γ-分泌酶抑制劑對鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞化療敏感性影響的研究的開題報告

γ-分泌酶抑制劑對鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞化療敏感性影響的研究的開題報告一、研究背景卵巢癌是婦女生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的一種，具有隱蔽性、易復(fù)發(fā)等特點，因此化療是其主要治療手段之一。然而，耐藥問題一直是卵巢癌治療的難點。經(jīng)過多年研究，已知鉑類藥物在治療卵巢癌方面具有一定的療效。但隨著治療的進(jìn)行，部分患者會出現(xiàn)鉑耐藥，導(dǎo)致治療效果下降，甚至失效。因此，探究影響卵巢癌細(xì)胞化療敏感性的因素和途徑，是提高治療效果和提高生活質(zhì)量的關(guān)鍵所在。γ-分泌酶（γ-secretase）是一種保守的膜蛋白酶復(fù)合體，可以切割多種膜蛋白底物，包括轉(zhuǎn)錄因子Notch、ErbB4、APP等。γ-分泌酶對Notch信號通路的激活有著重要的作用。Notch信號通路在正常細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等方面扮演重要角色。但是，在某些癌癥細(xì)胞中，Notch信號通路可能被異常激活，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移以及耐藥性的增強(qiáng)。近年來，研究發(fā)現(xiàn)γ-分泌酶在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展以及鉑耐藥中起著重要作用。因此，通過抑制γ-分泌酶的活性，可以為卵巢癌的治療提供新的手段和方向。二、研究目的和意義本研究旨在探究γ-分泌酶抑制劑對鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞化療敏感性的影響，并深入分析其機(jī)制，為卵巢癌的治療提供新的思路和途徑。同時，本研究對于深入探究卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，理解γ-分泌酶在癌癥中的作用也具有重要意義。三、研究方法1.實驗材料：人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3、鉑耐藥株SKOV3/DDP，γ-分泌酶抑制劑DAPT。2.細(xì)胞培養(yǎng)：使用DMEM高糖培養(yǎng)基含10%FBS、1%penicillin-streptomycin進(jìn)行培養(yǎng)；分別對SKOV3、SKOV3/DDP細(xì)胞進(jìn)行γ-分泌酶抑制劑DAPT處理。3.MTT法：采用MTT法檢測各組細(xì)胞的增殖能力，并計算IC50值。4.檢測細(xì)胞凋亡率：按照說明書使用AnnexinV-FITC/PI染色劑組合進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測。5.Westernblot法：采用Westernblot法檢測細(xì)胞中相關(guān)蛋白如Notch1、PTEN、AKT、CleavedCaspase-3以及Bcl-2/Mcl-1等的表達(dá)情況。四、預(yù)期成果通過本研究，預(yù)計可以獲得以下預(yù)期成果：1.確定γ-分泌酶抑制劑DAPT對鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞化療敏感性的影響及其劑量響應(yīng)關(guān)系；2.探究γ-分泌酶抑制劑DAPT對鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞生長、增殖、運(yùn)動、凋亡等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響；3.闡明γ-分泌酶抑制劑DAPT對Notch信號通路、PTEN/AKT信號通路以及Bcl2/Mcl-1等相關(guān)蛋白表達(dá)水平的調(diào)控機(jī)制；4.對于卵巢癌的治療提供新的思路和途徑，為卵巢癌治療提供有效的治療藥物。五、研究的局限性本研究存在的局限性主要有以下幾個方面：1.本研究暫未考慮到宿主體內(nèi)的免疫應(yīng)答等因素對卵巢癌細(xì)胞的作用；2.本研究中使用的只是人卵巢癌細(xì)胞株和體外模型，暫未考慮實