2025版高考生物一輪總復習選擇性必修3第10單元生物技術與工程第4講動物細胞工程課件

第4講動物細胞工程考情研讀·備考定位課標要求核心素養(yǎng)1.闡明動物細胞培養(yǎng)是從動物體獲得相關組織，分散成單個細胞后，在適宜的培養(yǎng)條件下讓細胞生長和增殖的過程。動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎。2．闡明動物細胞核移植一般是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，并使重組細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的過程。1.應用結(jié)構與功能觀理解動物細胞工程的原理和操作。(生命觀念)2．構建各種動物細胞工程操作流程模型，分析操作注意事項。(科學思維)課標要求核心素養(yǎng)3．闡明動物細胞融合是指通過物理、化學或生物學等手段，使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。4．概述細胞融合技術是單克隆抗體制備的重要技術。5．簡述干細胞在生物醫(yī)學工程中有廣泛的應用價值。3．結(jié)合生產(chǎn)生活實踐，分析動物細胞工程的應用，關注倫理與人體健康。(社會責任)考點一動物細胞培養(yǎng)必備知識·夯實基礎知|識|鞏|固1．動物細胞培養(yǎng)的條件2．動物細胞培養(yǎng)的過程3．干細胞培養(yǎng)及其應用種類胚胎干細胞成體干細胞誘導多能干細胞來源____________骨髓、臍帶血等體細胞(如成纖維細胞等)特點能分化成任何一種細胞、組織或器官，甚至成為______分化成__________________能誘導分化成類似_____________的細胞特定的細胞或組織早期胚胎個體胚胎干細胞種類胚胎干細胞成體干細胞誘導多能干細胞應用分化成心肌細胞、神經(jīng)元和造血干細胞等造血干細胞用于治療白血病，神經(jīng)干細胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療鐮狀細胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等思|維|辨|析易錯整合，判斷正誤。(1)體外培養(yǎng)的動物細胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖，另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖。(

)(2)進行動物細胞培養(yǎng)時常用胃蛋白酶分散成單個細胞。(

)(3)幼齡動物的細胞比老齡動物的細胞更容易進行動物細胞培養(yǎng)。(

)(4)干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。(

)√×√√延|伸|探|究1．動物細胞培養(yǎng)時，要將動物組織分散成單個細胞的原因是什么？提示：①保證細胞所需要的營養(yǎng)供應；②保證細胞內(nèi)有害代謝物的及時排出；③防止細胞與細胞靠在一起限制彼此的生長和增殖。2．為什么說iPS細胞的應用前景要優(yōu)于ES細胞？提示：ES細胞必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題，限制了在醫(yī)學上的應用。iPS細胞的誘導過程無須破壞胚胎，而且iPS細胞可以來自病人自身的體細胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應。剖析難點·考點突破重|難|精|講1．細胞貼壁和接觸抑制①細胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細胞貼附在瓶壁生長的現(xiàn)象；接觸抑制是指當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象。②細胞貼壁生長對培養(yǎng)瓶的要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。③打破接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。2．動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項目動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)生物學原理細胞增殖細胞全能性培養(yǎng)基性質(zhì)液體固體培養(yǎng)結(jié)果子代細胞新的植株應用是動物細胞工程的基礎快速繁殖、培育作物新品種、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)、作物脫毒項目動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)條件無菌、適宜的溫度和pH、營養(yǎng)等取材動物組織植物器官、組織或細胞培養(yǎng)對象分散的單個細胞植物器官、組織或細胞過程原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)脫分化、再分化細胞分裂、生長、分化特點貼壁生長、接觸抑制①脫分化形成愈傷組織；②再分化形成根、芽等考向一結(jié)合動物細胞培養(yǎng)，考查生命觀念下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．動物細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)與植物細胞培養(yǎng)不同B．傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞C．癌細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．動物細胞培養(yǎng)時需要添加抗生素以防止雜菌污染精|準|命|題例1C解析：

動物細胞培養(yǎng)需要血清、血漿等，植物細胞培養(yǎng)需要蔗糖等，A項正確；傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶等處理貼壁生長的細胞，不然會因為接觸抑制而無法繼續(xù)分裂，B項正確；癌細胞膜表面的糖蛋白減少，細胞間信息交流受到限制，在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C項錯誤；動物細胞培養(yǎng)時需添加一定量抗生素以防止雜菌污染，D正確。(1)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)①原代培養(yǎng)：動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。②傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)過程中，貼滿瓶壁的細胞需要重新用胰蛋白酶處理，然后分瓶培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。(2)區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關鍵是看用胰蛋白酶處理的對象①第一次：用胰蛋白酶對剪碎的動物組織進行處理，使其分散成單個細胞后進行培養(yǎng)，為原代培養(yǎng)。②第二次：細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制，用胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來，然后，將其分散到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)?！沧兪接柧?〕

(2024·山西運城高三模擬)對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培養(yǎng)，下列說法錯誤的是(

)A．在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．動物細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pHC．為了防止動物細胞培養(yǎng)過程中受污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清等一些天然成分C解析：

在利用肝組織塊制備細胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解組織細胞間的蛋白質(zhì)，得到單個細胞，A正確；動物細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B正確；為防止動物細胞培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，C錯誤；使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細胞時，通常要加入血清等一些天然成分，以利于動物細胞生長，D正確?？枷蚨@干細胞培養(yǎng)及其應用，考查社會責任

(2024·江蘇南京高三模擬)某學術期刊發(fā)表論文稱，利用人類多能干細胞培養(yǎng)的皮膚類器官在培養(yǎng)4～5個月后，形成了多層皮膚組織，包含毛囊、皮脂腺和神經(jīng)元回路，是迄今最逼真的人皮膚類器官。下列相關敘述正確的是(

)A．多能干細胞形成多層皮膚組織的過程中，遺傳物質(zhì)通常會發(fā)生改變B．多能干細胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織，說明動物的體細胞具有全能性C．給燒傷病人移植自身多能干細胞培養(yǎng)成的皮膚類器官可減弱免疫排斥反應D．該項研究結(jié)果表明多能干細胞可以分化成為人體內(nèi)所需的各種組織和器官例2C解析：

多能干細胞形成多層皮膚組織的過程中，遺傳物質(zhì)并未發(fā)生改變，只是發(fā)生了基因的選擇性表達，A錯誤；多能干細胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織，未分化成各種細胞或發(fā)育成完整個體，不能體現(xiàn)動物體細胞的全能性，B錯誤；研究結(jié)果表明，多能干細胞能形成多層皮膚組織，包含毛囊、皮脂腺和神經(jīng)元回路，但不能說明其能分化成各種組織和器官，D錯誤?！沧兪接柧?〕某大學的教授將4個關鍵基因移植入已分化的體細胞中并表達，使這個細胞成為具有類似干細胞功能的誘導多能干細胞(iPS細胞)。如圖為該技術在人體細胞中的實驗示意圖，據(jù)圖分析下列說法正確的是(

)A．iPS細胞與肌肉細胞有相同的遺傳物質(zhì)，關鍵基因在肌肉細胞中能復制、轉(zhuǎn)錄和翻譯B．過程①②③是基因選擇性表達的結(jié)果，圖示過程體現(xiàn)了iPS細胞具有全能性C．用該技術得到的新生器官替換供體病變器官，可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應D．4個關鍵基因表達過程將改變肌肉細胞的細胞質(zhì)環(huán)境，使iPS細胞功能趨向?qū)ｉT化C解析：

肌肉細胞中無關鍵基因，因此與iPS細胞的遺傳物質(zhì)不同；圖示過程中沒有分化成各種細胞或發(fā)育成完整個體，因此沒有體現(xiàn)出細胞的全能性；用該技術得到的新生器官替換供體病變器官，可避免異體移植產(chǎn)生的免疫排斥反應；由圖可知，4個關鍵基因的表達使肌肉細胞發(fā)生了“脫分化”，使iPS細胞功能趨向多能化?？键c二動物細胞融合技術與單克隆抗體必備知識·夯實基礎知|識|鞏|固1．動物細胞融合技術2．單克隆抗體的制備(1)制備原理①B淋巴細胞特點：一種B淋巴細胞只分泌___種特異性抗體。②骨髓瘤細胞特點：能在體外____________。③雜交瘤細胞的特點：既能____________，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的____________。一大量增殖大量增殖特定抗體(2)制備過程(3)優(yōu)點：能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以____________。大量制備3．單克隆抗體的應用(1)作為____________：在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。(2)運載藥物：抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將____________與能特異性識別腫瘤抗原的_______________結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC通常由______________________________三部分組成。(3)治療疾病。診斷試劑細胞毒素單克隆抗體抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)思|維|辨|析易錯整合，判斷正誤。(1)滅活的病毒能促進動物細胞融合，但不能促進植物細胞融合。(

)(2)多種B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合篩選后，還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。(

)(3)單克隆抗體能準確地識別抗原的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。(

)√√

√延|伸|探|究1．動物細胞融合過程中為什么未滅活的病毒不能作誘導劑？提示：未滅活的病毒會感染細胞，因而不能誘導細胞融合。2．制備單克隆抗體時，不直接用經(jīng)過免疫的B淋巴細胞來獲得單克隆抗體的原因是什么？提示：用于獲得雜交瘤細胞的B淋巴細胞為漿細胞，是高度分化的動物細胞，培養(yǎng)時很難恢復分裂能力，不能進行無限增殖，難以獲得足夠數(shù)量的單克隆抗體。剖析難點·考點突破重|難|精|講1．植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞增殖融合前處理除去細胞壁使細胞分散開項目植物體細胞雜交動物細胞融合相關酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導方法物理法：電融合法、離心法等；化學法：聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法等PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導法等結(jié)果雜種植株雜交細胞應用培育植物新品種等主要用于制備單克隆抗體意義突破遠緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴展了雜交的親本組合2.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導融合后會得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞項目第一次篩選第二次篩選篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和融合的具有同種核的細胞(“B—B”細胞、“瘤—瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B—瘤”細胞)才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群篩選目的得到雜交瘤細胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞拓展延伸：第一次篩選獲得雜交瘤細胞的方法：①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。②人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但不能分裂增殖。③鼠骨髓瘤細胞中只有D途徑，沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤，B淋巴細胞及同型融合細胞不能增殖，骨髓瘤細胞及同型融合細胞DNA合成的D途徑被氨基嘌呤阻斷也不能增殖，只有雜交瘤細胞能無限增殖?？枷蛞粐@動物細胞融合，考查理解能力關于動物細胞融合的說法，不正確的是(

)A．動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個細胞結(jié)合形成一個細胞的過程B．細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞C．細胞融合技術突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能D．常用的誘導動物細胞融合的方法有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導法和紫外線照射等精|準|命|題例1D解析：常用的誘導動物細胞融合的方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等，紫外線照射不是誘導動物細胞融合的方法。〔變式訓練1〕

(2022·江蘇卷改編)下圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人—鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進行基因定位。現(xiàn)檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述錯誤的有(

)A．加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B．細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細胞C．芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D．胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上B解析：分析題干信息：Ⅰ保留X、11號染色體，Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以控制芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，控制胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；控制磷酸甘油酸激酶合成的基因位于X號染色體上；控制乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。動物細胞融合過程中，可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導劑促進細胞融合，A正確；細胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體，故不會是鼠—鼠融合細胞，B錯誤；根據(jù)分析可知，芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，C、D正確?？枷蚨Y(jié)合單克隆抗體制備過程，考查科學探究能力

如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程。下列敘述錯誤的是(

)A．反復給小鼠注射甲的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的抗體B．人工誘導細胞融合獲得乙的常用方法是用滅活的病毒C．丁細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的抗體D．制備的單克隆抗體可以早期診斷人體胃癌的發(fā)生情況例2A解析：甲為抗原，反復給小鼠注射甲的目的是對小鼠進行免疫，以便產(chǎn)生更多的能分泌相應抗體的漿(B淋巴)細胞；人工誘導動物細胞融合的常用方法是用滅活的病毒誘導，還可以用聚乙二醇融合法、電融合法；丁細胞為既能無限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的特異性抗體；單克隆抗體特異性強、靈敏度高，可以在早期檢測出人體胃癌的發(fā)生情況?！沧兪接柧?〕

(2022·山東卷)如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是(

)A．雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞D解析：根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結(jié)合，A正確；根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物發(fā)揮相應的作用，B正確；由于雙抗是在兩種不同的抗原刺激下，B細胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細胞分泌形成的，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原—抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；同時注射2種抗原可刺激B細胞分化形成不同的漿細胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細胞，D錯誤?？键c三動物體細胞核移植技術和克隆動物必備知識·夯實基礎知|識|鞏|固1．動物細胞核移植技術(1)概念分析①供體：動物一個細胞的_________。②受體：去掉細胞核的____________。③結(jié)果：重新組合的細胞發(fā)育成_________，繼而發(fā)育成動物個體。④原理：_________________________。(2)哺乳動物核移植類型：______細胞核移植和體細胞核移植。細胞核卵母細胞新胚胎動物體細胞核具有全能性胚胎2．動物體細胞核移植技術(1)原理：動物體細胞核具有全能性。(2)過程(3)結(jié)果：產(chǎn)生新個體。提醒：選用去核卵母細胞的原因：卵母細胞比較大，容易操作；卵母細胞細胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富，含有促進核全能性表達的物質(zhì)。3．體細胞核移植技術的應用前景和存在的問題前景

畜牧業(yè)加速家畜____________進程，促進優(yōu)良畜群繁育醫(yī)藥衛(wèi)生

①作為_______________生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；②_____________________的細胞、組織和器官可以用于異種移植；③人核移植_______________經(jīng)過誘導分化形成相應的細胞、組織、器官，可用于器官移植保護瀕危物種增加瀕危物種的存活數(shù)量

問題①成功率_________；②絕大多數(shù)克隆動物存在______問題，表現(xiàn)出_____________________遺傳改良生物反應器轉(zhuǎn)基因克隆動物胚胎干細胞非常低健康遺傳和生理缺陷思|維|辨|析易錯整合，判斷正誤。(1)動物體細胞核移植的受體細胞必須是卵細胞。(

)(2)減數(shù)分裂Ⅱ中期(MⅡ期)卵母細胞中的“核”其實是紡錘體—染色體復合物。(

)(3)重構胚的激活可用Ca2＋載體、蛋白酶合成抑制劑等方法。(

)(4)重構胚是天然形成的胚胎，具有發(fā)育成完整個體的能力。(

)×

√√×延|伸|探|究1．為什么體細胞核移植較胚胎細胞核移植更困難？提示：由于動物胚胎細胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對容易；而動物體細胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。因此動物體細胞核移植的難度就明顯高于胚胎細胞核移植。2．受體細胞為什么選用卵母細胞？提示：體積大，易操作；去核時易于同時吸走第一極體；含有激發(fā)細胞核全能性的物質(zhì)。3．在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？提示：為使核移植的胚胎或動物的核遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價值的動物提供的體細胞，在供體細胞的細胞核移至受體細胞之前，必須將受體細胞的核遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐??？枷蚪Y(jié)合動物核移植技術與克隆動物，考查社會責任

(2024·遼寧模擬預測)如圖表示我國體細胞克隆猴的培育過程，下列說法正確的是(

)A．克隆小猴的遺傳物質(zhì)全部來自提供體細胞的胎猴B．滅活的仙臺病毒短暫處理是為了誘導細胞融合C．代孕母猴應使用一定的激素進行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理D．克隆猴培育應用了體外受精、胚胎移植和胚胎分割技術精|準|命|題例剖析難點·考點突破B解析：克隆小猴的細胞核由胎猴提供，細胞質(zhì)由提供卵母細胞的母猴提供，因此遺傳物質(zhì)大部分來自于提供體細胞的胎猴，A錯誤；在實際操作中將胎猴的體細胞注入去核卵母細胞時需要滅活的仙臺病毒誘導兩類細胞融合，B正確；代孕母猴作為胚胎的“受體”僅需使用激素進行同期發(fā)情處理，不需要超數(shù)排卵，C錯誤；克隆猴培育過程屬于無性繁殖，沒有應用體外受精技術，也沒有應用胚胎分割技術，D錯誤?！沧兪接柧殹?/p>

(2021·遼寧卷)如圖是利用體細胞核移植技術克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，有關敘述正確的是(

)A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B．過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D．過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至原腸胚后移植B解析：后代丁的細胞核遺傳物質(zhì)來自甲牛，細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自乙牛，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯誤；動物細胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣(保證細胞的有氧呼吸)和5%CO2(維持培養(yǎng)液的pH)的混合氣體，B正確；過程②常使用顯微操作去核法對卵母細胞進行處理，C錯誤；過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚后移植，D錯誤。素養(yǎng)提升·強化思維構|建|網(wǎng)|絡真|題|再|(zhì)現(xiàn)1．(2023·北京卷)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關制備過程的敘述不正確的是(

)A．需要使用動物細胞培養(yǎng)技術B．需要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細胞D．篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞D解析：單克隆抗體制備過程中需要對骨髓瘤細胞等進行培養(yǎng)，即需要使用動物細胞培養(yǎng)技術，A正確；該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，故應用PTH刺激小鼠，使其產(chǎn)生相應的B細胞，B正確；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，可利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細胞，C正確；由于一種B淋巴細胞經(jīng)分化形成漿細胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選出的單個雜交瘤細胞無法分泌多種抗體，D錯誤。故選D。2．(2023·湖北卷)某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細胞融合前，已免疫的脾細胞(含漿細胞)_________(填“需要”或“不需要”)通過原代培養(yǎng)擴大細胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是_________________________________________________________。不需要使細胞接觸處的磷脂分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基)，該培養(yǎng)基對___________________和________________________生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是__________________________________________________。未融合的親本細胞融合的具有同種核的細胞通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細胞(4)構建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是___。④解析：(1)漿細胞是高度分化的細胞，不能增殖，所以不需要通過原代培養(yǎng)擴大細胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細胞接觸處的磷脂分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細胞篩選過程中，用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選。在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，是運用了抗原—抗體雜交技術，抗體檢測呈陽性的細胞，即為所需的雜交瘤細胞。(4)DNA連接酶能連接DNA片段，催化合成磷酸二酯鍵，即將一條脫氧核苷酸5′端的磷酸基團與另一條脫氧核苷酸鏈的3′端的—OH相連，④符合題意。故選④。3．(2021·湖南卷)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚