實(shí)驗(yàn)血清甘油三酯含量測定

關(guān)于實(shí)驗(yàn)血清甘油三酯含量測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庋甯视腿ズ繙y定的正常值與臨床意義掌握血清甘油三酯化學(xué)法測定的基本原理及主要技術(shù)方法第2頁,共8頁，2024年2月25日，星期天甘油三酯KOH60-70℃20min鉀皂甘油++HIO4+NH4+甲醛乙酰丙酮3,5-二乙酰-1,4二氫-2,6二甲基吡啶（黃色帶熒光）甘油甲醛皂化氧化顯色32實(shí)驗(yàn)原理第3頁,共8頁，2024年2月25日，星期天實(shí)驗(yàn)步驟取3（或4）只小試管，依次加入蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)液、樣品，抽提劑及硫酸，邊加邊搖，用力振搖10min，靜置10min分層注意：試管必須干燥吸取上層液體0.5ml，加入對應(yīng)的3（或4）只大試管中，加入異丙醇、皂化試劑，充分混勻，65℃水浴5min注意：吸上層液時(shí)，務(wù)必當(dāng)心，絕對不可吸入下層液體（分光光度計(jì)預(yù)熱）加入氧化試劑，充分混勻后，加入乙酰丙酮和氨的混合液，搖勻，65℃水浴15min取出試管，流水/室溫冷卻，測420nm的吸光度抽提皂化氧化顯色比色第4頁,共8頁，2024年2月25日，星期天拉桿，0-4檔樣品池讀數(shù)波長毛面1、分清光面、毛面。手應(yīng)接觸毛面，光從光面通過2、用溶液潤洗2-3次，裝至2/3至4/5體積3、粗紙吸水、柔紙擦亮光面比色杯的使用分光光度計(jì)的使用1.打開電源，調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長，預(yù)熱20~30min2.1檔（空白管），T模式調(diào)100%，顯示“Blank”、“100”3.拉桿拉至1.5檔，T模式調(diào)0%，顯示“0.00”4.換到A模式，拉至2、3、4檔，讀取各個(gè)樣品的吸光度光面第5頁,共8頁，2024年2月25日，星期天Lambert-Beer定律正常參考值為0.30~1.7mmol/Lmg/mlmmol/L國際單位mg/ml—————————×1000摩爾質(zhì)量g/mol(885)實(shí)驗(yàn)結(jié)果A1c1m1標(biāo)準(zhǔn)管法——=——=——（終體積相同時(shí)）A2c2m2A樣品———×m標(biāo)準(zhǔn)品A標(biāo)準(zhǔn)品樣品TG濃度=————————V樣品A樣品———×1mg/ml×0.2mlA標(biāo)準(zhǔn)品=————————————0.2ml第6頁,共8頁，2024年2月25日，星期天注意事項(xiàng)抽提時(shí)搖勻靜置，待完全分層后才能吸取上層液，吸取上層液時(shí)不能吸入下層液；實(shí)驗(yàn)完成后，試管和比色杯必須用皂粉洗干凈，不能有油污，將水甩干，倒置晾干；槍頭必須清洗干凈，甩干選用小試管時(shí)試管口徑不能太細(xì)；試管使用時(shí)必須要干燥