第三章 滅菌制劑與無菌制劑課件

藥劑學(xué)

Pharmaceutics第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

第三章滅菌制劑與無菌制劑第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)滅菌制劑與無菌制劑是指直接注射于體內(nèi)或直接用于創(chuàng)面、黏膜等的一類制劑。滅菌法是將所有微生物的繁殖體和芽胞殺滅或除去的方法或技術(shù)。無菌操作法是將制備過程控制在無菌環(huán)境下進行操作的一種技術(shù)或控制技術(shù)。所謂的菌就是微生物，包括細菌、真菌、病毒等。微生物的種類不同、滅菌方法不同，滅菌效果也不同。第一節(jié)概述第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)消毒（disinfection）是指采用物理和化學(xué)方法將病原微生物殺死的技術(shù)。防腐(antisepsis)系指用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生長與繁殖的手段。藥劑學(xué)中采取滅菌措施的基本目的是既要除去或殺滅微生物，又要保證藥物的穩(wěn)定性、治療作用及用藥安全。因此選擇滅菌方法時必須結(jié)合藥物的性質(zhì)加以全面考慮。故滅菌法的研究對保證產(chǎn)品質(zhì)量有著重要意義。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)一、滅菌制劑與無菌制劑滅菌制劑：系指采用某一物理、化學(xué)方法殺滅或除去所有活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。無菌制劑：系指采用某一無菌操作方法或技術(shù)制備的不含任何活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑。無菌制劑包括：注射用制劑，眼用制劑；植入型制劑；創(chuàng)面用制劑；手術(shù)用制劑等。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)二、滅菌與無菌技術(shù)目的：殺滅或除去所有微生物繁殖體和芽孢，最大限度地提高藥物制劑的安全性，保護制劑的穩(wěn)定性，保證制劑的臨床療效。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)滅菌法的分類方法如下：在制藥工業(yè)中常用且可靠的的滅菌方法為熱滅菌法。本節(jié)重點介紹物理滅菌法，其它滅菌法簡略說明。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

二、物理滅菌技術(shù)

1、熱滅菌法（thermalsterilization）加熱可以破壞蛋白質(zhì)與核酸中的氫鍵，導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或凝固，核酸破壞，酶失去活性，致使微生物死亡。熱滅菌分為干熱滅菌和濕熱滅菌，滅菌所需熱量與滅菌量、滅菌時間、濕含量等有關(guān)。（1）干熱滅菌法（dryheatsterilization）有火焰滅菌法和干熱空氣滅菌法。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)1)火焰滅菌法直接在火焰中燒灼滅菌的方法。滅菌迅速、可靠、簡便，適用于耐火焰材質(zhì)的物品，如金屬、玻璃及瓷器等用具的滅菌，不適用于藥品的滅菌。2)干熱空氣滅菌法在高溫干熱空氣中滅菌的方法。由于干燥狀態(tài)下微生物的耐熱性強，必須長時間受高熱的作用才能達到滅菌的目的。一般認(rèn)為繁殖性細菌在100℃以上干熱1h即可被殺死，而耐熱性細菌芽胞在140℃以上時才能使殺菌效率急劇增長。在180℃，滅菌2h或在260℃，滅菌45min對于細菌芽胞的殺菌能力如同繁殖體。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)有關(guān)滅菌條件，有的藥典規(guī)定為135～145℃滅菌需3～5h；160～170℃滅菌需2～4h；180～200℃滅菌需0.5～1h。這只是一般標(biāo)準(zhǔn)，必須通過實驗，在保證滅菌物品無損害的前提下指定完全滅菌的溫度與時間。此法適用于耐高溫的玻璃制品、金屬制品以及不允許濕氣穿透的油脂類和耐高溫的粉末化學(xué)藥品等。粉針的無菌瓶的干燥常采用干熱滅菌法。熱源經(jīng)250℃，30min，或200℃以上45min，可遭破壞。本法的缺點是穿透力弱，溫度不易均勻，而且滅菌溫度較高，滅菌時間較長，不適于橡膠、塑料及大部分藥品。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（2）．濕熱滅菌法濕熱滅菌法是在飽和蒸氣或沸水或流通蒸氣中進行滅菌的方法。由于蒸氣潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。

1）熱壓滅菌法用壓力大于常壓的飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法。此法具有很強的滅菌效果，滅菌可靠，能殺滅所有細菌繁殖體和芽胞，是在制劑生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛的一種滅菌方法。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)熱壓滅菌所需的溫度（蒸氣表壓）與時間的關(guān)系如下：116℃(67kPa)，40min；121℃(97kPa)，30min；126℃(139kPa)，15min。凡能耐高壓蒸氣的藥物制劑、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡膠塞、膜過濾器等均能采用此法。影響濕熱滅菌的主要影響因素有：a微生物的種類與數(shù)量；b蒸汽性質(zhì)；c藥品性質(zhì)和滅菌時間；d其他第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)臥式熱壓滅菌柜，是一種大型滅菌器，如圖所示，全部用堅固的合金制成，帶有夾套的滅菌柜內(nèi)備有帶軌道的格車，分為若干格。滅菌柜頂部裝有壓力表，指示滅菌柜室內(nèi)的壓力。滅菌柜的上方還應(yīng)安裝蒸氣排除閥，以便開始通入加熱蒸氣時排除不凝性氣體。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)操作方法是：在使用前將柜內(nèi)用刷子洗凈。先開夾套中蒸氣加熱10分鐘，夾套壓力上升至所需壓力時，將待滅菌的物品置于鐵絲籃中，排列于格車架上，推入柜室，關(guān)閉柜門，并將門匝旋緊。待夾套加熱完成后，將加熱蒸氣通入柜內(nèi)，當(dāng)溫度上升至規(guī)定溫度（如115.5℃）時，將此時刻定為滅菌開始時間，柜內(nèi)壓力表應(yīng)固定在規(guī)定壓力（如，表壓70kPa左右）。在滅菌時間到達后，先將蒸氣關(guān)閉，排氣，當(dāng)蒸氣壓力降至“0”時，柜門即可開啟，待冷卻后將滅菌物品取出。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)注意事項：①必須使用飽和蒸氣；②必須將滅菌器內(nèi)的空氣排除。如果滅菌器內(nèi)有空氣存在，則壓力表上的壓力是蒸氣與空氣二者的總壓并非純蒸氣壓，溫度達不到規(guī)定值。而且實驗證明，加熱蒸氣中含有1%空氣時，傳熱系數(shù)降低60%。這些直接影響滅菌效果，因此滅菌器上往往附有真空裝置，通入蒸氣前將器內(nèi)的空氣抽出；第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)③滅菌時間必須由全部藥液溫度真正達到所要求的溫度時算起。通常測定溫度是滅菌器內(nèi)的溫度，不是滅菌物內(nèi)部溫度，因此最好能設(shè)計直接測定被滅菌物內(nèi)溫度的裝置或使用溫度指示劑；④滅菌完畢后停止加熱，必須使壓力逐漸降到0，才能放出鍋內(nèi)蒸氣，使鍋內(nèi)壓力和大氣壓相等后，稍稍打開滅菌鍋，待10min～15min，再全部打開。以避免鍋內(nèi)外壓差太大、溫差太大而使物品沖出和使玻璃瓶炸裂，保證操作人員的安全。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)國內(nèi)對水針車間的GMP規(guī)范化的全面要求，使滅菌器械得到充分的開發(fā)與應(yīng)用。絕大多數(shù)GMP認(rèn)證車間已經(jīng)采用全自動滅菌器，根據(jù)滅菌溫度和時間的設(shè)定條件將操作溫度與時間自動記錄與控制，自動計算出F0值，以判斷滅菌的完全與否。下圖為平移門安瓿水浴滅菌器的流程圖。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)安瓿水浴滅菌器是目前國際上對安瓿針劑、口服液等瓶裝液體制劑進行滅菌處理和真空檢漏的先進設(shè)備。它采用高溫水淋浴方式對液瓶加熱和滅菌,具有溫度均勻，溫度控制范圍寬，調(diào)控可靠等優(yōu)點。同時計算機控制可實現(xiàn)F0值自動計算，對滅菌進行監(jiān)控。滅菌操作結(jié)束后，對滅菌室抽真空，充入顏色，對安瓿進行檢漏和清洗處理。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2）流通蒸氣滅菌在常壓下使用100℃流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。通常滅菌時間為30min～60min。本法不能保證殺滅所有的芽胞，系非可靠的滅菌法，可適用于消毒及不耐高熱的制劑的滅菌。3）煮沸滅菌法把待滅菌物品放入沸水中加熱滅菌的方法。通常煮沸30min～60min。本法滅菌效果差，常用于注射器、注射針等器皿的消毒。必要時加入適當(dāng)?shù)囊志鷦?，如甲酚、氯甲酚、苯酚、三氯叔丁醇等，可殺死芽胞菌?/p>

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)4）低溫間歇滅菌法將待滅菌的物品，用60℃～80℃水或流通蒸氣加熱1h，將其中的細胞繁殖體殺死，然后在室溫中放置24h，讓其中的芽胞發(fā)育成為繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)進行3～5次，直至消滅芽胞為止。本法適用于不耐高溫的制劑的滅菌。缺點是：費時，工效低，且芽胞的滅菌效果往往不理想，必要時加適量的抑菌劑，以提高滅菌效率。美國及英國藥典沒有收載本法。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2、射線滅菌法1）輻射滅菌法以放射性同位素（或）放射的γ射線殺菌的方法。射線可使有機化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代謝的自由基，導(dǎo)致微生物體內(nèi)的大分子化合物分解。輻射滅菌的特點是不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強，適合于不耐熱藥物的滅菌，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于維生素類、抗生素、激素、肝素、羊腸線、重要制劑、醫(yī)療器械、高分子材料等物質(zhì)的滅菌。包裝材料也可滅菌，從而大大減少了污染的機會。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2）紫外線滅菌法紫外線滅菌法是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200nm～300nm，滅菌力最強的波長是254nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線進行直線傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)3）微波滅菌法用微波照射而產(chǎn)生的熱殺滅微生物的方法。所謂微波是指頻率在300兆赫到300千兆赫之間的高頻電磁波。極性分子在微波電磁場的作用下，按電磁場方向整齊排列，而微波電磁場方向在每秒鐘內(nèi)改變24.5億次，這些極性分子的排列位置將隨電場的改變而急劇改變，分子在快速改變方向的過程中互相撞擊、摩擦而產(chǎn)生熱，變成宏觀的微波加熱。水是極性分子，在交變電場的作用下極化并能產(chǎn)生劇烈的轉(zhuǎn)動而發(fā)熱，因而具有強烈的微波吸收能力。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)微波能穿透到介質(zhì)的深部，通?？墒菇橘|(zhì)表里一致地加熱。本法適用于水性注射液的滅菌。據(jù)報道，比較微波滅菌與高壓蒸氣滅菌對17種化學(xué)藥物穩(wěn)定性的影響，證明對高壓蒸氣滅菌穩(wěn)定的藥物，使用微波滅菌無變化；而對高壓蒸氣滅菌不穩(wěn)定的藥物，如維生素C、阿司匹林等用微波滅菌，則比較穩(wěn)定，其分解程度降低。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)國內(nèi)開發(fā)的微波滅菌機是利用微波的熱效應(yīng)和非熱效應(yīng)（生物效應(yīng)）相結(jié)合，實現(xiàn)了滅菌的目的。其中熱效應(yīng)使細菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，細菌失去活性。非熱效應(yīng)干擾了細菌正常的新陳代謝，破壞細菌生長條件。微波的生物效應(yīng)起到物理化學(xué)滅菌所沒有的特殊作用，能在低溫（70℃～80℃左右）達滅菌效果。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)微波滅菌以低溫、常壓、省時（滅菌速度快，一般為2min～3min），高效、均勻、保質(zhì)期長（不破壞藥物原有成分，滅菌后的藥品存放期可增加1/3以上）、節(jié)約能源、不污染環(huán)境、操作簡單、易維護等優(yōu)點。我國生產(chǎn)的MMM-6型微波滅菌機，經(jīng)檢驗，開機60s，能完全殺滅安瓿內(nèi)大腸桿菌；開機90s，對安瓿內(nèi)枯草桿菌黑色變色芽胞滅菌率達99.99%。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)3.過濾滅菌法用過濾方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機械除菌的方法。這種機械叫除菌過濾器。主要適用于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等的除菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡便。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)繁殖型細菌一般＞1μm，芽胞大小≤0.5μm。對于以表面過篩作用截留的除菌濾器，其孔徑必須小到足以阻止細菌和芽胞進入濾孔之內(nèi)，例如纖維素酯膜濾器的篩孔大小約為0.2μm；對于阻留于孔道內(nèi)或靜電作用截留的除菌濾器，其孔徑可稍大于所需濾除的菌體，但壓力過大或波動，菌體有被擠過的可能。最常用測定孔徑的方法，是用大小為0.7μm左右的靈菌（B.prodigilsus）混懸液過濾，濾液通過培養(yǎng)實驗，觀察有無靈菌生長。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)滅菌過濾一般選用孔徑0.22μm或0.3μm。常用的除菌濾器有G6號垂熔玻璃漏斗、微孔薄膜濾器、孔徑在1.3μm以下的白陶土濾柱等。該法應(yīng)配合無菌操作技術(shù)，并對成品必須進行無菌檢查，以保證其除菌質(zhì)量。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)1、滅菌參數(shù)（F與F0值）近年來對滅菌過程和無菌檢查中存在的問題已引起人們的關(guān)注。在檢品中存在微量的微生物時，往往難以用現(xiàn)行的無菌檢驗法檢出。因此，有必要對滅菌方法的可靠性進行驗證。F與F0值可作為驗證滅菌可靠性的參數(shù)。

（四）滅菌參數(shù)和滅菌驗證第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)D值與Z值（1）D值研究表明，微生物受高溫、輻射、化學(xué)藥品等作用時就要被殺滅，其殺滅速度符合一級過程，即：

式中，N0—原有微生物數(shù)；Nt—滅菌時間為t時殘存的微生物數(shù)；k—殺滅速度常數(shù)?；虻谌聹缇苿┡c無菌制劑(2)

lgNt對t作圖得一直線，斜率，令斜率的負(fù)倒數(shù)為D值，即：

由式可知，當(dāng)lgN0-lgNt=1時D=t，即D的物理意義為，在一定溫度下殺滅微生物90%或殘存率為10%時所需的滅菌時間（分）。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（2）Z值滅菌條件不同，其滅菌速率也不同。當(dāng)溫度升高時，速度常數(shù)k增大，因而D值（滅菌時間）隨溫度的升高而減少。在一定溫度范圍內(nèi)（100～138℃）lgD與溫度T之間呈直線關(guān)系。令

故Z值為降低一個lgD值所需升高的溫度數(shù)。即，滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

如Z=10℃，意思是滅菌時間減少到原來滅菌時間的10%，而具有相同的滅菌效果，所需升高的滅菌溫度為10℃。上式可以改寫為：

設(shè)Z=10℃，T1=110℃，T2=121℃，則D2=0.079D1。即110℃滅菌1min與121℃滅菌0.079min，其滅菌效果相當(dāng)。若Z=10℃，滅菌溫度每增加一度，則D1=1.259D2，即溫度每增加一度，其滅菌速率提高25.9%。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)F值與F0值（3）F值F值的數(shù)學(xué)表達式如下：

式中，△t—測量被滅菌物溫度的時間間隔，一般為0.5～1.0分鐘；T—每個時間間隔△t所測得被滅菌物溫度；T0—參比溫度。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)根據(jù)表達式，F(xiàn)值為在一系列溫度T下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效力與在參比溫度T0下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效力相同時，T0溫度下所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r間，以分為單位。即整個滅菌過程的效果相當(dāng)于T0溫度下F時間的滅菌效果。F值常用于干熱滅菌。干熱滅菌時Z=20℃，參比溫度為170℃。評價干熱滅菌的相對能力時，必須要保證F值大于60min（170℃），30min（180℃）。破壞大腸桿菌內(nèi)毒素的F值為250℃時750min。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（4）F0值在濕熱滅菌時，參比溫度定為121℃，以嗜熱脂肪芽孢桿菌作為微生物指示菌，該菌在121℃時，Z值為10℃。則：

顯然，F(xiàn)0值為一定滅菌溫度（T），Z為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃，Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效力相同時所相當(dāng)?shù)臅r間（min）。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)也就是說，不管溫度如何變化，t分鐘內(nèi)的滅菌效果相當(dāng)于溫度在121℃下滅菌F0分鐘的效果，即它把所有溫度下滅菌效果都轉(zhuǎn)化成121℃下滅菌的等效值。因此稱F0為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間（min）。按上式定義的F0又叫物理F0，目前F0應(yīng)用僅限于熱壓滅菌。滅菌過程中，只需記錄被滅菌物的溫度與時間，就可算出F0。假設(shè)如下數(shù)據(jù)，△t取一分鐘，即每分鐘測量一次溫度。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)表滅菌過程中不同時間的溫度

按表15-3中數(shù)據(jù)用式15-11計算如下：第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)計算結(jié)果說明44min內(nèi)一系列溫度下的滅菌效果相當(dāng)與在121℃滅菌8.49分鐘的滅菌效果。F0值的計算要求測定滅菌物品內(nèi)部的實際溫度，并將不同溫度與時間對滅菌的效果統(tǒng)一在121℃濕熱滅菌的滅菌效力，它包括了滅菌過程中升溫、恒溫、冷卻三部分熱能對微生物的總致死效果。故F0值可作為滅菌過程的比較參數(shù)，對于滅菌過程的設(shè)計及驗證滅菌效果具有重要意義。說明一點，F(xiàn)0值僅是用時間單位表示量值，并不是“時間”的量值。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)將上式編入計算機程序中，將計算機與滅菌器連接，根據(jù)測得數(shù)據(jù)，就可自動顯示F0值。F0值隨溫度變化而呈指數(shù)變化，因此溫度即使有很小的差別（如0.1～1.0℃），將對F0值產(chǎn)生顯著影響。為了使F0測定準(zhǔn)確，應(yīng)選擇靈敏度高、重現(xiàn)性好、精密度為0.1℃的熱電偶，滅菌時應(yīng)將熱電偶的探針置于被測物的內(nèi)部，經(jīng)滅菌器通向溫度記錄儀。對滅菌工藝及滅菌器進行驗證，要求滅菌器內(nèi)熱分布均勻一致，重現(xiàn)性好。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)F0值的影響因素主要有：①容器大小、形狀、熱穿透系數(shù)；②滅菌產(chǎn)品溶液粘度、容器充填量；③容器在滅菌器內(nèi)的數(shù)量與排布等。F0值是121℃時微生物降解所需時間，F(xiàn)0值等于D121值與微生物的對數(shù)降低值的乘積。由于F0由微生物的D值和微生物的初始數(shù)及殘存數(shù)所決定，所以F0又叫生物F0。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)式中，Nt為滅菌后預(yù)期達到的微生物殘存數(shù)。又叫染菌度概率（Probabilityofnonsterility）一般取Nt為10-6（原有菌數(shù)的百萬分之一，或100萬個制品中只允許有一個制品染菌）即認(rèn)為達到可靠的滅菌效果。比如，將含有200個嗜熱脂肪芽胞桿菌的5%葡萄糖水溶液以121℃熱壓滅菌時，其D值為2.4min。則因此，F(xiàn)0值也可認(rèn)為是相當(dāng)于121℃熱壓滅菌時殺死容器中全部微生物所需要的時間。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

為了保證F0值的滅菌效果，應(yīng)注意以下兩個問題。①根據(jù)公式，若N0越大，即被滅菌物中微生物數(shù)越多，則滅菌時間越長，故盡可能減少各工序中微生物對藥品的污染，分裝好的藥品應(yīng)盡快滅菌，以使初始微生物數(shù)在最低水平。最好使每個容器的含菌量控制在10以下（即lgN0≤1）；②應(yīng)適當(dāng)考慮增強安全因素，一般增加50%。如規(guī)定F0為8min，則實際操作應(yīng)控制F0為12min為好。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)四、化學(xué)滅菌法化學(xué)滅菌法是用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺死的方法?；瘜W(xué)殺菌劑不能殺死芽胞，僅對繁殖體有效?；瘜W(xué)殺菌劑的效果依賴于微生物種類及數(shù)目，物體表面的光滑度或多孔性以及殺菌劑的性質(zhì)?；瘜W(xué)殺菌的目的在于減少微生物的數(shù)目，以控制無菌狀況至一定水平。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)1．氣體滅菌法

利用環(huán)氧乙烷等殺菌性氣體進行殺菌的方法。可應(yīng)用于粉末注射劑、不耐熱的醫(yī)用器具、設(shè)施、設(shè)備等。常用甲醛蒸氣、丙二醇蒸氣、三甘醇、過氧醋酸蒸氣進行操作室內(nèi)的滅菌。采用該法滅菌時應(yīng)注意殺菌氣體對物品質(zhì)量的損害以及滅菌后的殘留氣體的處理。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)環(huán)氧乙烷滅菌器是在一定的溫度、壓力和濕度條件下，用環(huán)氧乙烷滅菌氣體對封閉在滅菌室內(nèi)的物品進行熏蒸滅菌的專用設(shè)備。我國已有環(huán)氧乙烷滅菌器的系列產(chǎn)品。環(huán)氧乙烷氣體滅菌的主要特點是穿透力強，殺菌廣譜，滅菌徹底，對物品無腐蝕無損害等。滅菌器的結(jié)構(gòu)主要由滅菌室、真空裝置、加溫及熱循環(huán)裝置、加濕裝置、氣化裝置、氣動裝置、特殊密封裝置、殘氣處理裝置以及相應(yīng)的控制系統(tǒng)組成。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．藥液法

利用藥液殺滅微生物的方法。常用的有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液，2%左右的酚或煤酚皂溶液，75%乙醇等。該法常應(yīng)用于其它滅菌法的輔助措施，即手指、無菌設(shè)備和其它器具的消毒等。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)五、無菌操作法無菌操作法是把整個過程控制在無菌條件下進行的一種操作方法。無菌操作所用的一切用具，材料以及環(huán)境，均需按照前述的滅菌法滅菌，操作須在無菌操作室或無菌柜內(nèi)進行。在藥物制劑中，將一些不耐熱的藥物制成注射劑、眼用溶液、眼用軟膏、皮試液等時，往往采用無菌操作法制備。按無菌操作法制備的產(chǎn)品，最后一般不再滅菌，直接使用，故無菌操作法對于保證不耐熱產(chǎn)品的質(zhì)量至關(guān)重要。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)1.無菌操作室的滅菌無菌室的滅菌多采用滅菌和除菌相結(jié)合的方式實施。對于流動空氣采用過濾介質(zhì)除菌法；對于靜止環(huán)境的空氣采用滅菌方法。常用空氣滅菌法有甲醛溶液加熱熏蒸法，丙二醇或三甘醇蒸氣熏蒸法，過氧醋酸熏蒸法，紫外線空氣滅菌法等。近年來利用臭氧進行滅菌，代替紫外線照射與化學(xué)試劑熏蒸滅菌，取得了令人滿意的效果，是在《GMP驗證指南》消毒方法種類中被推薦的方法。該法將臭氧發(fā)生器安裝在中央空調(diào)凈化系統(tǒng)送、回風(fēng)總管道中與被控制的潔凈區(qū)采用循環(huán)形式滅菌。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)臭氧滅菌法①不需增加室內(nèi)消毒設(shè)備；②可以使臭氧迅速擴散到潔凈室的每個角落，臭氧濃度分布均勻，因而對空氣中的浮游菌及設(shè)備、建筑物表面的沉降菌落都能消毒；③對空氣凈化過濾系統(tǒng)滋生的霉菌和雜菌起到了殺滅作用；④滅菌時間短（一般只需1小時）、操作簡便、效果好。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)下圖表示甲醛溶液加熱熏蒸法的傳統(tǒng)氣體發(fā)生裝置。將甲醛溶液放入瓶內(nèi)，逐漸被吸入蒸氣夾層加熱鍋中，甲醛溶液被加熱，甲醛蒸氣經(jīng)蒸氣出口送入總進風(fēng)道，由鼓風(fēng)機吹入無菌室，連續(xù)三小時后，將鼓風(fēng)機關(guān)閉。室溫應(yīng)保持在25℃以上，以免室溫過低甲醛蒸氣聚合而附著于冷表面，濕度應(yīng)保持60%以上，密閉熏蒸12～24小時以后，再將25%氨水加熱（每m3用8～10ml），從總風(fēng)道送入氨氣約15分鐘，以吸收甲醛蒸氣，然后開啟總出風(fēng)口排風(fēng)，并通入經(jīng)處理過的無菌空氣直到室內(nèi)無甲醛為止。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

除用上述方法定期進行較徹底的滅菌外，還要對室內(nèi)的空間、用具、地面、墻壁等，用3%酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2%苯扎溴銨或75%乙醇噴灑或擦拭。其它用具盡量用熱壓滅菌法或干熱滅菌法滅菌。每天工作前開啟紫外線燈一小時，中午休息也要開0.5～1小時,以保證操作環(huán)境的無菌狀態(tài)。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2.無菌操作操作人員進入操作室之前要洗澡，并換上已滅菌的工作服和清潔的鞋子和帽子，以免造成污染機會。安瓿要150～180℃，2～3小時干熱滅菌。橡皮塞要以121℃，1小時熱壓滅菌。有關(guān)器具都要經(jīng)過滅菌。用無菌操作法制備的注射劑，大多需加入抑菌劑。小量無菌制劑的制備，普遍采用層流潔凈工作臺進行無菌操作，使用方便，效果可靠，為無菌操作創(chuàng)造了良好的條件。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)在無潔凈工作臺的情況下，無菌操作也可在無菌操作柜中進行。無菌操作柜構(gòu)造如下圖所示。操作柜的架子用有機玻璃或木制。若用木制，四周配以玻璃，前面操作處裝木版，挖兩個圓孔，孔內(nèi)密接橡皮手套或袖套。藥品及用具等，由側(cè)門送入。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)操作時可完全與外界空氣隔絕。柜內(nèi)空氣的滅菌，可在柜中央安裝一小型紫外燈，使用前一小時啟燈滅菌，或使用藥液噴霧滅菌。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)六、無菌檢查法無菌檢查法系指檢查藥品與輔料是否無菌的一種方法。經(jīng)滅菌或無菌操作法處理后的制劑必須經(jīng)過無菌檢查法檢驗證實已無微生物生存后，方能使用?！吨袊幍洹芬?guī)定的無菌檢查法有“直接接種法”和“薄膜過濾法”。直接接種法將供試品溶液接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)數(shù)日后觀察培養(yǎng)基上是否出現(xiàn)渾濁或沉淀，與陽性和陰性對照品比較或直接用顯微鏡觀察。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)薄膜過濾法取規(guī)定量的供試品經(jīng)薄膜過濾器過濾后，取出濾膜在培養(yǎng)基上培養(yǎng)數(shù)日，進行陰性與陽性對照。其具體操作方法以及在一些特殊情況下的變動，可詳見《中國藥典》附錄規(guī)定。

薄膜過濾用于無菌檢查的突出優(yōu)點，在于可過濾較大量的樣品和可濾除抑菌性物質(zhì)，過濾后的薄膜，即可直接接種于培養(yǎng)基中，或直接用顯微鏡觀察。故此法靈敏度高，不易產(chǎn)生假陰性結(jié)果，操作也比較簡便。無菌檢查的全部過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物的污染，因此多在層流潔凈工作臺中進行。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)三.空氣凈化技術(shù)（一）、概述空氣凈化(airpurification)技術(shù)是以創(chuàng)造潔凈的空氣為主要目的的空氣調(diào)節(jié)措施。藥物制劑行業(yè)中的空氣凈化需要生物潔凈，即在除掉空氣中的各種塵埃的同時除掉各種微生物等。藥品的凈化過程是在凈化的空氣環(huán)境中進行的防止藥品受到污染、提高藥品質(zhì)量的重要措施之一。分為工業(yè)凈化和生物凈化第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

空氣的凈化措施與環(huán)境的空氣狀態(tài)以及生產(chǎn)對空氣的要求密切相關(guān)。

①大氣中存在的粉塵、煙、霧、蒸氣、不良氣體、微生物等以及其含有量都會影響空氣的凈化程度。②生產(chǎn)劑型不同，如片劑、注射劑、輸液、軟膏、栓劑等以及生產(chǎn)崗位不同，如注射劑中配液、灌封、包裝等對空氣的凈化要求有很大差別。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（1998年修訂）中明確規(guī)定“進入潔凈室（區(qū)）的空氣必須凈化，并根據(jù)要求劃分空氣潔凈級別”?？諝鈨艋夹g(shù)是一項綜合性措施。為了獲得良好的潔凈結(jié)果、不僅著重采取合理的空氣凈化措施，而且必須要求建筑、工藝和其他專業(yè)采取相應(yīng)的措施和嚴(yán)格的維護管理。本節(jié)重點介紹空氣凈化技術(shù)。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（二）、潔凈室的凈化標(biāo)準(zhǔn)與測定方法潔凈室的凈化標(biāo)準(zhǔn)1．含塵濃度的表示方法空氣中含塵濃度常用計數(shù)濃度與重量濃度表示。計數(shù)濃度：每升或每立方米空氣中所含粉塵個數(shù)（個/L或個/m3）。重量濃度：每立方米空氣中所含粉塵的毫克量（mg/m3）。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．潔凈室的潔凈度標(biāo)準(zhǔn)目前在國際上沒有統(tǒng)一的空氣潔凈度標(biāo)準(zhǔn)，各國有自己的等級標(biāo)準(zhǔn)。確定室內(nèi)潔凈度標(biāo)準(zhǔn)時，必須考慮塵埃及細菌污染因素。表15-4表示《美國聯(lián)邦潔凈室標(biāo)準(zhǔn)》，各國指定標(biāo)準(zhǔn)時常用來做參考。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)表15-4美國聯(lián)邦潔凈室標(biāo)準(zhǔn)209B

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)我國《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（1998年修訂）中將藥品生產(chǎn)潔凈室（區(qū)）的空氣潔凈度劃分四個級別，見表15-5。表15-5潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級別表

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)潔凈級別是指每立方英尺中≥0.5μm的粒子數(shù)最多不超過的個數(shù)，如100級是指每立方英尺中≥0.5μm的粒子數(shù)最多不超過100個，10,000級是不超過10,000個。目前按國際單位計算，分別在每立方米中不超過3,500個和350,000個，依次類推。沉降菌落數(shù)是指直徑為9cm的雙碟露置于空氣中半小時后落下的菌的個數(shù)。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)我國的《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》中對藥品生產(chǎn)潔凈室（區(qū)）的空氣潔凈度級別的規(guī)定基本上與世界衛(wèi)生組織和一些發(fā)達國家的GMP要求相一致，參見下表。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)表15-6一些國家和世界衛(wèi)生組織對空氣潔凈度級別的規(guī)定1.FS-2009E—

美國聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)《潔凈室和潔凈區(qū)內(nèi)空氣浮游粒子潔凈等級》；2.WHO—世界衛(wèi)生組織GMP；3.EC—歐共體GMP；4.NHB5340-2—美國國家航空及宇航局（NASA）《潔凈室和潔凈工作臺微生物控制標(biāo)準(zhǔn)》第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)不同藥品、不同工藝程序?qū)崈舳鹊囊蟛煌?，固體口服給藥制劑、液體口服給藥制劑、粘膜給藥制劑、肌肉注射給藥制劑、靜脈給藥制劑等對潔凈度的要求依次增高；在輸液的制備過程中，灌封崗位的潔凈度要求最高。應(yīng)根據(jù)需要選擇適宜的潔凈級別。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（三）含塵濃度的測定方法目前常用的測量空氣中塵粒的大小及計數(shù)濃度的方法有光散射法、濾膜顯微鏡法、比色法。1．光散射式粒子計數(shù)測定法當(dāng)含塵氣流以細流束通過強光照射的測量區(qū)時，空氣中的每個塵粒發(fā)生光散射，形成光脈沖信號，并轉(zhuǎn)換成正比于散射光強度的電脈沖信號，散射光的強度正比于塵粒的表面積，脈沖信號的次數(shù)與塵粒數(shù)目對應(yīng)，最后由數(shù)碼管顯示粒徑與粒子數(shù)目。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．濾膜顯微鏡計數(shù)測定法利用微孔濾膜真空過濾含塵空氣，把塵粒捕集在濾膜表面，用丙酮蒸氣熏蒸，使濾膜形成透明體，然后用顯微鏡計數(shù)。根據(jù)采樣的空氣量及粒子數(shù)可計算空氣的含塵量。此法可直接觀察塵埃的形狀、大小、色澤等物理性質(zhì)，這對分析潔凈室污染情況是極為寶貴的資料。缺點是取樣、計數(shù)麻煩。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)3．光電比色計數(shù)測定法用真空泵將含塵空氣通過濾紙，然后將污染的濾紙在光源照射下用光電比色計（光電密度計）測出過濾前后濾紙的透光度。在粉塵的成分、大小、和分布等相同的條件下，由于光密度與積塵量成正比，所以可直接測出空氣中的含塵量。比色法適用于中、高效過濾器的滲漏檢查。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)三、空氣過濾潔凈室的空氣凈化方法多采用空氣過濾法。當(dāng)含有粉塵的空氣通過具有很多細孔的過濾介質(zhì)時，粉塵被孔壁吸附或截留而與空氣分離。在室內(nèi)環(huán)境中，懸浮粒狀物質(zhì)的粒徑絕大多數(shù)小于10μm的粒子，而且其粒度分布在粒徑4μm附近和1μm以下出現(xiàn)峰值。因此潔凈室技術(shù)中以0.5μm和5.0μm作為劃分潔凈度等級的標(biāo)準(zhǔn)粒徑。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)空氣過濾屬于介質(zhì)過濾，可分為表面過濾與深層過濾。表面過濾系指粒子截留在介質(zhì)表面上，此時粒子大小必須大于過濾介質(zhì)的微孔。常用的有醋酸纖維素、硝酸纖維素制成的微孔濾膜。主要用于要求高的無塵、無菌潔凈室的末級過濾。深層過濾系指粉塵的過濾過程發(fā)生在過濾介質(zhì)內(nèi)部，此時塵粒的粒徑可小于介質(zhì)的微孔。常用的介質(zhì)有玻璃纖維、天然纖維、合成纖維、粒狀活性炭、發(fā)泡性濾材及薄層濾紙等。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（一）空氣過濾機理及影響因素1．

空氣過濾機理常用的過濾介質(zhì)為纖維，其過濾機理復(fù)雜，主要有以下幾種：①慣性作用：當(dāng)塵粒隨空氣流過纖維層的彎曲通道時，由于顆粒的慣性較大，脫離彎曲流線與纖維碰撞而附著。這種作用隨氣速和粒徑的增大而增大；②擴散作用：當(dāng)塵粒隨空氣圍繞纖維表面作布朗運動時，因擴散作用使與纖維接觸而被附著。這一作用在塵粒越小、過濾速度越低時越明顯；

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)③攔截作用：當(dāng)粒徑大于纖維間的間隙時，或塵粒與纖維發(fā)生接觸時，塵粒被纖維截留的作用；④靜電作用：當(dāng)含塵氣流通過纖維時，由于摩擦產(chǎn)生的靜電作用使塵粒沉積在纖維表面；⑤其它：重力作用、分子間范德華力等作用使粉粒截留在纖維表面。在實際過濾器中多種機理同時作用，只有一種或二種機理是主要的。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．空氣過濾的影響因素各種捕集機理的有效性考察表明：①粒徑的影響：粒徑越大，慣性、攔截、重力沉降作用越大；粒徑越小，擴散作用越顯著。因此存在過濾效率最低的中間粒徑，往往用這一粒徑的塵粒檢測高效過濾器的效果。對于深層過濾，常用粒徑為0.3μm的塵粒來檢測。②過濾風(fēng)速：風(fēng)速大，慣性作用強，但過強將會使附著的塵粒吹出，而且阻力增大；而風(fēng)速小，擴散作用強，能捕集小塵粒，而且阻力小。常用極小的風(fēng)速捕集更小的塵粒。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)③介質(zhì)纖維直徑和密實性：纖維越細、越密實，則接觸面積大、慣性作用與攔截作用增強，但過于密實阻力增大，擴散作用弱。④附塵作用：隨著過濾的進行，在纖維表面沉積的塵?？稍黾訑r截效果，但到一定程度后塵粒有再次飛散的可能，因此有必要定期清洗。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（二）空氣過濾器與過濾特性1．空氣過濾器的分類在空氣凈化系統(tǒng)中，將過濾器按過濾效率分為粗效（初效）過濾器、中效過濾器、亞高效過濾器、高效過濾器四類。粗效過濾器：主要濾除粒徑大于5μm的懸浮粉塵，過濾效率可達20%~80%，除了用于捕集大粒子外，用于防止中、高效過濾器被大粒子堵塞，以延長中、高效過濾器的壽命。通常設(shè)在上風(fēng)側(cè)的新風(fēng)過濾，因此也叫預(yù)過濾器（pre-filter）。粗效過濾器一般采用易于拆卸的平板型或袋型。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)中效過濾器：主要用于濾出大于1μm的塵粒，過濾效率達到20%~70%，一般置于高效過濾器之前，用以保護高效過濾器。中效過濾器的外形結(jié)構(gòu)大體與粗效過濾器相似，主要區(qū)別是濾材。亞高效過濾器：主要濾出小于1μm的塵挨，過濾效率在95%~99.9%之間,置于高效過濾器之前以保護高效過濾器，常采用疊式過濾器。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)高效過濾器—簡稱HEPA（HighEfficiencyParticleAirFilter），主要濾除小于1μm的塵埃，對粒徑0.3μm的塵粒的過濾效率在99.97%以上。一般裝在通風(fēng)系統(tǒng)的末端，必須在中效過濾器或在亞高效過濾器的保護下使用。高效過濾器的結(jié)構(gòu)主要是折疊式空氣過濾器。高效過濾器的特點是效率高、阻力大、不能再生、安裝時正反方向不能倒裝第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．空氣過濾裝置空氣過濾器往往把濾材裝進金屬或木材框架內(nèi)制成一個單元過濾器，使用時將單個或多個單元過濾器鑲在通風(fēng)管或通風(fēng)柜里的空氣過濾箱體內(nèi)，如圖。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)常用單元過濾器按其結(jié)構(gòu)有如下幾種形式，如圖所示。（1）板式空氣過濾器（a），把濾材裝到框架內(nèi)，兩側(cè)用金屬網(wǎng)壓緊形成平面狀，框架采用木材、金屬或塑料等制成，是最簡單而常用的過濾器。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（2）契式空氣過濾器

如圖（b），將平板狀濾材交錯擺放成楔狀。常用于中效過濾。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（3）袋式濾過器

如圖（c），把濾材作成細長的袋子，然后裝入框架上。常用于中效過濾。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（4）折疊式空氣過濾器

如圖（d），將較薄的墊塊狀濾材折疊裝入框架內(nèi)，并且采用波紋形分隔板夾在褶狀濾材之間，保持濾材褶與褶之間的間隙，支持手風(fēng)琴狀的濾材，防止濾材變形。該過濾器過濾面積大，可減小通過濾材的有效風(fēng)速，微米級粉塵的捕集效率高，是經(jīng)濟而可靠的高效過濾設(shè)備。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)3．空氣過濾器的特性過濾特性是評價或選擇空氣過濾器的重要依據(jù)。（1）面速與濾速①面速系指通過過濾器斷面上的氣流速度，以m3/（m2·s）表示，反映過濾器通過氣體的能力，面速越大，過濾器的安裝面積越大；②濾速系指通過濾材面積的氣流速度（m/s或cm/s），反映濾材的通過氣體能力。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（2）過濾效率η在額定風(fēng)量下，過濾前后空氣含塵濃度的變化與過濾前含塵濃度之比稱為過濾效率。過濾效率反映濾除去的含塵量，是過濾器的重要參數(shù)之一。

式中，C1，C2分別表示過濾前后空氣的含塵量。當(dāng)含塵量以計數(shù)濃度表示時，η為計數(shù)效率；以重量濃度表示時，η為計重效率。（15-13）第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

不同級別的過濾器串聯(lián)使用時過濾效率為

式中C1，Cn分別表示第一個過濾器進口的含塵濃度與第n個過濾器出口的含塵濃度；η1，η2，ηn分別表示第一個、第二個及第n個過濾器的過濾效率。

或（15-14）（15-15）第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（3）穿透率K與凈化系數(shù)KC

穿透率是過濾后和過濾前的含塵濃度比，表明過濾器沒有截留的含塵量。

凈化系數(shù)表明過濾后含塵濃度降低的程度，以穿透率的倒數(shù)表示。（15-16）（15-17）第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（4）過濾器的阻力以過濾器進出口處的壓差表示。這壓差是由氣流通過濾材和通過過濾器框架、波紋板等構(gòu)件時克服的阻力。過濾器的阻力隨容塵量的增加而增大，當(dāng)阻力增大到最初阻力的兩倍時，更換或清洗過濾器，此時阻力叫終阻力。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（5）容塵量

指過濾器允許積塵的最大量。超過容塵量時，阻力增大或捕集的塵粒再次飛揚到潔凈空氣中，降低過濾效率。容塵量一般定為阻力增大到最初阻力的二倍或過濾效率降至初值的85%以下的積塵量。玻璃纖維紙高效過濾器的容塵量約在500g/個。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)四、潔凈室（區(qū)）的設(shè)計制劑生產(chǎn)廠房的內(nèi)部布置必須根據(jù)藥品的種類、劑型以及生產(chǎn)工序、生產(chǎn)要求等合理劃分區(qū)域，即一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)、無菌區(qū)。一般生產(chǎn)區(qū)(generalregion)：沒有潔凈度要求的車間或生產(chǎn)崗位，如割瓶、成品檢漏、燈檢、包裝崗位等；

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)控制區(qū)（controlregion）：潔凈度要求為30萬級或10萬級的工作區(qū)；潔凈區(qū)（cleanregion）：對潔凈度的要求為1萬級的一般無菌工作區(qū)；無菌區(qū)（sterileregion）：對潔凈度的要求為100級的工作區(qū)。常用1萬級背景下再設(shè)置層流式潔凈罩或?qū)恿魇綕崈襞?，局?00級，以減少安裝費用并有利于確保100級的工作區(qū)，一般不采用整個室作成100級的層流潔凈室。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

部分生產(chǎn)工序與潔凈度級別的要求介紹如下：100級或10,000級背景下的局部100級：無菌藥品需滅菌的≥50ml大容量注射劑的罐裝，不需除菌過濾的藥液的配制、灌封、分裝和壓塞，凍干粉針的罐裝、壓塞等；10,000級：注射劑的稀配、過濾，小容量注射劑的罐封，罐裝前需除菌過濾的藥液的配制，供角膜創(chuàng)傷或手術(shù)用滴眼劑的配制和罐裝等；

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)100,000級：注射劑的濃配和采用系統(tǒng)的稀配，非最終滅菌口服液體藥品的暴露工序，深部組織創(chuàng)傷外用藥品、眼用藥品的暴露工序，陰道、鼻粘膜用藥等暴露工序；300,000級：最終需滅菌的口服液體藥品的暴露工序，口服固體藥品的暴露工序，表皮外用藥品暴露工序，直腸用藥的暴露工序，原料的精制、干燥、包裝環(huán)境等。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（一）潔凈室的布置

潔凈區(qū)一般由潔凈室、（空）氣閘、風(fēng)淋、亞污染區(qū)、廁所、洗澡間、更衣室等組成。圖為1萬級潔凈室的安排形式之一。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)各個部位的布置必須在符合生產(chǎn)工藝要求的前提下，明確人、物流以及空氣流的流向，以保證潔凈室的潔凈度。人員進入準(zhǔn)潔凈區(qū)的流程為：外更衣室→洗凈室→更衣室→風(fēng)淋室→準(zhǔn)潔凈室；操作人員進入潔凈室的流程為：外更衣室→脫衣室→淋浴室（水洗）→風(fēng)淋室→更衣室→風(fēng)淋室→無菌走廊→無菌室。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)潔凈室布置的基本原則為①潔凈室內(nèi)設(shè)備布置盡量緊湊，以減少潔凈室的面積；②潔凈室內(nèi)不安排窗戶或窗戶與潔凈室之間隔以封閉式外走廊；③潔凈室的門要求密閉，人、物進出口處裝有氣閘（airlock）；④同級別潔凈室盡可能安排在一起；第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)⑤不同級別的潔凈室由低級向高級安排，彼此相連的房間之間應(yīng)設(shè)隔門，按潔凈等級設(shè)計相應(yīng)壓差，一般10Pa左右，門的開啟方向朝著潔凈度級別高的房間；

⑥潔凈室應(yīng)保持正壓，潔凈室之間按潔凈度等級的高低依次相連，并有相應(yīng)的壓差以防止低級潔凈室的空氣逆流到高級潔凈室。空氣潔凈級別不同的相鄰房間之間的凈壓差應(yīng)大于5Pa，潔凈室（區(qū)）與室外大氣的凈壓差應(yīng)大于10Pa，門的開啟方向朝著潔凈度級別高的房間；第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)⑦照光度按GMP規(guī)定應(yīng)超過300Lx以上；⑧無菌區(qū)紫外光燈，一般安裝在無菌工作區(qū)之上側(cè)或入口處；⑨除工藝對溫、濕度有特殊要求外，潔凈室溫度宜保持在18～26℃，相對濕度45%～65%。詳細內(nèi)容參見《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的有關(guān)規(guī)定。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（二）潔凈室對內(nèi)部結(jié)構(gòu)的要求潔凈室對墻壁與地面總的要求是：便于清掃，防濕，防霉，不易開裂，不易燃燒，導(dǎo)電性好，經(jīng)濟等。因此從材料的選擇到施工與潔凈度緊密相關(guān)。1．地板地面對潔凈度的影響較大，在潔凈室的內(nèi)部構(gòu)造中，地板是關(guān)鍵，而且不易做到很完美的程度。因為工作人員在地面上活動而發(fā)塵量較大所致，一般發(fā)塵量取值為4.5×105粒/（㎝3·min）。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)對地板的要求有①有彈性而光滑的地板材料為好，缺乏彈性的地板材料易產(chǎn)生缺口而容易積塵；②地板和壁面相接的墻角最好做到曲面，以便清掃。常用地面材料有：水磨石地面、鋁、塑料、環(huán)氧樹脂、聚氨酯、聚氧乙烯等。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．墻墻面的發(fā)塵量較少。對于大面積墻，常采用高密度塊材砌成后表面貼瓷磚或涂上漆類以形成堅實的表面，光滑無隙。常用涂料有聚氨基甲酸乙酯、過氧化乙烯漆、乳膠漆、普通瓷漆等。對小面積的潔凈室可用塑料板、鋁板等作隔墻。3．頂棚各種管道，如水管、風(fēng)管、高效過濾器和照明設(shè)施（包括紫外燈）都可裝嵌在天花板吊頂內(nèi)。天花板采用鑲板、混凝土等。天花板最好能用隔音板包于塑料薄膜內(nèi)，以減少噪音。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（三）潔凈室對人、物的凈化要求潔凈室的設(shè)計和施工即使很完善，維護和管理不當(dāng)也同樣使?jié)崈舳冗_不到要求。有人認(rèn)為對污染的控制效果設(shè)備占50%，管理占50%。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)1．對人的要求在潔凈室內(nèi)人是粉塵和細菌的主要污染源。人的皮膚和頭發(fā)中剝落下來的皮屑，呼吸和說話時吐出的唾液，衣服中脫落下來的纖維都成為污染的物質(zhì)，特別是人的一舉一動更使污染加劇。為了減少人為產(chǎn)生的發(fā)塵量，操作人員進入潔凈室之前必須水洗（洗手、洗臉、淋浴等），更衣鞋帽，空氣吹淋（風(fēng)淋）；工作服必須用專用服，盡量蓋罩住全身，減少皮膚外露，衣料采用發(fā)塵少、難于吸附、不易脫落的緊密的尼龍、滌綸等織物。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)2．對物的要求使用的原料、儀器、設(shè)備等在進入潔凈室前均需清潔處理。按一次通過方式，邊滅菌邊送入無菌室內(nèi)。如安瓿等，在生產(chǎn)流水線上經(jīng)過洗滌和滅菌后，用傳遞帶通過潔凈區(qū)隔墻上開的空洞陸續(xù)送入無菌室。由于潔凈室內(nèi)保持正壓，或空洞上方設(shè)有氣幕，或設(shè)置紫外滅菌等，可防止塵埃進入潔凈室。又如滅菌柜安裝在貫通無菌室的墻壁，一端開門于生產(chǎn)區(qū)，另一端開門于無菌室，把物料從一般生產(chǎn)區(qū)裝入，經(jīng)滅菌后從另一端無菌室開門取出。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)（四）潔凈室的氣流組織由高效過濾器送出來的潔凈空氣進入潔凈室后，其流向的安排直接影響室內(nèi)潔凈度。氣流形式有層流式和亂流式。1．層流（laminarflow）是指空氣流線呈平行，又稱平行流或單向流。由于層流的流線為單一方向且相互平行，各流線間的塵粒不易從一個流線擴散到另一流線上去。該氣流方式的基本形式類似氣缸內(nèi)活塞動作，把室內(nèi)發(fā)生的粉塵以整層氣流形式推出室外。第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)

即使氣流遇到人、物等發(fā)塵部位，塵粒也很少擴散到全室，而隨平行流迅速流出，從而容易保持潔凈度。只要過濾器送風(fēng)口和工作面之間不存在發(fā)塵源，在工作面上始終能夠得到100級潔凈的空氣，工作面下風(fēng)側(cè)為1000級左右。層流常用于100級的潔凈區(qū)。層流分為垂直層流與水平層流，如圖。

第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)第三章滅菌制劑與無菌制劑(2)垂直層流（verticallaminarflow）以高效過濾器為送