臨床醫(yī)師臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)-紅細(xì)胞檢查

臨床醫(yī)師臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)一紅細(xì)胞檢查

《考綱要求》

(1)紅細(xì)胞生理掌握

概要

(2)血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)、成分、合成和代謝了解

(1)檢測(cè)原理掌握

(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)掌握

紅細(xì)胞檢查(一)

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(3)質(zhì)量控制熟練掌握

血紅蛋白測(cè)定(4)參考值熟練掌握

(5)臨床意義掌握

(6)操作方法了解

概要

一、紅細(xì)胞生理RBC生成

造

紅原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅紅細(xì)胞衰亡

血

系

干

祖

一

細(xì)

細(xì)

胞

胞

衰老紅細(xì)胞主要在脾破壞，

分解為鐵、珠蛋白和膽紅素。

二、血紅蛋白(hemoglobin,Hb)

l.Hb分子結(jié)構(gòu)及成分

f原嚇蹄

色素部分為亞鐵血紅素

蛋白質(zhì)部分為珠蛋白

類鏈：a,6和8梃；

B類糙：B，$，V.￡鋌。

每個(gè)Hb分子由2條a類肽鏈和2條B類肽鏈組成。

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

【檢測(cè)原理】

1.手工顯微鏡法：

用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)

換算求出每升血液中紅細(xì)胞數(shù)量。

稀釋一充池f計(jì)數(shù)一計(jì)算

2.血液分析儀法：用電阻抗和(或)光散射原理。

【稀釋液】

氯化訥(jfaa)--調(diào)節(jié)遨透濃度

1.Ha5rem液

硫酸訥(Na:SO,)--防止紅細(xì)胞聚集

氯化晟＞汞(IfeClj)—防腐劑，有毒

氛調(diào)遨，硫防聚，高貢防腐且有毒。

2.枸椽酸訥稀釋液:枸椽酸訥—抗凝和維持滲誘壓

巴蒙——防腐和固定紅細(xì)胞

氯化訥

--調(diào)節(jié)滲透濃度

3.普通生理鹽水或加1%甲醛的生理鹽水。

改良牛鮑計(jì)數(shù)板(血細(xì)胞計(jì)數(shù)板)

計(jì)數(shù)池

計(jì)數(shù)池

*'H!，型溝槽

0.1mm間隙

面積1mm2

容積0.W(U-l)

}11nm5個(gè)大方格

四角大方格單線

16中方格

中央大方格雙線

25中方格，16小方格

計(jì)數(shù)池微觀結(jié)構(gòu)

【血細(xì)胞計(jì)數(shù)板口訣】

改良牛鮑H型，

上下兩池容點(diǎn)1,

四角中央五大格，

四角單線白細(xì)胞，

單線分成16中，

中央雙線紅與血，

雙線分成25中，

每中分成16小。

3nun

白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域

是四角的4個(gè)大方格

紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)區(qū)域

中央大方格四角和中間

5個(gè)中方格

血細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)

【操作方法】

稀釋液2ml+血lOulf混勻■＞充池f靜止3~5min一循檢

一次完成充池，如充池過少、過計(jì)數(shù)

多有氣泡、繼續(xù)充液，應(yīng)重新操

作。充池后不能移動(dòng)蓋玻片。

倍m

計(jì)數(shù)區(qū)域

計(jì)算

計(jì)數(shù)原則

?3:

32?3

??

>a??321

■

■

)2?2.?e?4

O

.

■

■

2，?2'3

■5

0

O

0O

計(jì)數(shù)原則

壓線細(xì)胞

【計(jì)算】

紅細(xì)胞數(shù)/L=NX25/5X10X200Xl()6/L

=N(5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù))/1OOX1O'7L

白細(xì)胞影響

通常白細(xì)胞總數(shù)較少，僅相當(dāng)于紅細(xì)胞的1/1000~1/500,對(duì)結(jié)果影響很小，可以忽略不計(jì)。但白細(xì)胞

過高者(WB0100X107L),紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行校正。

校正方法有兩種：

一是：直接將患者紅細(xì)胞數(shù)減去白細(xì)胞數(shù)。

二是：在高倍鏡下勿將白細(xì)胞計(jì)入，白細(xì)胞體積常比紅細(xì)胞略大，中央無凹陷，細(xì)胞核隱約可見，無

黃綠色折光。

【方法學(xué)評(píng)價(jià)】

1.手工顯微鏡法

是傳統(tǒng)方法，不需要特殊設(shè)備，但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)。

2.血液分析儀法

是常用方法，比手工法精確（如電阻抗計(jì)數(shù)法的變異系數(shù)為2%,手工法則大于11%）,且操作簡(jiǎn)便、

快速。當(dāng)白細(xì)胞數(shù)量明顯增高時(shí)，會(huì)干擾紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定而產(chǎn)生誤差。成本高，環(huán)境條件要求高。

【質(zhì)量控制】

1.手工法：誤差原因

①樣本：血液發(fā)生凝固，使細(xì)胞計(jì)數(shù)減少或分布不均。

②操作：稀釋、充池、計(jì)數(shù)不規(guī)范。

③器材：微量吸管、計(jì)數(shù)板不標(biāo)準(zhǔn)。

④固有誤差（計(jì)數(shù)域誤差）

估計(jì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的95%可信限和變異系數(shù)，采用下列公式：

標(biāo)準(zhǔn)差s=；95%可信限=計(jì)數(shù)值±2s；

變異系數(shù)=（：丫％=$/11乂100%=4*100虬

2.儀器法：應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)程操作，并定期進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)。

【參考值】

男性：（4.0?5.5）X10,2/L

女性：（3.5~5.0）XlO'VL

新生兒：（6.0?7.0）X1012/L

醫(yī)學(xué)決定水平：

高于6.8X10"/L,應(yīng)采取治療措施；

低于參考值低限，為診斷貧血界限。

低于1.5X10'2/L應(yīng)考慮輸血。

【臨床意義】

1.生理性變化

增多

年齡、性別、精神因素、劇烈體力勞動(dòng)或運(yùn)動(dòng)、新生兒、高原居民等。

減少

老年人、妊娠等。

2.病理性變化

（1）RBC和Hb減少

貧血：?jiǎn)挝蝗莘e血液中RBC數(shù)量、Hb量或HCT低于參考值的下限。

1）急、慢性紅細(xì)胞丟失過多：各種原因出血，如消化性潰瘍、痔瘡、十二指腸鉤蟲病等。

2）紅細(xì)胞壽命縮短：各種原因溶血，如輸血溶血反應(yīng)、蠶豆病、遺傳性球形細(xì)胞增多癥等。

紅血比低于下限見貧血，出血紅細(xì)胞丟失多，溶血紅細(xì)胞壽命縮短，原料骨髓抑制生成少。

3）造血原料不足：如慢性失血者、先天性或后天性紅細(xì)胞酶缺陷者、鐵粒幼細(xì)胞貧血；某些藥物，如

異煙腫、硫嗖嚓吟等；繼發(fā)于某些疾病，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、白血病、甲狀腺功能亢進(jìn)、慢性腎功能不全、

鉛中毒等。

4）骨髓造血功能減退：某些藥物，如抗腫瘤藥物、磺胺類藥物、保泰松、有機(jī)珅、馬利白消安等可抑

制骨髓造血功能；物理因素，如X線、60鉆、鐳照射等可抑制骨髓造血功能。

（2）RBC增多

1）相對(duì)增多：

嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、多汗、多尿、大面積燒傷、晚期消化

道腫瘤而長期不能進(jìn)食等引起血液濃縮、血液中有形成

分相對(duì)增多，多為暫時(shí)性增多。

「繼發(fā)性

2）絕對(duì)增多v血中Epot

一原發(fā)性

繼發(fā)性

①心血管?。焊鞣N先天性心血管疾病，如房室間隔缺損。

②肺部疾?。悍螝饽[、肺源性心臟病、肺纖維化、矽肺和各種引起肺氣體交換面積減少。

③異常血紅蛋白病。

④腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)（庫欣?。嚎赡芘c皮質(zhì)激素刺激骨髓使紅細(xì)胞生成偏高有關(guān)。

⑤某些藥物，如腎上腺素、糖皮質(zhì)激素、雄激素等。

原發(fā)性：

真性紅細(xì)胞增多癥（PV）o

血紅蛋白測(cè)定

【檢測(cè)原理】

1.氟化高鐵血紅蛋白HiCN測(cè)定法:除SHb外

高鐵甄化理

Hb--------------------?Hi+CLTHiCN

九540nm

------------------------------------?A

ICSH推薦參考方法，具有操作簡(jiǎn)單、顯色快、結(jié)果

穩(wěn)定可靠、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點(diǎn)。致命的弱點(diǎn)

是氟化鉀（KCN）試劑有劇毒，使用管理不當(dāng)可造成公害。

2.十二烷基硫酸鈉血紅蛋白SDS測(cè)定法：

^538m

Hb+SDS-----?SDS-Hb（粽紅色）------------->A

具有操作簡(jiǎn)單、呈色穩(wěn)定、準(zhǔn)確性和精確性符合要求、無公害等優(yōu)點(diǎn)。但由于摩爾消光系數(shù)尚未最后

確認(rèn)，不能直接用吸光度計(jì)算Hb濃度，而且SDS試劑本身質(zhì)量差異較大，會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

【參考值】

成年男性：120?160g/L

成年女性：110?150g/L

新生兒：170?200g/L

【臨床意義】

Hb的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似，但判斷貧血程度優(yōu)于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。根據(jù)Hb濃度可將貧血分為4度。

輕度貧血：Hb<120g/L（女性HbV110g/L）；

中度貧血：Hb<90g/L；

重度貧血：Hb<60g/L；

極重度貧血：Hb<30g/L?

當(dāng)RBCVI.5X10%,HbV45g/L時(shí),應(yīng)考慮輸血。

男性120女性110,低于下限輕度貧，中重極963,低于45應(yīng)輸血。

（1）某些疾病，血紅蛋白和紅細(xì)胞濃度不一定能正確反映全身紅細(xì)胞的總?cè)萘?。如大量失血時(shí)，在補(bǔ)

充液體前，雖循環(huán)血容量縮小，但血液濃度很少變化，從血紅蛋白濃度來看，很難反映出存在貧血。如水

潴留時(shí)，血漿容量增大，即使紅細(xì)胞容量正常，但血液濃度減低，從血紅蛋白濃度來看，己存在貧血，失

水時(shí)，血漿容量縮小，即使血液濃度增高，但紅細(xì)胞容量減少，從血紅蛋白濃度來看，貧血不明顯。

（2）發(fā)生大細(xì)胞性貧血或小細(xì)胞低色素性貧血時(shí)，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與血紅蛋白濃度不成比例。大細(xì)胞性貧

血的血紅蛋白濃度相對(duì)偏高，小細(xì)胞低色素貧血的血紅蛋白減低，但紅細(xì)胞計(jì)數(shù)可正常。

氧化高鐵血紅蛋白測(cè)定法操作

1.直接測(cè)定法

⑴在5mlHiCN轉(zhuǎn)化液加血20uh充分混合，靜置5min后，波長540nm處，光徑（比色杯內(nèi)徑）1.000cm,

IliCN轉(zhuǎn)化液或蒸儲(chǔ)水調(diào)零，測(cè)定吸光度（A）。

（2）計(jì)算：根據(jù)公式直接計(jì)算：

Hb（g/L）=為料xX251=AX367.7

44為毫摩爾消光系數(shù)，64458/1000為Imol/LHb溶液中

所含Hb克數(shù)，251為稀釋倍數(shù)。

2.參考液比色測(cè)定法（間接法）

采用HiCN參考液50g/L,100g/L,150g/L,200g/L,在分光光度計(jì)上,波長540nm處,測(cè)定各種參考

液的吸光度，以參考液血紅蛋白含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，或求出換算常數(shù)K：

”XHb

根據(jù)樣本吸光度（A）在標(biāo)準(zhǔn)曲線查出血紅蛋白濃度，或用K值計(jì)算：Hb（g/L）=KXA。

3.HiCN貯存

在棕色有塞玻璃瓶中，不能貯存在塑料瓶中，否則會(huì)使CN一丟失，測(cè)定結(jié)果偏低。HiCN轉(zhuǎn)化液在4℃保

存一般可數(shù)月，不能在0℃以下保存，因?yàn)榻Y(jié)冰可使高鐵氟化鉀還原，試劑失效。

4.氟化鉀試劑

是劇毒品，測(cè)定后的廢液首先以水稀釋廢液（1:1）,再按每升上述稀釋液加次氯酸鈉35ml,充分混勻，

敞開容器，放置15h以上，使CN一氧化成CO?和N?揮發(fā)，或水解成CO/和NH4+,再排入下水道。廢液不能

直接與酸性溶液混合，因?yàn)榉浻鏊峥僧a(chǎn)生劇毒的氟氨酸氣體。

【小結(jié)】

RBC計(jì)數(shù)Hb測(cè)定

稀充二計(jì)ICSII推薦HiCN吸收峰在540

檢測(cè)原氯調(diào)滲，硫防聚除了硫化Hb就是有毒和公害

理高貢防腐且有毒SDS吸收峰在538

枸椽抗?jié)B甲防固特色在于無公害

男性4055女性3550男性120女性110,低于下限輕度貧中重極為906030,

參考值

兒童6到7乘以1012低于45應(yīng)輸血

紅血比低于下限見貧血出血紅細(xì)

臨床意胞丟失多大細(xì)胞貧血,Hb濃度相對(duì)高

義溶血紅細(xì)胞壽命縮短小細(xì)胞低素貧,Hb濃度減低

原料骨髓抑制生成少

相對(duì)絕對(duì)紅增多，相對(duì)嘔瀉血濃縮，

絕對(duì)繼發(fā)和原發(fā)，繼發(fā)多見心肺腎，

原發(fā)見于真性紅。

【習(xí)題】

Ilayem紅細(xì)胞稀釋液中硫酸鈉的主要作用是

A.固定細(xì)胞形態(tài)

B.防腐作用

C.防止細(xì)胞黏附

D.調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓

E.抗凝

『正確答案」C

『答案解析JHayem紅細(xì)胞稀釋液中硫酸鈉的主要作用是防止細(xì)胞黏附。

患者，女性，50歲，用改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)其紅細(xì)胞，中央大方格內(nèi)4角及中央5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞

總數(shù)為300,則其紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為

A.3X10'2/L

B.4X10'2/L

C.5X10'7L

D.6X10'7l.

E.2X10l2/L

『正確答案』A

『答案解析』紅細(xì)胞數(shù)/L=NX25/5X10X200X107L=N（5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)）/100X10'7>3X

IO12/LO

目前國際推薦測(cè)定血紅蛋白方法是

A.十二烷基硫酸鈉比色法

B.氧化高鐵血紅蛋白比色法

C.堿羥血紅蛋白比色法

D.酸化血紅蛋白比色法

E.血細(xì)胞分析儀測(cè)定法

r正確答案』B

［答案解析』目前國際推薦測(cè)定血紅蛋白方法是氟化高鐵血紅蛋白比色法

《考綱要求》

(1)檢測(cè)原理掌握

紅細(xì)胞形態(tài)檢查(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)了解

紅細(xì)胞檢查(二)血細(xì)胞比容測(cè)定(3)質(zhì)量控制掌握

紅細(xì)胞平均指數(shù)(4)參考值熟練掌握

(5)臨床意義掌握

紅細(xì)胞形態(tài)檢查

【檢測(cè)原理】

紅細(xì)胞形態(tài)檢查與Hb測(cè)定、RBC計(jì)數(shù)結(jié)果相結(jié)合可粗略推斷貧血原因，對(duì)貧血診斷和鑒別診斷有很重

要的臨床價(jià)值。將細(xì)胞分布均勻的血涂片，進(jìn)行染色(如瑞氏染色)后，根據(jù)各種細(xì)胞和成分各自的呈色

特點(diǎn)，在顯微鏡下進(jìn)行觀察和識(shí)別。

【質(zhì)量控制】

1.選擇細(xì)胞分布均勻的區(qū)域。

2.注意檢查順序的完整性

?1的購分做均勻.立體將由

也?弟漕(中央照英)

先在低倍鏡下估計(jì)細(xì)胞分布和染色情況，再用油鏡觀察血膜體尾交界處細(xì)胞形態(tài)，同時(shí)瀏覽是否存在

其他異常細(xì)胞，如幼稚或有核紅細(xì)胞等，有時(shí)異常成分常集中分布在血片邊緣。

【參考值】

瑞氏染色血涂片成熟紅細(xì)胞形態(tài)為雙凹圓盤形，細(xì)胞大小一致、平均直徑7.2um,淡粉紅色，中央1/3

為生理性淡染區(qū)，胞質(zhì)內(nèi)無異常結(jié)構(gòu)。

*RBC大小改變

*Hb含量改變

*RBC形態(tài)改變

*RBC結(jié)構(gòu)改變

【臨床意義】

1.RBC大小改變

(1)小紅細(xì)胞

直徑＜6um的紅細(xì)胞，Hb合成障礙，生理性淡染區(qū)擴(kuò)大，見于IDA、珠蛋白生成障礙性貧血。

6

6

(2)大紅細(xì)胞

直徑＞10Um的紅細(xì)胞，見于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、惡性貧血等。

(3)巨紅細(xì)胞

直徑＞15um的紅細(xì)胞，因葉酸、維生素B12缺乏使幼稚細(xì)胞內(nèi)DNA合成不足，不能按時(shí)分裂，脫核

后成為巨大紅細(xì)胞，血涂片還可見分葉過多中性粒細(xì)胞。見于巨幼細(xì)胞性貧血。

(4)紅細(xì)胞大小不均

紅細(xì)胞間直徑相差一倍以上，大者可達(dá)12Nm,小者僅2.5Bm,與骨髓粗制濫造紅細(xì)胞有關(guān)。見于嚴(yán)

重的增生性貧血(如MA)。

2.11b含量(染色異常)

(1)高色素性

紅細(xì)胞中央淺染區(qū)消失，

整個(gè)紅細(xì)胞染成紅色，胞體增大,

平均紅細(xì)胞Hb含量增高，

平均Hb濃度正常。見于MA

(2)低色素性

紅細(xì)胞中央生理性淺染區(qū)擴(kuò)大,

成為環(huán)形紅細(xì)胞。見于IDA、

珠蛋白生成障礙性貧血、

鐵幼粒細(xì)胞性貧血等。

0oO

c

（3）多色性

是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，胞體較大，胞質(zhì)內(nèi)尚存少量嗜堿性物質(zhì)（RNA）,紅細(xì)胞染成灰紅色或淡灰

藍(lán)色。

見于正常人（占現(xiàn)左右）、骨髓造紅細(xì)胞功能活躍（如溶血性或急性失血性貧血）。

啊紅大小染色常

小紅低色缺鐵珠

大紅不均高巨貧

多色骨髓功能躍

建。O

3.紅細(xì)胞形狀改變

（1）球形紅細(xì)胞

見于遺傳性和獲得性球形細(xì)胞增多癥（如自身免疫溶血性貧血等）。

（2）橢圓形紅細(xì)胞

見于遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥（可達(dá)25%?75%）、大細(xì)胞性貧血（可達(dá)25%）、缺鐵性貧血、正常人

（約占1%,不超過15%）?

（3）靶形紅細(xì)胞

細(xì)胞中央染色較深，外圍為蒼白區(qū)域，而邊緣又深染，形如射擊之靶。

見于各種低色素性貧血(如珠蛋白生成障礙性貧血、HbC病)、阻塞性黃疸、脾切除后。

(4)口形紅細(xì)胞

細(xì)胞中央有裂縫，中央淡染區(qū)呈扁平狀，似張開的口形或魚口，細(xì)胞有膜異常，Na通透性增加，細(xì)胞

膜變硬，使脆性增加，細(xì)胞生存時(shí)間縮短。見于口形紅細(xì)胞增多癥、小兒消化系統(tǒng)疾患引起的貧血、酒精

中毒、某些溶血性貧血、肝病和正常人(〈4%)。

(5)鐮形紅細(xì)胞：

細(xì)胞呈鐮刀狀、線條狀或L、S、V形等，是含有異常血紅蛋白S(HbS)的紅細(xì)胞,在缺氧情況下，溶

解度減低，形成長形或尖形結(jié)晶體，使細(xì)胞膜發(fā)生變形。檢查鐮形紅細(xì)胞時(shí)需加還原劑如偏亞硫酸鈉后觀

察。見于鐮狀細(xì)胞貧血(HbS-S,HbS-C)、鐮狀細(xì)胞特性樣本(HbA-S)。

(7)裂紅細(xì)胞

為紅細(xì)胞碎片或不完整紅細(xì)胞，大小不一、外形不規(guī)則，呈刺形、盔形、三角形、扭轉(zhuǎn)形等，是細(xì)胞

通過阻塞的、管腔狹小的微血管所致。見于彌散性血管內(nèi)凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成

障礙性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、嚴(yán)重?zé)齻驼Ｈ?<2%)。

(8)緡錢狀紅細(xì)胞

紅細(xì)胞互相連接如緡錢狀，是因?yàn)檠獫{中某些蛋白(纖維蛋白原、球蛋白)增高，使紅細(xì)胞正負(fù)電荷

發(fā)生改變所致。

(9)有核紅細(xì)胞(幼稚紅細(xì)胞)

除1周內(nèi)嬰幼兒血涂片中可見少量有核紅細(xì)胞外，其他則為病理現(xiàn)象，包括：①溶血性貧血②造血系

統(tǒng)惡性疾患或骨髓轉(zhuǎn)移性腫瘤③慢性骨髓增生性疾?。喝绻撬枥w維化。

(10)其他

淚滴形紅細(xì)胞

紅細(xì)胞形如淚滴樣或梨狀，

因細(xì)胞內(nèi)含有Heinz小體或包涵體，

或紅細(xì)胞膜被粘連而拉長所致。

見于貧血、骨髓纖維化和正常人。

口訣：

球橢口、見遺傳，

靶形可見珠蛋白，

鐮形HbS病，

裂D淚纖有核病，

緡錢纖原珠蛋白。

4.RBC異常結(jié)構(gòu)

(1)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞

瑞氏染色后，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍(lán)色顆粒(變性RNA),屬于未完全成熟紅細(xì)胞，顆粒大小不一、

多少不等，原因?yàn)橹亟饘贀p傷細(xì)胞膜，使嗜堿性物質(zhì)凝集，或嗜堿性物質(zhì)變性，或血紅蛋白合成中阻斷原

嚇咻與鐵結(jié)合。見于鉛中毒。正常人血涂片中很少見到嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞(約占1/10000)。

（2）豪焦小體（染色質(zhì)小體）

成熟紅細(xì)胞或幼紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有一個(gè)或多個(gè)直徑為1?2um暗紫紅色圓形小體，為核碎裂、溶解后

的殘余部分。見于脾切除后、無脾癥、脾萎縮、脾功能低下、紅白血病、某些貧血（如巨幼細(xì)胞性貧血）。

（3）卡波環(huán)

在嗜多色性、堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)紫紅色細(xì)線圈狀結(jié)構(gòu)，呈環(huán)形、“8”字形，為核膜殘余物、

紡錘體殘余物、脂蛋白變性物。見于白血病、巨細(xì)胞性貧血、增生性貧血、鉛中毒、脾切除后。

口訣：

異常結(jié)構(gòu)有點(diǎn)彩

點(diǎn)彩常見鉛中毒

豪焦卡波和蟲子

經(jīng)常愿與小白混

（4）寄生蟲

瘧原蟲、微絲拗、杜利什曼原蟲等病原體。

血細(xì)胞比容測(cè)定（Het,Ht,HCT或PCV）

【檢測(cè)原理】是指在一定條件下，經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血樣本中所占比值。

1.離心法

包括溫氏法（Wintrobe法）、微量法是將抗凝血置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細(xì)玻管中，以一定轉(zhuǎn)速離

心一定時(shí)間后，計(jì)算紅細(xì)胞層占全血的體積比。

2.血液分析儀法

【質(zhì)量控制】

1.手工法

抗凝劑量不準(zhǔn)確、混勻不充分、離心速度不夠會(huì)產(chǎn)生誤差。紅細(xì)胞形態(tài)異常（如小紅細(xì)胞、大紅細(xì)胞、

橢圓形紅細(xì)胞、鐮形紅細(xì)胞）或紅細(xì)胞增多癥可使血漿殘留量增加6%。當(dāng)紅細(xì)胞增多時(shí)，HCT明顯增高，

血漿殘留也會(huì)增加。

2.血液分析儀法要注意Ilct是否與RBC、MCV相關(guān)。

【參考值】

溫氏法:男性0.40?0.50；女性0.37?0.48。

微量法：男性0.47±0.04；女性0.42±0.05。

【臨床意義】

1.增高見于各種原因所致血液濃縮，如大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷、真性紅細(xì)胞

增多癥等。

2.減低見于各種貧血。但不同類型的貧血，HCT減少程度與RBC計(jì)數(shù)值不完全一致。

3.輸液評(píng)估用于評(píng)估血漿容量有無增減或濃度稀釋程度，有助于控制補(bǔ)液量和了解體液平衡情況，是

臨床輸血、輸液治療療效觀察的指標(biāo)。

4.計(jì)算平均值作為紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度計(jì)算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

5.真紅診斷指標(biāo)HCT>0.7,RBC為（7?10）XlO'VL,Hb>180g/L即可診斷。

【操作方法】

溫氏法取EDTA-K2或肝素鈉抗凝靜脈血2nd,加入溫氏管中，用水平離心機(jī)以2264g,離心30分鐘。

離心后血液分為5層，自上而下分別為血漿層、血小板層、白細(xì)胞層和有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層

（紫黑紅色）、帶氧紅細(xì)胞層（鮮紅色）。

讀取還原紅細(xì)胞層柱高的毫米數(shù)，乘以0.01,即為每升血液中紅細(xì)胞體積的升數(shù)。

六、紅細(xì)胞平均指數(shù)

【檢測(cè)原理】手工法

..每升血液中血細(xì)胞比容Het

每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)RBC

rcu每升血液中血紅蛋白含量Hb,、

每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)RBC

一cue每升血液中血紅蛋白含量Hb,八、

MCHC=-----------------------------------=-----（q/L）

每升血液中血細(xì)胞比容Het

【參考值】

如表不同人群紅細(xì)胞指數(shù)的參考范圍

MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)

新生兒86?12027?36250?370

1-3歲79?10425?32280?350

成人80?10026?34320?360

老年人81?10327?35310?360

【臨床意義】

紅細(xì)胞平均指數(shù)可作為貧血形態(tài)分類依據(jù)

貧血分類MCVMCI1MCHC貧血

正細(xì)胞貧血正常正常正常再生障礙性貧血、急性失血性貧血、某些溶血性貧血

大細(xì)胞貧血增高增高正常各種造血物質(zhì)缺乏或利用不良的貧血

單純小細(xì)胞貧血減低減低正常慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血

小細(xì)胞低色素貧血減低減低減低缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血，慢性失血性貧血

【小結(jié)】

RBC形態(tài)IICT測(cè)定RBC平均指數(shù)

MCV=Hct/RBC(fl)

檢測(cè)紅細(xì)胞層占

推片染色鏡下觀MCH=Hb/RBC(pg)

原理全血的體積比

MCHC=IIb/Hct(g/L)

雙凹圓盤淡粉紅成人MCV80?100

參考值平均直徑6?9男性0.40-0.50女性0.37~0.48MCH26-34

中央1/3淡染區(qū)MCHC320-360

平均指數(shù)貧血分

大小改變

輸液評(píng)估三項(xiàng)正常正細(xì)胞

臨床染色改變

計(jì)算平均值MCV,MCH增高大細(xì)胞

意義形態(tài)改變

真紅診斷指標(biāo)MCV,MCH減低單純小

結(jié)構(gòu)改變

三項(xiàng)均低小細(xì)胞

異常結(jié)構(gòu)有點(diǎn)彩

點(diǎn)彩常見鉛中毒

豪焦卡波和蟲子

經(jīng)常愿與小白混

球橢口、見遺傳，

靶形可見珠蛋白，

鐮形HbS病,

裂D淚纖有核病，

緡錢纖原珠蛋白。

離心后血液分為5層,

自上而下分別為

漿板白核還原帶氧。

讀取還原乘以0.01。

【習(xí)題】

不屬于紅細(xì)胞異常結(jié)構(gòu)的是

A.染色質(zhì)小體

B.杜勒小體

C.卡波環(huán)

D.嗜堿性點(diǎn)彩

E.寄生蟲

『正確答案』B

『答案解析』杜勒小體是白細(xì)胞的結(jié)構(gòu)異常。

異常結(jié)構(gòu)有點(diǎn)彩

點(diǎn)彩常見鉛中毒

豪焦卡波和蟲子

經(jīng)常愿與小白混

鉛中毒時(shí)，血涂片中易見是

A.有核紅細(xì)胞

B.球形紅細(xì)胞

C.點(diǎn)彩細(xì)胞

D.大紅細(xì)胞

E.小紅細(xì)胞

『正確答案』C

『答案解析』鉛中毒時(shí)，血涂片中易見是點(diǎn)彩細(xì)胞。

下列關(guān)于血細(xì)胞比容的說法中，不正確的是

A.與紅細(xì)胞數(shù)量有關(guān)

B.與紅細(xì)胞大小有關(guān)

C.是抗凝血自然沉降后所測(cè)得的紅細(xì)胞在全血中所占體積的百分比

D.在各種貧血時(shí)血細(xì)胞比容會(huì)降低

E.大面積燒傷病人的血細(xì)胞比容常增高

『正確答案』C

『答案解析』血細(xì)胞比容是抗凝血離心后所測(cè)得的紅細(xì)胞在全血中所占體積的百分比。

患者,男性，30歲,貧血外貌。實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果如下：MCV78fl,MCH24pg,MCHC280g/L,可見于下列

哪種貧血

A.巨幼細(xì)胞貧血

B.再生障礙性貧血

C.溶血性貧血

D.缺鐵性貧血

E.慢性感染所致貧血

『正確答案』D

『答案解析』根據(jù)紅細(xì)胞平均指數(shù)的判斷，其屬于小細(xì)胞低色素性貧血，故常見于缺鐵性貧血。

紅細(xì)胞檢查(1)檢測(cè)原理掌握

(三)紅細(xì)胞體積分布寬度(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)了解

(3)質(zhì)量控制掌握

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(4)參考值熟練掌握

(5)臨床意義掌握

(1)檢測(cè)原理了解

(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)了解

(3)質(zhì)量控制掌握

點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

(4)參考值掌握

(5)臨床意義掌握

(6)操作方法了解

(1)檢測(cè)原理熟練掌握

(2)方法學(xué)評(píng)價(jià)了解

(3)質(zhì)量控制掌握

紅細(xì)胞檢查紅細(xì)胞沉降率

(4)參考值熟練掌握

(5)臨床意義掌握

(6)操作方法了解

紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)

【檢測(cè)原理】

反映樣本中紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)程度,常用變異系數(shù)(CV)表示，由血液分析儀的紅細(xì)胞體積直方

圖導(dǎo)出。

【參考值】

RDW參考值

作者例數(shù)RDW(X<1.64s)時(shí)間(年)

Bessman229<13.91983

McClure90<14.81985

Robert29<12.11985

Marti61<48(SD)1987

叢玉隆等*2013<14.91996

*北京市協(xié)作組6家醫(yī)院使用5種型號(hào)全自動(dòng)血液分析儀調(diào)查2013例成人(男1013例，女1000

例)結(jié)果

【臨床意義】

1.貧血形態(tài)學(xué)分類Bessman貧血的MCV/RDW分類法

MCVRDW分類常見疾病

正常小細(xì)胞均一性輕型8地中海貧血

減低

增大小細(xì)胞不均一性IDA

正常正細(xì)胞均一性急性失血、酶缺陷、急性溶血

正常

增大正細(xì)胞不均一性IDA早期

正常大細(xì)胞均一性MDS

增大

增大大細(xì)胞不均--性MA

2.作為缺鐵性貧血（IDA）

篩選診斷和療效觀察的指標(biāo)。

RDW增大對(duì)IDA的診斷靈敏度達(dá)95%以上，特異性不強(qiáng)，可作為IDA的篩選診斷指標(biāo)。當(dāng)鐵劑治療有效

時(shí)，RDW開始增大，隨后逐漸降至正常。

3.鑒別缺鐵性貧血和B-珠蛋白生成障礙性貧血

IDA：RDW增大

6-珠蛋白生成障礙性貧血：RDW正常

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（Ret）

【檢測(cè)原理】

是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞，屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存寶

堿性物質(zhì)核糖核酸（RNA）,經(jīng)活體染色（新亞甲藍(lán)、煌焦油藍(lán)、中性紅等染料）后，形成核酸與堿性染料

復(fù)合物，呈深染的顆粒狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。凡含兩個(gè)以上的深染顆?；蚓哂芯€網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的無核紅細(xì)胞，即為網(wǎng)

織紅細(xì)胞。

網(wǎng)織未成嗜堿RNA,活體染色新焦藍(lán)，染成深染顆粒網(wǎng)，外周多以IV型見。

咖?

造

紅

應(yīng)

系00

干

―?祖

短

細(xì)

胸

胞

72h

1.普通光學(xué)顯微鏡法

在顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分比或分?jǐn)?shù)。

2.網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法和血液分析儀法

用熒光染料（如口丫呢橙、派若寧-Y、噬哇橙）使網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)RNA著色，用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）得到網(wǎng)

織紅細(xì)胞數(shù)。

【方法學(xué)評(píng)價(jià)】

1.普通光學(xué)顯微鏡法

試管法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性較好。玻片法取血量少、染色時(shí)水分易蒸發(fā)，造成結(jié)果偏低。但顯微鏡法受

主觀因素影響較多，且耗時(shí)費(fèi)力。

2.網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法

可客觀地將Ret分成高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞（HFR）、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞（MFR）、弱熒光強(qiáng)度網(wǎng)

織紅細(xì)胞（LFR）3類，有助于化療、放療、移植患者的監(jiān)測(cè)。

3.血液分析儀法

網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值（Ret）、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比（Ret%）、網(wǎng)織紅細(xì)胞分布寬度（RDWr）、網(wǎng)織紅細(xì)胞

平均體積（MCVr/MRV）,網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（HCr）、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHCr）、網(wǎng)

織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度（HDWr）.LFR、MFR、HFR、網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)（RMLRMI=（MFR+HFR）/LFR

X100）。

儀器法優(yōu)點(diǎn)是測(cè)量細(xì)胞多，避免主觀因素，方法易于標(biāo)準(zhǔn)化。

【質(zhì)量控制】

1.顯微鏡法

影響因素有：操作人員對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞識(shí)別不同、血涂片質(zhì)量好壞、計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)量多少、計(jì)數(shù)方法等。

Miller窺盤法技術(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞誤差可減小，網(wǎng)織紅細(xì)胞95%可信限為：

Ret±2^Ret（W0-Ret）

2.儀器法

計(jì)數(shù)紅細(xì)胞10000?50000個(gè)。出現(xiàn)豪焦小體、有核紅細(xì)胞、巨大血小板會(huì)使結(jié)果假性增高。

【參考值】

手工法

成人0.008?0.02或（25?85）X109/L

新生兒0.02-0.06

儀器法（RMI）

男性9.1%~32.2%

女性12.8%~33.7%

【臨床意義】

1.Ret計(jì)數(shù)（尤其是Ret絕對(duì)值）是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。

正常情況下，骨髓中網(wǎng)織紅細(xì)胞均值為150X109/L,血液中為65X109/L。當(dāng)骨髓網(wǎng)織紅細(xì)胞增多，

外周血減少時(shí)，提示釋放障礙；骨髓和外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞均增加，提示為釋放增加。正常時(shí)，外周血網(wǎng)織

紅細(xì)胞中ID型約占20%?30%,IV型約占70%?80%,若骨髓增生明顯，可出現(xiàn)I型和H型網(wǎng)織紅細(xì)胞。

（1）增多

①溶血性貧血：溶血時(shí)大量網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)，Ret可達(dá)6%?8%,急性溶血時(shí)，可達(dá)約20%,

甚至50%以上，絕對(duì)值超過lOOXlO'/L急性失血后，5?10天網(wǎng)織紅細(xì)胞達(dá)高峰，

2周后恢復(fù)正常。

②放療、化療后：恢復(fù)造血時(shí)，Ret短暫和迅速增高，是骨髓恢復(fù)較敏感的指標(biāo)。

③紅系無效造血：骨髓中紅系增生活躍，外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)正?；蜉p度增高。

增多溶貧放化紅無效

（2）減少

見于再生障礙性貧血、溶血性貧血再障危象。典型再生障礙性貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)之一是Ret計(jì)數(shù)常低于

0005,絕對(duì)值低于15X1（）9/L。

2.觀察貧血療效

缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血患者治療前，Ret僅輕度增高（也可正?；驕p少），給予鐵劑或維生素

B%葉酸治療后，用藥3?5d后，Ret開始上升，7?10d達(dá)高峰，2周左右，Ret逐漸下降，表明治療有效。

增多溶貧放化紅無效，減少再障骨髓抑，觀察貧血骨移植，RPI反映Ret生成率。

3.骨髓移植后監(jiān)測(cè)

骨髓移植后第21d,如Ret大于15X107L,表示無移植并發(fā)癥；小于15XU/L,伴中性粒細(xì)胞和血小

板增高，可能為骨髓移植失敗。

4.網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)（RPI）

是網(wǎng)織紅細(xì)胞生成相當(dāng)于正常人的倍數(shù)。通常Ret生存期限約為2d,若未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞提前釋放入

血，Ret生存期限將延長，為了糾正網(wǎng)織紅細(xì)胞提前釋放引起的偏差，用網(wǎng)織RPI來反映Ret生成速率。計(jì)

算公式為:

1患者Het

Rn=-----------------xX被測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比

Ret成熟天數(shù)正常人Het

點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

【檢測(cè)原理】

是尚未完全成熟的紅細(xì)胞在發(fā)育過程中受到損害，其胞質(zhì)中殘存變性的嗜堿性RNA,堿性亞甲藍(lán)染色后

呈現(xiàn)大小、形狀不一的藍(lán)色顆粒。瑞氏染色后，顆粒呈藍(lán)黑色。在油鏡下計(jì)數(shù)點(diǎn)彩紅細(xì)胞百分率。

【參考值】＜0.03%。

【臨床意義】

增高：

①中毒（如鉛、汞、銀、根、硝基苯、苯胺等）。

②各類貧血（如溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、惡性腫瘤等）。

紅細(xì)胞沉降率測(cè)定

【檢測(cè)原理】

紅細(xì)胞沉降率（ESR,血沉）指離體抗凝血靜置后，紅細(xì)胞在單位時(shí)間內(nèi)沉降的速度。

分為3期：

①緡錢狀紅細(xì)胞形成期，約數(shù)分鐘至lOmin；

②快速沉降期，緡錢狀紅細(xì)胞以等速下降，約40min；

③細(xì)胞堆積期（緩慢沉積期），紅細(xì)胞堆積到試管底部。

1.魏氏法（Westergren法）：血沉測(cè)定首選方法

將離體抗凝血液置于特制刻度測(cè)定管內(nèi)，垂直立于室溫中，lh準(zhǔn)紅細(xì)胞層下沉距離，用毫米（mm）數(shù)

值報(bào)告。

2.血沉儀法：用發(fā)光二極管、光電管檢測(cè)紅細(xì)胞和血漿界面的透光度改變，得到血沉值，顯示紅細(xì)胞

沉降高度（H）與時(shí)間（t）關(guān)系的n-t曲線。

【質(zhì)置控制】

影響血沉的理化因素與紅細(xì)胞數(shù)量、表面積、厚度、直徑、血紅蛋白量和血漿等有關(guān)。血沉加快的最

重要因素是紅細(xì)胞相互重疊呈“緡錢”狀或積聚成堆。

影響紅細(xì)胞緡錢狀形成的主要因素有：

1.血漿蛋白質(zhì)比例

小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉減緩，大分子蛋白如急性反應(yīng)蛋白（如C反應(yīng)蛋白、纖維蛋白

原、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、ai酸性糖蛋白、ai抗胰蛋臼酶）、免疫球蛋白、巨球蛋白、膽固醇、甘油三酯等

使血沉加快。

2.紅細(xì)胞數(shù)量和形狀

（1）紅細(xì)胞數(shù)量

紅細(xì)胞沉降率和血漿阻逆力保持平衡。如數(shù)量減少，使總面積減少、所承受血漿逆阻力減少，引起血

沉加快。

數(shù)量增多使血沉減慢。但數(shù)量太少，則影響了紅細(xì)胞緡錢狀形成，導(dǎo)致血沉也減慢。

（2）紅細(xì)胞直徑：直徑越大血沉越快，如靶紅細(xì)胞，但球形紅細(xì)胞、鐮形紅細(xì)胞不易聚集而使血沉減

慢。

影響血沉紅細(xì)胞漿，血沉快時(shí)紅少徑大，正電蛋白緡錢狀，沉管傾斜溫度高，抗凝過多血沉慢。

3.血沉管

置血沉架上應(yīng)完全直立，血沉管傾斜時(shí)，紅細(xì)胞沿管壁一側(cè)下沉，而血漿沿另--側(cè)下降，會(huì)加速紅細(xì)

胞沉降，如血沉管傾斜3。，沉降率增加降%。

4.血樣本

抗凝劑濃度增加、血液凝固（血漿纖維蛋白原減少）使血沉減慢。但樣本冷臧4?24小時(shí)，測(cè)定前平

衡至室溫，并混勻后，不影響檢測(cè)結(jié)果。

5.溫度

室溫過高（>25℃）使血沉加快，可按溫度系數(shù)校正。

室溫過低（<18℃）使血沉減慢，但無法校正。

影響血沉紅細(xì)胞漿，

血沉增快紅少徑大，

正電蛋白緡錢狀，

沉