1.2.3 三 滅菌與無菌操作

藥物制劑生產(chǎn)中山火炬職業(yè)技術(shù)學(xué)院健康產(chǎn)業(yè)學(xué)院－吳旖中山火炬職業(yè)技術(shù)學(xué)院健康產(chǎn)業(yè)學(xué)院－吳旖滅菌與無菌操作法三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系引言官方報道的原因：未按批準(zhǔn)的工藝參數(shù)滅菌!欣弗事件(導(dǎo)入）三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系主要內(nèi)容制藥衛(wèi)生的概述（拓展）2滅菌方法與無菌操作3331三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系一、污染藥物的常見微生物沙門氏菌大腸桿菌金色葡萄球菌枯草桿菌白色念珠菌黑曲霉菌三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系黑曲霉菌破傷風(fēng)桿菌銅綠假單胞菌螨蟲破傷風(fēng)桿菌一、污染藥物的常見微生物三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系二、藥物制劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)口服藥品：

1.不得檢出大腸桿菌，含動物藥及臟器的藥品同時不得檢出沙門氏菌；

外用制劑：不得檢出綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌；陰道、創(chuàng)傷、潰瘍用制劑：不得檢出破傷風(fēng)桿菌。1.致病菌注：活螨、霉變者以不合格論處《中國藥典》2010年版附錄規(guī)定：三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系二、藥物制劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（1）細(xì)菌

①固體制劑：細(xì)菌數(shù)：每1g含細(xì)菌數(shù)不得過1000個。

②液體制劑：細(xì)菌數(shù)：每1ml含細(xì)菌數(shù)不得過100個。（2）霉菌、酵母菌

每1g或1ml含霉菌、酵母菌數(shù)不得過100個。2.細(xì)菌、霉菌、酵母菌三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系二、藥物制劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（1）口服固體制劑①不含藥材原粉：每1g含細(xì)菌數(shù)不得過1000個，含霉菌、酵母菌數(shù)不得過1OO個。②含藥材原粉：每1g含細(xì)菌數(shù)不得過10000個（丸劑不得過30000個）含霉菌數(shù)和酵母菌數(shù)均不得過100個。

（2）口服液體制劑①不含藥材原粉：每1ml含細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)和酵母菌數(shù)均不得過100個。

②含藥材原粉：每1ml含細(xì)菌數(shù)不得過500個、霉菌數(shù)和酵母菌數(shù)均不得過100個。

（3）含六神曲等發(fā)酵成分制劑

細(xì)菌：每1g不得過100000個，每1ml不得過1000個。

霉菌、酵母菌：每1g不得過500個、每1ml不得過100個。

2.細(xì)菌、霉菌、酵母菌三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系二、藥物制劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（4）局部用藥①眼科用藥：每1g或1ml含細(xì)菌數(shù)不得過10個，不得檢出霉菌和酵母菌。②陰道、創(chuàng)傷、潰瘍用制劑：每1g、1ml或10c㎡含細(xì)菌數(shù)不得過100個，霉菌、酵母菌數(shù)不得過10個。③用于表皮、粘膜不完整的含藥材原粉制劑：含細(xì)菌數(shù)每1g或10c㎡不得過1000個，1ml不得過100個；霉菌、酵母菌數(shù)每

1g、1ml或10c㎡不得過100個。④用于表皮、粘膜完整的含藥材原粉制劑：含細(xì)菌數(shù)每1g或10c㎡不得過10000個，1ml不得過100個。⑤直腸給藥制劑：含細(xì)菌數(shù)每1g不得過1000個，1ml不得過100個；酵母菌數(shù)均不得過100個。⑥其他局部制劑：每1g、1ml或10c㎡含細(xì)菌、霉菌、酵母菌數(shù)均不得過100個。2.細(xì)菌、霉菌、酵母菌第四節(jié)滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系三、藥劑可能被污染的途徑1.原料藥；2.藥用輔料；3.制藥設(shè)備；4.制藥環(huán)境空氣

5.操作人員；6.包裝材料

可能途徑

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系四、制藥環(huán)境的基本要求（一）生產(chǎn)廠區(qū)的環(huán)境（位置的選擇）三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系（二）廠區(qū)的合理布局（生產(chǎn)區(qū)與非生產(chǎn)區(qū)要嚴(yán)格分開）四、制藥環(huán)境的基本要求三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系（三）廠房設(shè)計和設(shè)施裝備要求四、制藥環(huán)境的基本要求三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系四、制藥環(huán)境的基本要求三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作1.滅菌與滅菌法

（1）滅菌(sterilization)

：

是指用物理或化學(xué)方法將所有致病和非致病的微生物繁殖體和細(xì)菌的芽胞全部殺滅或除去。

（2）滅菌法(thetechniquesterilization)：

是指殺滅或除去所有致病和非致病的微生物繁殖體和芽胞的方法或技術(shù)。三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作2.無菌與無菌操作法

（1）無菌(sterility)：在任一指定物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物。

（2）無菌操作法（aseptictechnique）：在整個操作過程中利用或控制一定條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一種操作方法或技術(shù)。三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作3.防腐和消毒

（1）防腐(antisepsis)：是指用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生長與繁殖的手段，亦稱抑菌。

（2）消毒(disinfection)：是指用物理和化學(xué)方法將病原微生物殺滅或除去。三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作二.滅菌法的分類三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作一、物理滅菌法：系指采用加熱、干燥、輻射、聲波等物理手段達(dá)到滅菌目的的方法。┌火焰滅菌法

┌

干熱滅菌法┤

│

└空氣干熱滅菌法

┌

熱力滅菌法

┤

├

濾過除菌法

│

┌熱壓滅菌法

物理滅菌法┼紫外線滅菌法

└

濕熱滅菌法┤流通蒸汽滅菌法與煮沸滅菌法

├

微波滅菌法

└低溫間歇滅菌法

└

輻射滅菌法

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（1）干熱滅菌法：利用干熱空氣殺滅微生物或消除熱原。

特點：熱穿透能力差，微生物的耐熱性強，所需滅菌時間長。

滅菌條件：160～170℃120min以上、170～180℃60min以上或250℃45min以上。

適用范圍：耐高溫但不能用濕熱滅菌法的物品，如玻璃制品、金屬制品、油脂類、耐高溫的固體藥品等。

粉針劑用的無菌瓶的干燥就采用干熱滅菌法。

1.熱滅菌法三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（2）濕熱滅菌法：是在飽和蒸氣或沸水或

流通蒸氣中進(jìn)行滅菌的方法。

特點：由于蒸氣潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質(zhì)

變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。

①熱壓滅菌：115℃(68.6kPa)，30分；121.5℃(98kPa)，20分；126.5℃(137.2kPa)，15分。

適用范圍：凡能耐高壓蒸氣的藥物制劑、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡膠塞、膜濾過器等均能采用，尤其適用于大輸液。

注意事項：A.必須使用飽和蒸氣，B.須將滅菌器內(nèi)的空氣排除，C滅菌時間由全部藥液溫度真正達(dá)到所要求的溫度時算起

1.熱滅菌法三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（2）濕熱滅菌法：②流通蒸氣滅菌

：是在常壓下100℃流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，通常滅菌時間為30~60分鐘。

③煮沸滅菌：沸水中加熱滅菌的方法．通常煮沸30～60分鐘。注意事項：不能保證殺滅所有的芽胞，系非可靠的滅菌法，可適用于消毒及不耐高熱的制劑的滅菌。

常用于注射器、注射針等器皿的消毒。④低溫間歇滅菌：用60～80℃水或流通蒸氣加熱1小時，將其中的細(xì)菌繁殖體殺死，然后在室溫中放置24小時。讓其中的芽胞發(fā)育成為繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)進(jìn)行3～5次，直至消滅芽胞為止。特點：適用于不耐高溫的制劑的滅菌，費時，工效低。

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（1）輻射滅菌法：以放射性同位素(60Co或137Cs)放射的

或β射線殺菌的方法。

特點：是不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強。但設(shè)備費用高。

適用范圍：適合于不耐熱藥物的滅菌，特別適合于很厚的固體藥物

原包裝。

2.射線滅菌法三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（2）紫外線滅菌法：指用紫外線照射殺滅微生物的方法．一般用于滅菌的紫外線波長是220~290nm，滅菌力最強的波長是254nm。

原理：紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。特點：穿透力微弱

。

適用范圍：物體表面、空氣及蒸餾水。

2.射線滅菌法

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系物理滅菌法（3）微波滅菌法：頻率在300兆赫到300千兆赫之間的電磁波

。

特點：微波能穿透到介質(zhì)的深部，通?？墒菇橘|(zhì)表里一致地加熱。

適用范圍：適用于水性藥液、水性注射液的滅菌、含水的固體藥物

。

除菌濾器：一般選用孔徑0.22

m微孔薄膜濾器，G6號垂熔玻璃漏斗。

適用范圍：主要適用于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等的滅菌。

2.射線滅菌法

3.過濾除菌法

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作二、化學(xué)滅菌法：指用化學(xué)藥品來殺滅微生物的方法，同時不應(yīng)損害制品的質(zhì)量。

二.常用的滅菌方法

（1）氣體滅菌法

常用氣體：①環(huán)氧乙烷；②甲醛等。

（2）藥液滅菌法

常用殺菌劑：①醇類：75%的乙醇等；②酚類；③表面活性劑類：新潔爾滅、潔爾滅；④氧化劑：過氧乙酸、過氧化氫等。

三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系五滅菌方法和無菌操作

用無菌操作法制備的注射液，一般需加入適量抑菌劑；按無菌操作法制備的產(chǎn)品，一般不再滅菌。三、無菌操作層流潔凈工作臺

定義

整個過程在無菌條件

條件

在無菌操作室或無菌柜內(nèi)一切用具、材料以及環(huán)境，均需滅菌。采用層流潔凈工作臺適用物質(zhì)

不耐熱的藥物注射劑、眼用溶液、眼用軟膏或皮試液等。三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系小結(jié)概述中藥制劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

了解藥劑污染的主要環(huán)節(jié)及預(yù)防措施

熟悉GMP車間潔凈級別劃分及適應(yīng)范圍

熟悉滅菌方法與無菌操作滅菌、消毒、防腐的概念

掌握常用的物理滅菌法的操作及適應(yīng)范圍

掌握常用的化學(xué)滅菌方法

熟悉無菌操作

了解三滅菌與無菌操作生物醫(yī)藥系作業(yè)1、歸納常用的物理滅菌方法及各種方法的特點三滅菌與無菌操