小鼠骨髓細胞染色體制備與觀察

實驗(Yan)二小鼠骨髓細胞染色體制備與觀察第一頁，共三十頁。實驗(Yan)原理小鼠骨髓細胞始終保持較強的分裂活性，且細胞數(shù)量較多。第二頁，共三十頁。秋水仙素，可以抑制細胞分裂時的紡錘體形成，使處于增殖狀態(tài)的細胞停止在中期。注射到動物活體內(nèi)，可以收集到較(Jiao)多的中期分裂相的骨髓細胞。第三頁，共三十頁。第四頁，共三十頁。實驗?zāi)康呐c要求：1.熟悉小鼠骨髓細胞染色體制備方法。2.了解小鼠染色體核型。3.認(Ren)識秋水仙素對細胞增殖的作用。器材與試劑內(nèi)容與方法（一）小鼠骨髓細胞染色體制備預(yù)處理取材，收集細胞低滲固定、再固定滴片染色第五頁，共三十頁。取材前2～3h，向腹腔內(nèi)注射秋水仙素。注射濃度隨動物種類不同而異。秋水仙素的主要作用是使分裂細胞阻(Zu)斷在有絲分裂中期，增加中期分裂相的比例。

腹腔內(nèi)注射秋水仙素2~3小時后，頸椎脫臼處死小鼠。第六頁，共三十頁。小白鼠(Shu)骨骼標本第七頁，共三十頁。第八頁，共三十頁。取出小鼠的后肢股骨，注意不要將股骨剪斷，否則容(Rong)易造成骨髓細胞的流失。第九頁，共三十頁。用紗布(Bu)擦股骨上的肌肉組織，清除干凈注射器抽取生理鹽水沖洗骨髓第十頁，共三十頁。收集細(Xi)胞：暴露骨髓腔，反復(fù)沖洗骨髓腔獲得骨髓細胞，收集到離心管中,定容至6ml.第十一頁，共三十頁。滴2~3滴于玻片(Pian)上，吹氣，在酒精燈火焰過火8次，做記號，涼干，染色滴片：滴片后，將片子侵入Giemsa染液缸中，10~15分鐘，棄去染液，水洗，晾干，鏡檢。第十二頁，共三十頁。第十三頁，共三十頁。第十四頁，共三十頁。作(Zuo)業(yè)與思考題1、繪制一個你所觀察到的小鼠骨髓細胞染色體中期分裂相。2、本實驗中秋水仙素、低滲液、固定液各起什么作用？3、簡述實驗中應(yīng)注意那些關(guān)鍵問題？第十五頁，共三十頁。（二）染色體標本片觀察1.標本片質(zhì)量評價（1）細胞密度合適、均勻；（2）背景干凈(Jing)，細胞核和染色體清晰；（3）有較多的分裂相；（4）染色體分散較好。第十六頁，共三十頁。細胞密(Mi)度第十七頁，共三十頁。染色體(Ti)分散度第十八頁，共三十頁。2.染色體形(Xing)態(tài)特征觀察第十九頁，共三十頁。3.染色體計(Ji)數(shù)（100×10）151699+16+15=401082222+8+10=40第二十頁，共三十頁。4.細胞增(Zeng)殖指數(shù)統(tǒng)計細胞增殖指數(shù)=分裂細胞數(shù)分裂細胞數(shù)+間期細胞數(shù)×100%第二十一頁，共三十頁。實驗三細胞(Bao)器的觀察一、中心體二、高爾基體第二十二頁，共三十頁。一、中心(Xin)體（4×10）馬蛔蟲子宮橫切片全貌第二十三頁，共三十頁。中(Zhong)心體（10×10）第二十四頁，共三十頁。中(Zhong)心體（40×10）第二十五頁，共三十頁。二、高爾(Er)基體（4×10）脊神經(jīng)節(jié)切片第二十六頁，共三十頁。高爾(Er)基體（10×10）第二十七頁，共三十頁。高(Gao)爾基體（40×10）第二十八頁，共三十頁。高爾(Er)基體（40×10）第二十九頁，共三十頁。內(nèi)(Nei)容總結(jié)實驗二小鼠骨髓細胞染色體制備與觀察。秋水仙素，可以抑制細胞分裂時的紡錘體形成，使處于增殖狀態(tài)的細胞停止在中期。注射到動物活體內(nèi)，可以收集到較多的中期分裂相的骨髓細胞。固定、再固定。秋水仙素的主要作用是使分裂細胞阻斷在有絲分裂中期，增加中期分裂相的比例。取出小鼠的后肢股骨