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文檔簡介
1豬瘟病毒競爭磁微粒CLIA抗體檢測方法本文件適用于定量檢測豬血清中針對豬瘟病毒的特GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試GB/T35906豬瘟抗體間接ELISANY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術規(guī)范4符號和縮略語CLIA:化學發(fā)光免疫分析法(ChemiluminescenceImmunoassELISA:酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImCSFV:豬瘟病毒(ClassicalSwineFeverV5.2磁微粒工作液(偶聯(lián)鏈霉親和素的磁性微粒)。5.5抗體工作液(吖啶酯標記的CSFV單克隆抗體)。2于無菌血清管中,按照GB19489樣品處理的生物安全措施、實驗室生在一周內檢測,可置2℃~8℃條件下保存,若超過一周檢測,應置于-20℃以下冷凍保存。取8.1中的樣品,8000rpm,離心2min,取上清放于1.5mL尖底離心管中,體積應檢;若樣品中存在沉淀或絮狀物等雜質,應離心39操作步驟9.1校準曲線擬合將CSFV抗體工作校準品1~工作校準品6放入樣本架,按照99.2校準曲線校準9.4樣品檢測),整個檢測過程在全自動化學發(fā)光免疫分析儀上進行,具體檢測過9.5結果計算4檢測完成后,以工作校準品抗體含量(3.125U、12.5U、50U、200U、800U、3200U)為橫坐標、相應檢測發(fā)光值為縱坐標擬合四參數為標準曲線,四參數公式為Y=(a-d)/[1+(x/c)*b]+d,當R2高抗體含量≥10U時,判為CSFV抗體陽5將表A.1中的試劑依次加入燒杯中,加滅菌蒸餾水至600mL,溶解,定容至1000mL,置于2~8℃按表A.2中的試劑依次加入燒杯中,加滅菌蒸餾水至600mL,溶解,6d后檢測抗體水平,如達不到要求,再進行第三、四次免疫??贵w水平達到35906的豬瘟抗體間接ELISA檢測方法檢測抗體水平,以檢測樣本為陽性的最大7取B.1所制備的CSFV高免血清,用校準品稀釋液稀釋至抗體含量為50U和800取B.1所制備的CSFV高免血清,用校準品稀釋液稀釋至抗體含量為6.25U和20質控品1和質控品2,用CSFV抗體磁微?;瘜W發(fā)光免疫分析檢測方法檢測5次,計
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