木瓜粉蚧檢疫鑒定方法

ICS

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中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/TXXXXX—XXXX

木瓜秀粉蚧檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofParacoccusmarginatusWilliams&Granarade

Willink

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（征求意見稿）

（2022年2月15日）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

GB/TXXXXX—XXXX

木瓜秀粉蚧檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了木瓜秀粉蚧ParacoccusmarginatusWilliams&GranaradeWillink的檢疫鑒定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于木瓜秀粉蚧的檢疫鑒定。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

腹臍circulus

又名腹裂，位于腹部腹面第3、4腹節(jié)的中部，常以局部地角質(zhì)化的狹窄的硬化框?yàn)榻缦?，多為圓

形、卵圓形、長(zhǎng)方形或沙漏形的表皮區(qū)，其數(shù)目和大小在不同的蚧蟲種類中變化很大，也有的種類無(wú)腹

臍。

3.2

背孔o(hù)stioles

又名背裂。一般兩對(duì)，均在背板兩側(cè)，前背孔在前胸，后背孔在第6腹節(jié)。其形如人眼，具二片孔

瓣，瓣上有三格腺和毛，瓣緣或硬化。

3.3

肛環(huán)analring

位于背末，是一個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)。環(huán)上有成列環(huán)孔和6根環(huán)毛，此環(huán)為肛門的開口。

3.4

刺孔群cerarius

一般分布在背緣，稱背緣刺孔群或簡(jiǎn)稱刺孔群，有的分布在體背則稱背刺孔群。每一刺孔群一般有

1對(duì)錐狀刺（簡(jiǎn)稱錐刺），一群三格腺，另外或有數(shù)根毛（簡(jiǎn)稱附毛）。這是緣蠟絲的分泌和支持機(jī)構(gòu)。

3.5

盤孔diskpores

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圓孔狀的泌蠟結(jié)構(gòu)，此類孔可分為：三格腺，呈三角形或近三角形，其內(nèi)具三格；多格腺，圓形，

具1中心格，周圍多格（6格～12格），為盤腺中最大者，一般分布在陰門附近；五格腺，大小介于

三格腺和多格腺之間，其中心1格，周圍5格，呈五角形或近五角形。

3.6

柱腺cylindricalducts

管狀的泌蠟結(jié)構(gòu)，又稱管腺或領(lǐng)腺，開口處內(nèi)向有不同高度的環(huán)或領(lǐng)。

3.7

尾瓣anallobes

腹末節(jié)之突出部分。

4木瓜秀粉蚧基本信息

中文名：木瓜秀粉蚧。

學(xué)名：ParacoccusmarginatusWilliams&GranaradeWillink，1992。

異名：無(wú)。

中文別名：木瓜粉蚧。

英文名：papayamealybug。

分類地位：半翅目Hemiptera，胸喙亞目Sternorrhyncha，粉蚧科Pseudococcidae，秀粉蚧屬Paracoccus，

木瓜秀粉蚧是一種重要的農(nóng)林害蟲，可通過空氣氣流進(jìn)行短距離擴(kuò)散，也可借助水、床土、人類、

家畜和野生動(dòng)物擴(kuò)散，易隨果實(shí)、苗木和接穗的調(diào)運(yùn)而遠(yuǎn)距離傳播。

木瓜秀粉蚧其他信息參見附錄A。

5方法原理

5.1形態(tài)學(xué)鑒定

根據(jù)木瓜秀粉蚧的為害狀，在現(xiàn)場(chǎng)可借助手持放大鏡檢查寄主植物，挑取成蟲，制作成玻片，用顯

微鏡觀察，依據(jù)雌成蟲的形態(tài)特征對(duì)其進(jìn)行種類鑒定。

5.2DNA條形碼鑒定

根據(jù)成蟲或幼蟲樣品，通過擴(kuò)增具有種類鑒別特征的DNA條形碼序列與其他粉蚧同源序列的最大

相似度進(jìn)行鑒定。

6儀器、用具和試劑

6.1儀器、用具

體視顯微鏡、顯微鏡、手持放大鏡、眼科鑷子、小毛筆、解剖針、眼科手術(shù)刀、接種環(huán)、載玻片、

蓋玻片、培養(yǎng)皿、小燒杯、比色板、酒精燈、水浴裝置（如加熱板等）、樣品袋。

PCR儀、冷凍混合球磨儀、超凈工作臺(tái)、電泳儀、凝膠成像分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、微量組織搗

碎儀、高速冷凍離心機(jī)、研磨機(jī)、臺(tái)式小型離心機(jī)、制冰機(jī)、旋渦震蕩器、移液、器、電子天平、pH

計(jì)、水浴鍋、純水儀、高壓滅菌器、超低溫冰箱等。

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6.2試劑

10%氫氧化鉀或10%氫氧化鈉、蒸餾水、70%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、酸性品紅、加拿大樹

脂、丁香油、甘油、二甲苯、苯酚。

動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒、10×PCR緩沖液、脫氧核糖核苷三磷酸（dNTPs）、DNA擴(kuò)增引物

（PcoF1、LepR1）、ddH2O、Taq酶、DNAMarker、瓊脂糖、DNA染料。

7現(xiàn)場(chǎng)檢疫

目測(cè)植株、枝葉和果有無(wú)被粉蚧危害的癥狀（長(zhǎng)勢(shì)衰弱，莖、葉扭曲變形，有白色蠟粉），用手持

擴(kuò)大鏡重點(diǎn)檢查植物的幼嫩部分（嫩葉、葉片、花芽和葉柄），此外，果萼下和植株空隙內(nèi)均是粉蚧易

藏匿的部位，一旦發(fā)現(xiàn)粉蚧蟲體，應(yīng)將粉蚧連同枝葉裝入樣品袋中，做好現(xiàn)場(chǎng)記錄，送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定。

8實(shí)驗(yàn)室鑒定

8.1形態(tài)學(xué)鑒定

8.1.1若蟲的培養(yǎng)

當(dāng)只發(fā)現(xiàn)有粉蚧若蟲時(shí)，應(yīng)將其接入木瓜果實(shí)上并置于25℃～28℃、RH65%～75%條件下培養(yǎng)，

待發(fā)育至成蟲時(shí)再挑取雌成蟲作形態(tài)鑒定，玻片制作方法參見附錄B。

8.1.2粉蚧科PseudococcidaeWestwood的鑒定特征

粉蚧科的雌成蟲具有下列特征：觸角端節(jié)較其前節(jié)長(zhǎng)而大，約呈紡錘形；背孔0對(duì)～2對(duì)，位于前

胸及第6腹部背側(cè)；腹臍0個(gè)～5個(gè)，位于體腹面中區(qū)成1縱列，一般1個(gè)，位于第3、4腹節(jié)腹板間；

背緣有一系列刺孔群，左右側(cè)成對(duì)，基數(shù)為18對(duì)，可少至零，或更多；每刺孔群為由錐刺及腺群組成；

體表常具有三格腺。

8.1.3秀粉蚧屬Paracossus屬的鑒定特征

成蟲體通常寬橢圓形。臀瓣通常發(fā)達(dá)，具硬化棒，從端毛或棒毛基部延伸，觸角通常8節(jié)。足發(fā)達(dá)，

爪無(wú)齒，跗冠毛端部膨大；透明孔通常出現(xiàn)在后足基節(jié)和脛節(jié)上。刺孔群最多18對(duì)，除了頭部和胸部刺

孔群有3或4根錐刺之外，其余刺孔群有2根錐刺；除了末對(duì)刺孔群之外沒有附毛。腹臍有或無(wú)。背部具

蕈狀腺，有時(shí)出現(xiàn)在腹部。具領(lǐng)狀腺。腹部具多格腺，三格腺有。

8.1.4木瓜秀粉蚧雌成蟲形態(tài)特征

生態(tài)鑒別特征

雌成蟲體嫩黃色，卵圓形,約2.2mm長(zhǎng)、1.4mm寬；體表具有白色粉狀蠟質(zhì)物，背部蠟粉厚度分布

不均，不足以掩蓋體色，但亦無(wú)不連續(xù)裸露區(qū)；體緣有短蠟絲[4]。卵囊發(fā)達(dá)，位于腹面后部（參見附錄

圖C.1和圖C.2）。

玻片標(biāo)本形態(tài)特征觀察

雌成蟲玻片標(biāo)本主要顯微鑒定特征如下：

——體觸角8節(jié)；

——背面具有14對(duì)～17對(duì)刺孔群，其中第1、2、4、5、7、9對(duì)刺群孔具有2根錐刺；

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——蟲體背面缺多格腺，三格腺分散分布，大多位于剛毛附近。蕈狀管通常限于刺孔群邊緣區(qū)。背

部無(wú)領(lǐng)狀管。肛環(huán)剛毛長(zhǎng)平均136μm，約為肛環(huán)寬度的1.4倍；

——腹部腹面具有多格腺，通常位于第六到第八腹節(jié)的前端和后端，腹部第4節(jié)和第5節(jié)則僅限于后

端。三格腺集中分布于剛毛基部附近。盤孔不常見，若有則與背面盤孔大小相同。蕈狀管位于前胸

到第1腹節(jié)中部外側(cè)，每節(jié)側(cè)面3個(gè)～6個(gè)。同一大小的領(lǐng)狀管明顯呈簇狀分布于蟲體邊緣和腹部第3

至第8節(jié)中部及中部外側(cè)區(qū)域，第一腹節(jié)通常有2個(gè)～3個(gè)。臀葉背面無(wú)蕈狀管；

——后足基節(jié)有大量透明孔；后足脛節(jié)無(wú)透明孔（參見附錄圖C.3～圖C.5）。

8.1.5木瓜秀粉蚧與近似種的區(qū)別

木瓜秀粉蚧可以通過下列形態(tài)特征與秀粉蚧屬其他種區(qū)別：

——蕈狀管僅存在于身體邊緣；

——其后足脛節(jié)無(wú)透明孔。

同時(shí)滿足上述兩種特征即可判定為木瓜秀粉蚧。木瓜秀粉蚧與秀粉蚧屬南亞分布種的分類檢索表參

見附錄D。

8.2分子生物學(xué)鑒定

8.2.1基因組DNA提取

由于粉蚧的個(gè)體小，因此建議選用適用微量樣品提取的商用試劑盒，取樣一般以單頭蟲體為宜，提

取方法參照試劑盒說明步驟。

8.2.2DNA質(zhì)量檢查

用核酸蛋白檢測(cè)儀測(cè)定DNA的純度與濃度，分別取得260nm和280nm處的吸光值，核酸的純度和

濃度計(jì)算式見式（1）、式（2）。

DNA純度=OD260/OD280··········································(1)

DNA濃度=50×OD260μg/mL····································(2)

式中：

DNA純度——OD260與OD280的比值；

OD260——指核酸在260nm的吸光值；

OD280——指蛋白質(zhì)在280nm的吸光值；

PCR級(jí)DNA溶液的OD260與OD280的比值應(yīng)為1.7～1.9，若DNA濃度高于100ng/μL，則應(yīng)稀釋至100

ng/μL。

8.2.3PCR檢測(cè)

擴(kuò)增引物

PCR擴(kuò)增引物采用粉蚧科線粒體COI5′端片段基因的通用引物PcoF1/LepR1，引物序列見表1。

表1引物名稱及序列

產(chǎn)物大小

引物名稱引物序列參考文獻(xiàn)

（bp）

PcoF1上游引物：5′-CCTTCAACTAATCATAAAAATATYAG-3′Parketal.

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LepR1下游引物：5′-TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA-3′（2011）

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反應(yīng)體系

PCR反應(yīng)體系見表2。

表2反應(yīng)體系

試劑名稱加樣量（μL）

10×PCRBuffer3.0

dNTPMixture（10mM）2.4

上游引物（10M）0.5

下游引物（10M）0.5

Taq酶（5U/L）0.2

DNA模板（10～100ng/μL）2.0

ddH2O補(bǔ)足反應(yīng)總體積為30μL

注：1、反應(yīng)體系中各試劑的量可使用等效的PCR預(yù)混液，具體情況根據(jù)采用的試劑進(jìn)行調(diào)整；2、若DNA模板濃度低

于10ng/μL，則應(yīng)適當(dāng)增加模板用量。

反應(yīng)條件

循環(huán)前94℃預(yù)變性1min；94℃變性1min，45℃退火1.5min，72℃延伸1.5min，5個(gè)循環(huán)；94℃變

性1min，51℃退火1.5min，72℃延伸1min，36個(gè)循環(huán);最后72℃延伸5min，體系溫度降至4℃，結(jié)束PCR

擴(kuò)增（當(dāng)使用不同儀器和試劑時(shí)，可根據(jù)要求將反應(yīng)參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整）。

對(duì)照設(shè)置

上述反應(yīng)中均需同時(shí)作空白對(duì)照（以滅菌蒸餾水代替模板DNA），各做2個(gè)重復(fù)。

8.2.4瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)

PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分析，每個(gè)樣品取5μL擴(kuò)增產(chǎn)物與1μL的6×加樣緩沖液混合均

勻進(jìn)行點(diǎn)樣，用DNAMarker作分子標(biāo)記，在1×TAE中以5V/cm的電壓電泳40min，在凝膠成像系統(tǒng)

上觀察并拍攝記錄結(jié)果。

8.2.5PCR產(chǎn)物測(cè)序及標(biāo)準(zhǔn)序列

取剩余PCR擴(kuò)增產(chǎn)物20μL，使用DNA產(chǎn)物純化回收試劑盒純化回收產(chǎn)物，將回收產(chǎn)物及相應(yīng)的

上下游引物提供給有資質(zhì)的生物技術(shù)公司進(jìn)行雙向測(cè)序，將得到的雙向序列拼接后去掉兩端的引物即可

用于比對(duì)鑒定。

木瓜秀粉蚧DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)序列：

ACTTATATATTTAATTTTTGGATTTTGATCAAGATTAATAGGTTTATCAATAAGTTTTATTATTCGA

ATTGAATTAATAAATTTAAATAATAATTTTAATAATAATATAATTTATTATATAATAATTACTATT

CATGCTTTTATTATAATTTTTTTTATAACTATACCTATTATTATTGGAAGATTAAGTAATTGATTAT

TACCTTTAATATTAATATCTTCAGATTTAATTTTTCCTCGTTTAAATAATTTTAGATTTTGATTATT

AATTCCATCTTTAATTTTTATAATATTAAATATATTATTAAATAATAATATTAATACTGGATGAAC

ATTATATCCTCCTTTAATTAATCAAAATTTTATTACATTAAATTTTATTATTTTTTCATTACATTTA

AATGGTTTATCTTCAATTTTTAGATCTATTAATTTTATTTCATCTATTTTTATTATTAATAATAATA

ATTTTTTTTTAAATAATTTTTCTTTATATATTTGATCAATTATTGTTACTACAATTTTATTAATTATT

TCAATTCCTATTTTATCTAGAGCTATTACTATAATTATTTTAGATAATAATTTAAACATAAATTTTT

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TTAATCCAATAGGAAATGGTAATCCTATTTTATATCAACATTTATTT

8.2.6序列比對(duì)分析

測(cè)序獲得數(shù)據(jù)后，采用MEGA6軟件打開峰圖文件，檢查序列的單一性，對(duì)序列進(jìn)行拼接，并去

除兩端的引物序列，登陸NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLST同源性比對(duì)。

9結(jié)果判定

9.1形態(tài)學(xué)方法

以雌成蟲的形態(tài)特征為依據(jù)，符合8.1.4和8.1.5特征時(shí)可鑒定為木瓜秀粉蚧。

9.2分子生物學(xué)方法

根據(jù)待測(cè)樣品測(cè)序獲得的基因序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)與上述木瓜秀粉蚧DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)序列或已知

木瓜秀粉蚧COI基因序列（NCBI登陸號(hào)：JN797604.1、MT707300.1和MN901467.1等）進(jìn)行BLAST比對(duì)

的結(jié)果，如序列長(zhǎng)度最高覆蓋率≥85%且最大相似度≥99%，則可判定待測(cè)樣品為木瓜秀粉蚧。

10樣品保存

木瓜秀粉蚧各齡若蟲、蛹和成蟲均可浸泡在70%乙醇溶液或乙醇-甘油保存液中保存，將浸泡標(biāo)本

置-18℃以下冷凍，可長(zhǎng)期保存；成蟲也可制成玻片標(biāo)本保存，玻片標(biāo)本應(yīng)置于陰暗干燥處保存；危害

狀標(biāo)本可干燥后，固定在標(biāo)本盒中，加入樟腦丸防蟲，置于干燥處保存。用作分子生物學(xué)鑒定的若蟲、

蛹和成蟲則置于2.0mL的凍存管，加入適量100%乙醇，-70℃冷凍保存；用于分子生物學(xué)鑒定所剩余的

DNA進(jìn)行分裝后，-70℃冷凍保存。記錄害蟲名稱、來源、寄主、截獲時(shí)間、地點(diǎn)、截獲人、鑒定人等

相關(guān)信息，一般保存期至少為一年。

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附錄A

（資料性附錄）

木瓜秀粉蚧的其他信息

A.1分布

木瓜秀粉蚧原產(chǎn)于中美洲地區(qū)（墨西哥、伯利茲、危地馬拉和哥斯達(dá)黎加），現(xiàn)報(bào)道分布國(guó)家和地

區(qū)有：安提瓜和巴布達(dá)、巴巴多斯、伯利茲、多米尼加、哥斯達(dá)黎加、古巴、瓜德羅普、海地、荷屬安

的列斯、開曼群島、美國(guó)、美屬維爾京群島、墨西哥、圣基茨和尼維斯、危地馬拉、小安的列斯群島、

英屬維爾京群島、波多黎各、法屬圭亞那、菲律賓、柬埔寨、斯里蘭卡、泰國(guó)、印度（安得拉邦、阿魯

納恰爾邦、古吉拉特邦、查饃克什米爾、卡納塔克邦、喀拉拉邦、馬哈拉施特拉邦、奧里薩邦、旁遮普、

泰米爾納德邦、特里普拉邦、西孟加拉）、印度尼西亞、中國(guó)（廣東、海南、云南、臺(tái)灣）、以色列、

肯尼亞、老撾、馬來西亞、馬爾代夫、馬提尼克島、毛里求斯、蒙特色拉特島、莫桑比克、提利斯、尼

日利亞、北瑪麗安娜冰島、阿曼、巴基斯坦、帕勞群島。

A.2寄主

已知記錄了50科153屬，主要有：爵床科Acanthaceae：穿心蓮Andrographispaniculata、十字爵床

Crossandrainfundibuliformis、黃蝦衣花Pachystachyslutea；番杏科Aizoaceae：假海馬齒Trianthema

portulacastrum；莧科Amaranthaceae：土牛膝Achyranthesaspera、Aervajavanica、Aervalanata、蓮子草

Alternantherasessilis、皺果莧Amaranthusviridis、青葙Celosiaargentea、Digeramuricata；漆樹科

Anacardiaceae：杧果Mangiferaindica、檳榔青Spondiaspinnata；番荔枝科Annonaceae：刺果番荔枝Annona

muricata、番荔枝Annonasquamosa；傘形科Apiaceae：積雪草Centellaasiatica；夾竹桃科Apocynaceae：

大紫蟬Allamandablanchetii、大葉糖膠樹Alstoniamacrophylla、牛角瓜Calotropisgigantea、牛角瓜

Calotropisgigantea、長(zhǎng)春花Catharanthusroseus、匙羹藤Gymnemasylvestre、歐洲夾竹桃Neriumoleander、

白花雞蛋花Plumeriaalba、紅雞蛋花Plumeriarubra、蛇根木Rauvolfiaserpentina；天南星科Araceae：

Philodendronlacerum；棕櫚科Arecaceae：椰子Cocosnucifera、海棗Phoenixdactylifera、王棕Roystonea

regia；天門冬科Asparagaceae：晚香玉Polianthestuberosa；菊科Asteraceae：藿香薊Ageratumconyzoides、

Ambrosiaperuviana、鬼針草Bidenspilosa、夜香牛屬Cyanthillium、大麻葉澤蘭Eupatoriumcannabinum、

向日葵Helianthusannuus、銀膠菊Partheniumhysterophorus、蟛蜞菊Sphagneticolacalendulacea、萬(wàn)壽菊

Tageteserecta、羽芒菊Tridaxprocumbens、百日菊Z(yǔ)inniaelegans；紫葳科Bignoniaceae：黃鐘花Tecoma

stans；橄欖科Burseraceae：Commiphoracaudata；桔?？艭ampanulaceae：半邊蓮屬Lobelia；番木瓜科

Caricaceae：番木瓜Caricapapaya；白花菜科Cleomaceae：Cleomeviscosa；旋花科Convolvulaceae：蕹菜

Ipomoeaaquatica、Ipomoeacarnea、虎掌藤Ipomoeapes-tigridis；閉鞘姜科Costaceae：Cheilocostus

speciosus；葫蘆科Cucurbitaceae：Cucumismaderaspatanus、廣東絲瓜Luffaacutangula、苦瓜Momordica

charantia；大戟科Euphorbiaceae：鐵莧菜屬Acalypha、熱帶鐵莧菜Acalyphaindica、紅桑Acalypha

wilkesiana、波氏巴豆Crotonbonplandianus、飛揚(yáng)草Euphorbiahirta、一品紅Euphorbiapulcherrima、橡

膠樹Heveabrasiliensis、麻風(fēng)樹Jatrophacurcas、Jatrophaglandulifera、琴葉珊瑚花Jatrophaintegerrima、

紅珊瑚Jatrophamultifida、佛肚樹Jatrophapodagrica、Jatrophatanjorensis、Manihotchlorosticta、木薯

Manihotesculenta、蓖麻Ricinuscommunis；豆科Fabaceae：Acaciaferruginea、Acacialeucophloea、落花

生Arachishypogaea、羊蹄甲Bauhiniapurpurea、木豆Cajanuscajan、臘腸樹Cassiafistula、蝶豆Clitoria

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ternatea、菽麻Crotalariajuncea、多枝草合歡Desmanthusvirgatus、Erythrinaabyssinica、刺桐Erythrina

variegata、格力豆Gliricidiasepium、大豆Glycinemax、銀合歡Leucaenaleucocephala、大含羞草Mimosa

pigra、含羞草Mimosapudica、菜豆Phaseolusvulgaris、牧豆樹Prosopisjuliflora、小鹿藿Rhynchosiaminima、

塞納決明Sennaalexandrina、Sennaauriculata、大花田菁Sesbaniagrandiflora、Sesbaniapunicea、酸豆

Tamarindusindica、長(zhǎng)序灰毛豆Tephrosianoctiflora、灰毛豆Tephrosiapurpurea、軟莢豆Teramnuslabialis、

Vignamungo、綠豆Vignaradiata、豇豆Vignaunguiculata；蝎尾蕉科Heliconiaceae：蝎尾蕉屬Heliconia；

唇形科Lamiaceae：Menthaarvensis、甘牛至Origanummajorana、柚木Tectonagrandis；樟科Lauraceae：

鱷梨Perseaamericana；千屈菜科Lythraceae：散沫花Lawsoniainermis、石榴Punicagranatum；金虎尾科

Malpighiaceae：Malpighiaemarginata、金虎尾Malpighiaglabra；錦葵科Malvaceae：咖啡黃葵Abelmoschus

esculentus、黃葵Abelmoschusmoschatus、惡味苘麻Abutilonhirtum、吉貝Ceibapentandra、黃麻Corchorus

capsularis、棉屬Gossypium、毛可可Guazumaulmifolia、木芙蓉Hibiscusmutabilis、朱槿Hibiscus

rosa-sinensis、玫瑰茄Hibiscussabdariffa、小懸鈴花Malvaviscusarboreus、黃花棯Sidaacuta、可可

Theobromacacao；楝科Meliaceae：印楝Azadirachtaindica、楝Meliaazedarach、面包果Artocarpusaltilis、

菠蘿蜜Artocarpusheterophyllus、榕屬Ficus、桑Morusalba；芭蕉科Musaceae：Musaparadisiaca；桃金

娘科Myrtaceae：番石榴Psidiumguajava；紫茉莉科Nyctaginaceae：黃細(xì)心Boerhaviadiffusa、直立黃細(xì)心

Boerhaviaerecta；木樨科Oleaceae：素馨屬Jasminum；芝麻科Pedaliaceae：Sesamumorientale；葉下珠科

Phyllanthaceae：余甘子Phyllanthusemblica、麻德拉斯葉下珠Phyllanthusmaderaspatensis；胡椒科

Piperaceae：胡椒屬Piper、蓽拔Piperlongum；禾本科Poaceae：Uniolapaniculata、玉蜀黍Zeamays；蓼

科Polygonaceae：海葡萄屬Coccoloba；鼠李科Rhamnaceae：滇刺棗Ziziphusmauritiana；薔薇科Rosaceae：

Pseudocydoniasinensis、薔薇屬Rosa；茜草科Rubiaceae：梔子屬Gardenia、長(zhǎng)隔木屬Hamelia、黃花龍船

花Ixoracoccinea、海濱木巴戟Morindacitrifolia、洋玉葉金花Mussaendafrondosa、Neonaucleapurpurea、

長(zhǎng)管糙葉豐花草Spermacocearticularis；蕓香科Rutaceae：Citrusaurantium、調(diào)料九里香Murrayakoenigii；

無(wú)患子科Sapindaceae：紅毛丹Nepheliumlappaceum；山欖科Sapotaceae：人心果Manilkarazapota；苦木

科Simaroubaceae：Ailanthusexcelsa；茄科Solanaceae：辣椒Capsicumannuum、夜香樹Cestrumnocturnum、

洋金花Daturametel、煙草Nicotianatabacum、番茄Solanumlycopersicum、茄Solanummelongena、龍葵

Solanumnigrum、水茄Solanumtorvum、Solanumtrilobatum、土豆Solanumtuberosum、黃果茄Solanum

virginianum、睡茄Withaniasomnifera；馬鞭草科Verbenaceae：假連翹Durantaerecta、馬纓丹Lantana

camara；葡萄科Vitaceae：仙素蓮Cissusquadrangularis、葡萄Vitisvinifera；蒺藜科Zygophyllaceae：蒺

藜Tribulusterrestris。

A.3生物學(xué)特性

木瓜秀粉蚧喜溫暖干燥的氣候，在18℃～30℃之間均可完成生活史。發(fā)育周期與溫度和取食植物有

關(guān)，雌蟲和雄蟲的發(fā)育有效積溫分別為294度.日和303度.日。雌蟲若蟲共三齡，無(wú)翅，可短距離爬行或

隨氣流移動(dòng)；生活史平均歷期約1個(gè)月，產(chǎn)卵期1～2周，平均產(chǎn)卵300粒，25℃時(shí)雌蟲產(chǎn)卵量最大，37℃

以上產(chǎn)卵被抑制。卵孵化期10天左右，若蟲孵化后開始尋找合適的位置取食。雄蟲共五齡（包括成蟲），

第四齡時(shí)形成一個(gè)白色長(zhǎng)筒型繭，羽化后的雄成蟲有翅，飛行能力較弱。雌成蟲依靠性激素吸引雄蟲交

配，在室溫條件下全年可繁殖，但有些寄主植物上無(wú)法完成受精。

木瓜秀粉蚧屬刺吸式口器，主要在寄主植物莖干、葉背、花和果實(shí)等汁液豐富的部位取食，同時(shí)向

植物體內(nèi)注射毒性物質(zhì)，導(dǎo)致葉片枯萎黃化、植株滯育、葉片卷縮變形、落花落果、同時(shí)產(chǎn)生大量蜜露

產(chǎn)生煙煤病，最終引起植物死亡。蟲口密度大時(shí)形成厚的白色蠟質(zhì)層，導(dǎo)致果實(shí)弱小畸形影響可食用性。

A

2

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附錄B

（資料性附錄）

玻片標(biāo)本制作

B.1固定

挑取蚧蟲置入70%乙醇中殺死固定2h，以備制作玻片標(biāo)本。如需長(zhǎng)期保存，則在70％乙醇中加入

少量甘油（70％乙醇：甘油為50:1）作為保存液。

B.2脫脂透明

選取經(jīng)固定的成熟蟲體，用眼科手術(shù)刀在蟲體背面前端或側(cè)面刺一小孔，若為較干燥的蟲體，加熱

回軟5min后再刺小孔，移入加有10%氫氧化鉀（或10%氫氧化鈉）溶液的小燒杯中，用酒精燈加熱10

min～30min，水浴控溫在80℃～90℃，以不沸騰為宜，直至體外蠟質(zhì)和蟲體內(nèi)含物全部融化；將蟲

體移入盛有堿液的透明比色皿中，用解剖針、接種環(huán)、小毛筆等輕輕擠壓、清理蟲體，直至徹底清除內(nèi)

含物、蟲體變?yōu)榍鍧嵧该?。加熱還可用水浴、溫箱等方法，脫脂時(shí)間以標(biāo)本透明為準(zhǔn)。

B.3清洗

把蟲體從氫氧化鉀溶液中移入熱蒸餾水中清洗、浸泡，更換蒸餾水3次～5次，以清除蟲體表面和內(nèi)

部的堿液。

B.4染色

移入酸性品紅（酸性品紅95％乙醇飽和溶液）中染色，也可用其它染料使蟲體著色，染色時(shí)間視標(biāo)

本著色情況而定，一般在8h以上。

B.5脫水

用70%乙醇洗掉多余染色劑，移入95％乙醇中，視染色程度浸泡1min～3min，洗去浮色，再將

蚧蟲移入裝有無(wú)水乙醇的比色板中，終止脫色5min，但不能停留過久，以免過度褪色。

B.6透明

移入二甲苯酚（二甲苯：苯酚為3：1）內(nèi)5min～10min進(jìn)一步透明；移入二甲苯中1min～3min使

顏色固定；移入丁香油中20min～30min或更長(zhǎng)。

B.7整姿與封片

在載玻片上加一滴樹脂，移入蟲體，用接種環(huán)或昆蟲針等工具整姿，用蓋玻片封片。在玻片兩側(cè)貼

上標(biāo)簽，注明產(chǎn)地、寄主、采集日期、采集人等信息。待玻片晾干后，即可進(jìn)行鏡檢。

B

3

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附錄C

（資料性附錄）

木瓜秀粉蚧活蟲體（成蟲、若蟲）外觀特征圖

圖C.1木瓜秀粉蚧在木瓜上的為害狀

圖C.2木瓜秀粉蚧在琴葉珊瑚葉片（左）、花蕾（右上）和枝芽（右下）上的危害狀

4

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圖C.3木瓜秀粉蚧雌成蟲玻片圖

圖C.4木瓜秀粉蚧雌成蟲后足基節(jié)透明孔

1

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圖C.5木瓜秀粉蚧雌性形態(tài)特征

a.前足爪；b.蕈狀管；c.三格腺；d.半透明孔；e.領(lǐng)狀管；f.后足爪；g.多格腺；h.短尾環(huán)毛；

i.臀瓣刺孔群；j.附毛；k.盤孔；l.背毛；m.刺孔群錐毛（引自MillerDG&MillerGL，2002）

1

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附錄D

（資料性附錄）

木瓜秀粉蚧與近似種分類檢索表

D.1秀粉蚧屬雌成蟲已知種分類檢索表

1有腹臍………………..……2

無(wú)腹臍……………….…….8

2背面蕈狀腺最多9個(gè)，若腹部有，則不在刺孔群附近………………Paracoccuskeralae

背面蕈狀腺至少16個(gè)，有時(shí)超過40個(gè)，總有一些蕈狀腺單獨(dú)出現(xiàn)在1到2個(gè)腹部刺孔群附

近………………..………..……………..…………..…………3

3后足脛節(jié)有透明孔……………….…..…….4

后足脛節(jié)無(wú)透明孔…………………….……………..………..P.marginatus

4頭部和胸部邊緣有領(lǐng)狀腺……………..……….………….5

頭部和胸部邊緣無(wú)領(lǐng)狀腺………………..……….……..P.invectus(部分)

5腹部腹面具多格腺，在第四和第五腹節(jié)呈雙列并到達(dá)腹節(jié)邊緣，兩觸角基部之間無(wú)領(lǐng)狀

腺…………………….………6

腹部腹面具多格腺，在第四和第五腹節(jié)呈單列但不達(dá)這兩腹節(jié)邊緣，兩觸角基部之間具有領(lǐng)狀

腺……………………………7

6后足基節(jié)明顯大于前足基節(jié)。背剛毛短硬，不呈鞭毛狀，長(zhǎng)度7.5μm～15.0μm…………...……...

………………..P.interceptust

后足基節(jié)與前足基節(jié)大小相似。所有背剛毛鞭毛狀，長(zhǎng)度15μm～40μm，最長(zhǎng)為第七腹節(jié)達(dá)到

40μm………………………….…….P.cognatus

7所有刺孔群均明顯，除了頭部外，每一個(gè)刺孔群都包含成對(duì)的錐刺，其中有1到2個(gè)刺孔

群可能具有3或4個(gè)錐刺。腹部蕈狀腺僅出現(xiàn)在腹部邊緣，在亞緣和亞中部區(qū)

無(wú)…..……..…………………………P.burnerae

部分在頭、胸和前腹節(jié)的刺孔群通常不明顯，有時(shí)縮小至單一的圓錐毛，或?yàn)槔w細(xì)的腺剛毛。腹部

蕈狀腺出現(xiàn)在腹部亞緣和亞中部區(qū)域…….………………..……..P.tripurae

8蕈狀腺出現(xiàn)在腹部腹面…………….……….P.murreeanus

腹部腹面無(wú)蕈狀腺…………..……………9

9背蕈狀腺幾乎無(wú)，僅腹部有1到2個(gè)（偶爾無(wú)）。在第七和第八腹節(jié)的背剛毛最長(zhǎng)達(dá)到

35μm….................................................................................................................…………….....P.neocarens

背蕈狀腺數(shù)量較多，至少在胸部有。在第七和第八腹節(jié)的背最長(zhǎng)剛毛約15μm…………....…….10

10背蕈狀腺出現(xiàn)在腹部后段…………..….P.invectus(部分)

腹部后段缺背蕈狀腺……………………..11

11胸部腹面缺多格腺，多格腺在腹部各節(jié)之間呈單列出現(xiàn)。后腿節(jié)有少量透明

孔…………………………..………P.nellorensis

胸部腹面具多格腺，多格腺在腹部各節(jié)之間呈雙列或三列排列。后腿節(jié)無(wú)透明孔…………….P.evae

（注：本檢索表依據(jù)WilliamsDJ(2004)所列灰粉蚧屬南亞種制作）

1

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參考文獻(xiàn)

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England.

[19]WilliamsDJ.MealybugsofSouthernAsia.2004,TheNaturalHistoryofMuseum,London.

2

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_________________________________

3

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。

本文件由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAC/TC271）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國(guó)廣州海關(guān)，中華人民共和國(guó)杭州海關(guān)，中華人民共和國(guó)上海海關(guān)，中

國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

本標(biāo)準(zhǔn)起草人：馬駿，顧渝娟，林莉，李獻(xiàn)鋒，武目濤，吳志毅，王書平，梁帆，徐晗，趙菊鵬，齊國(guó)

君，魏霜。

I

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木瓜秀粉蚧檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了木瓜秀粉蚧ParacoccusmarginatusWilliams&GranaradeWillink的檢疫鑒定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于木瓜秀粉蚧的檢疫鑒定。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

腹臍circulus

又名腹裂，位于腹部腹面第3、4腹節(jié)的中部，常以局部地角質(zhì)化的狹窄的硬化框?yàn)榻缦蓿酁閳A

形、卵圓形、長(zhǎng)方形或沙漏形的表皮區(qū)，其數(shù)目和大小在不同的蚧蟲種類中變化很大，也有的種類無(wú)腹

臍。

3.2

背孔o(hù)stioles

又名背裂。一般兩對(duì)，均在背板兩側(cè)，前背孔在前胸，后背孔在第6腹節(jié)。其形如人眼，具二片孔

瓣，瓣上有三格腺和毛，瓣緣或硬化。

3.3

肛環(huán)analring

位于背末，是一個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)。環(huán)上有成列環(huán)孔和6根環(huán)毛，此環(huán)為肛門的開口。

3.4

刺孔群cerarius

一般分布在背緣，稱背緣刺孔群或簡(jiǎn)稱刺孔群，有的分布在體背則稱背刺孔群。每一刺孔群一般有

1對(duì)錐狀刺（簡(jiǎn)稱錐刺），一群三格腺，另外或有數(shù)根毛（簡(jiǎn)稱附毛）。這是緣蠟絲的分泌和支持機(jī)構(gòu)。

3.5

盤孔diskpores

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圓孔狀的泌蠟結(jié)構(gòu)，此類孔可分為：三格腺，呈三角形或近三角形，其內(nèi)具三格；多格腺，圓形，

具1中心格，周圍多格（6格～12格），為盤腺中最大者，一般分布在陰門附近；五格腺，大小介于

三格腺和多格腺之間，其中心1格，周圍5格，呈五角形或近五角形。

3.6

柱腺cylindricalducts

管狀的泌蠟結(jié)構(gòu)，又稱管腺或領(lǐng)腺，開口處內(nèi)向有不同高度的環(huán)或領(lǐng)。

3.7

尾瓣anallobes

腹末節(jié)之突出部分。

4木瓜秀粉蚧基本信息

中文名：木瓜秀粉蚧。

學(xué)名：ParacoccusmarginatusWilliams&GranaradeWillink，1992。

異名：無(wú)。

中文別名：木瓜粉蚧。

英文名：papayamealybug。

分類地位：半翅目Hemiptera，胸喙亞目Sternorrhyncha，粉蚧科Pseudococcidae，秀粉蚧屬Paracoccus，

木瓜秀粉蚧是一種重要的農(nóng)林害蟲，可通過空氣氣流進(jìn)行短距離擴(kuò)散，也可借助水、床土、人類、

家畜和野生動(dòng)物擴(kuò)散，易隨果實(shí)、苗木和接穗的調(diào)運(yùn)而遠(yuǎn)距離傳播。

木瓜秀粉蚧其他信息參見附錄A。

5方法原理

5.1形態(tài)學(xué)鑒定

根據(jù)木瓜秀粉蚧的為害狀，在現(xiàn)場(chǎng)可借助手持放大鏡檢查寄主植物，挑取成蟲，制作成玻片，用顯

微鏡觀察，依據(jù)雌成蟲的形態(tài)特征對(duì)其進(jìn)行種類鑒定。

5.2DNA條形碼鑒定

根據(jù)成蟲或幼蟲樣品，通過擴(kuò)增具有種類鑒別特征的DNA條形碼序列與其他粉蚧同源序列的最大

相似度進(jìn)行鑒定。

6儀器、用具和試劑

6.1儀器、用具

體視顯微鏡、顯微鏡、手持放大鏡、眼科鑷子、小毛筆、解剖針、眼科手術(shù)刀、接種環(huán)、載玻片、

蓋玻片、培養(yǎng)皿、小燒杯、比色板、酒精燈、水浴裝置（如加熱板等）、樣品袋。

PCR儀、冷凍混合球磨儀、超凈工作臺(tái)、電泳儀、凝膠成像分析儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、微量組織搗

碎儀、高速冷凍離心機(jī)、研磨機(jī)、臺(tái)式小型離心機(jī)、制冰機(jī)、旋渦震蕩器、移液、器、電子天平、pH

計(jì)、水浴鍋、純水儀、高壓滅菌器、超低溫冰箱等。

2

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6.2試劑

10%氫氧化鉀或10%氫氧化鈉、蒸餾水、70%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、酸性品紅、加拿大樹

脂、丁香油、甘油、二甲苯、苯酚。

動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒、10×PCR緩沖液、脫氧核糖核苷三磷酸（dNTPs）、DNA擴(kuò)增引物

（PcoF1、LepR1）、ddH2O、Taq酶、DNAMarker、瓊脂糖、DNA染料。

7現(xiàn)場(chǎng)檢疫

目測(cè)植株、枝葉和果有無(wú)被粉蚧危害的癥狀（長(zhǎng)勢(shì)衰弱，莖、葉扭曲變形，有白色蠟粉），用手持

擴(kuò)大鏡重點(diǎn)檢查植物的幼嫩部分（嫩葉、葉片、花芽和葉柄），此外，果萼下和植株空隙內(nèi)均是粉蚧易

藏匿的部位，一旦發(fā)現(xiàn)粉蚧蟲體，應(yīng)將粉蚧連同枝葉裝入樣品袋中，做好現(xiàn)場(chǎng)記錄，送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定。

8實(shí)驗(yàn)室鑒定

8.1形態(tài)學(xué)鑒定

8.1.1若蟲的培養(yǎng)

當(dāng)只發(fā)現(xiàn)有粉蚧若蟲時(shí)，應(yīng)將其接入木瓜果實(shí)上并置于25℃～28℃、RH65%～75%條件下培養(yǎng)，

待發(fā)育至成蟲時(shí)再挑取雌成蟲作形態(tài)鑒定，玻片制作方法參見附錄B。

8.1.2粉蚧科PseudococcidaeWestwood的鑒定特征

粉蚧科的雌成蟲具有下列特征：觸角端節(jié)較其前節(jié)長(zhǎng)而大，約呈紡錘形；背孔0對(duì)～2對(duì)，位于前

胸及第6腹部背側(cè)；腹臍0個(gè)～5個(gè)，位于體腹面中區(qū)成1縱列，一般1個(gè)，位于第3、4腹節(jié)腹板間；

背緣有一系列刺孔群，左右側(cè)成對(duì)，基數(shù)為18對(duì)，可少至零，或更多；每刺孔群為由錐刺及腺群組成；

體表常具有三格腺。

8.1.3秀粉蚧屬Paracossus屬的鑒定特征

成蟲體通常寬橢圓形。臀瓣通常發(fā)達(dá)，具硬化棒，從端毛或棒毛基部延伸，觸角通常8節(jié)。足發(fā)達(dá)，

爪無(wú)齒，跗冠毛端部膨大；透明孔通常出現(xiàn)在后足基節(jié)和脛節(jié)上。刺孔群最多18對(duì)，除了頭