抗原抗體反應(yīng)

抗原抗體反應(yīng)2第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理

第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

第三節(jié)影響抗原抗體反應(yīng)的因素

第四節(jié)抗原抗體反應(yīng)的類型

內(nèi)容提要3抗原抗體反應(yīng)(antigen-antibodyreaction):是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。體內(nèi)：溶菌、殺菌、中和毒素、促進(jìn)吞噬等作用，有時(shí)亦可引起免疫病理損傷。體外：凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、溶血反應(yīng)等。

抗原表位與抗體超變區(qū)的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性和親和性，由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的抗原表位與抗體超變區(qū)必須緊密接觸第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理1.靜電引力：相反電荷之間（electrostaticforces）2.范德華引力:原子、分子之間發(fā)生，極化作用最?。╲anderWaalsinteractions）3.氫鍵:H和電負(fù)性大的N、O，最具特異性（hydrogenbond）4.疏水作用力:疏水基團(tuán)接觸，對(duì)水分子排斥，作用最大（hydrophobicinteractions）

抗原抗體結(jié)合力示意圖一、抗原抗體結(jié)合力氫鍵離子鍵疏水作用力范德華引力離子鍵二、抗原抗體的親和性和親合力AbAgHighAffinityAbAgLowAffinity親和性(affinity)：抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與相應(yīng)的抗原表位之間的結(jié)合強(qiáng)度，取決于兩者空間構(gòu)型互補(bǔ)的程度K=K1結(jié)合常數(shù)/K2解離常數(shù)親和力與親和性、與抗體結(jié)合價(jià)、抗原的有效抗原表位數(shù)目相關(guān)YKeq=104AffinityY106AvidityYYYYY1010Avidity親合力(avidity):一個(gè)完整抗體分子的抗原結(jié)合部位與若干相應(yīng)抗原表位之間的結(jié)合強(qiáng)度8親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見反應(yīng)三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗原抗體為蛋白質(zhì)，帶負(fù)電荷，表面有水化層抗原抗體結(jié)合使表面電荷減少，水化層變薄，失去親水性特異性可逆性比例性階段性第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)10特異性：抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子超變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性一、特異性兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)交叉反應(yīng)（crossreactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖外-斐試驗(yàn)：斑疹傷寒的診斷（變形桿菌與立克次體有相同的抗原表位）二、可逆性可逆性：抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性

影響因素：抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親合力－親合力環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響－pH、離子強(qiáng)度動(dòng)態(tài)平衡,K=K1/K2Ag+AbAg-Ab臨床應(yīng)用:親和層析純化抗原或抗體比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系三、比例性AbexcessAgexcessEquivalence–Latticeformation14前帶(prezone)：抗體過量后帶(postzone)：抗原過量等價(jià)帶(equivalencezone)：抗原抗體比例合適

沉淀量與抗原抗體的比例關(guān)系注意臨床應(yīng)用?。?！第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，數(shù)秒至數(shù)分鐘內(nèi)完成，肉眼不可見第二階段：反應(yīng)可見階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象，數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)到數(shù)日不等，且受電解質(zhì)、溫度和酸堿度等影響四、階段性抗原、抗體反應(yīng)物的自身因素反應(yīng)的環(huán)境因素第三節(jié)影響抗原抗體反應(yīng)的因素一、反應(yīng)物自身因素抗原:理化性狀(顆粒性、可溶性、單價(jià)抗原)表位種類和數(shù)目抗體:來源(R型或H型)濃度親和性18電解質(zhì):0.85%NaCl溶液或各種緩沖液酸堿度:pH6～pH9溫度:15℃～40℃，37℃最適，4℃冷凝集適當(dāng)?shù)恼駬u或攪拌加速反應(yīng)二、環(huán)境因素凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體參與的反應(yīng)中和反應(yīng)標(biāo)記免疫反應(yīng)抗原和抗體性質(zhì)的不同和反應(yīng)條件的差異、反應(yīng)現(xiàn)象不同第四節(jié)抗原抗體反應(yīng)的類型20反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗(yàn)同上抗球蛋白試驗(yàn)同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀，檢測(cè)濁度凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)觀察掃描沉淀線或沉淀環(huán)免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)觀察測(cè)定溶血現(xiàn)象補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)同上反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷中和反應(yīng)病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)病毒感染性毒素中和試驗(yàn)檢測(cè)外毒素毒性標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度金免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀22總結(jié)抗原抗體反應(yīng)概念抗原抗體之間的結(jié)合力涉及靜電引力、范德華引力、_______和________?？乖贵w反應(yīng)的特點(diǎn)是____