高考生物二輪復(fù)習(xí) （專(zhuān)題突破+破譯命題密碼）第一部分 專(zhuān)題22 酶的應(yīng)用及特定成分的提取與分離 新人教版

"【創(chuàng)新方案】版高考生物二輪復(fù)習(xí)（專(zhuān)題突破+破譯命題密碼）第一部分專(zhuān)題22酶的應(yīng)用及特定成分的提取與分離新人教版"專(zhuān)題22酶的應(yīng)用及特定成分的提取與分離[請(qǐng)根據(jù)當(dāng)?shù)亟虒W(xué)實(shí)際和高考要求選用]1．果膠酶的作用是分解果膠變成可溶性的半乳糖醛酸。2．酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶反應(yīng)速度用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量表示，影響酶活性的因素有溫度、pH和酶的抑制劑等。3．固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。4．植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是細(xì)胞的全能性，過(guò)程是離體的植物組織或細(xì)胞eq\o(→,\s\up7(脫分化),\s\do5())愈傷組織eq\o(→,\s\up7(再分化))根、芽等eq\o(→,\s\up7(移植))完整植物體。5．DNA粗提取的原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。6．PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，需要的條件是引物、模板、原料、耐高溫的DNA聚合酶等，過(guò)程是變性、復(fù)性和延伸。7．蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定。8．植物有效成分的提取方法有蒸餾法、壓榨法和萃取法等。1．(·江蘇高考)下列關(guān)于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”的敘述，合理的是()A．先用熱水溶解洗衣粉，再將水溫調(diào)節(jié)到最適溫度B．實(shí)驗(yàn)的觀(guān)察指標(biāo)可以是相同洗滌時(shí)間內(nèi)污漬的殘留程度C．相同pH時(shí)加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉D．衣物質(zhì)地和洗衣粉用量不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果[命題立意]本題考查探究加酶洗衣粉的洗滌效果實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)。[知識(shí)依托]①酶活性受溫度和pH的影響，只有在最適溫度和最適pH下酶活性才可能最強(qiáng)。②加酶洗衣粉的使用要充分考慮使用條件和衣物質(zhì)地等。③設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)要遵循單一變量原則。[解析]選B高溫會(huì)導(dǎo)致加酶洗衣粉中酶變性失活，所以不能用熱水溶解洗衣粉，A項(xiàng)錯(cuò)誤；本實(shí)驗(yàn)的目的是探究?jī)煞N洗衣粉的洗滌效果，所以觀(guān)察指標(biāo)可以是相同洗滌時(shí)間內(nèi)污漬的殘留程度或達(dá)到同樣洗滌效果所需時(shí)間的長(zhǎng)短，B項(xiàng)正確；在酶作用的適宜條件下，加酶洗衣粉的洗滌效果好于普通洗衣粉，C項(xiàng)錯(cuò)誤；酶具有專(zhuān)一性，加有蛋白酶的洗衣粉則不能用于真絲、羊毛等衣料衣物的洗滌，適當(dāng)增加洗衣粉的用量會(huì)增強(qiáng)洗滌效果，D項(xiàng)錯(cuò)誤。2．(·江蘇高考)下列關(guān)于酶和固定化酵母細(xì)胞的研究與應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()A．從酶的固定方式看，吸附法比化學(xué)結(jié)合法對(duì)酶活性影響小B．作為消化酶使用時(shí)，蛋白酶制劑以口服方式給藥C．尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過(guò)氧化氫酶，可以反復(fù)使用D．將海藻酸鈉凝膠珠用無(wú)菌水沖洗，目的是洗去CaCl2和雜菌[命題立意]本題考查固定化酶和酵母細(xì)胞的固定化的基本知識(shí)。[知識(shí)依托]①酶的固定方法通常有物理吸附法，化學(xué)結(jié)合法和包埋法，吸附法對(duì)酶活性影響最小。②消化酶起消化作用的場(chǎng)所在消化道內(nèi)。③尿糖試紙上的固定化酶用完后不能重復(fù)使用。[解析]選C酶的固定方式有包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法，物理吸附法是利用吸附劑本身的表面張力對(duì)附近的分子產(chǎn)生吸附，與化學(xué)結(jié)合法相比，不會(huì)使被吸附物質(zhì)的性質(zhì)發(fā)生改變，所以對(duì)酶活性影響較小，A項(xiàng)說(shuō)法正確；消化酶在人體消化道內(nèi)發(fā)揮作用，蛋白酶制劑一般在最外面加上糖衣后通過(guò)口服方式給藥，B項(xiàng)說(shuō)法正確；尿糖試紙是一種由葡萄糖氧化酶、過(guò)氧化氫酶和某種無(wú)色的化合物固定于濾紙上制成的酶試紙，不能反復(fù)利用，C項(xiàng)說(shuō)法錯(cuò)誤；制作固定化酵母細(xì)胞時(shí)，將海藻酸鈉凝膠珠用無(wú)菌水沖洗的目的是洗去CaCl2和雜菌，防止凝膠珠硬度過(guò)大和雜菌污染，D項(xiàng)說(shuō)法正確。3．(·江蘇高考)下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是()A．洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B．將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C．常溫下菜花勻漿中有些酶類(lèi)會(huì)影響DNA的提取D．用玻棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少[命題立意]本題考查DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)。[知識(shí)依托]①洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，使細(xì)胞釋放出核物質(zhì)。②鑒定DNA時(shí)需先將DNA溶解在NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑沸水浴加熱檢測(cè)。③玻璃棒緩慢攪拌可減少DNA分子斷裂，有利于DNA分子析出。[解析]選C提取植物細(xì)胞中DNA時(shí)加入洗滌劑可瓦解植物細(xì)胞的細(xì)胞膜，利于DNA的釋放，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A項(xiàng)錯(cuò)誤；含DNA的絲狀物應(yīng)先溶解在物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑在沸水浴條件下檢測(cè)，冷卻后觀(guān)察變成藍(lán)色，B項(xiàng)錯(cuò)誤；菜花勻漿中含有DNA水解酶，常溫下其活性較高，可催化DNA水解從而影響DNA的提取，C項(xiàng)正確；用玻璃棒緩慢攪拌濾液不會(huì)使DNA分子斷裂，即不會(huì)減少DNA的提取量，D項(xiàng)錯(cuò)誤。4．(·廣東高考)食品種類(lèi)多，酸堿度范圍廣。生物興趣小組擬探究在食品生產(chǎn)中應(yīng)用范圍較廣的蛋白酶，查閱相關(guān)文獻(xiàn)，得知：(1)pH對(duì)不同蛋白酶的活力影響有差異。據(jù)右圖可知，________更適宜作為食品添加劑，理由是______________________________。蛋白酶的活力可用________________________的量來(lái)表示。(2)該蛋白酶的提取工藝流程如下：eq\a\vs4\al(4℃組織勻漿)eq\a\vs4\al(→上清液)eq\o(→,\s\up15(\a\vs4\al(加酶保護(hù)劑,0.02～0.10mol/L)加65%乙醇\a\vs4\al(調(diào)提取液pH,5.0～9.0)),\s\do5())沉淀物(粗酶制劑)→測(cè)酶活力(單位：U)興趣小組分別對(duì)酶保護(hù)劑濃度、提取液pH進(jìn)行了探究實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，酶保護(hù)劑濃度在0.02～0.06mol/L范圍內(nèi)，酶活力較高；提取液pH在6.0～8.0范圍內(nèi)，酶活力較高。他們認(rèn)為，要進(jìn)一步提高粗酶制劑的酶活力，以達(dá)到最佳提取效果，還需對(duì)酶保護(hù)劑濃度和提取液pH進(jìn)行優(yōu)化，并確定以此為探究課題。請(qǐng)擬定該課題名稱(chēng)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表。[命題立意]本題主要考查pH等外因?qū)γ富盍Φ挠绊懸约懊富盍Φ膶?shí)驗(yàn)探究方法。[知識(shí)依托]①不同的酶具有不同的最適pH，在最適pH時(shí)酶活力最高。②課題名稱(chēng)要表明實(shí)驗(yàn)自變量與因變量之間是否有影響。③表格設(shè)計(jì)要體現(xiàn)自變量、因變量及記錄因變量隨自變量變化的數(shù)值。[解析](1)由圖可知，在一定范圍內(nèi)木瓜蛋白酶的活力不受pH的影響，適宜作為食品添加劑。蛋白酶的活力可用單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量或產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。(2)由題意可知，為了進(jìn)一步確定酶保護(hù)劑的最適濃度和提取液的最適pH，可以在題干提供的范圍內(nèi)縮小梯度差，進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。[答案](1)木瓜蛋白酶在pH4～9范圍內(nèi)，木瓜蛋白酶的活力高且穩(wěn)定單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物增加(單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)底物減少)(2)課題名稱(chēng)：探究酶保護(hù)劑的最佳濃度和提取液的最適pH實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表提取液的pH底物的減少量(或產(chǎn)物的產(chǎn)生量)酶保護(hù)劑濃度(mol/L)6.06.57.07.58.00.020.030.040.050.065．(·新課標(biāo)全國(guó)卷)為了探究6－BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6－BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見(jiàn)下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。培養(yǎng)基編號(hào)濃度/mg·L－1m/%n/個(gè)6－BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問(wèn)題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為_(kāi)_______和________兩類(lèi)。上述培養(yǎng)基中，6－BA屬于________類(lèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是________，因變量是____________________________，自變量的取值范圍是________。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是________號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6－BA”或“1AA”)。[命題立意]本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。[知識(shí)依托]①植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基要滿(mǎn)足植物細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育所需要的各種營(yíng)養(yǎng)要求，同時(shí)還要提供植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。②植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)、用量影響植物細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程。[解析]植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的主要成分有無(wú)機(jī)鹽(大量元素和微量元素)、有機(jī)物，常常還需要添加植物激素。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中加入的6－BA屬于細(xì)胞分裂素類(lèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。根據(jù)表中所列數(shù)據(jù)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本實(shí)驗(yàn)自變量是IAA濃度，其取值范圍是0～0.5mg·L－1，因變量是再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。當(dāng)生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí)，有利于根的分化，所以為了誘導(dǎo)菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入6－BA。[答案](1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)0～0.5mg·L－1(3)1(4)6－BA1．從考查內(nèi)容上看，主要集中在對(duì)酶在生活生產(chǎn)中的應(yīng)用、酶的固定化、植物組織培養(yǎng)操作及生物組織中特定成分提取操作四個(gè)知識(shí)內(nèi)容上。2．從考查角度上看，聯(lián)系生活生產(chǎn)實(shí)際，結(jié)合酶的特性以實(shí)驗(yàn)探究與分析的形式考查酶的應(yīng)用；以現(xiàn)代科學(xué)研究為背景，在植物組織培養(yǎng)方面進(jìn)行命題。聯(lián)系人類(lèi)生活與健康，在生物組織中特定成分提取與鑒定方面進(jìn)行命題。3．從命題趨勢(shì)上看，預(yù)計(jì)年高考仍很可能趨向于以生產(chǎn)生活素材為背景，對(duì)酶的應(yīng)用、特定成分提取分離、植物組織培養(yǎng)進(jìn)行命題。]酶的應(yīng)用[例1]為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果，將一種無(wú)酶洗衣粉分成3等份，進(jìn)行3組實(shí)驗(yàn)。甲、乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶，丙組不加酶，在不同溫度下清洗同種化纖布上的2種污漬，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，下表為實(shí)驗(yàn)記錄。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。水溫/℃1020304050組別甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙清除血漬時(shí)間/min67668852518336347711126891167清除油漬時(shí)間/min93789587639182468575277769868(1)提高洗衣粉去污能力的方法有________________。甲組在洗衣粉中加入了________。乙組在洗衣粉中加入了________。(2)甲、乙組洗滌效果的差異，說(shuō)明酶的作用具有____________________________。(3)如果甲、乙和丙3組均在水溫為80℃時(shí)洗滌同一種污漬，請(qǐng)比較這3組洗滌效果之間的差異并說(shuō)明理由。______________________________________________。(4)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹的，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來(lái)的酶迅速發(fā)揮催化作用。請(qǐng)說(shuō)明這是否運(yùn)用了酶的固定化技術(shù)及其理由。______________。[解析]通過(guò)表格數(shù)據(jù)獲取有效的解題信息是解本題的關(guān)鍵。通過(guò)表格比較容易得出：在10～50℃的范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶的去污能力增強(qiáng)；加入酶的洗衣粉的去污能力比未加酶的強(qiáng)。血漬中主要成分是血紅蛋白，油漬中主要成分是脂肪，根據(jù)甲、乙兩組去除血漬和油漬的能力比較，能夠得出甲組加入了蛋白酶，乙組加入了蛋白酶和脂肪酶。兩組去污能力的差異也正好說(shuō)明酶具有專(zhuān)一性。酶在高溫的情況下會(huì)變性失活，因此甲、乙、丙3組在水溫為80℃時(shí)，效果一樣。酶的固定化技術(shù)是要把酶固定在不溶于水的載體上，且具有重復(fù)利用的特點(diǎn)。[答案](1)加酶和適當(dāng)提高溫度蛋白酶蛋白酶和脂肪酶(2)專(zhuān)一性(3)沒(méi)有差異，因?yàn)楦邷厥姑甘Щ?4)未運(yùn)用酶的固定化技術(shù)，因?yàn)槊肝垂潭ㄔ诓蝗苡谒妮d體上，也不能重復(fù)利用1．酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用(1)纖維素酶與果膠酶：組成作用纖維素酶C1酶Cx酶葡萄糖苷酶纖維素在C1酶、Cx酶的作用下分解成纖維二糖，再在葡萄糖苷酶的作用下將纖維二糖分解為葡萄糖果膠酶多聚半乳糖醛酸酶果膠分解酶果膠酯酶都能將不溶性果膠分解成可溶性半乳糖醛酸(2)加酶洗衣粉：①概念：指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四類(lèi)。②洗滌原理：種類(lèi)洗滌原理洗滌的物質(zhì)種類(lèi)蛋白酶可將蛋白質(zhì)水解為易溶解或分散于洗滌液中的小分子的肽或氨基酸血漬、奶漬及各種食品類(lèi)的蛋白質(zhì)污垢脂肪酶把脂肪水解為較易溶解的甘油和脂肪酸食品的油漬、人體皮脂、口紅淀粉酶能使淀粉分解為可溶性的麥芽糖、葡萄糖來(lái)自面條等的污垢纖維素酶使纖維的結(jié)構(gòu)變得蓬松，從而使?jié)B入到纖維深處的塵土和污垢能夠與洗衣粉充分接觸，達(dá)到更好的去污效果2．固定化酶和固定化細(xì)胞的比較項(xiàng)目固定化酶固定化細(xì)胞常用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法優(yōu)點(diǎn)①可反復(fù)使用；②有利于工藝的連續(xù)化、管道化，同時(shí)降低了生產(chǎn)成本①可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約成本；②保持酶在細(xì)胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)定性；③操作容易不足①酶在固定化時(shí)活力有所損失；②不適用于多酶反應(yīng)細(xì)胞膜、細(xì)胞壁會(huì)阻礙底物的滲透和擴(kuò)散，降低反應(yīng)效率1．某學(xué)生進(jìn)行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”的課題研究。他的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：①設(shè)置2組實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉②2組實(shí)驗(yàn)的洗衣粉用量、被洗滌的衣物量、衣物質(zhì)地、污染物性質(zhì)和量、被污染的時(shí)間、洗滌時(shí)間、洗滌方式等全部設(shè)置為相同③根據(jù)污漬去除程度得出結(jié)果對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)，正確的是()A．未設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn) B．無(wú)關(guān)變量設(shè)置太多C．沒(méi)有自變量 D．因變量不能描述解析：選A實(shí)驗(yàn)課題是“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”，因此設(shè)置的2組實(shí)驗(yàn)應(yīng)該是：一組用普通洗衣粉作對(duì)照組，另一組用加酶洗衣粉作實(shí)驗(yàn)組。如果設(shè)置3組也正確，一組用普通洗衣粉作對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組設(shè)置使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉。2．用果膠酶處理蘋(píng)果泥是為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng)，應(yīng)采取的措施是()A．加大蘋(píng)果泥用量 B．大幅度提高反應(yīng)溫度C．換成大型號(hào)容器 D．用玻璃棒進(jìn)行攪拌解析：選D為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng)，應(yīng)采取的措施是增大酶和反應(yīng)物接觸面積，攪拌可以達(dá)到此目的，而換大號(hào)容器不一定加快反應(yīng)。大幅度提高溫度有可能會(huì)出現(xiàn)溫度過(guò)高而使酶活性降低的現(xiàn)象。如果反應(yīng)物足夠多，增加反應(yīng)物不改變反應(yīng)速率。生物組織中特定成分的提取與分離[例2](·海南高考)許多植物含有天然香料，如薄荷葉中含有薄荷油?，F(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油?；卮饐?wèn)題：(1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì)，提取薄荷油時(shí)應(yīng)選用________(鮮、干)薄荷葉作原料，其原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)用萃取法提取薄荷油時(shí)，采用的溶劑是________，原理是_____________________。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時(shí)，在油水混合物中加入氯化鈉的作用是________________________________，常用于分離油層和水層的器皿是________，分離出的油層中加入無(wú)水硫酸鈉的作用是________________，除去固體硫酸鈉的常用方法是________。[解析](1)薄荷油揮發(fā)性強(qiáng)，薄荷葉在干燥過(guò)程中，薄荷油因揮發(fā)含量降低。(2)因薄荷油易溶于石油醚、酒精等有機(jī)溶劑，故用萃取法提取薄荷油時(shí)，采用的溶劑為有機(jī)溶劑。(3)向通過(guò)水蒸氣蒸餾得到的油水混合物中加入NaCl后，增加水的密度，有利于油層和水層的分離。常用分液漏斗將水、油分離。向分離出的油層中加無(wú)水硫酸鈉的作用是除去少量的水，用過(guò)濾的方法除去薄荷油中的硫酸鈉。[答案](1)鮮鮮葉比干葉的薄荷油含量高(其他合理答案也可)(2)有機(jī)溶劑薄荷油溶于有機(jī)溶劑，而不溶水于(3)增加水層的密度，有利于油層和水層的分離分液漏斗除去少量的水過(guò)濾1．不同物質(zhì)的提取分離方法提取方法方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾、分離油層、除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法石灰水浸泡、漂洗、壓榨、過(guò)濾、靜置、再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取粉碎、干燥、萃取、過(guò)濾、濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中2．DNA與蛋白質(zhì)提取的比較提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟DNA鹽析法①DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同②DNA不溶于酒精，但某些化合物溶于酒精①溶解在2mol/L的NaCl溶液中②NaCl溶液加水稀釋到0.14mol/L，使DNA析出、過(guò)濾③加入冷酒精析出血紅蛋白凝膠色譜法、電泳法①根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大?、诟鞣N分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、性狀的不同①樣品處理②粗提?、奂兓芗兌辱b定3．有關(guān)植物芳香油的提取方法敘述正確的是()①植物芳香油具有較強(qiáng)的揮發(fā)性，能隨水蒸氣蒸發(fā)，因此可利用蒸餾法提取②壓榨法是利用機(jī)械壓力榨出芳香油③將新鮮的植物材料浸泡在用于萃取的有機(jī)溶劑中，然后蒸去溶劑，即可獲得植物芳香油，此為萃取法A．①② B．①③C．②③ D．①②③解析：選A植物芳香油是有機(jī)物，利用其溶解性的特點(diǎn)，可用多種方法提取。若使用萃取法，原料應(yīng)粉碎且干燥后浸泡于有機(jī)溶劑，然后蒸發(fā)出有機(jī)溶劑。4．下列關(guān)于“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是()A．用雞血作為材料，原因是雞血紅細(xì)胞有細(xì)胞核，其他動(dòng)物紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核B．用不同濃度的NaCl溶液進(jìn)行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同C．用酒精進(jìn)行提純，原因是DNA溶于酒精，蛋白質(zhì)不溶于酒精D．用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定，原因是DNA溶液中加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色解析：選B只有哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核；DNA不溶于酒精，蛋白質(zhì)溶于酒精，所以可用冷卻的酒精來(lái)對(duì)DNA進(jìn)行提純；DNA溶液中加入二苯胺試劑后要在沸水浴加熱的情況下才能出現(xiàn)藍(lán)色。植物組織培養(yǎng)[例3]藥用植物是一類(lèi)具有特殊用途的經(jīng)濟(jì)植物，對(duì)人類(lèi)健康具有重要的醫(yī)療和保健作用。藥用植物的品種改良工作引起了科研人員的重視。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)科研人員用花粉培養(yǎng)出單倍體植株，此實(shí)驗(yàn)的原理是利用了________________。為鑒定單倍體植株，可制作________進(jìn)行染色體觀(guān)察。(2)川芎易受病毒侵染造成大幅度減產(chǎn)，日本學(xué)者用川芎的________作為外植體進(jìn)行脫毒培養(yǎng)，在適宜濃度的________________誘導(dǎo)下，外植體經(jīng)________和________形成脫毒川芎。(3)科研人員試圖通過(guò)________技術(shù)將中藥柴胡的藥效成分基因轉(zhuǎn)入胡蘿卜。他們將柴胡的原生質(zhì)體與胡蘿卜原生質(zhì)體進(jìn)行融合，通過(guò)組織培養(yǎng)最終獲得了再生愈傷組織。(4)莨菪中分離得到的天仙子胺6β羧化酶基因轉(zhuǎn)入顛茄中，轉(zhuǎn)基因植株能夠產(chǎn)生大量的東莨菪堿。這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用在一定程度上打破了種間的________。若從分子水平上檢測(cè)天仙子胺6β羧化酶基因是否成功在顛茄細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可采用________技術(shù)，用放射性同位素標(biāo)記的基因探針與________進(jìn)行雜交。[解析](1)利用花粉細(xì)胞的全能性能培養(yǎng)出單倍體植株，可制作臨時(shí)裝片進(jìn)行染色體觀(guān)察。(2)可以培養(yǎng)植物的莖尖和芽尖得到無(wú)病毒植株，在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，經(jīng)過(guò)脫分化和再分化形成脫毒苗。(3)可以通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將柴胡的原生質(zhì)體與胡蘿卜原生質(zhì)體進(jìn)行融合。(4)基因工程可以打破種間的生殖隔離，可以通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因與mRNA雜交。[答案](1)植物(生殖)細(xì)胞的全能性臨時(shí)裝片(2)莖尖(或芽尖)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素(或植物激素)脫分化再分化(3)體細(xì)胞雜交(4)生殖隔離(或雜交不親和性)核酸分子(或核酸)雜交mRNA植物激素與組織培養(yǎng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)為：①在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。②使用順序不同，結(jié)果不同，具體如下：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高③用量比例不同，結(jié)果也不同：eq\f(生長(zhǎng)素用量,細(xì)胞分裂素用量)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(高：利于根的分化、抑制芽的形成,低：利于芽的分化、抑制根的形成,適中：促進(jìn)愈傷組織的形成))5．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子D．植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得解析：選D愈傷組織是一團(tuán)排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能。二倍體植株的花粉中只含一個(gè)染色體組，培養(yǎng)得到的個(gè)體為單倍體，高度不育，其幼苗需用秋水仙素處理后才能穩(wěn)定遺傳；愈傷組織不能用于制備人工種子。用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需要的突變體類(lèi)型。6．下圖是利用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)過(guò)程的示意圖，請(qǐng)利用所學(xué)知識(shí)回答相關(guān)問(wèn)題。(1)該過(guò)程利用的現(xiàn)代生物技術(shù)稱(chēng)為_(kāi)_______________，其原理是________；在培養(yǎng)過(guò)程中需要向e、f中添加一些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，主要是__________________________。(2)若h中是純合二倍體，則g中需要用________________處理，該育種方法的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________；育種中若產(chǎn)生了變異，其可遺傳的變異類(lèi)型有__________________________。(3)若利用此項(xiàng)技術(shù)培育相關(guān)組織制造治療燙傷、割傷的藥物——紫草素，培養(yǎng)將進(jìn)行到(填字母)________；若想制作人工種子，應(yīng)該選用(填字母)________。解析：由a到e為花藥離體培養(yǎng)，形成單倍體幼苗后，再培育成成熟的植株。在培育過(guò)程中，為了誘導(dǎo)組織分化，需要在不同時(shí)期添加不同比例的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。若h是純合二倍體，則g過(guò)程需要用一定濃度的秋水仙素處理，育種中若產(chǎn)生了變異，其可遺傳的變異類(lèi)型有基因突變和染色體變異，因?yàn)榇诉^(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行有性生殖，所以不會(huì)發(fā)生基因重組。答案：(1)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素(2)一定濃度的秋水仙素快速大量得到純合子，縮短育種年限基因突變和染色體變異(3)cd一、PCR反應(yīng)的原理、過(guò)程及結(jié)果1．PCR原理在一定的緩沖溶液中通過(guò)控制溫度并提供模板和原料，使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。2．PCR反應(yīng)過(guò)程(1)變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，如下圖：(2)復(fù)性：當(dāng)溫度下降到50℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，如下圖：(3)延伸：當(dāng)溫度上升到72℃左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，如下圖：3．結(jié)果(1)PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要包括變性、復(fù)性、延伸三步。(2)兩個(gè)引物之間的固定長(zhǎng)度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。二、.血紅蛋白的提取和分離1．凝膠色譜法的原理相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小直徑大小大于凝膠顆?？障吨睆叫∮谀z顆?？障吨睆竭\(yùn)動(dòng)途徑從凝膠顆粒間隙向下移動(dòng)從凝膠顆粒內(nèi)部空隙向下移動(dòng)運(yùn)動(dòng)路程較短較長(zhǎng)移動(dòng)速度較快較慢洗脫次序先從凝膠柱洗脫出來(lái)后從凝膠柱洗脫出來(lái)2．樣品的預(yù)處理及粗分離eq\a\vs4\al(紅細(xì)胞,的洗滌)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(過(guò)程：采集血樣→低速短時(shí)間離心→吸出血,漿→生理鹽水洗滌→低速短時(shí)間離心→,重復(fù)洗滌三次,目的：去除雜蛋白))血紅蛋白的釋放eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(過(guò)程：加蒸餾水→加甲苯→磁力攪拌器攪拌,目的：溶血，紅細(xì)胞釋放血紅蛋白))eq\a\vs4\al(分離血紅蛋白溶液)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(過(guò)程：離心2000r/min,目的：分離血紅蛋白溶液,結(jié)果\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(第一層：甲苯層,第二層：脂溶性物質(zhì)的沉淀層，,白色薄層固體,第三層：血紅蛋白的水溶液層,第四層：其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物))))透析eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(原理：透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi),過(guò)程：血紅蛋白溶液裝入透析袋→將透析袋放入緩沖液中→透析12h,目的：去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)))一、選擇題1．PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了乙肝病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的()A．白細(xì)胞DNA B．病毒蛋白質(zhì)C．血漿抗體 D．病毒DNA解析：選DPCR技術(shù)是DNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)，乙肝病毒是DNA病毒，可擴(kuò)增病毒的DNA，以此檢測(cè)分析病人是否感染了病毒。2．下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是()A．固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢(shì)明顯B．固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解氧C．利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營(yíng)養(yǎng)條件D．利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類(lèi)的作用只是作為反應(yīng)底物解析：選A固定化酶的應(yīng)用中，需要控制好pH、溫度等條件，不一定控制溶解氧；用固定化酶降解有機(jī)磷農(nóng)藥，不需要營(yíng)養(yǎng)條件，因?yàn)檫@不是固定化細(xì)胞；固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類(lèi)既是反應(yīng)底物，又是酵母細(xì)胞的碳源物質(zhì)、能源物質(zhì)。3．(·鹽城一模)下列有關(guān)酶的應(yīng)用的敘述，正確的是()A．酶對(duì)重金屬鹽不敏感，但對(duì)低溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿非常敏感B．加酶洗衣粉因?yàn)樘砑恿嗣钢苿?，比普通洗衣粉更易污染環(huán)境C．固定化酶可以反復(fù)利用，但反應(yīng)物與酶接觸受影響而會(huì)降低反應(yīng)效率D．酶的催化功能很強(qiáng)，但需給以適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)才能較長(zhǎng)時(shí)間維持其作用解析：選C酶對(duì)重金屬、高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都非常敏感。加酶洗衣粉易分解，不易污染環(huán)境。固定化酶因其外有物質(zhì)包裹，酶與反應(yīng)物接觸受影響。酶不是細(xì)胞，不需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。4．下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述正確的是()A．生產(chǎn)腐乳所用的毛霉能夠耐受高鹽環(huán)境B．加酶洗衣粉在各種洗滌條件下都有較好的洗滌效果C．進(jìn)行DNA鑒定時(shí)，將析出的DNA溶解在二苯胺試劑中，水浴加熱后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色D．電泳法可用于蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子的分離解析：選D用毛霉制作腐乳時(shí)，后期發(fā)酵包括用鹽腌制，高濃度鹽同樣抑制毛霉生長(zhǎng)繁殖；加酶洗衣粉需要在適宜的環(huán)境下，洗滌效果最好，如適宜的pH、溫度等；進(jìn)行DNA鑒定時(shí)，需將析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑混合均勻，再沸水浴加熱5min；凝膠電泳法依靠電場(chǎng)力分離，從遷移速度的快慢看，凝膠電泳法遷移速度快的是相對(duì)分子質(zhì)量小的物質(zhì)，可用于蛋白質(zhì)、DNA、RNA等生物大分子的分離。5．紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)提取和分離血紅蛋白。下列對(duì)血紅蛋白提取和分離的敘述，錯(cuò)誤的是()A．血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定的順序進(jìn)行B．純化過(guò)程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液C．粗分離時(shí)透析的目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)D．可經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定解析：選B蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。提取和分離血紅蛋白時(shí)，首先通過(guò)洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品處理；再通過(guò)透析法除去相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜蛋白除去，即樣品純化，純化過(guò)程中凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹后，配制成凝膠懸浮液，而不是用生理鹽水；最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。6．下列關(guān)于植物芳香油的敘述錯(cuò)誤的是()A．揮發(fā)性強(qiáng)，易溶于有機(jī)溶劑，一般來(lái)說(shuō)價(jià)格昂貴B．都是由天然植物的莖、葉、樹(shù)干、花、果實(shí)和種子等部位萃取出來(lái)的濃縮液體C．它是植物免疫和維護(hù)系統(tǒng)的精華D．植物芳香油廣泛地應(yīng)用于輕工、化妝品、飲料和食品制造等方面解析：選B植物芳香油不僅揮發(fā)性強(qiáng)，而且易溶于有機(jī)溶劑?？捎幂腿》▉?lái)提取，但這不是唯一方法。可根據(jù)植物原料的特點(diǎn)，選擇不同的提取方法，植物芳香油提取方法常用的有蒸餾法、壓榨法和萃取法等。植物芳香油的存在對(duì)于保護(hù)植物本身有重要作用。7．右圖表示某研究小組在探究果膠酶的用量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。有關(guān)說(shuō)法不正確的是()A．在ab段限制反應(yīng)速率的主要因素是酶的用量B．在bc段限制反應(yīng)速率的因素是溫度、pH、反應(yīng)物濃度等C．在ac段增加反應(yīng)物濃度，可以明顯加快反應(yīng)速率D．在該實(shí)驗(yàn)給定條件下，果膠酶的最佳用量是b點(diǎn)對(duì)應(yīng)的值解析：選C由曲線(xiàn)圖可以看出，在ab段，隨著酶的用量的增大，酶促反應(yīng)速率加快，說(shuō)明此階段限制反應(yīng)速率的主要因素是酶的用量，此時(shí)增加反應(yīng)物濃度，反應(yīng)速率不會(huì)明顯加快；在bc段，隨著酶的用量的增大，酶促反應(yīng)速率不再加快，此時(shí)反應(yīng)物濃度成為限制反應(yīng)速率的因素之一，增加反應(yīng)物濃度，反應(yīng)速率會(huì)加快。8．下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述錯(cuò)誤的是()A．酶具有多樣性，固定化酶能夠催化一系列酶促反應(yīng)B．CaCl2溶液能夠使海藻酸鈉形成凝膠珠C．滴加酵母細(xì)胞與海藻酸鈉混合液過(guò)快，會(huì)使凝膠珠帶有尾巴D．固定化細(xì)胞可重復(fù)利用的前提是防止其他微生物的污染解析：選A固定化酶只能催化一種或一類(lèi)酶促反應(yīng)。9．下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，不正確的是()A．培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B．培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C．離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織D．同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因相同解析：選D同一株綠色開(kāi)花植物經(jīng)減數(shù)分裂形成的花粉細(xì)胞中所含有的染色體數(shù)目與該植物經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的體細(xì)胞含有的染色體數(shù)目不同，因此含有基因不同，由它們經(jīng)有絲分裂培養(yǎng)成的愈傷組織的基因也是不同的。10．下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的粗提取與分離(鑒定)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A．提取DNA或血紅蛋白都可用豬的成熟紅細(xì)胞B．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，兩次DNA析出的方法相同C．實(shí)驗(yàn)中都要去除雜質(zhì)以便得到較純凈的DNA或血紅蛋白D．提取出的血紅蛋白溶解在雙縮脲試劑中即可觀(guān)察到紫色解析：選C豬的成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，故不能作為提取DNA的生物材料；在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，第一次DNA的析出是利用DNA在不同氯化鈉溶液中的溶解度不同，第二次是利用DNA不溶于酒精的原理；血紅蛋白不溶于雙縮脲試劑，且血紅蛋白為紅色，紫色反應(yīng)不易觀(guān)察。二、非選擇題11．某化工廠(chǎng)生產(chǎn)的一種加酶洗衣粉，其包裝袋上印有如下說(shuō)明。eq\x(\a\al(成分：含堿性蛋白酶等,用法：洗滌前先將衣物浸于洗衣粉溶液內(nèi)一段時(shí)間，使用溫水效果更佳,注意：切勿用于絲質(zhì)及羊毛衣料))某研究性學(xué)習(xí)小組為探究該洗衣粉中酶催化作用的最適溫度，設(shè)計(jì)了如下裝置進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并將結(jié)果用下列曲線(xiàn)圖A、B表示。請(qǐng)回答以下各題：(1)由圖可知，使用該加酶洗衣粉的最適宜溫度為_(kāi)_______。(2)在0℃和75℃時(shí)，酶的催化效率基本都為零。但當(dāng)溫度再度回到45℃時(shí)，后者酶的催化能力已不能恢復(fù)，這是因?yàn)開(kāi)_________________________________________________。(3)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可以通過(guò)直接測(cè)定______________________________(指標(biāo))來(lái)表示該洗衣粉中酶的催化效率。(4)目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的，某洗滌公司為降低生產(chǎn)成本研制了一種能多次重復(fù)使用加酶洗衣粉的設(shè)備，他們將酶固定在不溶于水的尼龍載體上，洗滌完衣物后，經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理，這些酶還可以多次重復(fù)利用，這種方法制成的酶叫________。(5)除加酶外，很多洗衣粉中還加有香精，高檔洗衣粉中的香精都是由植物芳香油制成的，目前從植物中提取芳香油的方法有(答出兩種即可)____________________。(6)加酶洗衣粉中的淀粉酶可以從霉菌中提取。用固體培養(yǎng)基分離、純化霉菌的方法有____________、__________。解析：(1)由圖可知，使用該加酶洗衣粉的最適宜溫度為45℃。(2)當(dāng)溫度從75℃回到45℃時(shí)，酶的催化能力已不能恢復(fù)，這是因?yàn)楦邷貤l件下酶的結(jié)構(gòu)已遭到破壞(或酶的活性已喪失)。(3)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可通過(guò)直接測(cè)定膠片上的蛋白膜存在時(shí)間的長(zhǎng)短(指標(biāo))來(lái)表示該洗衣粉中酶的催化效率。(4)將酶固定在不溶于水的尼龍載體上，洗滌完衣物后，這些酶經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理，還可以多次重復(fù)利用，則這種酶就是固定化酶。(5)目前從植物中提取芳香油的方法有萃取法、蒸餾法、壓榨法等。(6)用固體培養(yǎng)基分離、純化霉菌的常用方法有平板劃線(xiàn)法、稀釋涂布平板法。答案：(1)45℃(2)高溫條件下酶的結(jié)構(gòu)已遭到破壞(或酶的活性已喪失)(3)膠片上的蛋白膜存在時(shí)間的長(zhǎng)短(或其他合理答案)(4)固定化酶(5)萃取法、蒸餾法、壓榨法(答出兩條即可)(6)平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法12．(16分)自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)開(kāi)始，基因工程正式問(wèn)世了，人們對(duì)DNA的關(guān)注也越來(lái)越多。分析并回答下列問(wèn)題：(1)從生物組織中提取DNA時(shí)，若要獲取含有DNA的濾液，需破碎細(xì)胞；若為雞的成熟紅細(xì)胞，可以加入一定量的蒸餾水，原因是細(xì)胞________而漲破；若為植物細(xì)胞可以加入一定量的洗滌劑。(2)利用DNA和RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，可以將它們分離。如DNA的溶解度在NaCl溶液濃度為_(kāi)_______時(shí)最小，可以使DNA與其他雜質(zhì)初步分離。(3)為了純化提取的DNA，可以用95%的酒精去除濾液中的雜質(zhì)。其原理是DNA不溶于酒精