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課時(shí)4動(dòng)物細(xì)胞工程一、選擇題1.[2024遼寧]大量懸浮培育產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞,可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是(D)A.懸浮培育單克隆細(xì)胞可有效避開接觸抑制B.用于培育單克隆細(xì)胞的培育基通常需加血清C.當(dāng)病毒達(dá)到確定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D.培育基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量解析懸浮培育單克隆細(xì)胞,可以保證足夠的氣體交換,通過振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散狀態(tài)懸浮于培育液內(nèi),可有效避開接觸抑制,A正確;由于細(xì)胞的生長(zhǎng)是比較困難的過程,血清中含有一些細(xì)胞生存的必要成分,用于培育單克隆細(xì)胞的培育基通常需加血清,B正確;病毒借助于細(xì)胞進(jìn)行繁殖,利用了宿主細(xì)胞的物質(zhì)、能量等,當(dāng)病毒達(dá)到確定數(shù)量時(shí)細(xì)胞的生命活動(dòng)會(huì)受到影響,進(jìn)而影響細(xì)胞的增殖,C正確;細(xì)胞的正常生命活動(dòng)須要相宜的pH,培育基的pH會(huì)影響細(xì)胞代謝,進(jìn)而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。2.[2024牡丹江一模]試驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞進(jìn)行貼壁生長(zhǎng)培育的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(D)A.甲過程須要在無菌條件下進(jìn)行B.乙過程須要用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶等處理皮膚組織C.丙過程是原代培育,可能出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.丁過程可以干脆離心來進(jìn)行傳代培育解析甲過程表示取試驗(yàn)小鼠的組織細(xì)胞,離體動(dòng)物細(xì)胞培育須要無菌、無毒的環(huán)境,因此甲過程須要在無菌條件下進(jìn)行,A正確;乙過程表示用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶等處理皮膚組織,使其分散成單個(gè)皮膚細(xì)胞,B正確;丙過程表示原代培育,會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,C正確;丁過程表示傳代培育,該過程也須要用胰蛋白酶等處理細(xì)胞,使貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)皮膚細(xì)胞,再進(jìn)行離心,D錯(cuò)誤。3.[2024湖南九校聯(lián)考]運(yùn)用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”過程可選用如下技術(shù)路途。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(D)A.“三親嬰兒”的遺傳物質(zhì)來自捐獻(xiàn)者、母親及供應(yīng)精子的男子B.圖中的精子在參加受精前須要進(jìn)行獲能處理C.該項(xiàng)技術(shù)的細(xì)胞學(xué)原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性D.圖中捐獻(xiàn)者和母親的卵母細(xì)胞取自卵巢或輸卵管解析由題圖分析可知,“三親嬰兒”的遺傳物質(zhì)來自捐獻(xiàn)者、母親及供應(yīng)精子的男子,A正確;圖中的精子參加受精前需經(jīng)過獲能處理才具有受精實(shí)力,B正確;題圖所示為動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù),其細(xì)胞學(xué)原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性,C正確;從題圖可以看出,重組后的卵母細(xì)胞須要在體外培育至MⅡ期,說明卵母細(xì)胞不是來自輸卵管,因?yàn)閬碜暂斅压艿穆涯讣?xì)胞已經(jīng)進(jìn)入了MⅡ期,D錯(cuò)誤。4.[2024浙江聯(lián)考]抗原確定簇是確定抗原特異性的特別化學(xué)基團(tuán),大多存在于抗原物質(zhì)的表面,一個(gè)自然抗原可以有多種和多個(gè)抗原確定簇。如圖是某種RNA病毒的結(jié)構(gòu)蛋白M表面的兩種抗原確定簇及這兩種抗原確定簇與相應(yīng)抗體結(jié)合的示意圖,將蛋白M注入小鼠體內(nèi)一段時(shí)間后,提取該小鼠的血清和免疫細(xì)胞,并利用免疫細(xì)胞制備單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(B)A.抗體與抗原的結(jié)合實(shí)質(zhì)是抗體與抗原確定簇的結(jié)合B.制備單克隆抗體時(shí)須要先將分別出的免疫細(xì)胞進(jìn)行克隆化培育C.利用該小鼠能制備不止一種抗蛋白M的單克隆抗體D.該蛋白M可用于制備針對(duì)該RNA病毒的疫苗解析單克隆抗體制備過程中須要先將分別出的免疫細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,不須要先將免疫細(xì)胞進(jìn)行克隆化培育,B錯(cuò)誤。二、非選擇題5.[2024長(zhǎng)沙模擬,10分]隨著基因工程等現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展,動(dòng)物細(xì)胞工程的理論和應(yīng)用均獲得了突破性的進(jìn)展。如圖為動(dòng)物細(xì)胞工程涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域?;卮鹣铝袉栴}:(1)在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),將成塊的組織中的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理。在培育過程中,要向培育液中加入確定量的抗生素,以防止微生物的污染;還須要向培育液中加入血清等一些自然成分,以保證細(xì)胞所需的養(yǎng)分。(2)與植物細(xì)胞不同,動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著細(xì)胞分化程度的提高而漸漸受到限制,因此,到目前為止,用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物,實(shí)際是通過圖中所示的核移植技術(shù)實(shí)現(xiàn)的。接受圖中的細(xì)胞融合技術(shù),可使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)單核(填“單核”或“多核”)的雜交細(xì)胞。解析(1)在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),需用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理組織塊,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。在細(xì)胞培育過程中,要向培育液中加入確定量的抗生素,以防止微生物的污染;須要向培育液中加入血清等一些自然成分,以保證細(xì)胞所需的養(yǎng)分。(2)動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著細(xì)胞分化程度的提高而漸漸受到限制,因此,用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物,實(shí)際是通過核移植技術(shù)實(shí)現(xiàn)的。細(xì)胞融合技術(shù)可使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)單核的雜交細(xì)胞。一、選擇題6.[2024山西聯(lián)考]我國(guó)科學(xué)家勝利用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠,部分流程如圖所示,其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶,TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列說法正確的是(A)A.推想組蛋白乙?;腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程B.①過程的小分子化合物可誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞C.③過程中運(yùn)用有活性的病毒處理的目的是誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.圖示流程未運(yùn)用胚胎移植等技術(shù)解析結(jié)合題圖可知,在重構(gòu)胚中注入Kdm4d的mRNA,并用TSA處理后,重構(gòu)胚發(fā)育成克隆鼠,而Kdm4d的mRNA的翻譯產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶,可以使組蛋白去甲基化,TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑,可抑制組蛋白脫乙酰酶的作用,組蛋白可發(fā)生正常的乙酰化修飾,故推想組蛋白乙?;腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程,A正確;①過程的小分子化合物可誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞形成iPS細(xì)胞,而不是突變?yōu)閕PS細(xì)胞,B錯(cuò)誤;③為動(dòng)物細(xì)胞融合的過程,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合所用的病毒是滅活的病毒,C錯(cuò)誤;圖示流程運(yùn)用了體細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù),D錯(cuò)誤。7.[2024安徽六校聯(lián)考]探討人員利用CD14蛋白制備抗CD14單克隆抗體的流程如圖所示,下列選項(xiàng)錯(cuò)誤的是(A)A.步驟②可干脆將從小鼠脾臟中分別出的能分泌抗CD14抗體的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B.步驟③中的特定培育基屬于選擇培育基C.步驟⑤除圖中所示途徑外還可以將篩選出的雜交瘤細(xì)胞置于動(dòng)物細(xì)胞培育液中培育D.圖中步驟⑥能從小鼠的腹水中提取與CD14蛋白特異性結(jié)合的抗CD14單克隆抗體解析步驟②無法將能分泌抗CD14抗體的漿細(xì)胞與其他B淋巴細(xì)胞分別開,因此應(yīng)先將從小鼠脾臟中分別出的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,之后再進(jìn)行篩選,A錯(cuò)誤;步驟③為用選擇培育基進(jìn)行培育,以篩選出雜交瘤細(xì)胞,步驟④為通過克隆化培育和專一抗體檢測(cè)進(jìn)行進(jìn)一步篩選,以篩選出既能大量增殖,又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,B正確;篩選出的雜交瘤細(xì)胞既可以注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,也可以在動(dòng)物細(xì)胞培育液中培育,其中注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖時(shí),可從小鼠腹水中提取相應(yīng)單克隆抗體,C、D正確。8.[2024宿遷檢測(cè)]6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6PD)有F和S兩種類型,分別由一對(duì)等位基因XF和XS編碼?;蛐蜑閄FXS的女性體細(xì)胞中的兩條X染色體會(huì)有一條隨機(jī)失活,且這個(gè)細(xì)胞的后代相應(yīng)的X染色體均會(huì)發(fā)生同樣的變更。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進(jìn)行細(xì)胞的原代培育,再對(duì)不同的單細(xì)胞分別進(jìn)行單克隆培育。分別對(duì)原代培育和單克隆培育的細(xì)胞進(jìn)行G-6PD蛋白電泳檢測(cè),結(jié)果如圖所示。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(D)A.動(dòng)物細(xì)胞培育是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)B.用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.原代培育的細(xì)胞電泳圖有2個(gè)條帶是因?yàn)橥瑫r(shí)檢測(cè)了不止一個(gè)細(xì)胞D.單克隆培育的細(xì)胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同解析動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體的制備等都須要用到動(dòng)物細(xì)胞培育,故動(dòng)物細(xì)胞培育是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ),A正確;用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理皮膚組織,可使其分散成單個(gè)細(xì)胞,B正確;由題干信息可知,基因型為XFXS的女性體細(xì)胞中的兩條X染色體會(huì)有一條隨機(jī)失活,且這個(gè)細(xì)胞的后代相應(yīng)的X染色體均會(huì)發(fā)生同樣的變更,故對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行G-6PD蛋白電泳檢測(cè)后只顯示1個(gè)條帶,原代培育的細(xì)胞電泳圖有2個(gè)條帶是因?yàn)橥瑫r(shí)檢測(cè)了不止一個(gè)細(xì)胞,C正確;單克隆培育的細(xì)胞,是通過有絲分裂增殖得到的細(xì)胞,故單克隆培育的細(xì)胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因相同,表達(dá)的基因不愿定相同,D錯(cuò)誤。二、非選擇題9.[2024西安檢測(cè),15分]非洲豬瘟是由ASFV(一種雙鏈DNA病毒)感染豬引起的烈性傳染病。某探討小組將ASFV外殼蛋白基因?qū)胴i體細(xì)胞中,利用核移植技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因豬,從而得到自動(dòng)產(chǎn)生ASFV抗體的個(gè)體,其過程如圖所示。回答下列問題:(1)圖中步驟①接受的技術(shù)手段是細(xì)胞核移植,結(jié)構(gòu)乙處于胚胎發(fā)育過程的囊胚期。進(jìn)行步驟③時(shí),受體C豬子宮對(duì)外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),從而為來自供體的胚胎在受體內(nèi)的存活供應(yīng)了可能。(2)B豬體細(xì)胞在培育瓶中培育時(shí),除必需保證環(huán)境是無菌、無毒的之外,還必需定期更換培育液,以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。培育到確定程度后,須要分瓶接著培育,分瓶后的培育過程稱為傳代培育。(3)若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,須要構(gòu)建基因表達(dá)載體,該過程接受雙酶切法處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,其優(yōu)點(diǎn)是保證目的基因和載體定向連接。(4)利用抗原—抗體雜交技術(shù)推斷D豬是否產(chǎn)生ASFV抗體時(shí),運(yùn)用的抗原物質(zhì)最好是ASFV外殼蛋白。該抗體也可以運(yùn)用雜交瘤技術(shù)來制備,利用雜交瘤技術(shù)制備該抗體時(shí),雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)ASFV外殼蛋白免疫后的B淋巴細(xì)胞融合獲得的。解析(1)步驟③表示胚胎移植,進(jìn)行胚胎移植時(shí),要對(duì)受體進(jìn)行同期發(fā)情處理,受體子宮對(duì)外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為來自供體的胚胎在受體內(nèi)的存活供應(yīng)了可能。(2)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),必需保證環(huán)境是無菌、無毒的,此外,還要定期更換培
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