輸血前相容性試驗

關于輸血前相容性試驗第一節(jié)重視血液標本一、血標本采集要求（一）輸血申請單的正確書寫必須包含足夠的信息以識別受血者身份的唯一性，大部分醫(yī)療機構都是使用受血者姓名及其身份證號碼（或住院號）。當輸血科（血庫）的技術人員在配血過程中遇到問題時，受血者的診斷、輸血史及妊娠史是非常有意義的。凡資料不全的輸血申請單，尤其是缺乏輸血史、妊娠史和無主治醫(yī)師簽名的，要退回臨床科室補上，不得遷就。第2頁,共53頁，星期六，2024年，5月（二）受血者身份識別

1、采用標有受血者全名和住院號的腕帶來識別受血者。

2、使用更安全的條形碼系統(tǒng)對受血者身份進行識別。在床邊完成采血和粘貼標簽后，可用一個便攜式的條形碼掃描儀進行掃描，以確認血標本試管上的標簽信息與受血者腕帶上的身份信息是否相符。

3、使用其他標識方式。受血者無法戴腕帶，比如大面積燒傷的患者、早產(chǎn)兒以及某些外科手術中的患者。有些醫(yī)療機構就允許將患者的身份標識符放在患者的踝關節(jié)或者前額，門診患者除了使用腕帶之外，也可以用駕駛證或其他含本人相片的身份信息來識別。第3頁,共53頁，星期六，2024年，5月（三）血標本類型的選擇1．選擇血清標本的情況(1)試管法：血漿標本中的纖維蛋白小凝塊可干擾檢測結果，而血清標本可避免。(2)存在需激活補體才能反應的抗體：血漿標本因為某些抗凝劑能螯合鈣離子及鎂離子，阻斷補體激活途徑。2．選擇血漿標本的情況(1)凝血時間延長或經(jīng)過肝素化的血液：這種血標本可能發(fā)生不完全凝血，如采用其血清進行檢測，其結果可能不準確。因此，對于這種情況，可采集抗凝血標本分離血漿進行檢測。如要使用其血清，可在這些血標本中加入凝血酶或加硫酸魚精蛋白中和肝素。(2)采用微柱凝膠技術：應選擇血漿標本進行檢測。第4頁,共53頁，星期六，2024年，5月（四）血標本采集部位的選擇1、不能在輸液部位的上段（近心端）靜脈穿刺采血，但可以在下段（遠心端）采血，最好是在另一個肢體采血，以防止標本稀釋。必須在輸液血管內采血，應去掉最初的5～10ml血液。2、新生兒應取其臍帶的胎盤血；嬰幼兒采頸靜脈血；重癥休克患者可以采集股靜脈血或在深靜脈插管部位采血。（五）血標本的質量要求1．血標本標識的要求(1)血標本標識與患者身份的一致性第5頁,共53頁，星期六，2024年，5月(2)血標本采集者的標識：采血者最好在血標本管標簽上簽名及記錄采血日期。(3)血標本的識別信息與輸血申請單上的信息應一致2．血標本外觀的要求(1)避免使用溶血的血標本：采集過程中引起的機械性溶血，應當重新采集。患者確實存在血管內溶血，而必須使用溶血的血標本時，為了防止對溶血結果誤判建議使用的方法是：①在反定型及交叉配血的紅細胞中加入適量EDTA鹽水溶液。由于EDTA能夠螫合補體激活所需的Mg2+和Ca2+，故可阻斷補體活化引起的紅細胞破壞，即溶血；②另一種方法是在試驗前后作溶血程度的比較。可用生理鹽水（或6%白蛋白）與患者的紅細胞混合為第6頁,共53頁，星期六，2024年，5月陰性對照，將患者血清與患者的細胞混合，反應后離心，比較兩種細胞扣(cellbutton)的大小，或者比較實驗管與對照管的溶血程度，以證實是否有紅細胞破壞增加的可能性。(2)避免使用高脂血標本：高脂血癥患者禁食12小時后重新采血。(3)其他要求：試管應無破損和滲漏。（六）血標本的采集時間要求1、普通患者一般用3天內的血標本做交叉配血試驗。2、特殊患者

(1)地中海貧血患者：在每3天一次抗篩及鑒定為陰性時，血標本采集時間可適當放寬。

(2)需要剖宮產(chǎn)的孕婦：免疫抗體產(chǎn)生最可能發(fā)生于最第7頁,共53頁，星期六，2024年，5月后3個月。故至少是7天之內的標本。但盡可能在輸血前采集血標本，以利于在發(fā)生輸血不良反應時進行回顧性檢查。

(3)需輸注右旋糖酐的患者：右旋糖酐是大分子葡萄糖聚合物，會覆蓋于紅細胞膜上，使紅細胞容易發(fā)生假凝集，應在輸注前抽取血標本備用。（七）血標本采集量的要求1、推薦用EDTA.K2抗凝，血量>3ml，抗體鑒定>5ml。2、疑難交叉配血要求送檢2管，一管抗凝，一管不抗凝，血量均>3ml。綜上所述，對不符合要求的情況，可遵循血標本“八不”接收原則：①血標本無標簽或填寫不清不收；②血標本與輸血申請單所填項目不符不收；③血標本量少于3ml不收；④血標本被稀釋不收；⑤血標本溶血不收第8頁,共53頁，星期六，2024年，5月（溶血性疾病除外）；⑥用肝素治療者的血標本未經(jīng)魚精蛋白對抗使之凝血或未經(jīng)標記說明不收；⑦用右旋糖酐、羥乙基淀粉等大分子物質治療后采集的血標本未作標記說明不收；⑧非醫(yī)護人員或非授權人員送血標本不收。二、血標本保存的要求（一）全血標本的保存在輸血后，受血者和獻血者的血標本必須密封或將試管蓋緊，在1～6℃保存7天。用于輸血反應尤其是遲發(fā)性溶血性輸血反應（多發(fā)生于輸血后3～7天）查因。（二）血清或血漿標本的保存可將血標本分離血清或血漿，置于-30℃保存，保第9頁,共53頁，星期六，2024年，5月存（因許多遲發(fā)性溶血性輸血反應在輸血后10天未必出現(xiàn)臨床表現(xiàn)）第二節(jié)堅持正反定型正反定型起到互相驗證和質量控制的作用，只有正反定型結果相符才能正確判定ABO血型。除了出生4個月以內的嬰兒和新生兒只做正定型之外，必須堅持正反定型。其主要臨床意義有：1、易于發(fā)現(xiàn)和糾正血型鑒定錯誤。2、有助于發(fā)現(xiàn)ABO亞型，因為亞型患者紅細胞上A或B抗原可能很弱，例如將A2型誤判為A1型，如果這種患者含有抗-A1，輸A型血（含A1抗原）便會發(fā)生急性溶血性輸血反應。第10頁,共53頁，星期六，2024年，5月一、ABO血型的鑒定（一）對常規(guī)血標本堅持正反定型1、人類在出生4個月后抗體已經(jīng)形成，除了出生4個月以內的嬰兒和新、生兒之外，常規(guī)檢測受血者和獻血者ABO血型必須正反定型,并同時進行自身對照和陰性對照。為了防止對溶血結果誤判,用于配制反定型試劑紅細胞的稀釋液應含有EDTA。2、方法選擇不能用玻片法，可用試管法和微柱凝膠法。3、ABO正反定型不一致的原因(1)人為因素：操作中加錯標本或試劑；離心速度不夠第11頁,共53頁，星期六，2024年，5月或速度過快；細胞與血清比例不當；結果判讀錯誤等。(2)客觀因素：因某種疾?。ㄈ绨籽。е驴乖瓬p弱，紅細胞發(fā)生多凝集現(xiàn)象及產(chǎn)生類B物質；抗體效價低，如嬰幼兒、老年人、低丙種球蛋白血癥等；存在不規(guī)則抗體；某些藥物干擾；試劑不標準、試劑失效或污染等。

4．ABO正反定型不一致的處理使用原始標本重新配制紅細胞懸液，采用試管法和洗滌紅細胞重新檢測時，同時做自身對照。當檢測結果與以往記錄不一致時，應重新采集血標本再檢測一次。

5．正反定型不相符時的輸血獻血者正反定型不相符，該袋血不能發(fā)出使用；患者正反定型不相符，如遇緊急輸血搶救，可先輸O型紅第12頁,共53頁，星期六，2024年，5月細胞（但不能輸O型全血，因全血有近一半的血漿，可能導致溶血反應），然后再查找原因。（二）對出生4個月內的嬰兒及新生兒血標本只做正定型二、RhD血型的鑒定我國已規(guī)定常規(guī)血型鑒定還應包括RhD定型。三、疑難血型鑒定（一）ABO疑難血型的鑒定主要原因：①某些慢性疾病致ABH抗原減弱或丟失；老年人、化療或與疾病有關的免疫抑制致天然抗體丟失。②胃腸道腫瘤或梗阻患者出現(xiàn)過量可溶性ABH血型物質。③多發(fā)性骨髓瘤或其他異常蛋白血癥的患者或靜脈輸注第13頁,共53頁，星期六，2024年，5月高分子質量的液體可形成緡錢狀紅細胞。④高效價冷自身抗體、臍帶血標本中的Wharton膠可引起紅細胞凝集。⑤細菌酶、造血組織中體細胞的突變或遺傳性疾病形成多凝集紅細胞。⑥多種細胞群或嵌合現(xiàn)象，如造血干細胞移植后、輸不同ABO血型的紅細胞、雙胎紅細胞生成組織的宮內交換，引起混合視野凝集。⑦有結腸癌或敗血癥病史的患者產(chǎn)生獲得性B抗原。⑧紅細胞表面存在少量異型血型抗原。⑨存在A2亞型抗原，血漿中存在抗-A1或IgM型同種抗體，如抗-P1、抗-M和抗-Leb等。⑩缺乏ABH抗原，含有抗-H、抗-A和抗-B的盂買表型或類盂買表型的存在等。為了解決以上ABO疑難血型鑒定的問題，可根據(jù)不同的情況選擇延長室溫孵育時間，降低孵育溫度，采用

第14頁,共53頁，星期六，2024年，5月吸收放散試驗、洗滌技術、生理鹽水稀釋、鹽水替代、ABO血型基因分型、設自身對照，或觀察是否出現(xiàn)不同程度的混合視野凝集等方法來解決。（二）其他疑難血型的鑒定存在自身抗體或異常血清蛋白時RhD血型的鑒定直接抗球蛋白試驗強陽性的致敏紅細胞極易造成血型鑒定錯誤，這些致敏紅細胞在高蛋白或高分子聚合物介質中易發(fā)生自凝，可出現(xiàn)RhD陰性受血者被錯誤地鑒定為RhD陽性的情況。為了避免這種情況下血型鑒定的錯誤，可采用放散或解離紅細胞上大多數(shù)自身抗體后再進行RhD定型。常用的方法有：56℃水浴放散法、氯喹放散法、酸洗脫法。第15頁,共53頁，星期六，2024年，5月四、緊急情況下ABO和RhD血型鑒定（一）緊急情況的定義緊急情況是指沒有足夠的時間采用常規(guī)的方法進行ABO血型和RhD血型定型。（二）緊急情況下的ABO和RhD血型鑒定在緊急情況下進行血型鑒定時，必須包括用抗-A、抗-B和抗-D，并設立適當?shù)膶φ栈蜻M行反定型試驗。當檢測結果顯示患者血型為AB型和RhD陽性時，必須非常小心。因為實驗過程中沒有進行嚴格的對照試驗排除冷凝集等因素。緊急發(fā)血后，繼續(xù)按規(guī)范進行ABO和RhD血型鑒定，發(fā)現(xiàn)問題及時糾正。第16頁,共53頁，星期六，2024年，5月第三節(jié)做好抗體篩選與鑒定對于有輸血史、妊娠史、交叉配血不合或短期內需要接受多次輸血者，應對患者的血液進行紅細胞不規(guī)則抗體篩選試驗，如果篩選結果為陽性，應該讓臨床醫(yī)師知道可能要推遲提供所需的血液，同時要預留足夠的時間，讓技術人員鑒定抗體的特異性，選擇相合的血液。一、抗體篩選（一）紅細胞不規(guī)則抗體篩選的原理紅細胞不規(guī)則抗體篩選的原理是用一套商品化的2～3個獻血者的O型紅細胞對受血者的血清或血漿進行抗原抗體反應，以篩查出在37℃有臨床意義的抗體。每個篩選紅細胞的表型或抗原譜已經(jīng)被詳細篩選第17頁,共53頁，星期六，2024年，5月過，由2～3個人份的O型紅細胞組成一套試劑，要求盡可能包括更多的抗原，至少需要表達下列18個抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、K、k、Fya、Fyb、Jka、Jkb，而且以純合子基因所表達的抗原為佳，各組細胞抗原最好具有互補性。隨機獲得的O型紅細胞作為篩選紅細胞則難以達到上述要求，易造成漏檢。（二）紅細胞不規(guī)則抗體篩選的臨床意義由于輸血或妊娠接觸外來的紅細胞抗原引起同種免疫產(chǎn)生的抗體通常稱為紅細胞同種抗體。紅細胞同種免疫患者中有20%產(chǎn)生多種同種抗體。有臨床意義的紅細胞同種抗體與溶血性輸血反應有關。通過紅細胞不規(guī)則抗體篩選，可檢出這些抗體。第18頁,共53頁，星期六，2024年，5月（三）抗體篩選的基本技術1、間接抗球蛋白試驗：最可靠的方法。(1)鹽水-間接抗球蛋白試驗：由于需要較長的孵育時間,一般不做為常規(guī)檢測方法。(2)白蛋白-間接抗球蛋白試驗：可提高靈敏度，縮短孵育時間至30分鐘。(3)低離子強度溶液-間接抗球蛋白試驗：孵育時間可縮短至10分鐘，是最合適的方法

(4)聚乙二醇-間接抗球蛋白試驗：對IgM型抗體，尤其是ABO和Lewis系統(tǒng)中的IgM抗體呈弱反應性，甚至無法被檢測出來，但能提高有臨床意義的IgG型抗體檢測的靈敏度。(5)酶-間接抗球蛋白試驗：因為酶會破壞某些紅細胞抗第19頁,共53頁，星期六，2024年，5月原，如M、N、S、Fya和Fyb，因此，酶法不作為常規(guī)使用方法。但是,酶法在Rh系統(tǒng)和Kidd系統(tǒng)的抗體鑒定中特別有用，經(jīng)常用來提高抗體鑒定靈敏度。

2、凝聚胺試驗是孵育時間最短的敏感試驗。能夠提高對RhD特異性抗體鑒定的靈敏度，但檢測抗Kell(K)抗體的靈敏度卻很低。3、凝膠法或微板法可實現(xiàn)自動化測試，減少實驗室血標本識別錯誤。其中微柱凝膠法簡單、有效，但無法排除無臨床意義抗體的干擾。（四）紅細胞不規(guī)則抗體篩選的局限性1、低效價抗體的漏檢近30%紅細胞同種抗體在產(chǎn)生后的5年內仍然存在于體內，有些抗體效價已降至難以檢第20頁,共53頁，星期六，2024年，5月出的水平，有可能被漏檢。在輸血后，漏檢的抗體會再次對獻血者的紅細胞上的特異性抗原發(fā)生回憶反應，產(chǎn)生相應的抗體。因此，即使抗篩陰性，也應結合輸血史、妊娠史進行綜合分析，防止發(fā)生遲發(fā)性溶血性輸血反應。2、低頻率抗原的抗體可能被漏檢低頻率抗原比如Cw、V、Kpa、Jsa和Wra抗原，在篩選細胞上是罕見的，篩選細胞可能不含有這些抗原。因此，如果血清或血漿中存在這些低頻率抗原的抗體，也有可能被漏檢，這對于有輸血史和妊娠史的患者必須加倍小心。以往的抗體鑒定記錄有重要參考價值。二、抗體鑒定（一）紅細胞不規(guī)則抗體鑒定的原理第21頁,共53頁，星期六，2024年，5月

紅細胞不規(guī)則抗體鑒定是利用試劑紅細胞（譜細胞）對受血者血清或血漿中的抗體進行檢測，譜細胞常包含8～16種已知血型的O型紅細胞配套組成，每一種紅細胞來自一個O型獻血者。要求含有8個或8個以上的譜細胞數(shù)，至少包括以下抗原：K、k、Fya、Fyb、Jka、Jkb、S、s和M等，應能鑒別多種抗體同時存在的情況。（二）紅細胞不規(guī)則抗體鑒定的內容1、自身抗體和同種抗體檢查觀察受血者的血清與受血者自身紅細胞的反應情況，確定血清內是否有自身抗體，或自身抗體和同種抗體兩者同時存在。2、抗體特異性檢查應用各種抗體檢查技術，檢測受血者的血清，確定其抗體的特異性。第22頁,共53頁，星期六，2024年，5月確定抗體特異性時可以綜合運用以下的資料：①觀察受檢血清與每個抗體鑒定譜細胞的反應結果；②觀察受檢血清與其自身細胞的反應結果；③觀察受檢血清與酶處理細胞的反應結果；④觀察反應的格局，檢查各個反應相的結果，包括不同的溫度、懸浮介質或酶作用的情況，一些抗體的特異性與反應介質直接相關；⑤有否溶血現(xiàn)象；⑥在陽性反應的細胞中，反應強度有否不同，是否出現(xiàn)劑量反應效應；⑦對自身紅細胞上的抗原進行詳細檢查，從所缺少的抗原情況，來判斷是否存在相應的抗體。第四節(jié)嚴格交叉配血“嚴格交叉配血”是指所采用的方法必須能檢出ABO第23頁,共53頁，星期六，2024年，5月不相容及ABO系統(tǒng)之外的有臨床意義的抗體，主要為IgG類抗體。一、交叉配血的內容（一）用于交叉配血的血液制品血型選擇1、ABO血型的選擇表2-3血液成分的ABO血型選擇血液成分ABO血型選擇全血必須與受血者的血型一致紅細胞必須與受血者的血型一致或與受血者的血漿相容單采粒細胞必須與受血者的血型一致或與受血者的血漿相容新鮮冰凍血漿應該與受血者的紅細胞相容單采血小板應該與受血者的紅細胞相容冷沉淀應該與受血者的紅細胞相容第24頁,共53頁，星期六，2024年，5月2、RhD血型的選擇緊急情況下，如果受血者為RhD陰性的女性，且處于育齡期，輸注RhD陽性的血液，其D抗原產(chǎn)生抗-D的概率約70%，必須輸注RhD陰性血。RhD陰性的男性和超過生育年齡的女性中，如果血清中不存在抗-D時，可允許輸注RhD陽性的紅細胞；

RhD陰性育齡期女性輸注RhD陽性血液時，最好根據(jù)輸注紅細胞量，考慮使用RhD免疫球蛋白，但應充分權衡輸血利益與風險，并充分告知患者及其家屬。3、其他血型抗原的選擇當存在或以前出現(xiàn)過有臨床意義的紅細胞不規(guī)則抗體時，應該選擇相應抗原陰性紅細胞進行交叉配血。但是，如果抗體鑒定確認該抗體是在第25頁,共53頁，星期六，2024年，5月37℃以下才起反應，則不需要輸抗原陰性的血液。如果有冷反應抗體存在，只要在37℃下進行交叉配血是相容的，輸注該袋血液是安全的，但應注意保暖，必要時用輸血加溫器。（二）交叉配血交叉配血包括主側交叉配血和次側交叉配血。1、主側交叉配血可檢出患者當前是否存在有臨床意義的抗體，還可以驗證血型是否正確。2、次側交叉配血在歐美等發(fā)達國家，對這個試驗的需求已經(jīng)逐漸減少，因為獻血者的血液都經(jīng)過了紅細胞不規(guī)則抗體篩選。獻血者抗篩陽性，其血液一般不準入庫。此外，現(xiàn)在大部分的輸血都是輸注只含少量獻血者血漿第26頁,共53頁，星期六，2024年，5月的紅細胞，進行次側交叉配血沒有很大價值。但是，我國獻血者的血液均未做紅細胞不規(guī)則抗體篩選，在輸注全血和紅細胞時仍需做次側交叉配血。3、自身對照由患者自身血清和自身紅細胞組成（自身對照有助于分析交叉配血試驗中出現(xiàn)的陽性結果）。二、常用的交叉配血方法如果患者過去或現(xiàn)在都沒有紅細胞不完全抗體的存在，那么鹽水介質交叉配血或電子交叉配血是首選的方法。否則，必須選擇能檢出不完全抗體的交叉配血法，如凝聚胺法、酶法或抗球蛋白法等。（一）鹽水介質交叉配血法鹽水法是驗證ABO配合性最常用的方法，這種方法只能檢出ABO.P.Lewis.MN等系統(tǒng)的天然IgM類型完全第27頁,共53頁，星期六，2024年，5月抗體，不能檢出Rh.Kell.Kidd.Duffy等系統(tǒng)的免疫性IgG類不完全抗體。鹽水介質交叉配血法只適用于下列情況：第一、在用非混合的篩選細胞進行的紅細胞不規(guī)則抗體篩選試驗中，沒有發(fā)現(xiàn)紅細胞不規(guī)則抗體的存在；第二、患者過去沒有檢出紅細胞不規(guī)則抗體的歷史記錄。（二）酶法能檢出不完全抗體。利用酶消化紅細胞表面的唾液酸，降低表面電荷，縮小紅細胞間距，使之得以互相靠攏而顯示出肉眼可見的凝集。酶法操作時間較長、較為費力，而且酶能改變某些血型系統(tǒng)的抗原構型，破壞其抗原性，加之酶不易保存，故使用受到一定限制。第28頁,共53頁，星期六，2024年，5月（三）凝聚胺交叉配血法凝聚胺溶解后產(chǎn)生很多正電荷，可中和紅細胞表面負電荷，使紅細胞間距縮短，引起紅細胞非特異性凝聚，這種凝聚是可逆的；抗體致敏的紅細胞在凝聚胺作用下發(fā)生凝集，這種凝集是不可逆的。因而可用帶負電荷的枸櫞酸鈉中和凝聚胺正電荷，從而把凝聚和凝集區(qū)別開來。凝聚胺法有幾個優(yōu)點：首先，凝聚胺交叉配血法對Rh血型系統(tǒng)抗體特別敏感，檢出不完全抗體的靈敏度高，特異性好。其次，因其方法簡便、快速、價格不高，易于在基層醫(yī)療機構推廣。因此，盡管凝聚胺對Kell系統(tǒng)不敏感，但由于漢族人幾乎100%為K抗原陰第29頁,共53頁，星期六，2024年，5月性，通常不考慮抗-Kell(K)，且在我國以Rh系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血性輸血反應最常見，我國中小醫(yī)療機構適合用凝聚胺交叉配血法。（四）抗球蛋白交叉配血法抗球蛋白是第二抗體(即抗抗體，抗-IgG)，在不完全抗體(IgG)間“搭橋”，延長了不完全抗體的長度，從而使紅細胞互相靠攏顯示凝集反應。白種人中約有9%是K抗原陽性，凝聚胺對Kell系統(tǒng)不敏感，而抗球蛋白法對Kell系統(tǒng)抗體敏感性高，是檢測IgG抗體最可靠的方法，缺點是試驗過程費時、費力。（五）微柱凝膠交叉配血法微柱凝膠法的原理是抗原抗體反應與凝膠分子篩技術相結合，通過調節(jié)葡聚糖凝膠的濃度控制分子篩孔徑第30頁,共53頁，星期六，2024年，5月大小，使分子篩只允許游離紅細胞通過，不允許凝集紅細胞通過。傳統(tǒng)的交叉配血方法雖然所需設備簡單，但因影響因素多，時而出現(xiàn)差錯，甚至造成事故。而微柱凝膠法雖價格昂貴，耗時長，可出現(xiàn)假陽性，但其優(yōu)點很多，如靈敏度高，重復性好，還能自動化操作，最大限度地減少了人為誤差，可實現(xiàn)輸血科（血庫）各種信息的計算機管理。經(jīng)過大量的臨床實踐，這種方法已逐漸成熟，使輸血安全更有保障。現(xiàn)在歐美國家以及我國部分醫(yī)療機構已將微柱凝膠法作為交叉配血的常規(guī)手段。三、交叉配血不合的解決方案（一）抗篩陰性、主側陽性、自身對照陰性情況：1、ABO血型不合鹽水法主側陽性提示血型鑒定錯第31頁,共53頁，星期六，2024年，5月誤，另一種情況是受血者的血清中含有從以前輸?shù)难夯蛟陟o脈注射免疫球蛋白治療中獲得的抗-A或抗-B。2、冷反應同種抗體的存在冷反應同種抗體（如抗-M或抗-P）也有可能在室溫下發(fā)生反應。仔細地回顧患者的輸血史，有可能提供依據(jù)。3、直接抗球蛋白試驗陽性的血液在抗球蛋白試驗時，如果受血者的血清只與一袋血不配合，該袋血可能是直抗陽性，如果證實，該袋血不能用于輸血。4、受血者存在抗低頻率抗原的抗體如果獻血者血液是直抗陰性，有可能是受血者的血清里含有低頻率抗原的同種抗體，但卻未能被篩選細胞檢出。這時候抗體鑒定第32頁,共53頁，星期六，2024年，5月試驗應包括對盡可能多的低頻率抗原進行檢查。5、受血者存在純合子抗原的抗體另外一種可能的答案是受血者存在只與獻血者紅細胞呈劑量依賴關系的純合子抗原發(fā)生反應的抗體。在這種特殊的情況下，篩選細胞沒有與受血者的抗體發(fā)生反應，是因為抗原抗體反應呈劑量依賴關系。這時要采用更高級的技術進行抗體鑒定以解決這個問題。（二）抗篩陽性、主側陽性、自身對照陰性情況：這通常是受血者產(chǎn)生了高頻率同種抗體或已經(jīng)用篩選細胞檢出混合同種抗體，并且獻血者的紅細胞中含有相應的抗原。這時應對受血者作抗體鑒定，選擇相應抗原陰性的血液進行配血試驗。如果抗原陰性的血液仍然是不配合的，就要找另一種類型的血液，見表2-4。（三）抗篩陽性、主側陽性、自身對照陽性情況：第33頁,共53頁，星期六，2024年，5月1、自身抗體的存在大多數(shù)的自身抗體會與所有的細胞反應，為了確定同種抗體是否被受血者血清中的自身抗體反應掩蓋，必須在試驗前采用一定的技術去除自身抗體。2、同種抗體的存在受血者最近輸過血，則可能產(chǎn)生了同種抗體，導致了陽性的自身對照。此時，自身對照和直抗試驗都會顯示混合凝集。應該進行抗體鑒定，以解決配血不合的問題，包括對輸血前血標本的紅細胞抗原表型的研究。3、緡錢狀細胞形成受血者血清白蛋白和丙種球蛋白比例的倒置或使用大分子右旋糖酐或羥乙基淀粉溶液擴容時會導致紅細胞形成緡錢狀。這種現(xiàn)象與多發(fā)性骨髓瘤和巨球蛋白血癥等疾病有關。如果有必要區(qū)分很強的緡第34頁,共53頁，星期六，2024年，5月錢狀形成和抗體介導的凝集，可以使用鹽水替代技術，見表2-4。

表2-4交叉配血不合的可能原因及解決方案現(xiàn)象可能原因解決方案主側：＋自身對照：－抗體篩選：－a.受血者或獻血者ABO血型錯誤b．受血者血清中有紅細胞不規(guī)則抗體，但篩選細胞上無相應抗原c.獻血者紅細胞已被致敏a．重新鑒定血型，調查受血者有無輸血史及移植史b．選用抗原譜更廣的篩選細檢測受血者紅細胞不規(guī)則抗體c.對獻血者紅細胞做直接抗球蛋白試驗主側：＋自身對照：－抗體篩選：＋受血者血清中的同種抗體與獻血者紅細胞上相應抗原反應鑒定受血者紅細胞不規(guī)則抗體，選擇無對應抗原的血液進行交叉配血試驗主側：＋自身對照：＋抗體篩選：＋a.受血者血清中可能同時存在自身抗體和同種抗體b.白蛋白/球蛋白比例不正常c.血漿容量擴充劑的影響d．污染a.對受血者血清做自身吸收試驗，用吸收后血清鑒定紅細胞不規(guī)則抗體及交叉配血試驗b.鹽水添加試驗解決緡錢狀凝集c.洗滌細胞或重新采集血標本d．使用潔凈器具和符合要求的試劑第35頁,共53頁，星期六，2024年，5月

四、交叉配血試驗的臨床意義交叉配血試驗的目的是檢測供、受者的血液是否相容，以確保供、受者血液間沒有可測的不相容的抗原、抗體成分。少數(shù)臨床醫(yī)師發(fā)現(xiàn)血紅蛋白在輸血后反而下降而不查明原因又輕易地再次輸血，導致不完全抗體的效價急劇升高，出現(xiàn)血紅蛋白尿，甚至急性腎衰竭。在這種情況下，臨床醫(yī)師不要輕易地再次輸血，而是應該請輸血科（血庫）技術人員協(xié)助檢查受血者是否存在不完全抗體。如果檢測到不完全抗體而無法鑒定其特異性，則要多選幾袋血并采用多種方法（至少應包括抗球蛋白試驗）進行交叉配血，直到有相合的血液進行輸注。第36頁,共53頁，星期六，2024年，5月但是，如果輸血科（血庫）技術人員在輸血前已采用多種方法進行交叉配血仍未檢測到不完全抗體，遲發(fā)性溶血性輸血反應的發(fā)生，是因為以往輸血或妊娠產(chǎn)生的紅細胞不規(guī)則抗體效價已經(jīng)下降到難以檢測的水平，而在輸血后引起回憶反應，使這種抗體的效價急劇升高。不過，這種情況極為少見。如在這種遲發(fā)性溶血性輸血反應發(fā)生后抽取受血者的血液，即可檢測到這種不完全抗體，從而在下次輸血前多選幾袋血進行交叉配血，以選取相合的血液進行輸注。第37頁,共53頁，星期六，2024年，5月五、交叉配血試驗的局限性（一）單種血清學技術的局限性：不能檢測所有的抗體，在意外溶血的調查中，實驗室應當用不同的強化介質、延長孵育時間、酶處理技術或增加血清與紅細胞的比例等技術手段進行試驗。（二）不能檢測效價下降的同種抗體，這會導致輸血后回憶反應，產(chǎn)生相應抗體。應根據(jù)以往的抗體鑒定結果，選擇對應抗原陰性血液配血。（三）不能檢出對紅細胞以外的抗體（如血小板、白細胞、血清蛋白抗體等）。（四）獻血者紅細胞抗原的特殊性第38頁,共53頁，星期六，2024年，5月少數(shù)受血者紅細胞不規(guī)則抗體不能用血清學方法鑒別?？蓪ζ浼t細胞進行Rh、MNSs、Kell、Duffy和Kidd系統(tǒng)抗原表型檢測。對于缺乏某種紅細胞抗原的受血者，選擇這種紅細胞抗原陰性的血液進行輸注。第五節(jié)認真對待疑難交叉配血一、免疫性溶血性貧血患者因其自身抗體可與所有紅細胞發(fā)生凝集，難以找到相容性的血液輸注。應遵循以下原則：①有溫抗體的受血者在交叉配血不完全相合時，選擇多份ABO血型相同的血液進行交叉配血試驗，采用所含紅細胞與受血者血清反應最弱的獻血者血液輸注；②對于存在冷抗體的受血者，應嚴格在37℃條件下進行交叉配血；③如果ABO第39頁,共53頁，星期六，2024年，5月血型未能確定，在搶救受血者的緊急情況下可立即輸注O型洗滌紅細胞。（一）溫抗體型自身免疫性溶血性貧血患者1、鑒別患者溶血的原因采用特異性單克隆抗-IgG試劑和抗-C3d試劑做直接抗球蛋白試驗，鑒別患者溶血的原因是IgG還是補體引起的。2、抗-C3d陽性、抗-IgG陰性患者對獻血者血液的選擇：選擇ABO及RhD血型相容血液，凝聚胺法交叉配血，或用特異性單克隆抗-IgG試劑進行抗球蛋白法交叉配血，輸注主側相合的洗滌紅細胞。3、抗-IgG陽性患者獻血者血液的選擇：如果抗-IgG陽性（抗-C3d陽性或陰性），則選擇Rh系統(tǒng)D、C、E、c、e抗原，Kidd(Jka，Jkb)系統(tǒng)抗原，Duffy(Fya，F(xiàn)yb)系統(tǒng)抗原相同的獻血者紅細胞，或與多第40頁,共53頁，星期六，2024年，5月名獻血者血液分別進行主側交叉配血。根據(jù)交叉配血結果選擇主側交叉配血相合或凝集最弱獻血者的洗滌紅細胞輸注。成人每次輸注紅細胞不超過2單位，盡量緩慢輸注并密切觀察。4、其他交叉配血方法也可對其抗凝血標本的紅細胞進行放散試驗，對其不抗凝血標本血清進行吸收試驗。然后對放散后的紅細胞和吸收后的血清復檢ABO和RhD血型，并與ABO及RhD血型相容的獻血者血液進行交叉配血試驗。（二）冷抗體型自身免疫性溶血性貧血患者存在冷抗體的患者在交叉配血時應嚴格在37℃條件下進行。（三）緊急情況下自身免疫性溶血性貧血患者如果ABO血型一時難以確定，患者的病情又十分危急，需緊急輸血搶救患者的生命，此時可立即給予O型洗滌第41頁,共53頁，星期六，2024年，5月紅細胞輸注。二、其他特殊情況（一）大量輸血和緊急非同型輸血1、大量輸血(1)一般情況下的大量輸血：當24小時內輸給受血者的血量等于或大于受血者全部的血容量時，即為大量輸血。大量輸血時除嚴格受血者與獻血者之間的交叉配血外，應特別注意獻血者之間的血液相容性。(2)緊急情況下的大量輸血：此時可簡化或取消交叉配血試驗，在緊急發(fā)血前，進行鹽水介質交叉配血試驗確定ABO的相容性。如果已知受血者血液中存在有臨床意義的不規(guī)則抗體，應當選擇相應抗原陰性的血液進行輸注。如無同型血液或受血者血型未知，可行緊急非同型血液輸注。第42頁,共53頁，星期六，2024年，5月2．緊急非同型血液輸注

(1)已知受血者ABO血型和RhD血型的情況：當發(fā)生急性大量失血時，需要對受血者進行緊急輸血，但又缺乏ABO或RhD同型的血液，可按表2-5的原則輸血，但不能輸注全血，只能輸注紅細胞。輸注的紅細胞只要求主側配血相合，次側配血不做要求。血漿和冷沉淀可以相容性輸注。表2-5緊急非ABO同型血液成分血型選擇原則受血者血型紅細胞血漿及冷沉淀首選次選三選首選次選AAO無AABBBO無BABOO無無OA、B或ABABABA或BOAB無第43頁,共53頁，星期六，2024年，5月(2)未知受血者ABO血型和RhD血型的情況：輸血科（血庫）在接到輸血申請單及血標本后，如病情“危急”且不知受血者血型情況下，應在10～15分鐘以內發(fā)出第一袋未經(jīng)交叉配血的O型RhD陽性懸浮紅細胞（O型紅細胞必須正反定型相符），并在血袋上標明發(fā)血時尚未完成交叉配血試驗。此后，應盡快鑒定獻血者和受血者血型，并根據(jù)臨床輸血需要，發(fā)出經(jīng)交叉配血主側相合的非同型懸浮紅細胞。在未知受血者RhD血型的情況下，即使是RhD陰性受血者，緊急情況下也可選擇RhD陽性的ABO相容的紅細胞，但對于有生育需求的女性或未成年女性不輕易發(fā)給RhD陽性O型紅細胞。病情“緊急”應在30分鐘內完成正反定型及凝聚胺法主側配血。第44頁,共53頁，星期六，2024年，5月新生兒需緊急換血治療時，首先確定是否為新生兒溶血病患兒，如果為ABO血型不合引起的新生兒溶血病，應選擇O型紅細胞和AB型血漿進行換血治療。如果為Rh系統(tǒng)血型不合引起的新生兒溶血病，應選擇ABO血型與患兒相同，Rh血型與母親相同的紅細胞進行交叉配血。若已輸入大量的O型紅細胞成分后，能否輸注與受血者同型的血液應視具體情況而定。當受血者原ABO血型的紅細胞與新采集的受血者血標本血清相合時，可以輸注與受血者原血型相同的血液（在改輸原同型的血液時，須更換輸血器）。若交叉配血試驗由于受血者ABO抗體所致的不合時，則應繼續(xù)輸注O型紅細胞。

RhD陰性受血者需要輸注血漿和冷沉淀時，可按ABO同型或相容性輸注，RhD血型可忽略。第45頁,共53頁，星期六，2024年，5月（二）凝血時間延長血標本的處理由于疾病或藥物的抗凝作用導致受血者凝血時間延長，這給交叉配血試驗帶來了困難。進行肝素治療的受血者其血標本可能沒有完全凝固，從凝固不完全的血標本中分離的血清可以不斷地產(chǎn)生纖維蛋白，尤其是在37℃孵育時?？捎诿?ml血液中加入一滴凝血酶，或使用小玻璃珠在37℃孵育、離心并回收血清。如果血標本不凝是肝素引起的，則可加入一滴魚精蛋白硫酸鹽溶液到4ml全血中，然后在37℃孵育5~10分鐘，血標本就會凝固。但魚精蛋白不能過量使用，否則會促使細胞的緡錢狀形成并阻止血液凝固。第46頁,共53頁，星期六，2024年，5月（三）新生兒交叉配血試驗與血液的選擇新生兒首次輸血前，必須確定其ABO血型（只用抗-A和抗-B試劑做正定型）和RhD血型。新生兒或其母親的血清或血漿都可以做紅細胞不規(guī)則抗體篩選。如果初次篩選是陰性，對于新生兒，也需要與獻血者紅細胞進行交叉配血，如果選擇輸血的細胞不是O型，必須檢測新生兒血清或血漿是否含有從母親被動轉移過來的抗-A或抗-B的存在，可用已知的試劑A1細胞、B細胞或獻血者細胞進行抗球蛋白試驗。如果檢測出抗-A或抗-B。必須輸注ABO血型相容的紅細胞。還需要對這些血液進行交叉配血試驗，且獻血者血液中血紅蛋白S的檢測必須為陰性。第47頁,共53頁，星期六，2024年，5月當證實受血者的血清或血漿中含有