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第第頁土壤硝態(tài)氮試劑盒說明書土壤硝態(tài)氮試劑盒說明書微量法100T/96S注意：正式測定之前選擇23個預期差別大的樣本做猜測定。測定意義：硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中的有機物分解生成銨鹽，被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮。土壤中硝態(tài)氮是高等植物汲取氮的重要形式之一，其含量直接關系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。測定原理：在濃酸條件下，NO3與水楊酸反應，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH12）呈黃色，在肯定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計算得硝態(tài)氮含量。自備試驗用品及儀器：蒸餾水、天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀。試劑構成和配制：試劑一：粉劑×2支，4℃避光保管。臨用前依據(jù)用量每支加1mL濃硫酸充分溶解。試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保管。樣本處理：依照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g新鮮土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，置于振蕩儀中振蕩提取1h，25℃，10000g離心10min，取上清待測。測定操作表：1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)整波長至410nm，蒸餾水調(diào)零。2、操作表（于EP管中加入下列試劑）空白管測定管樣本（μL）10蒸餾水（μL）10試劑一（μL）2020充分混勻，25℃靜置30min試劑二（μL）475475混勻，渦旋振蕩，使顯現(xiàn)的沉淀充分溶解，轉移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測定410nm處吸光值A，△A=A測定管A空白管計算公式：a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下標準曲線：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997NO3——N含量（mg/kg鮮重）=（△A0.0073）÷0.0156÷（W÷V樣總）=64.1×（△A0.0073）÷WV樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，gb.用96孔板測定的計算公式如下標準曲線：y=0.0078x+0.0073，R2=0.9997NO3——N（mg/kg鮮重）=（△A0.0073）÷0.0078÷（W÷V樣總）=128.2×（△A0.0073）÷WV樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g注意事項：1.硝酸根不為土壤膠體吸附，且易溶于水，很容易在土壤內(nèi)部移動，所以測定此指標時應注意采樣深度全都。2.土壤經(jīng)風干或者烘干很容易引起NO3——N的變動，所以最好采用新鮮土壤進行測定，以準確反映該指標含量。3.試劑一配制好后盡快使用，4℃可

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