(高清版)GBT 40267-2021 植物源產(chǎn)品中左旋多巴的測定 高效液相色譜法

植物源產(chǎn)品中左旋多巴的測定高效液相色譜法國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會IGB/T40267—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由全國生化檢測標準化技術委員會(SAC/TC387)提出并歸口。本文件起草單位：中國測試技術研究院生物研究所、四川大學、甘肅中商食品質量檢驗檢測有限公1GB/T40267—2021植物源產(chǎn)品中左旋多巴的測定高效液相色譜法本文件描述了植物源產(chǎn)品中左旋多巴含量的高效液相色譜測定方法。本文件適用于蠶豆(ViciafabaL.)、狗爪豆[Stizolobiumcochinchinensis(Lour.)TangetWang]、常春油麻藤(MucunasempervirensHemsl.)等植物源干樣品中左旋多巴含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4原理試樣用2%(體積分數(shù))鹽酸溶液超聲提取后，經(jīng)反相色譜柱分離，紫外(或二極管陣列)檢測器檢5試劑或材料5.1試劑除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1.1磷酸氫二鉀(K?HPO?·3H?O):優(yōu)級純。5.1.2鹽酸(HCl)。5.1.3磷酸(H?PO?)。5.2溶液配制5.2.12%(體積分數(shù))鹽酸溶液：取鹽酸20mL,加水至1L。5.2.210mmol/L磷酸氫二鉀溶液：稱取磷酸氫二鉀2.3g,加水950mL溶解，加磷酸調(diào)節(jié)pH7.0,再用水稀釋至1L。2GB/T40267—20215.4.1標準儲備液：稱取左旋多巴標準品約20mg(精確至0.1mg),用2%(體積分數(shù))鹽酸溶液溶解并定容至10mL,配制成質量濃度為2000mg/L的左旋多巴標準儲備液，于4℃下保存?zhèn)溆?，有效期?個月。5.4.2標準中間液：準確移取標準儲備液2.5mL于100mL容量瓶中，用2%(體積分數(shù))鹽酸溶液稀5.4.3低濃度標準工作溶液：分別準確移取適量標準中間液，用2%(體積分數(shù))鹽酸溶液稀釋配制成質5.4.4高濃度標準工作溶液：分別準確移取適量標準儲備液，用2%(體積分數(shù))鹽酸溶液稀釋配制成質6.1高效液相色譜儀：配紫外檢測器(UV)或二極管陣列檢測器(6.3超聲波發(fā)生器：功率250W,工作頻率40kHz。6.4離心機：轉速不低于8000g。6.5酸度計：精度為0.01個pH單位。6.6渦旋混勻器。8試驗步驟混勻后超聲提取30min,間隔15min搖勻一次，然后在8000(×g)下離心5min,將上清液轉移至3GB/T40267—202125mL容量瓶中。殘渣再用10mL2%(體積分數(shù))鹽酸溶液重復提取一次，合并兩次提取液，用2%(體8.2測定8.2.1液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下所示：磷酸氫二鉀溶液=5:95;d)柱溫：20℃;8.2.2標準工作曲線的制作依據(jù)試樣中左旋多巴的含量選擇合適質量濃度范圍的標準工作溶液由低到高濃度依次進樣分析，以左旋多巴色譜峰面積為縱坐標，溶液質量濃度為橫坐標，繪制標準工作曲線。標準工作溶液色譜圖見8.2.3樣品測定將試樣溶液注入高效液相色譜儀，依據(jù)保留時間定性，記錄峰面積，根據(jù)標準工作曲線得到試樣溶液中左旋多巴的質量濃度，應使試樣溶液中左旋多巴的質量濃度在標準工作曲線質量濃度范圍內(nèi)，超過標準工作曲線質量濃度上限的樣品應稀釋后進樣分析。典型樣品溶液色譜圖見圖A.2。8.3平行試驗按8.1和8.2的規(guī)定對同一試樣進行兩次平行測定。9試驗數(shù)據(jù)處理試樣中左旋多巴的含量按照式(1)計算：………….式中：w——試樣中左旋多巴含量，單位為克每百克(g/100g);p——由標準工作曲線得到的試樣中左旋多巴質量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——試樣定容體積，單位為毫升(mL);f——試樣溶液稀釋倍數(shù)；計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數(shù)字。4GB/T40267—202110精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。11其他本方法測定左旋多巴的檢出限為0.000275g/100g,定量限為0.00110