![高考生物一輪復(fù)習(xí)專(zhuān)項(xiàng)練習(xí)單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程含答案_第1頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view12/M09/1A/27/wKhkGWZTV3aAdxMFAAGoBDwlR48240.jpg)
![高考生物一輪復(fù)習(xí)專(zhuān)項(xiàng)練習(xí)單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程含答案_第2頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view12/M09/1A/27/wKhkGWZTV3aAdxMFAAGoBDwlR482402.jpg)
![高考生物一輪復(fù)習(xí)專(zhuān)項(xiàng)練習(xí)單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程含答案_第3頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view12/M09/1A/27/wKhkGWZTV3aAdxMFAAGoBDwlR482403.jpg)
![高考生物一輪復(fù)習(xí)專(zhuān)項(xiàng)練習(xí)單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程含答案_第4頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view12/M09/1A/27/wKhkGWZTV3aAdxMFAAGoBDwlR482404.jpg)
![高考生物一輪復(fù)習(xí)專(zhuān)項(xiàng)練習(xí)單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程含答案_第5頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view12/M09/1A/27/wKhkGWZTV3aAdxMFAAGoBDwlR482405.jpg)
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程(滿(mǎn)分:100分)一、選擇題(本題共15小題,每小題2分,共30分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列關(guān)于一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物的描述,不正確的是()A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D.水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一2.將同一土壤樣本經(jīng)滅菌和未滅菌處理后,分別放在兩個(gè)培養(yǎng)皿中,在土壤表面分別放3張廢紙(主要成分是纖維素)。然后將兩個(gè)培養(yǎng)皿放在有較高濕度的培養(yǎng)室中,4~6周后觀察兩個(gè)培養(yǎng)皿的變化情況(如下圖)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.土壤微生物能夠?qū)U紙中的有機(jī)物分解成無(wú)機(jī)物B.將培養(yǎng)皿和土壤滅菌的方法可以是高壓蒸汽滅菌法C.若土壤濕度不夠,可加入些清水以控制無(wú)關(guān)變量D.若某酵母菌不能利用廢紙,可能是由于缺乏相應(yīng)分解酶系3.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.兩種不同植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程中會(huì)發(fā)生染色體變異B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分明確、含量確定,可嚴(yán)格配制C.顯微操作去核法是核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法D.電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合4.下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖分析,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.圖中①②所示的結(jié)構(gòu)分別是細(xì)胞核、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.圖中③所示的生物工程技術(shù)是體細(xì)胞核移植技術(shù)C.完成過(guò)程④通常采用的方法是顯微注射技術(shù)D.圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是避免遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙5.質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如圖所示,通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否導(dǎo)入成功。外源基因插入的位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同,表格中是外源基因插入的位置(插入點(diǎn)有a、b、c),請(qǐng)根據(jù)表中提供的細(xì)菌生長(zhǎng)情況,推測(cè)①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn),正確的一組是()類(lèi)型細(xì)菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況①能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)②能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)③不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)A.①是c;②是b;③是aB.①是a和b;②是a;③是cC.①是a和b;②是b;③是aD.①是c;②是a;③是b6.下列關(guān)于“篩選”的敘述,錯(cuò)誤的是()A.在誘變育種、雜交育種、單倍體育種過(guò)程中都要進(jìn)行篩選B.在制備單克隆抗體和利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得雜種植株的過(guò)程中都要進(jìn)行篩選C.在小鼠胚胎細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,通過(guò)篩選可以獲得具有無(wú)限分裂能力的細(xì)胞D.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需要進(jìn)行篩選7.下圖表示改造哺乳動(dòng)物遺傳特性的三種途徑。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞通常是受精卵B.動(dòng)物2體內(nèi)各體細(xì)胞的基因種類(lèi)相同C.獲得動(dòng)物3的重組細(xì)胞具有全能性D.上述動(dòng)物的獲得均需運(yùn)用胚胎移植8.下列實(shí)驗(yàn)中,不能達(dá)成實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?)A.PCR技術(shù)中用高溫對(duì)DNA解旋B.用Taq聚合酶構(gòu)建表達(dá)載體C.用胰蛋白酶制備動(dòng)物細(xì)胞懸液D.用纖維素酶和果膠酶制備植物原生質(zhì)體9.下圖表示的是三種黏性末端,下列說(shuō)法正確的是()A.若乙中的T處發(fā)生突變,同一種限制酶可能就無(wú)法識(shí)別該切割位點(diǎn)B.甲、丙兩種黏性末端可以互補(bǔ)形成新的雙鏈C.切割得到的多個(gè)DNA片段可以用DNA聚合酶重組D.目前常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒等幾類(lèi)原核生物10.為解決大面積燒傷病人的植皮難題,科學(xué)家研制出人造皮膚,研制過(guò)程中需要將人的皮膚細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)液配制除必需的已知成分外,還必須加入天然成分,細(xì)胞方可正常生長(zhǎng)和增殖。下列敘述正確的是()A.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入抗生素就可以為細(xì)胞培養(yǎng)提供無(wú)菌條件B.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中只需不斷通入氧氣,就能保證細(xì)胞正常生命活動(dòng)C.加入的天然成分是血清或血漿,用來(lái)補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需的物質(zhì)D.經(jīng)培養(yǎng)可得到由多層細(xì)胞構(gòu)成的人造皮膚,能直接用于移植11.治療性克隆有望解決供體器官短缺和器官移植出現(xiàn)的排異反應(yīng),下圖表示治療性克隆的部分過(guò)程。據(jù)圖判斷,下列說(shuō)法正確的是()A.過(guò)程①表示細(xì)胞核移植B.細(xì)胞A常用受精卵C.過(guò)程②要先讓胚胎干細(xì)胞脫分化D.③可治療患者因缺乏胰島素受體引起的糖尿病12.某研究小組為了研制預(yù)防甲型H1N1流感病毒的疫苗,開(kāi)展了前期研究工作,其簡(jiǎn)要的操作流程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.步驟①所代表的過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄B.步驟②需使用限制酶和DNA連接酶C.步驟③可用CaCl2溶液處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài)D.步驟④表達(dá)出甲型H1N1流感病毒的抗體13.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物含有Bt蛋白,也叫毒蛋白,對(duì)人體無(wú)毒,但是鱗翅目昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)的腸道里有Bt蛋白的受體,Bt蛋白與受體結(jié)合導(dǎo)致腸道壁穿孔,使幼蟲(chóng)死亡。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.促進(jìn)Bt蛋白的合成有助于提高植物的抗蟲(chóng)效果B.可通過(guò)DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)Bt蛋白基因的表達(dá)C.將Bt蛋白基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法可使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法D.將植物材料和農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)之前,植物材料需要消毒處理14.下列關(guān)于生物工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)紫草素的工廠化生產(chǎn)B.由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,可能會(huì)發(fā)生基因突變C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交所依據(jù)的原理相同,都能形成雜種個(gè)體D.試管動(dòng)物技術(shù)可以充分發(fā)揮優(yōu)良動(dòng)物的繁殖潛力15.為了對(duì)重金屬污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù),研究者將從楊樹(shù)中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動(dòng)子連接,導(dǎo)入楊樹(shù)基因組中(如圖)。注:①②③④表示引物。為檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因,同時(shí)避免內(nèi)源HMA3基因的干擾,在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),應(yīng)選擇的引物組合是()A.①+③ B.①+②C.③+② D.③+④二、選擇題(本題共5小題,每小題3分,共15分。每小題有一個(gè)或多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求,全部選對(duì)得3分,選對(duì)但不全的得1分,有選錯(cuò)的得0分)16.精氨酸依賴(lài)營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥(niǎo)氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶,不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),但可作為鳥(niǎo)氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴(lài)營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌并進(jìn)行篩選的過(guò)程示意圖,過(guò)程②將紫外線照射處理的菌液接種在某培養(yǎng)基上,培養(yǎng)至菌落不再增加時(shí),平板上的菌落如圖甲所示。過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加某種物質(zhì),繼續(xù)培養(yǎng),得到如圖乙所示平板。下列相關(guān)敘述正確的是()A.紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生染色體變異B.圖乙中菌落B為精氨酸依賴(lài)營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌C.過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是鳥(niǎo)氨酸D.過(guò)程②所用培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基17.下圖為某同學(xué)構(gòu)建的細(xì)胞工程知識(shí)框架。以下相關(guān)說(shuō)法正確的是()A.圖中①指植物體細(xì)胞雜交B.圖中②屬于分子水平上的生物工程技術(shù)C.植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)依據(jù)的原理都是細(xì)胞的全能性D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)在單克隆抗體制備中都得到了應(yīng)用18.番茄葉片受害蟲(chóng)的損傷后,葉肉細(xì)胞迅速合成蛋白酶抑制劑,抑制害蟲(chóng)的消化作用。人們嘗試將番茄的蛋白酶抑制劑基因?qū)胗衩?以對(duì)付猖獗的玉米螟。下圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)玉米的流程圖,下列描述正確的是()A.用限制性?xún)?nèi)切核酸酶切割番茄的DNA得到的產(chǎn)物就是蛋白酶抑制劑基因B.用氯化鈣處理玉米受體細(xì)胞,有利于含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入C.重組Ti質(zhì)粒應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以啟動(dòng)蛋白酶抑制劑基因的轉(zhuǎn)錄D.若將目的基因?qū)胗衩谆ǚ奂?xì)胞,通過(guò)花藥離體培養(yǎng)可獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米19.小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞,制備流程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.為獲得更多的囊胚,采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同,所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)20.在許多生物實(shí)驗(yàn)中,為保證實(shí)驗(yàn)成功,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備、用品及材料進(jìn)行滅菌或消毒。下表所列實(shí)驗(yàn)、處理對(duì)象與處理方法的對(duì)應(yīng)關(guān)系中,正確的是()選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)處理對(duì)象處理方法A植物組織培養(yǎng)外植體用70%的酒精和氯化汞(或次氯酸鈉)消毒B土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)涂布器濕熱滅菌C聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段微量離心管、一次性吸液槍頭用70%的酒精消毒D分解纖維素的微生物的分離選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌三、非選擇題(本題共5小題,共55分)21.(14分)X基因存在于水稻基因組中,僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正常表達(dá),但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究X基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響,設(shè)計(jì)了如圖1所示實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)為使X基因能在卵細(xì)胞中成功表達(dá),需在基因表達(dá)載體中插入。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入水稻愈傷組織細(xì)胞,最常用的方法是。
(2)為篩選出含有重組質(zhì)粒的菌落,需采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選。符合要求的菌落在只含潮霉素、只含卡那霉素、含潮霉素和卡那霉素三種培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況分別為(填“生長(zhǎng)”或“不生長(zhǎng)”)。
(3)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,還應(yīng)含有;圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒片段中的相應(yīng)位置,PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是。某學(xué)生從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,則該菌落中含有的質(zhì)粒(填“是”或“不是”)正確插入目的基因的重組質(zhì)粒。
(4)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而非轉(zhuǎn)基因水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不能發(fā)育,由此表明
。
22.(14分)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收,只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過(guò)程如圖1所示,圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。圖1本課題使用的培養(yǎng)基配方KH2PO41.4gNa2HPO4 2.1gMgSO4·7H2O 0.2g葡萄糖 10.0g尿素 1.0g瓊脂 15.0g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL。圖2(1)圖2所示培養(yǎng)基,為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是、。
(2)甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比,唯一的區(qū)別是。
(3)在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋,如何確定樣品的稀釋操作是否成功?(4)甲、乙培養(yǎng)基都是選擇培養(yǎng)基,如何確定該培養(yǎng)基能夠?qū)ν寥乐形⑸锲鸬胶Y選作用?(5)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目,除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外,也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。
23.(12分)枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株(B菌),從中克隆得到了一種纖維素酶(C1酶)基因。將獲得的C1酶基因與高效表達(dá)載體(HT質(zhì)粒)連接,再導(dǎo)入B菌,以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。(1)纖維素屬于糖,因此經(jīng)過(guò)一系列酶催化最終可降解成單糖,該單糖是。
(2)對(duì)克隆得到的C1酶基因測(cè)序,與數(shù)據(jù)庫(kù)中的C1酶基因編碼序列相比有兩個(gè)堿基對(duì)不同,但兩者編碼出的蛋白的氨基酸序列相同,這是因?yàn)?/p>
。
(3)C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈,轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身的延伸方向?yàn)?'→3'。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接,克隆C1酶基因時(shí)在其兩端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位點(diǎn)。該基因內(nèi)部沒(méi)有這兩種酶切位點(diǎn)。圖1中酶切位點(diǎn)1和2所對(duì)應(yīng)的酶分別是。
(4)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組,一組接種工程菌,對(duì)照組1不進(jìn)行處理,對(duì)照組2進(jìn)行相應(yīng)處理。在相同條件下培養(yǎng)96h,檢測(cè)培養(yǎng)基中纖維素的含量。結(jié)果(圖2)說(shuō)明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)。對(duì)照組2的處理應(yīng)為。
(5)預(yù)期該工程菌在處理廢棄物以保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用
。(舉一例)
24.(9分)細(xì)胞工程可分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程等,請(qǐng)回答下列關(guān)于細(xì)胞工程的問(wèn)題。(1)圖1所示為植物體細(xì)胞雜交的流程。圖1中“去壁”要使用的酶是;①過(guò)程常用的方法有物理法和化學(xué)法,物理法包括等;③過(guò)程和④過(guò)程分別表示。
(2)圖2所示為制備單克隆抗體的流程。圖中“篩選”包括選擇培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè),其中能在特定的選擇培養(yǎng)基中存活的是,而抗體陽(yáng)性檢測(cè)的目的是。
(3)圖2中,促進(jìn)細(xì)胞融合的方法中,不同于圖1中促進(jìn)細(xì)胞融合所涉及的方法是;篩選出的目標(biāo)細(xì)胞還可以注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從中提取單克隆抗體。與普通抗體相比,單克隆抗體具有等優(yōu)點(diǎn)。
25.(6分)閱讀以下材料,回答下列問(wèn)題。材料11890年,Heape將2個(gè)四細(xì)胞時(shí)期的安哥拉兔胚胎移植到一只受精的比利時(shí)兔的輸卵管中,產(chǎn)下了4只比利時(shí)幼兔和2只安哥拉幼兔,這是第一次成功移植哺乳動(dòng)物胚胎。材料2Dziuk等研究了利用促卵泡激素進(jìn)行超數(shù)排卵的方法,最近有報(bào)道指出,使用透明質(zhì)酸作為稀釋劑注射1或2次促卵泡激素的效果與用鹽水為稀釋劑多次注射促卵泡激素的效果一致。材料3為了創(chuàng)造出相同的后代,德國(guó)科學(xué)家Spermann首次在2細(xì)胞蠑螈胚胎周?chē)瞪弦豢|胎發(fā),直到細(xì)胞分離,隨后,每個(gè)細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)成年個(gè)體。(1)胚胎工程是對(duì)動(dòng)物生殖細(xì)胞、所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。在胚胎移植時(shí)對(duì)受體的要求是。
(2)材料1中,比利時(shí)兔產(chǎn)下安哥拉幼兔,說(shuō)明
。
(3)從材料2最新報(bào)道中還可得出超數(shù)排卵的數(shù)量與有關(guān)。
(4)從材料3中可知,胚胎細(xì)胞在功能上具有,若在囊胚期進(jìn)行分割時(shí)應(yīng)注意。
單元質(zhì)檢卷十生物技術(shù)與工程1.B氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素,A項(xiàng)正確;該微生物的碳源是CO2,屬于無(wú)機(jī)物,不能作為微生物的能源物質(zhì),B項(xiàng)錯(cuò)誤;無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),C項(xiàng)正確;水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一,D項(xiàng)正確。2.C廢紙的主要成分是纖維素,土壤中分解纖維素的微生物可以利用廢紙中的纖維素獲取物質(zhì)和能量,A項(xiàng)正確;培養(yǎng)皿和土壤既可以采用干熱滅菌法,又可以采用高壓蒸汽滅菌法,B項(xiàng)正確;若土壤濕度不夠,可加入些無(wú)菌水,以控制濕度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,C項(xiàng)錯(cuò)誤;某酵母菌不能利用廢紙,可能的原因是缺乏相應(yīng)分解酶系(即缺乏纖維素酶和半纖維素酶),D項(xiàng)正確。3.B兩種不同植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程中會(huì)發(fā)生染色體數(shù)目變異,A項(xiàng)正確;在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱(chēng)為合成培養(yǎng)基,通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量血清等一些天然成分,B項(xiàng)錯(cuò)誤;目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法,C項(xiàng)正確;植物原生質(zhì)體融合的誘導(dǎo)方法包括化學(xué)法(聚乙二醇)、物理法(離心、電刺激),動(dòng)物細(xì)胞融合除上述方法外,還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)融合,故電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合,D項(xiàng)正確。4.D圖中③所示的生物工程技術(shù)是體細(xì)胞核移植技術(shù),①所示的結(jié)構(gòu)是細(xì)胞核;過(guò)程④為轉(zhuǎn)基因技術(shù),受體細(xì)胞②為囊胚中具有全能性的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞,A、B兩項(xiàng)正確;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常采用顯微注射法,C項(xiàng)正確;圖示方法獲得的胰島B細(xì)胞的遺傳物質(zhì)來(lái)自患者,與一般的異體移植相比,最大的優(yōu)點(diǎn)是可避免免疫排斥反應(yīng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。5.A第①組:細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基上與含四環(huán)素的培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng),說(shuō)明抗氨芐青霉素基因與抗四環(huán)素基因均沒(méi)有被破壞,因此外源基因的插入點(diǎn)是c。第②組:細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng),在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),說(shuō)明抗氨芐青霉素基因沒(méi)有被破壞,但抗四環(huán)素基因遭到了破壞,所以外源基因的插入點(diǎn)是b。第③組:細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng),說(shuō)明抗氨芐青霉素基因遭到了破壞,但抗四環(huán)素基因沒(méi)有被破壞,所以外源基因的插入點(diǎn)是a。6.C在誘變育種、雜交育種、單倍體育種過(guò)程中,均需要從眾多的不同表型的子代中進(jìn)行定向的選擇,篩選出符合人類(lèi)所需要的品種,A項(xiàng)正確;在制備單克隆抗體過(guò)程中至少需要兩次篩選,分別篩選出雜交瘤細(xì)胞以及能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中需篩選出融合的雜種細(xì)胞,B項(xiàng)正確;在小鼠胚胎細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,具有無(wú)限分裂能力的細(xì)胞在培養(yǎng)液中得以保留,其他細(xì)胞衰亡,不需要篩選,C項(xiàng)錯(cuò)誤;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需要進(jìn)行篩選,以便獲得成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,D項(xiàng)正確。7.B動(dòng)物1為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,受體細(xì)胞通常是受精卵,A項(xiàng)正確;動(dòng)物2由于導(dǎo)入外源基因的受體細(xì)胞注入囊胚的某一部位,將來(lái)發(fā)育成的動(dòng)物體各部位并不都含外源基因,B項(xiàng)錯(cuò)誤;動(dòng)物3為克隆動(dòng)物,重組細(xì)胞能夠發(fā)育成一個(gè)個(gè)體,具有全能性,C項(xiàng)正確;胚胎移植是胚胎工程其他技術(shù)手段的最后一道“工序”,要把早期胚胎培育成一個(gè)個(gè)體,必須經(jīng)過(guò)胚胎移植,D項(xiàng)正確。8.BPCR技術(shù)中,高溫會(huì)破壞DNA雙鏈間的氫鍵,進(jìn)而達(dá)到解旋的目的,因此不需要解旋酶的參與,A項(xiàng)正確;TaqDNA聚合酶是在PCR中溫延伸過(guò)程中發(fā)揮作用的,目的是合成DNA的子鏈,B項(xiàng)錯(cuò)誤;用胰蛋白酶或膠原蛋白酶可以制備動(dòng)物細(xì)胞懸液,C項(xiàng)正確;植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,因此用纖維素酶和果膠酶可以制備植物原生質(zhì)體,D項(xiàng)正確。9.A限制酶具有專(zhuān)一性,若乙中的T處發(fā)生突變,同一種限制酶可能就無(wú)法識(shí)別該切割位點(diǎn),A項(xiàng)正確;甲的末端序列是AATT,丙的末端序列是TTAA,黏性末端相同的才可以進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)形成新的雙鏈,B項(xiàng)錯(cuò)誤;切割得到的多個(gè)DNA片段可以用DNA連接酶重組,C項(xiàng)錯(cuò)誤;質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子,噬菌體和動(dòng)植物病毒都沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),它們都不屬于原核生物,D項(xiàng)錯(cuò)誤。10.C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理,還要加入抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染,A項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需適宜的氣體環(huán)境(95%的空氣和5%的CO2)、適宜的溫度和pH、無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境等,B項(xiàng)錯(cuò)誤;在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常培養(yǎng)液中需加入血清、血漿等一些天然成分,主要目的是為細(xì)胞提供促生長(zhǎng)因子,以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需的物質(zhì),C項(xiàng)正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中存在接觸抑制,當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞相互靠近時(shí),就會(huì)彼此限制細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,經(jīng)培養(yǎng)后的細(xì)胞還需要經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化形成特定的組織才能移植,D項(xiàng)錯(cuò)誤。11.A圖示表示治療性克隆的過(guò)程,圖中①過(guò)程表示細(xì)胞核移植,A項(xiàng)正確;治療性克隆技術(shù)利用了核移植,核移植過(guò)程中的受體細(xì)胞通常為去核的卵母細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;根據(jù)以上分析可知,過(guò)程②表示胚胎干細(xì)胞的分裂和分化過(guò)程,C項(xiàng)錯(cuò)誤;③可治療患者因缺乏胰島素引起的糖尿病,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12.D步驟①的模板是RNA,產(chǎn)物是DNA,為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程,A項(xiàng)正確;步驟②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程,需使用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體并用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA,B項(xiàng)正確;步驟③將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞,可用CaCl2處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài),C項(xiàng)正確;步驟④為目的基因的表達(dá)過(guò)程,由于目的基因攜帶的是病毒的遺傳信息,故表達(dá)出的是甲型H1N1流感病毒的蛋白質(zhì),不是抗體,D項(xiàng)錯(cuò)誤。13.BBt蛋白可以殺死昆蟲(chóng)幼蟲(chóng),A項(xiàng)正確;通過(guò)抗原—抗體檢測(cè)法檢測(cè)Bt蛋白基因的表達(dá),B項(xiàng)錯(cuò)誤;將Bt蛋白基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA片段,用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,還可用基因槍法直接將Bt基因?qū)胫参锛?xì)胞,C項(xiàng)正確;消毒處理可以排除其他病原體對(duì)植物材料的干擾,D項(xiàng)正確。14.C可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得愈傷組織,實(shí)現(xiàn)紫草素的工廠化生產(chǎn),A項(xiàng)正確;由根尖細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,可能會(huì)發(fā)生基因突變,B項(xiàng)正確;動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比,誘導(dǎo)融合的方法、所用的技術(shù)手段、所依據(jù)的原理均不完全相同,動(dòng)物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體,而植物細(xì)胞融合能形成雜種個(gè)體,但兩者都能形成雜種細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;試管動(dòng)物技術(shù)是進(jìn)行體外受精,可以充分發(fā)揮優(yōu)良動(dòng)物的繁殖潛力,D項(xiàng)正確。15.B根據(jù)圖示中引物的位置可知,引物①擴(kuò)增的片段含有啟動(dòng)子和HMA3基因,引物③擴(kuò)增的片段不含啟動(dòng)子,引物②擴(kuò)增的片段既含有啟動(dòng)子,又含有HMA3基因序列。圖示中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動(dòng)子連接,導(dǎo)入楊樹(shù)基因組中,若要檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因和高效啟動(dòng)子,需要檢測(cè)是否含有高效啟動(dòng)子序列和HMA3基因序列,應(yīng)選擇的引物組合是①+②。16.BD谷氨酸棒狀桿菌是原核生物,沒(méi)有染色體,紫外線照射只能導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變,A項(xiàng)錯(cuò)誤;與圖甲平板相比,圖乙平板上菌落多,說(shuō)明過(guò)程③往培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是精氨酸,新出現(xiàn)的菌落為精氨酸依賴(lài)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株,B項(xiàng)正確、C項(xiàng)錯(cuò)誤;圖甲平板上只有野生型菌株,因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基,D項(xiàng)正確。17.AD結(jié)合分析可知,圖中①指植物體細(xì)胞雜交,A項(xiàng)正確;圖中②屬于細(xì)胞水平上的生物工程技術(shù),B項(xiàng)錯(cuò)誤;植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性,而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞增殖,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果不是形成個(gè)體,C項(xiàng)錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)都是單克隆抗體制備中用到的主要技術(shù)手段,D項(xiàng)正確。18.C目的基因是用限制性?xún)?nèi)切核酸酶將DNA酶切后經(jīng)篩選得到的,A項(xiàng)錯(cuò)誤;氯化鈣用于處理細(xì)菌細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;基因成功表達(dá)的前提是能轉(zhuǎn)錄和翻譯,重組Ti質(zhì)粒應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的起點(diǎn)才能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,C項(xiàng)正確;花藥離體培養(yǎng)得到的是玉米的單倍體,需再用秋水仙素處理單倍體,使染色體加倍才能得到穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米,D項(xiàng)錯(cuò)誤。19.ABC雄鼠一次產(chǎn)生的精子數(shù)以?xún)|計(jì),但雌鼠產(chǎn)生的卵細(xì)胞數(shù)量較少,因此為獲得更多的囊胚,應(yīng)對(duì)母本進(jìn)行超數(shù)排卵處理,使其產(chǎn)生更多的卵細(xì)胞,從而形成更多的胚胎,A項(xiàng)錯(cuò)誤。囊胚的所有細(xì)胞都來(lái)自受精卵的有絲分裂,不同細(xì)胞中的核基因相同,B項(xiàng)錯(cuò)誤。用胰蛋白酶將細(xì)胞間的蛋白質(zhì)消化后可使胚胎干細(xì)胞分散,若將膜蛋白消化,則會(huì)破壞胚胎干細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境,各種動(dòng)物細(xì)胞都需要在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),D項(xiàng)正確。20.AD在植物組織培養(yǎng)中,外植體在70%的酒精中浸泡10min,再放入5%次氯酸鈉溶液中浸泡5min,然后在另一5%次氯酸鈉溶液中浸泡5min,最后在超凈工作臺(tái)中用無(wú)菌水清洗,A項(xiàng)正確;土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)采用稀釋涂布平板法,分離時(shí)需要使用涂布器進(jìn)行涂布,涂布器使用時(shí),先用70%的酒精浸泡,再用酒精燈火焰灼燒,B項(xiàng)錯(cuò)誤;在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段的實(shí)驗(yàn)中,使用的微量離心管、一次性吸液槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理,C項(xiàng)錯(cuò)誤;從土壤中分離分解纖維素的微生物,利用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,然后再利用剛果紅鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行鑒別,培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法,D項(xiàng)正確。21.答案:(1)可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)X基因轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子(和終止子)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(2)不生長(zhǎng)、生長(zhǎng)、不生長(zhǎng)(3)Taq酶(或耐高溫的DNA聚合酶)甲、乙不是(4)X基因在卵細(xì)胞成功表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚解析:(1)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需蛋白質(zhì)。因此為使X基因能在卵細(xì)胞中成功表達(dá),需在基因表達(dá)載體中插入可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)X基因轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子(和終止子)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入水稻愈傷組織細(xì)胞(植物細(xì)胞),最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(2)為篩選出含有重組質(zhì)粒的菌落,需采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選。由圖1可知,目的基因插入質(zhì)粒的潮霉素抗性基因內(nèi),而卡那霉素抗性基因不受影響,則含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌對(duì)卡那霉素有抗性,而對(duì)潮霉素?zé)o抗性,因此含重組質(zhì)粒的菌落在只含潮霉素、只含卡那霉素、含潮霉素和卡那霉素三種培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況分別為不生長(zhǎng)、生長(zhǎng)、不生長(zhǎng)。(3)PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,還應(yīng)含有Taq酶;圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒片段中的相應(yīng)位置,由于PCR技術(shù)要求兩種引物分別與目的基因的兩條單鏈結(jié)合,沿相反方向合成子鏈,因此PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是甲、乙。根據(jù)圖2可知,正確選擇甲、乙引物后,擴(kuò)增出的目的片段長(zhǎng)度應(yīng)為340bp,而該學(xué)生從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,則該菌落中含有的質(zhì)粒不是正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,可能該生錯(cuò)選了乙、丙引物對(duì),且擴(kuò)增出了目的基因反向連接后的片段。(4)從轉(zhuǎn)X基因二倍體植株的未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而非轉(zhuǎn)基因水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不能發(fā)育,由此表明X基因在卵細(xì)胞成功表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。22.答案:(1)葡萄糖尿素(2)甲中培養(yǎng)基無(wú)瓊脂(3)稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在30~300的平板(則說(shuō)明稀釋操作比較成功)。(4)將土壤稀釋液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后生成的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目(則說(shuō)明該培養(yǎng)基能夠?qū)ν寥乐形⑸锲鸬胶Y選作用)。(5)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)解析:(1)圖2所示培養(yǎng)基,為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是葡萄糖、尿素。(2)根據(jù)圖1所示的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程,甲中裝的是液體培養(yǎng)基,因此與乙中培養(yǎng)基的成分相比,唯一的區(qū)別是甲中培養(yǎng)基無(wú)瓊脂。(3)在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋,再進(jìn)行涂布,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。所以如果能得到菌落數(shù)目在30~300的平板,則說(shuō)明稀釋操作比較成功。(4)甲、乙培養(yǎng)基都是以尿素作為唯一的氮源,
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 農(nóng)村溝渠清淤合同范本
- 2025年度滑雪場(chǎng)教練員培訓(xùn)與青少年滑雪普及推廣合同
- 2025年度教育管理信息平臺(tái)數(shù)據(jù)遷移與集成合同
- 監(jiān)理工作中施工單位的資金管理
- 農(nóng)村垃圾地合同范本
- 190萬(wàn)投資理財(cái)合同范本
- 共同辦廠合同范本
- 醫(yī)師兼職合同范本
- 2025年金屬真空鍍膜行業(yè)深度研究分析報(bào)告
- 北京保安勞務(wù)合同范例
- GB 4793-2024測(cè)量、控制和實(shí)驗(yàn)室用電氣設(shè)備安全技術(shù)規(guī)范
- 廣電雙向網(wǎng)改造技術(shù)建議書(shū)
- 項(xiàng)目人員管理方案
- 重大火災(zāi)隱患判定方法
- 2024年電工(高級(jí)技師)考前必刷必練題庫(kù)500題(含真題、必會(huì)題)
- 《證券投資學(xué)》全套教學(xué)課件
- 2024年全國(guó)各地中考語(yǔ)文試題匯編:名著閱讀
- 公司組織架構(gòu)與管理體系制度
- 2024-2030年中國(guó)涂碳箔行業(yè)現(xiàn)狀調(diào)查與投資策略分析研究報(bào)告
- 2024-2030年中國(guó)派對(duì)用品行業(yè)供需規(guī)模調(diào)研及發(fā)展趨勢(shì)預(yù)測(cè)研究報(bào)告
- 傳染病監(jiān)測(cè)預(yù)警與應(yīng)急指揮大數(shù)據(jù)引擎平臺(tái)建設(shè)需求
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論