DB1308-T105-2012香菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

B22DB1308

承德市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB1308/T105—2012

代替DB1308/T105—2006

香菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

DB1308/T105—2012

香菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了承德市香菇各級(jí)菌種生產(chǎn)的技術(shù)人員、場(chǎng)地選擇、廠房設(shè)置和布局、設(shè)備設(shè)施、使用

品種、生產(chǎn)工藝流程和技術(shù)要求。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于承德市香菇菌種生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本

適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

GB4789.28—2003食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑

GB9687—1998食品包裝用聚乙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB9688—1988食品包裝用聚丙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

NY/T528—2002食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.1

品種strain

經(jīng)各種方法分離、誘變、雜交、篩選而選育出來(lái)具特異性、均一（一致）性和穩(wěn)定性的具有同一個(gè)

祖先的群體。也常稱作菌株或品系。

3.2

菌種pureculture

經(jīng)人工培養(yǎng)并可供進(jìn)一步繁殖或栽培使用的食用菌菌絲純培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。

3.3

母種stockculture

經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和使

用單位，也稱一級(jí)種、試管種。

3.4

原種pre-culturespawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以玻璃菌種瓶或塑料菌種瓶或15cm×28cm聚丙

烯塑料袋為容器。

3.5

栽培種spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以玻璃瓶、塑料瓶或塑料袋為容器。栽培種只能

用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種。

3.6

固體培養(yǎng)基solidmedinm

以富含木質(zhì)纖維素或淀粉類天然碳源物質(zhì)為主要原料，填加適量的有機(jī)氮源和無(wú)機(jī)鹽類，具有一定

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水分含量的培養(yǎng)基。常用的主要原料有木屑、棉籽殼、秸稈、麥粒、谷粒、玉米粒等，常用的有機(jī)氮源

有麥麩、米糠等，常用的無(wú)機(jī)鹽類有硫酸鈣、硫酸鎂、磷酸二氫鉀等。固體培養(yǎng)基包括以闊葉樹木屑為

主要原料的木屑培養(yǎng)基、以草本植物為主要原料的草料培養(yǎng)基、以禾谷類種子為主要原料的谷粒培養(yǎng)基、

以腐熟料為原料的糞草培養(yǎng)基、以種木為主要原料的木塞培養(yǎng)基。

3.7

種性charactersofstrain

食用菌的品種特性，是鑒別食用菌菌種或品種優(yōu)劣的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。一般包括對(duì)溫度、濕度、酸堿

度、光線和氧氣的要求，抗逆性、豐產(chǎn)性、出菇遲早、出菇潮數(shù)、栽培周期、商品質(zhì)量及栽培習(xí)性等農(nóng)

藝形狀。

4技術(shù)要求

4.1技術(shù)人員

菌種廠應(yīng)有與菌種生產(chǎn)所需的相應(yīng)專業(yè)技術(shù)人員，技術(shù)人員需與所生產(chǎn)菌種級(jí)別相適應(yīng)，并經(jīng)省級(jí)

主管部門考核合格。生產(chǎn)母種主要技術(shù)人員需有五年以上原種生產(chǎn)或栽培種生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)；生產(chǎn)原種主

要技術(shù)人員需有三年以上的栽培種生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)；生產(chǎn)栽培種主要技術(shù)人員需有三年以上的菌種生產(chǎn)實(shí)

踐。

4.2場(chǎng)地選擇

4.2.1基本要求

地勢(shì)高燥，通風(fēng)良好，排水暢通，交通便利。

4.2.2環(huán)境衛(wèi)生要求

至少300m之內(nèi)無(wú)禽畜舍，無(wú)垃圾（糞便）場(chǎng)、無(wú)污水和其它污染源（如大量揚(yáng)塵的水泥廠、磚瓦

廠、石灰廠、木材加工廠等）。

4.3廠房設(shè)置和布局

4.3.1廠房設(shè)置和建造

有各自隔離的攤曬場(chǎng)、原材料庫(kù)、配料分裝室（場(chǎng)）、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、貯存室、

菌種檢驗(yàn)室等。廠房建造從結(jié)構(gòu)和功能上滿足食用菌菌種生產(chǎn)的基本需要。

4.3.1.1攤曬場(chǎng)

要求平坦高燥、通風(fēng)良好、光照充足、空曠寬闊、遠(yuǎn)離火源。

4.3.1.2原材料庫(kù)

防雨防潮，防蟲、防鼠、防火、防雜菌污染。

4.3.1.3配料分裝室（場(chǎng)）

要求水電方便，空間充足，水泥地面。如安排在室外，應(yīng)有天棚，防雨防曬。

4.3.1.4滅菌室

要求水電安全方便，通風(fēng)良好，空間充足，散熱暢通。

4.3.1.5冷卻室

潔凈、防塵、易散熱，可密閉，可消毒。

4.3.1.6接種室

要設(shè)緩沖間，防塵換氣性能良好。內(nèi)壁和屋頂光滑，經(jīng)常清洗和消毒，做到空氣潔凈。內(nèi)設(shè)接種箱

或凈化工作臺(tái)。

4.3.1.7培養(yǎng)室和貯存室

內(nèi)壁和屋頂光滑，便于清洗和消毒。培養(yǎng)室和貯存室墻壁要加厚，利于控溫。室內(nèi)清潔衛(wèi)生、無(wú)直

射光，有通風(fēng)設(shè)備，空氣流通，可人工調(diào)控。

4.3.1.8菌種檢驗(yàn)室

水電方便，利于裝備相應(yīng)的檢驗(yàn)設(shè)備和儀器。

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DB1308/T105—2012

4.3.2布局

應(yīng)按菌種生產(chǎn)工藝流程合理安排布局。

4.4設(shè)備設(shè)施

4.4.1基本設(shè)備

磅秤、天平、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋、潔凈工作臺(tái)、接種箱、調(diào)溫設(shè)備、除濕機(jī)、培養(yǎng)架、恒溫

箱、冰箱、顯微鏡等及常規(guī)用具，產(chǎn)量大的菌種廠還應(yīng)配備攪拌機(jī)、裝瓶裝袋機(jī)。高壓滅菌鍋應(yīng)使用有

關(guān)部門檢驗(yàn)的安全合格產(chǎn)品。

4.4.2基本設(shè)施

配料、分裝、滅菌、冷卻、接種、培養(yǎng)等各環(huán)節(jié)的設(shè)施規(guī)模要配套。冷卻室、接種室、培養(yǎng)室和貯

存室都要有調(diào)溫設(shè)施。

4.5使用品種

4.5.1品種

應(yīng)使用經(jīng)省級(jí)以上農(nóng)作物品種審定委員會(huì)登記的品種，并且清楚種性。不應(yīng)使用來(lái)源和種性不清的

菌種和生產(chǎn)性狀未經(jīng)系統(tǒng)試驗(yàn)驗(yàn)證的組織分離物作種源生產(chǎn)菌種。并從具相應(yīng)技術(shù)資質(zhì)的供種單位引

種。

4.5.2移植擴(kuò)大

母種僅用于移植擴(kuò)大原種，一支母種移植擴(kuò)大原種不應(yīng)超過(guò)6瓶（袋）；一瓶原種移植擴(kuò)大栽培種

不應(yīng)超過(guò)50瓶（袋）。

4.6生產(chǎn)工藝流程

培養(yǎng)基配制→分裝→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)（檢查）→成品

4.7生產(chǎn)過(guò)程中的技術(shù)要求

4.7.1容器

4.7.1.1母種

使用玻璃試管和棉塞，試管18mm×180mm或20mm×200mm，棉塞要使用梳棉，不應(yīng)使用脫脂棉。

4.7.1.2原種

使用750ml～500ml，耐126℃高溫的無(wú)色或近無(wú)色的玻璃菌種瓶，上覆牛皮紙，耐高壓的聚丙烯薄

膜，要求薄膜平整美觀。或使用17cm×35cm的高壓聚丙烯塑料袋作容器。聚丙烯塑料袋應(yīng)符合GB9688

要求。

4.7.1.3栽培種

使用符合4.7.1.2規(guī)定的容器，與原種要求相同，也可采用17cm×35cm或15.5cm×57cm的聚乙

烯塑料菌袋。聚丙烯塑料袋應(yīng)符合GB9688要求。用絲裂或線繩扎口，要求袋口干凈、扎緊、扎實(shí)。

4.7.2培養(yǎng)原料

4.7.2.1化學(xué)試劑類

這類原料如硫酸鎂、磷酸二氫鉀等，要使用化學(xué)純級(jí)試劑。

4.7.2.2天然材料類

天然材料如木屑、棉籽殼、麥麩等，要求新鮮、無(wú)蟲、無(wú)螨、無(wú)霉、潔凈干燥。

4.7.3培養(yǎng)基配方

4.7.3.1母種培養(yǎng)基

一般使用附錄A中A.1規(guī)定的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）或A.2規(guī)定的綜合馬鈴薯葡萄糖瓊

脂培養(yǎng)基（CPDA），PH值6.5～7.5。

4.7.3.2原種和栽培種培養(yǎng)基

采取以附錄B.1為主的培養(yǎng)基，嚴(yán)格掌握含水量和PH值。

4.7.4分裝

母種培養(yǎng)基的分裝量應(yīng)掌握在試管長(zhǎng)度的四分之一至五分之一，滅菌后擺放成斜面頂端距試管口不

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DB1308/T105—2012

少于50mm，原種和栽培種培養(yǎng)基裝至距瓶口不少于60mm，滅菌后不少于45mm；袋式栽培種采用裝袋機(jī)

裝袋，應(yīng)袋裝緊裝實(shí)，袋口干凈。母種棉塞大小松緊要適度。原種和栽培種培養(yǎng)基的松緊度要求為上緊

下松中間扎孔，便于發(fā)菌。

4.7.5滅菌

母種的培養(yǎng)基配制分裝后應(yīng)立即滅菌；原種和栽培種培養(yǎng)基配制后應(yīng)在4h內(nèi)進(jìn)鍋滅菌。母種培養(yǎng)

基滅菌0.11MPa～0.12Mpa，30min，木屑培養(yǎng)基0.12Mpa，1.5h或0.14MPa～0.15Mpa，1h。裝容量較大

時(shí)，滅菌時(shí)間要適當(dāng)延長(zhǎng)。滅菌完畢后，應(yīng)自然降壓，不應(yīng)強(qiáng)制降壓。常壓滅菌時(shí)，在2h之內(nèi)使滅菌

室溫度達(dá)到100℃，保持8h～10h。母種培養(yǎng)基、原種培養(yǎng)基應(yīng)高壓滅菌，不應(yīng)常壓滅菌。滅菌時(shí)應(yīng)防

止棉塞被冷凝水打濕，袋式栽培種常壓滅菌時(shí)，達(dá)到100℃保持16h～18h，做到滅菌徹底。

4.7.6滅菌效果的檢查

母種培養(yǎng)基置于26℃恒溫培養(yǎng)，原種和栽培種培養(yǎng)基經(jīng)無(wú)菌操作接種于GB4789.28—2003中4.8

規(guī)定的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于26℃恒溫培養(yǎng)，48h后檢查，無(wú)微生物長(zhǎng)出的為滅菌合格。

4.7.7冷卻

冷卻室使用前要進(jìn)行清潔和除塵處理。地面鋪消毒過(guò)的塑料薄膜后，將滅菌后的原種瓶（袋）或栽

培種瓶（袋）放置在冷卻室中冷卻到料溫降至28℃以下。

4.7.8接種

4.7.8.1接種室（箱）的基本處理程序

清潔→搬入接種物和被接種物→接種室（箱）的消毒處理。

4.7.8.2接種室（箱）的消毒方法。

用煙霧消毒劑等藥物消毒并用紫外燈照射。

4.7.8.3凈化工作臺(tái)的消毒處理方法

先用75%酒精或新潔爾滅溶液進(jìn)行表面擦拭消毒，然后預(yù)凈20min。

4.7.8.4接種操作

在無(wú)菌室（箱）或凈化工作臺(tái)上嚴(yán)格按無(wú)菌操作接種。接種完成后及時(shí)貼好標(biāo)簽。

4.7.8.5接種室（箱）后處理

接種室每次使用后，要及時(shí)清潔，排除廢氣，清除廢物，臺(tái)面要用75%酒精或新潔爾滅溶液擦拭消

毒。

4.7.9培養(yǎng)室處理

在使用培養(yǎng)室的前兩天，采用藥物消毒。

4.7.10培養(yǎng)條件

適宜的培養(yǎng)溫度24℃～26℃，保持空氣相對(duì)濕度在75%以下，通風(fēng)，避光。

4.7.11培養(yǎng)期的檢查

各級(jí)菌種培養(yǎng)期間應(yīng)定期檢查，及時(shí)揀出不合格菌種。

4.7.12入庫(kù)

完成培養(yǎng)的菌種要及時(shí)登記入庫(kù)。

4.7.13記錄

生產(chǎn)各環(huán)節(jié)應(yīng)詳細(xì)記錄。

4.7.14留樣

留樣的數(shù)量應(yīng)以每個(gè)批號(hào)母種3支～5支，原種和栽培種5瓶～7瓶/（袋），于4℃～6℃下貯存，

貯存至使用者在正常生產(chǎn)條件下該批菌種出第一潮菇。

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DB1308/T105—2012

附錄A

（規(guī)范性附錄）

母種常用培養(yǎng)基及其配方

A.1PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）

馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000ml，PH值自然。

A.2CPDA培養(yǎng)基（綜合馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）

馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，瓊脂20g，水1000ml，PH

值自然。

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DB1308/T105—2012

附錄B

（規(guī)范性附錄）

原種和栽培種常用培養(yǎng)基配方

B.1闊葉樹木屑78%，麩皮20%，糖1%，石膏1%，含水量58%±2%。

B.2闊葉樹木屑63%，棉籽殼15%，麩皮20%，糖1%，石膏1%，含水量58%±2%。

B.3闊葉樹木屑63%，玉米芯粉15%，麩皮20%，糖1%，石膏1%，含水量58%±2%。

6

DB1308/T105—2012

前言

本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)代替DB1308/T105-2006《香菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》。與DB1308/T105-2006相比，除編輯性

修改外主要技術(shù)變化如下：

——將4.7.1.3栽培種的容器規(guī)格≤17×57cm的菌袋，改為17cm×35cm規(guī)格的菌袋。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：平泉縣食用菌辦公室、平泉縣技術(shù)監(jiān)督局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊濤、王會(huì)森、李靜、何桂蘭、王淑芬。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

——DB1308/T105-2006。

I

DB1308/T173—2010

附錄A

（規(guī)范性資料）

圍選一號(hào)主要病蟲害防治

流

防治對(duì)象

主要為害部防治方法流

位和癥狀膠

病

1、清掃果園，剪除病枝病葉，集

杏中燒毀。2、萌芽前噴5度Be石

主要為害新梢和葉片，被害新梢節(jié)問(wèn)縮短，幼葉簇生，

疔硫合劑。3、展葉后噴1-2次l：

被害葉暗紅色增厚呈腫脹狀，干枯不脫落

病1.5：200倍波爾多液。4、生長(zhǎng)

期人工剪除。

細(xì)L剪除病枝，清掃果園，枯枝落

菌葉集中燒毀。2、萌芽前噴5度

性被害葉初期呈水浸狀園斑，后干枯脫落形成穿孔。被Be石硫合劑。3、展葉后噴0.5：

穿害枝有水浸狀小皰。1：100倍波爾多液或鋅灰液，配

孔合比例硫酸鋅：生石灰：水=O.5：

病1：120。

天

1、剪除帶枝蟲卵集中消滅。2、

幕

主要為害葉片嚴(yán)重時(shí)全樹葉片吃光幼蟲孵化初期噴2.5%溴氰菊脂乳

毛

油，阿維菌素1200～2000倍液

蟲

1、清掃果園2、噴40%蚜滅多乳

蚜油，攻蚜1：2500～3000倍，七

主要為害葉片

蟲品紅3000～5000倍液，啶蟲脒

2000～2500倍液。

1、秋末冬初，徹底清理果園內(nèi)落

果、杏核及樹上殘存的僵果，集

杏中燒毀或深埋30cm以上;2、5

仁主要為害杏仁引起大量落果月上旬成蟲出土期，地膜覆蓋地

蜂