免疫組化標(biāo)記物臨床意義

關(guān)于免疫組化標(biāo)記物臨床意義免疫組織化學(xué)技術(shù)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。顯色劑抗體抗原為什么要做該檢查？第2頁,共13頁，2024年2月25日，星期天檢查目的1、確定細(xì)胞類型2、辨認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)物3、了解分化程度4、鑒定病變性質(zhì)5、發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶6、探討腫瘤起源或分化表型7、確定腫瘤分期8、指導(dǎo)治療和預(yù)后9、輔助疾病診斷和分類10、尋找感染病因第3頁,共13頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共13頁，2024年2月25日，星期天大腸癌套餐(CEA)癌胚抗原P53蛋白nm23轉(zhuǎn)移抑制基因Ki-67細(xì)胞增殖相關(guān)核抗原MRP多藥耐藥相關(guān)蛋白P53、Ki-67和nm23的表達(dá)與大腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)；CEA可能是大腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移的促進(jìn)因素；MRP所引起的耐藥機(jī)制是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的機(jī)制。CEA，P53，nm23，Ki-67可作為判斷大腸癌惡性程度、侵襲轉(zhuǎn)移以及預(yù)后的指標(biāo)，分析他們的表達(dá)情況可以作為臨床選擇更合理的治療方案提供可靠的依據(jù)。第5頁,共13頁，2024年2月25日，星期天CEACEA是大腸癌分泌的一組酸性糖蛋白，作為抗原可引起患者的免疫反應(yīng)。廣泛存在于各種上皮性腫瘤，尤其是各種腺癌。一般認(rèn)為，大腸癌分化程度越低，CEA陽性表達(dá)率越高。上皮組織被覆在機(jī)體體表，或襯于機(jī)體內(nèi)中空器官的腔面，以及體腔腔面。腫瘤的命名：良性腫瘤一般稱為瘤，來源于上皮組織的惡性腫瘤稱為癌，來源于間葉組織的惡性腫瘤為肉瘤，既有癌又有肉瘤者稱為癌肉瘤。CEA陽性表達(dá)的提示大腸癌，陽性強(qiáng)度越高，說明癌的分化程度越低，浸潤性強(qiáng)，轉(zhuǎn)移快。例如腺瘤為陽性（+），早期癌變就變成（++）第6頁,共13頁，2024年2月25日，星期天P53蛋白P53基因可分為野生型和突變型，野生型是抑癌基因，可以抑制腫瘤的增殖，但突變型則起反作用。免疫組化所檢測(cè)的是突變型基因所表達(dá)的蛋白，即p53蛋白那么p53陽性的意義是什么？免疫組化檢測(cè)的P53蛋白是一種腫瘤的促進(jìn)因子，不但沒有起到抑制腫瘤的作用，反而會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長，因此其陽性率越高，預(yù)后越差。第7頁,共13頁，2024年2月25日，星期天nm23抗轉(zhuǎn)移基因，其表達(dá)降低與腫瘤的高轉(zhuǎn)移能力，復(fù)發(fā)相關(guān)。nm23編碼的產(chǎn)物具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的功能，nm23在分化良好的腫瘤中呈高水平表達(dá)，且nm23基因表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，與無病生存期，整個(gè)生存期呈正相關(guān)，因此檢測(cè)nm23基因的表達(dá)高低，可以作為判斷腫有無轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要指標(biāo).故nm23陽性率越低，腫瘤越容易轉(zhuǎn)移。第8頁,共13頁，2024年2月25日，星期天Ki-67Ki-67是一種與細(xì)胞周期相關(guān)的一種核蛋白，主要表達(dá)于細(xì)胞增殖分裂的各個(gè)時(shí)期（G1、G2、M、S期），但是在靜息的細(xì)胞（G0期）中不表達(dá)，常用于檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的生長指數(shù)（免疫組化利用計(jì)算洗腦總數(shù)中的Ki-67陽性細(xì)胞數(shù)所占比例得到Ki-67指數(shù)），反映腫瘤細(xì)胞的增殖程度。細(xì)胞增殖相關(guān)核抗原Ki-67在多種腫瘤及癌前病變中均有異常表達(dá)，且與腫瘤的種植、浸潤、轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)。簡言之，腫瘤長它就漲，腫瘤靜它就靜。第9頁,共13頁，2024年2月25日，星期天MRPMRP屬ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員，MRP基因定位于16號(hào)染色體p13.1帶上，由6500bp組成，編碼1531個(gè)氨基酸的跨膜糖蛋白，分子量為190kD。耐藥的發(fā)生與依賴ATP的谷胱甘肽S結(jié)合載體（glutathione-S-conjugatecarrier）活性提高的緣故，谷胱甘肽S結(jié)合的輸出載體又稱為"GS-X泵"，它可將陰離子的共軛物排泄出細(xì)胞，并在清除外源性毒素中發(fā)揮作用。MRP能介導(dǎo)藥物中的谷胱甘肽硫共軛物、葡萄糖醛酸甙共軛物和硫酸鹽共軛物排出細(xì)胞。MRP轉(zhuǎn)運(yùn)的步驟可能為：GSH合成→GSH與藥物偶和→MRP將藥物泵出細(xì)胞外MRP不但定位于血漿細(xì)胞膜，而且存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基濾泡處，提示MRP還可在細(xì)胞內(nèi)隔離藥物，使藥物不能與靶位點(diǎn)結(jié)合，從而間接導(dǎo)致耐藥。MRP依靠ATP的作用能夠把帶有負(fù)電荷的化療藥物逆濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn)，使進(jìn)入腫瘤細(xì)胞中的藥物濃度減低，在靶細(xì)胞中達(dá)不到有效作用濃度，導(dǎo)致耐藥。第10頁,共13頁，2024年2月25日，星期天第11頁,共13頁，2024年2月25日，星期天CK細(xì)胞角蛋白(Cytokeratin,CK)主要存于上皮細(xì)胞胞漿中,是構(gòu)成細(xì)胞骨架的一類中間絲狀物,有多種類型,其中以細(xì)胞角蛋白19(CK19)片段CYFRA21-1(cytokeratin19frag2ments)在惡性腫瘤診斷中最為重要;細(xì)胞癌變時(shí)CK19釋放增加,這與CK19的DNA基因組改變有關(guān),CK19經(jīng)蛋白酶降解或細(xì)胞凋亡后其碎片釋放入血。CK18低分子量角蛋白，主要標(biāo)記各種單層上皮包括腺上皮，而復(fù)層鱗狀上皮常陰性，主要用于腺癌診斷。CK19分布于單層上皮和間皮，常用于腺癌診斷，肝細(xì)胞不表達(dá)，而膽管為陽性反應(yīng)。CK7卵巢、肺和乳腺上皮常陽性，結(jié)腸、前列腺、胃腸道上皮陰性。

第12頁,共13頁，2024年2月25日，星期天常用免疫組化項(xiàng)目Her-2：抗凋亡，參與調(diào)節(jié)P13K/AK途徑和MAPK激活途徑,胞膜,≥++,耐藥：環(huán)磷酰胺,三苯氧胺,氨甲喋呤ERCC1：過表達(dá)使停滯在G2/M期的損傷DNA迅速恢復(fù)胞核,≥++,耐藥：順氯氨鉑PRM1：DNA修復(fù)的限速酶，吉西他濱的結(jié)合位點(diǎn)，胞漿，≥++，耐藥：吉西他濱/順鉑BRCA1：高表達(dá)使細(xì)胞修復(fù)能力增強(qiáng)，胞漿/核，≥++，耐藥：順鉑ER、PR：正常乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)存在ER、PR。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，ER和PR出