基于CAR-T治療結(jié)直腸癌的臨床探索研究設(shè)計(第十六次全國消化系病學(xué)術(shù)會議)

基于CAR-T治療結(jié)直腸癌的臨床探索研究設(shè)計2016-9-24蘇州六次全國消化系病學(xué)術(shù)會議2021/3/29星期一1一

腫瘤精準(zhǔn)免疫治療二CAR-T在實體瘤上的臨床試驗三CAR-T在結(jié)直腸癌上的應(yīng)用四結(jié)直腸癌CAR-T治療的展望Contents2021/3/29星期一2腫瘤發(fā)生的復(fù)雜性惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞體細(xì)胞干細(xì)胞DNA損傷與修復(fù)外環(huán)境：輻射，致癌物，病毒感染內(nèi)環(huán)境：代謝，隨機(jī)突變，微生態(tài)遺傳因素：原癌基因100抑癌基因30表觀遺傳學(xué)：甲基化組蛋白修飾基因突變基因突變積累免疫系統(tǒng)識別殺傷細(xì)胞凋亡各種癌癥發(fā)生2021/3/29星期一3發(fā)生機(jī)理-太多的未知領(lǐng)域基因突變逆分化腫瘤干細(xì)胞免疫監(jiān)視。。。。。。*蛋白變異引起腫瘤*腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖2021/3/29星期一4腫瘤表現(xiàn)形式相同組織器官癌癥引發(fā)機(jī)理不一致相同的機(jī)理引發(fā)癌癥部位不一致腫瘤突變：數(shù)千個突變類型2021/3/29星期一5腫瘤特征精確分型K-ras密碼子12、13、61的突變。NCCN2010年臨床指南西妥昔單抗治療前基因檢測。腫瘤種類靶向藥物檢測基因檢測方法非小細(xì)胞肺癌易瑞沙（吉非替尼）特羅凱（厄洛替尼）EGFR、K-RAS、BRAFALK基因測序突變大腸癌西妥昔單抗/愛必妥K-RAS、BRAF基因測序突變?nèi)橄侔┣字閱慰?赫賽汀HER2FISH檢測基因含量黑色素瘤PLX4032BRAF（v600e)基因測序突變胃間質(zhì)瘤伊馬替尼/格列衛(wèi)c-kit基因測序突變以及基因檢測表達(dá)靶向藥物存在不足：有效性低；容易產(chǎn)生耐藥性；適用范圍窄等2021/3/29星期一6ACTStrategiesPromoteantigenpresentationEnhanceprotectiveTcellresponseOvercomeimmunosuppression抗腫瘤免疫反應(yīng)2021/3/29星期一7腫瘤精準(zhǔn)免疫治療的開端《科學(xué)》雜志評論作為2013年度最重要的科學(xué)突破的榜首——癌癥的免疫療法。治療的標(biāo)靶是身體的免疫系統(tǒng)而不是直接針對腫瘤，利用T細(xì)胞和其它免疫細(xì)胞來對抗腫瘤。程序性死亡因子1抗體(anti-PD1)及其它免疫檢查點抗體嵌合抗原受體T細(xì)胞療法（CAR-T療法）腫瘤免疫治療的突破Cancerimmunotherapydrugshavecapturednearly50%oftheoveralloncologydrugsmarket,generatingabout$41.0billionin2014alone2021/3/29星期一8靶向性療法對比抗體藥物過繼免疫細(xì)胞治療2021/3/29星期一9嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）技術(shù)2021/3/29星期一10CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的發(fā)展ExtracellulardomainsspacerVHVLLeaderTransmembranedomainIntracellulardomainLinkerCD3ZetaCD284-1BB&OX40IL-12IL-15……1st

2nd3rd4th2021/3/29星期一11CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的優(yōu)缺點黎明前的黑暗優(yōu)點VS缺點1）CAR-T細(xì)胞治療是靶點依賴型的治療，但不少腫瘤類型缺少良好的治療靶點；2）已被視為靶點的一些腫瘤相關(guān)抗原，也會在正常細(xì)胞低水平表達(dá)，導(dǎo)致CART治療可能會產(chǎn)生脫靶毒性，引發(fā)嚴(yán)重副反應(yīng)；3）細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）；4）基于病毒表達(dá)體系的CAR-T技術(shù)的生物安全性也需要引起重視。1）CAR改造的T細(xì)胞只能瞄定目標(biāo)細(xì)胞表面抗原，具有靶向性；2）CAR改造后的T細(xì)胞能夠跨越HLA表達(dá)下調(diào)這一腫瘤細(xì)胞免疫逃逸機(jī)制；3）體內(nèi)存留時間長，可以提供持續(xù)的治；4）在腫瘤微環(huán)境中增強(qiáng)抗腫瘤效果，能夠在相對較短的時間內(nèi)產(chǎn)生大量有腫瘤殺傷效力的T細(xì)胞。2021/3/29星期一12CAR-T細(xì)胞治療的流程N(yùn)aiveTCMTEMTEC2021/3/29星期一13國內(nèi)CAR-T研究現(xiàn)狀國內(nèi)研究以與全球趨勢相同，CD19仍是最受研發(fā)單位青睞的靶點，占到所有臨床試驗的34%。值得注意的是，在這些靶點中，也不乏一些最新的靶點，比如MCU-1、EPCAM和GPC3等。而且針對實體瘤的研究占到了CAR-T總臨床研究的50%以上。2021/3/29星期一14國內(nèi)CAR-T研究現(xiàn)狀研發(fā)單位方向臨床實驗治療效果301解放軍總醫(yī)院CAR-T（最早）招募患者的臨床試驗達(dá)到了8個進(jìn)行中第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院生物治療中心聯(lián)合血液科CAR-T白血病完全緩解上海腫瘤所CAR-EGFRT細(xì)胞晚期復(fù)發(fā)的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)病人恢復(fù)狀態(tài)良好，已經(jīng)順利出院科濟(jì)與仁濟(jì)醫(yī)院合作GPC3-CAR-T6名難治、復(fù)發(fā)的肝細(xì)胞癌患者2名患者體內(nèi)的甲胎蛋白（AFP）下降了90%以上（其中1名患者AFP指標(biāo)恢復(fù)正常）愛康得（icartab）全人源CAR-T與人源化CAR-TB急淋完全緩解西南醫(yī)院和北大未名CAR-T臨床試驗（4個）進(jìn)行中2021/3/29星期一15一

腫瘤精準(zhǔn)免疫治療二CAR-T在實體瘤上的臨床試驗三CAR-T在結(jié)直腸癌上的應(yīng)用四結(jié)直腸癌CAR-T治療的展望Contents2021/3/29星期一16CAR-Tforsolidtumor2021/3/29星期一17CombinationtherapystrategiesOncolyticVirusplusCAR-TLyticeffectplusRANTESandIL-152021/3/29星期一18CombinationtherapystrategiesTexpressingbothCARandheparanaseinvitro–culturedTlymphocyteslackexpressionoftheenzymeheparanase(HPSE)OverexpressionHPSEinTcellspromotedtumorTcellinfiltrationandantitumoractivity2021/3/29星期一19一

腫瘤精準(zhǔn)免疫治療二CAR-T在實體瘤上的臨床試驗三CAR-T在結(jié)直腸癌上的應(yīng)用四結(jié)直腸癌CAR-T治療的展望Contents2021/3/29星期一20實體瘤-結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌是世界上僅次于肺癌和乳腺癌的第三大常見腫瘤，屬于實體瘤，發(fā)病率在發(fā)達(dá)國家和地區(qū)處于較高水平。20世紀(jì)70年代以來，隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我國居民生活習(xí)慣、膳食結(jié)構(gòu)的改變以及人口老齡化進(jìn)程的加快，我國結(jié)直腸癌發(fā)病率和死亡率呈逐步上升趨勢，結(jié)直腸癌已成為危害我國居民健康的主要惡性腫瘤之一。據(jù)統(tǒng)計，2011年我國新發(fā)結(jié)直腸癌病例31萬余人，死亡約15萬人，位列惡性腫瘤發(fā)病及死亡第五位。2021/3/29星期一21CAR-T在結(jié)直腸癌上的應(yīng)用CD46是結(jié)直腸癌中差異表達(dá)上調(diào)最顯著的外泌型蛋白2021/3/29星期一22CAR-T在結(jié)直腸癌上的應(yīng)用HybridomafromATCCHC&LCsequencingFACSanalysisCARlentiviralvectorLentivirusgenerationCAR-TConstructionCAR-TevaluationFACS檢測CD46在結(jié)直腸癌細(xì)胞RKO表面的表達(dá)水平2021/3/29星期一23單鏈抗體LC1、LC2序列測序Lightchain1Lightchain2Lightchain1Lightchain22021/3/29星期一24LOVORKOLOVORKOPercentlysisofLOVOPercentlysisofRKOCAR-T體外殺傷結(jié)直腸癌細(xì)胞株2021/3/29星期一25免疫抑制性細(xì)胞的存在(regulatoryTcells,myeloidderivedsuppressorcells,andM2tumor-associatedmacrophages)抑制性細(xì)胞因子(TGF-β,IL-10)腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)的T細(xì)胞功能抑制性蛋白分子(B7-Hfamilymembers,Fasligand）引導(dǎo)CAR-T向腫瘤灶歸巢的趨化因子從外周血侵潤腫瘤組織的足夠的CAR-T細(xì)胞(blockingendothelinBreceptor*,degradationoftumorextracellularmatrix)CAR-T細(xì)胞回輸前預(yù)處理CAR-T細(xì)胞如何在體內(nèi)有效增殖CAR–T治療實體瘤需要克服的障礙Translationalresearch2021/3/29星期一26結(jié)直腸癌CAR-T治療的展望在結(jié)直腸癌的治療上，采用轉(zhuǎn)染和表達(dá)效率遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的慢病毒系統(tǒng)的非病毒系統(tǒng)介導(dǎo)CAR基因進(jìn)入T細(xì)胞，

通過建立獨特CAR-T細(xì)胞(帶剎車的CAR-T及雙信號獨立CAR-T系統(tǒng))的同時，創(chuàng)新