定汞污染第28頁,共51頁，2024年2月25日，星期天取本品約0.15g，精密稱定為0.1511g，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1002mo1/L）滴定至溶液顯翠綠色，消耗高氯酸滴定液（0.1002mo1/L）8.25ml，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正，空白消耗高氯酸滴定液（0.1002mo1/L）0.81ml。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于20.17mg的C10H15NO·HCl。求含量鹽酸麻黃堿含量測定

ChP(2010)第29頁,共51頁，2024年2月25日，星期天生物堿的硫酸鹽，在冰醋酸介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。2.硫酸鹽的測定第30頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（1）硫酸阿托品

取硫酸阿托品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸與酸酐各10ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液滴定，至溶液顯純藍色。

HClO4直接滴定時，反應(yīng)摩爾比為1∶1第31頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（2）硫酸奎寧

取硫酸奎寧約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml與結(jié)晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液滴定至溶液顯藍綠色。

HClO4直接滴定時，反應(yīng)摩爾比為1∶3第32頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（3）硫酸奎寧片

取硫酸奎寧片10片，除去糖衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量，置分液漏斗中，加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，加氯仿50ml，振搖10分鐘，靜止，分取三氯甲烷液，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25ml，加酸酐5ml與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液滴定至終點。

HClO4直接滴定時，反應(yīng)摩爾比為1∶4第33頁,共51頁，2024年2月25日，星期天

因HNO3具有氧化性，可使指示劑變色，一般電位法指示終點。3.硝酸鹽的測定第34頁,共51頁，2024年2月25日，星期天無影響，直接測定。如磷酸可待因。4.磷酸鹽及其有機酸鹽的測定第35頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（一）原理二、提取酸堿滴定法適用于堿性比較強的的藥物分析。(pKb=6-9)第36頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（二）操作方法取供試品溶于水或稀礦酸中，加入適當?shù)膲A性試劑使生物堿游離，再用合適的有機溶劑分次振搖提取，合并提取液，用水洗滌除去混存的堿性試劑和水溶性雜質(zhì)，再用無水硫酸鈉或植物膠脫水，濾過，即得游離生物堿的有機溶劑提取液第37頁,共51頁，2024年2月25日，星期天磷酸可待因糖漿的含量測定用內(nèi)容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管內(nèi)的附著液，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性，用氯仿振搖提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提盡為止，每次得到的氯仿液均用同一份水10ml洗滌，洗液用氯仿5ml振搖提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液(0.01mol/L)25ml，加熱溶解，放冷，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)滴定。每1ml的硫酸滴定液(0.01mol/L)相當于84.88mg的C18H21NO3·H3PO4·3/2H2O。第38頁,共51頁，2024年2月25日，星期天堿化試劑最常用氨試液**優(yōu)點：使大部分生物堿游離，不會和生物堿發(fā)生反應(yīng)，不易乳化，易揮發(fā)，易除去，無干擾。（三）注意事項第39頁,共51頁，2024年2月25日，星期天2.提取溶劑

（1）提取溶劑選擇的原則對生物堿溶解度大，而對其他共存物溶解度盡可能小；與生物堿及堿化試劑不起任何反應(yīng)。（2）常用的提取溶劑最常用氯仿**第40頁,共51頁，2024年2月25日，星期天3.滴定指示劑要求：變色范圍在酸性區(qū)域的指示劑；被滴定生物堿的化學計量點，應(yīng)在選用的指示劑變色范圍內(nèi)。藥品化學計量點的PH值（PT值）滴定突越的PH值指示劑阿托品5.43.8-7.2甲基紅罌粟堿3.603.8-4.6溴酚藍注：甲基紅：4.2-6.3，溴酚藍：3.0-4.6第41頁,共51頁，2024年2月25日，星期天三、酸性染料比色法生物堿與某些酸性染料，在一定PH條件下可定量結(jié)合顯色，然后用比色法測定含量。特點：靈敏度高、方便，并且具有一定專屬性和準確性。適用于含量較低的樣品測定。*第42頁,共51頁，2024年2月25日，星期天（一）基本原理在適當?shù)慕橘|(zhì)中，BH+.In-（水相）B+H+BH+HInH++In-BH+.In-（有機相）+第43頁,共51頁，2024年2月25日，星期天供試品溶液的制備：取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于硫酸阿托品2.5mg），置50ml量瓶中，加水振搖使硫酸阿托品溶解并稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。對照品溶液的制備：另取硫酸阿托品對照品約25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

例：硫酸阿托品片（05版藥典）第44頁,共51頁，2024年2月25日，星期天測試方法：精密量取供試品溶液與對照品溶液各2ml，分別置預(yù)先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液2.0ml，振搖提取2分鐘后，靜置使分層，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外-可見分光光度法（附錄ⅣA），在420nm的波長處分別測定吸光度，計算，并將結(jié)果與1.027相乘，即得供試量中含有(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O的重量。第45頁,共51頁，2024年2月25日，星期天(C17H23NO3)2·H2SO4·H2