微生物學(xué)實驗一

第第頁微生物學(xué)實驗一微生物學(xué)試驗

試驗室須知

1.應(yīng)保持試驗室寧靜，切勿高聲喧嘩和任意走動。2.試驗室內(nèi)禁止飲食、吸煙、及用嘴潮濕鉛筆和標(biāo)簽等物。3.運用顯微鏡和其它珍貴儀器時，應(yīng)在老師同意后方可運用，切勿擅自拆卸，否那么因此而損壞儀器，應(yīng)予以賠償。4.遇意外發(fā)生，應(yīng)馬上報告老師，不可自己任意處理。

試驗室考前須知：1.每次試驗前需要仔細(xì)預(yù)習(xí)，課堂上留意傾聽老師對試驗內(nèi)容的講解，留意觀測老師的示范操作。2.試驗時應(yīng)認(rèn)真仔細(xì)，嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，留意轉(zhuǎn)變生活中的習(xí)慣動作，以掌控微生物學(xué)試驗的科學(xué)操作方法。3.運用珍貴儀器應(yīng)先事先熟知操作規(guī)程，遇儀器故障時請老師援助解決。4.試驗中如遇菌液外溢、皮膚劃傷或菌液吸入等意外，應(yīng)馬上報告老師實時進(jìn)行處理，不得隱瞞，以免釀成后患。5.留意安全，易燃物品如二甲苯、吸水紙等應(yīng)遠(yuǎn)離火源。打火機只能用于點燃酒精燈，酒精燈用完應(yīng)實時蓋上燈帽。6.試驗完畢，需要將儀器放到指定地點，帶菌工具應(yīng)先進(jìn)行消毒。

試驗室考前須知：7.試驗需進(jìn)行培育的材料，要標(biāo)明姓名、組別、日期后，放于老師指定的培育箱中進(jìn)行培育。8.未經(jīng)老師同意，試驗室中的任何菌種和物品不得攜帶出室外。9.試驗時應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行觀測和操作，做好試驗記錄；有疑難問題向老師求教。10.勵行節(jié)省，對水、電、染色液、鏡油、擦鏡紙、吸水紙及其它藥品等均應(yīng)節(jié)省運用。11.試驗后應(yīng)對試驗室整理清掃，洗手后方可離開試驗室，關(guān)窗鎖門。

微生物學(xué)試驗室常用的器皿1.試管2.吸管3.培育皿4.三角燒瓶5.載玻片與凹玻片–一般載玻片用于微生物涂片、染色，作形態(tài)觀察等–凹玻片是在一塊厚玻片的當(dāng)中有一圓形凹窩，作懸滴觀測活細(xì)菌以及微室培育用。6.滴瓶：用來裝各種染料、生理鹽水等7.接種工具：接種環(huán)、接種針等

常用器材酒精燈接種環(huán)試管夾吸耳球計數(shù)器鑷子香柏油擦鏡紙1/人1/人1/人1/2人1/2人1/2人1/2人1/2人

試驗報告格式基本信息的填寫(不能留空)。題目目的原理材料和器皿試驗報告需要以實事求是、嚴(yán)厲認(rèn)真的科學(xué)立場，根據(jù)指導(dǎo)書的要求按時完成。試驗報告應(yīng)當(dāng)言簡意賅、表達(dá)精確、數(shù)據(jù)完整、繪圖清楚且寫實，應(yīng)有爭論、有分析，結(jié)論明確。

方法和步驟試驗結(jié)果–畫圖–文字描述分析和爭論思索題

清潔與衛(wèi)生保持試驗臺的清潔與試劑架的整齊干凈。廢紙、培育基等廢棄物一律丟入垃圾桶內(nèi)，嚴(yán)禁放入水槽！培育皿、玻片、試管等玻璃儀

器清洗后一律擱置涼在不朽鋼網(wǎng)框里。玻片上的染液需要徹底清洗潔凈(用洗衣粉洗)。培育皿、試管等玻璃儀器上做的標(biāo)記需要徹底洗凈。最終垃圾由值日生倒入衛(wèi)生間籮框里，濕拖把掛在水槽水龍頭架上滴水涼干。每次值日生4人。

實

驗

內(nèi)

容

試驗一顯微鏡油鏡的運用及細(xì)菌的簡約染色法試驗二細(xì)菌的革蘭氏染色及芽孢染色法試驗三鞭毛染色法及活細(xì)菌運動性的觀測試驗四四大類微生物菌落及個體形態(tài)觀測試驗五微生物大小測定及血球計數(shù)板計數(shù)試驗六培育基配制及滅菌試驗七微生物的分別純化與平板菌落計數(shù)試驗八微生物的生理生化反應(yīng)(一)試驗九微生物的生理生化反應(yīng)(二)

試驗一顯微鏡油鏡的運用及細(xì)菌的簡約染色法教學(xué)目標(biāo)或要求：※掌控顯微鏡油鏡的工作原理及運用方法；※學(xué)習(xí)細(xì)菌制片和簡約染色技術(shù)；※觀測細(xì)菌的三種基本形態(tài)；※初步建立無菌操作的概念；

一般光學(xué)顯微鏡

一般光學(xué)顯微鏡依據(jù)物鏡與被檢物體之間的介質(zhì)不同，可分為：①干燥系物鏡。以空氣為介質(zhì)，包括低倍物鏡(4*、10*)和高倍物鏡(40*)。②油浸系物鏡。常以香柏油為介質(zhì)，此物鏡又叫油鏡頭(100*),其上常刻有“HI”(homogeneousimmersion)或“OI”(oilimmersion)字樣，有的還刻有一圈紅線或黑線標(biāo)記。

油鏡運用的原理油鏡的透鏡很小，光線通過玻

片與油鏡頭之間的空氣時，因介質(zhì)密度不同，發(fā)生折射或全反射，使射入透鏡的光線減削，

物象顯現(xiàn)不清。假設(shè)在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),那么使進(jìn)入透鏡的光線增多，視野亮度加強，使物象明朗清楚。

瞳距調(diào)整

粗調(diào)松緊調(diào)整旋鈕

聚光鏡中心調(diào)整②10*物鏡①標(biāo)本

④聚光鏡升降旋鈕

油鏡觀測操作方法在高倍鏡或低倍鏡下找到要觀測的樣品區(qū)域后，然后將油鏡轉(zhuǎn)到工作位置。在待觀測的樣品區(qū)域滴加香柏油，從側(cè)面凝視，用粗調(diào)整器使油鏡浸在鏡油中并幾乎與標(biāo)本相接。然后用細(xì)調(diào)整器調(diào)整，在目鏡下找到

最合適的觀測點。油鏡運用畢后：上升鏡筒，取下載玻片，用擦鏡紙拭去鏡頭上的鏡油，然后用擦鏡紙蘸少許二甲苯(香柏

油溶于二甲苯)擦去鏡頭上殘留的油跡，最末用潔凈的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。

一般光學(xué)顯微鏡考前須知1.觀測標(biāo)本時，兩眼宜同時睜開。減削眼睛疲憊。最好用左眼觀測，右眼協(xié)作繪圖和記錄。2.運用油鏡需要按先用低倍鏡和高倍鏡觀測，再用油鏡觀測。3.下降鏡頭時，肯定要從側(cè)面凝視，切忌用眼睛對著目鏡，邊觀測邊下降鏡頭的錯誤操作，

以免壓碎玻片而損壞鏡頭。4.運用二甲苯擦鏡頭時，留意二甲苯不能過多，以防溶解固定透鏡的樹脂。5.留意保持顯微鏡的干凈，對金屬部分要用軟布擦拭，擦鏡頭需要用擦鏡紙，切勿用手或用一般布、紙等，以免損壞鏡頭。

顯微結(jié)構(gòu)圖的繪制(1)繪圖要用黑色硬鉛筆，不要用軟鉛筆或有色鉛筆，一般用2H鉛筆為宜。(2)畫圖時先用輕淡小點或輕線條