臨床基因擴(kuò)增PCR實(shí)驗(yàn)室SOP標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件(32項(xiàng))

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序編寫人：審核人：批準(zhǔn)人：?jiǎn)⒂萌掌冢耗暝氯誜XX醫(yī)院前言為使基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)有效地應(yīng)用于臨床，更好地為疾病的預(yù)防、診斷和治療服務(wù)，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，嚴(yán)格按照《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》(衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號(hào)文)附件《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》要求，制定本實(shí)驗(yàn)室管理文件，本實(shí)驗(yàn)室任何實(shí)驗(yàn)均需遵循本管理文件中規(guī)定執(zhí)行。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)指以臨床診斷治療為目的，以擴(kuò)增檢測(cè)DNA或RNA為方法的檢測(cè)技術(shù)，快速、可靠、準(zhǔn)確、安全、收費(fèi)合理方式下，以規(guī)范的操作對(duì)臨床標(biāo)本進(jìn)行分析。本室采用經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的試劑盒。開展的檢測(cè)項(xiàng)目：1、乙型肝炎病毒（HBV）核酸定量檢測(cè)2、人巨細(xì)胞病毒（HCMV）核酸定量檢測(cè)文件編號(hào)文件名稱頁(yè)碼PCR-BZCZCX-001分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序6--10PCR-BZCZCX-002分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序11--16PCR-BZCZCX-003分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和環(huán)境管理程序17PCR-BZCZCX-004臨床標(biāo)本管理程序18PCR-BZCZCX-005標(biāo)本采集、驗(yàn)收、保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序19-21PCR-BZCZCX-006標(biāo)本唯一性編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)操作程序22-23PCR-BZCZCX-007分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作、維護(hù)和校準(zhǔn)程序24-25PCR-BZCZCX-008分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序26-28PCR-BZCZCX-009分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序29-30PCR-BZCZCX-010化學(xué)試劑的管理及配制操作程序31-32PCR-BZCZCX-011分子實(shí)驗(yàn)室PCR試劑性能質(zhì)檢程序33-34PCR-BZCZCX-012樣本核酸提取操作程序35-36PCR-BZCZCX-013分子實(shí)驗(yàn)室一次性離心管和吸嘴的質(zhì)檢程序37-38PCR-BZCZCX-014分子實(shí)驗(yàn)室HBV-DNA室內(nèi)質(zhì)控程序39-41PCR-BZCZCX-015分子實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告和審簽管理程序42-43PCR-BZCZCX-016分子實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材的購(gòu)買和管理程序44-45PCR-BZCZCX-017分子實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)和清潔廢棄物處理程序46-49文件編號(hào)文件名稱頁(yè)碼PCR-BZCZCX-018分子實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序50-52PCR-BZCZCX-019分子實(shí)驗(yàn)室抱怨和應(yīng)急處理程序53-56PCR-BZCZCX-020分子實(shí)驗(yàn)室保密制度57PCR-BZCZCX-021分子實(shí)驗(yàn)室人員實(shí)習(xí)、培訓(xùn)和進(jìn)修管理程序58PCR-BZCZCX-022ABI-7500Plus熒光定量PCR儀使用、維護(hù)和校準(zhǔn)程序59-65PCR-BZCZCX-023儀器設(shè)備的使用、維護(hù)操作程序（離心機(jī)）66-68PCR-BZCZCX-024儀器設(shè)備的使用、維護(hù)操作程序（移液器）69-71PCR-BZCZCX-025實(shí)驗(yàn)室儀器使用、維護(hù)程序（冰箱）維護(hù)程序（冰箱）維護(hù)程序（冰箱）72-73PCR-BZCZCX-026實(shí)驗(yàn)室儀器使用、維護(hù)程序（生物安全柜）74-76PCR-BZCZCX-027恒溫金屬浴的使用、維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作和校準(zhǔn)程序77-78PCR-BZCZCX-028實(shí)驗(yàn)室儀器使用、維護(hù)程序（旋渦混合器）79PCR-BZCZCX-029移動(dòng)紫外消毒車使用、維護(hù)程序80-81PCR-BZCZCX-030溫度校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序82-83PCR-BZCZCX-031乙肝病毒（HBV）核酸提取標(biāo)準(zhǔn)操作程序84-88PCR-BZCZCX-032人巨細(xì)胞病毒（HCMV）核酸提取標(biāo)準(zhǔn)操作程序89-95XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件文件編號(hào)：PCR-BZCZCX版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共1頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-001版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共5頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：為了分子實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范管理，特制訂本程序。2.范圍：分子實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)： 3.1臨床PCR檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作人員共同遵守、相互督促。3.2因科研活動(dòng)需要，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)域（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本準(zhǔn)備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)）的非本室人員需首先熟悉本程序的各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵守執(zhí)行。4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)置：4.1實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)為：專用走廊、試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)組成。三個(gè)區(qū)域各有一個(gè)緩沖間。（見(jiàn)設(shè)置圖）4.2三個(gè)工作區(qū)各配備專用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服，并有明顯的區(qū)分標(biāo)識(shí)。試劑準(zhǔn)備區(qū)—白色、樣品處理區(qū)—蘭色、基因擴(kuò)增區(qū)—紅色。4.3工作區(qū)的配置、功能、內(nèi)務(wù)管理制度見(jiàn)各工作區(qū)文件。4.4實(shí)驗(yàn)室須嚴(yán)格遵守試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴(kuò)增區(qū)的流向制度，嚴(yán)禁誤入和逆進(jìn)入各工作區(qū)。4.5實(shí)驗(yàn)室流程：PCR室工作人員上班后，由過(guò)道走廊→試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴(kuò)增區(qū)流向，XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-001版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共5頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：打開排風(fēng)、光源、溫控裝置。2）標(biāo)本接收區(qū)接收標(biāo)本、驗(yàn)收登記后離心（不開蓋），由內(nèi)走廊入口將標(biāo)本送入標(biāo)本制備區(qū)緩沖間（標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)門關(guān)閉）。3）PCR工作人員按從試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴(kuò)增區(qū)更衣開始流水操作。4.6工作開始時(shí)，按開啟實(shí)驗(yàn)區(qū)門。工作結(jié)束，內(nèi)務(wù)整理完畢，關(guān)閉實(shí)驗(yàn)區(qū)。4.7實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁飲食、吸煙。5.人員配置：5.1人員要求：5.1.1鑒于PCR檢測(cè)干擾因素較多，結(jié)果分析復(fù)雜，其應(yīng)用需要與臨床充分溝通。因此，PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)具備大學(xué)?？埔陨蠈W(xué)歷，掌握相關(guān)學(xué)科知識(shí)及應(yīng)用能力（實(shí)驗(yàn)技能、分析能力、溝通能力）。5.1.2PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)取得上崗培訓(xùn)合格證書。5.1.3在崗未取得培訓(xùn)合格證書者，必須由具有上崗培訓(xùn)合格證書者對(duì)其先作專業(yè)培訓(xùn)，在條件許可時(shí)，應(yīng)在最短時(shí)間內(nèi)獲得上崗培訓(xùn)合格證書。其臨床PCR檢驗(yàn)過(guò)程須在具有培訓(xùn)合格證書的技術(shù)人員監(jiān)督指導(dǎo)下完成，其臨床PCR檢驗(yàn)報(bào)告須由具培訓(xùn)合格證書的技術(shù)人員審核簽發(fā)。5.1.4實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前必須學(xué)習(xí)掌握PCR實(shí)驗(yàn)室管理文件及要求，并由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人核查。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-001版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共5頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：5.2人員配置：實(shí)驗(yàn)室根據(jù)工作開展情況配備足夠數(shù)量的工作人員。目前，實(shí)驗(yàn)室配置人員為3人。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室全面管理、技術(shù)指導(dǎo)、解決與臨床溝通及技術(shù)疑難問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人不在崗時(shí)，應(yīng)指定代理人負(fù)責(zé)。5.3人員培訓(xùn)：5.3.1實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（或其指定代理人）每年必須參加上級(jí)管理部門組織的有關(guān)PCR內(nèi)容的會(huì)議及再繼續(xù)教育培訓(xùn)。5.3.2實(shí)驗(yàn)室其他人員每年要進(jìn)行1次專業(yè)學(xué)習(xí)。5.3.3未取得培訓(xùn)合格證書者，在有條件情況下，完成上崗培訓(xùn)，取得上崗培訓(xùn)合格證書。6.工作人員職責(zé)：6.1中、高級(jí)職務(wù)人員職責(zé)：6.1.1結(jié)合實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)，參與指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室發(fā)展規(guī)劃的制定工作，編寫技術(shù)管理件。6.1.2熟悉、追蹤本學(xué)科國(guó)內(nèi)外最新學(xué)術(shù)發(fā)展動(dòng)態(tài)，引進(jìn)先進(jìn)的技術(shù)和方法：6.1.3承擔(dān)部分臨床檢測(cè)工作、部分帶教工作。組織制定醫(yī)療、科研的實(shí)驗(yàn)方案。6.1.4解決本學(xué)科實(shí)驗(yàn)技術(shù)的重要問(wèn)題，設(shè)定新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。6.1.5通過(guò)學(xué)術(shù)報(bào)告、專題講座等形式培養(yǎng)本室的相關(guān)技術(shù)人員。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-001版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第4頁(yè)；共5頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：6.1.6協(xié)助科主任擬訂實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案和精密貴重儀器、大型設(shè)備的配置方案。6.1.7參與精密儀器、大型設(shè)備的可行性論證，組織安裝、調(diào)試、維修工作。6.2初級(jí)職務(wù)人員職責(zé)：6.2.1在上級(jí)技術(shù)人員的指導(dǎo)下，參加具體臨床檢測(cè)工作的技術(shù)操作，參與制定與本室工作有關(guān)的操作規(guī)范和儀器設(shè)備的使用規(guī)程。6.2.2負(fù)責(zé)本室儀器設(shè)備的保養(yǎng)和一般故障的維修工作，定期檢查儀器設(shè)備的完好狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，主動(dòng)會(huì)同有關(guān)部門及時(shí)解決。6.2.3積極參加室內(nèi)外各種技術(shù)培訓(xùn)，認(rèn)真學(xué)習(xí)與本專業(yè)技術(shù)有關(guān)的理論知識(shí)，不斷提高技術(shù)平。6.2.4幫助進(jìn)修生和實(shí)習(xí)生的技術(shù)工作。6.2.5完成上級(jí)技術(shù)人員交辦的與技術(shù)工作有關(guān)的其它任務(wù)。6.3工作人員行為規(guī)范：6.3.1有強(qiáng)烈的時(shí)間觀念，按時(shí)上下班，不遲到、不早退。6.3.2.每天實(shí)驗(yàn)完成后要清潔實(shí)驗(yàn)室，擦拭工作臺(tái)面。6.3.3實(shí)驗(yàn)人員須保持儀表整潔，工作區(qū)域須穿工作服，離開時(shí)應(yīng)換下。6.3.4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得飲食。6.3.5工作區(qū)域內(nèi)收集標(biāo)本外，不得擅離工作崗位，特殊情況需請(qǐng)假。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、人員配置和職責(zé)管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-001版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第5頁(yè)；共5頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：6.3.6上班時(shí)間內(nèi)除操作規(guī)范，不得隨意更改操作步驟。6.3.7嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)流程，盡量減少往返走動(dòng)。6.3.8操作過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真、專心，不得與他人交談，不得同時(shí)做與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的事情。如確有需要，應(yīng)暫停工作，并記錄下已進(jìn)行的步驟。6.3.9每日實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)記錄，報(bào)告單按時(shí)發(fā)送，原始記錄存檔清晰，以備查詢，文件記錄不骯臟、破損。6.3.10語(yǔ)言有禮貌、舉止講文明，對(duì)待來(lái)訪病人或電話應(yīng)和藹禮貌，解釋明確耐心，不得推脫或生硬回絕。6.3.11應(yīng)本著敬業(yè)愛(ài)崗的精神，努力做好本職工作，愛(ài)護(hù)儀器，節(jié)約消耗品，減少浪費(fèi)。6.3.12晚上下班要關(guān)門、關(guān)窗、檢查空調(diào)和儀器的電源是否關(guān)閉，處理好廢棄物。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：規(guī)范分子實(shí)驗(yàn)室各區(qū)的配置、功能、內(nèi)務(wù)管理等。2.適用范圍：PCR實(shí)驗(yàn)室。3.樣本接收區(qū)：3.1配置：計(jì)算機(jī)、操作臺(tái)及其他耗品和辦公用品若干。3.2功能：負(fù)責(zé)病人標(biāo)本的接收、驗(yàn)收、登記、檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告和簽發(fā)、抱怨的接受處理，Tip頭和離心管的分裝，檢驗(yàn)試劑的外內(nèi)包裝驗(yàn)收。分離的標(biāo)本、項(xiàng)目登記單隨分離的標(biāo)本傳遞到標(biāo)本處理區(qū)。3.3內(nèi)務(wù)管理3.3.1本區(qū)內(nèi)不允許與基因檢測(cè)無(wú)關(guān)的工作人員和病人進(jìn)入。3.3.2本區(qū)無(wú)人在崗時(shí)要關(guān)好房門，以保證檢驗(yàn)報(bào)告及其他物品的安全。3.3.3各種物品放置有序，清潔物與可疑污染物（如檢驗(yàn)申請(qǐng)單）要分開放置。3.3.4本區(qū)內(nèi)工作有相關(guān)文件的則按文件規(guī)定執(zhí)行，無(wú)相關(guān)文件的暫不作具體規(guī)定。4．試劑準(zhǔn)備區(qū)：4.1配置：普通冰箱一臺(tái)，離心機(jī)，空調(diào)，加樣器，可移動(dòng)紫外燈一臺(tái)、辦公用品若干。4.2.消耗品：消耗品包括酒精和次氯酸鈉，一次性手套，一次性帽子，各種尺寸的能高壓消毒的試劑容器，制備核酸的試劑，及反應(yīng)試劑（例如酶，緩沖液，XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：dNTPs），Eppendoff管，帶濾心的吸嘴。4.3功能：儲(chǔ)存溶液的準(zhǔn)備，應(yīng)用液、主混合液的準(zhǔn)備，分裝，成品試劑和化學(xué)試劑的貯存，75%乙醇等簡(jiǎn)單試劑的配制。工作完畢立即清洗工作場(chǎng)地。其他的工作不準(zhǔn)進(jìn)入。4.4.1著裝和標(biāo)識(shí)。該區(qū)工作服白色為標(biāo)識(shí)。4.4.2進(jìn)入本區(qū)時(shí)先開門，隨后關(guān)上，進(jìn)入緩沖間；在緩沖間內(nèi)換上專用工作服、鞋帽，做好工作人員出入實(shí)驗(yàn)室記錄，打開緩沖間門，進(jìn)入工作區(qū)，隨后將緩沖間門關(guān)上。非工作人員嚴(yán)禁入內(nèi)。4.4.3PCR擴(kuò)增體系的試劑配制和分裝、化學(xué)試劑的配制在本區(qū)內(nèi)完成即可。根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本驗(yàn)收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑，其余試劑要立即收好放回冰箱內(nèi)。配制好的試劑需通過(guò)傳遞窗再分送至Ⅱ區(qū)使用。實(shí)驗(yàn)中所使用的離心管、吸頭等需經(jīng)高壓滅菌處理，使用時(shí)應(yīng)在消毒有效期內(nèi)。4.4.4做好當(dāng)天冰箱溫度和臨床PCR檢驗(yàn)流程記錄表，通過(guò)傳遞窗再分送至Ⅱ區(qū)記錄。4.4.5本區(qū)內(nèi)的所有設(shè)備物品（除滅好菌的耗品外）均為本區(qū)內(nèi)專用，且要有明顯的標(biāo)識(shí)，不得移出使用，也不得從事本區(qū)規(guī)定以外的工作。4.4.6本區(qū)在工作開始前和工作中、工作結(jié)束后全過(guò)程均要嚴(yán)格按照各相關(guān)文件的規(guī)定操作。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.4.7每天須記錄本區(qū)的溫度和濕度，記錄時(shí)間為本區(qū)溫控設(shè)備開啟后半小時(shí)。4.4.8取下口罩、帽子放入垃圾筒。將本區(qū)所有廢棄物裝入垃圾袋，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，離開實(shí)驗(yàn)區(qū)時(shí)帶走垃圾袋，隨后關(guān)上實(shí)驗(yàn)區(qū)門。進(jìn)入緩沖間，脫下鞋套放入垃圾袋，然后將垃圾袋封口，脫下Ⅰ區(qū)專用工作服，打開Ⅰ區(qū)門，帶出垃圾，，關(guān)上門。5．標(biāo)本處理區(qū)：5.1配置：冰箱一臺(tái)，生物安全柜一臺(tái)，冷凍高速離心機(jī)一臺(tái)，混勻器一臺(tái)，加樣器一套，可移動(dòng)紫外消毒車一臺(tái)、金屬浴一臺(tái)，空調(diào)一臺(tái)，其他耗品、辦公用品若干。5.2功能：本區(qū)負(fù)責(zé)各種臨床樣本、質(zhì)控樣本的核酸提取純化，儲(chǔ)藏，樣本貯藏，在這一工作區(qū)完成。5.3內(nèi)務(wù)管理：5.3.1工作人員進(jìn)入本區(qū)前必須在緩沖間內(nèi)換上本區(qū)專用的工作服、鞋帽等，非本室工作人員嚴(yán)禁入內(nèi)。5.3.2標(biāo)識(shí)、著裝。該區(qū)為藍(lán)色工作服。其他要求同上述。5.3.3進(jìn)入工作區(qū)，打開傳遞窗門，取出當(dāng)天用的PCR試劑，做好當(dāng)天冰箱溫度和臨床PCR檢驗(yàn)流程記錄表，通過(guò)傳遞窗再分送至III區(qū)記錄。試劑放4℃冰XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第4頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：箱暫存。5.3.4這一工作區(qū)的試劑和消耗品切不可帶入PCR加樣區(qū)，因?yàn)樗鼈兛赡芪廴玖瞬粶?zhǔn)備擴(kuò)增的核酸。同樣，剩余的主混合液，酶，或者其他試劑也不準(zhǔn)返回試劑準(zhǔn)備區(qū)。5.3.5氣溶膠可引起污染，故應(yīng)避免實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不必要的走動(dòng)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的排風(fēng)調(diào)節(jié)，能減少過(guò)道區(qū)形成的氣溶膠對(duì)標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)的污染。每次加入待檢核酸后含反應(yīng)混合物反應(yīng)容器必須關(guān)閉，以避免樣品間的交叉污染。對(duì)于可能有傳染性的材料，必須遵守關(guān)于處理和消毒的已制定的SOP文件要求。5.3.6本區(qū)每天在工作時(shí)利用本區(qū)的溫控設(shè)備使本區(qū)的溫度控制在15~25℃之間。用過(guò)的加樣頭必須丟棄于相應(yīng)濃度的消毒液容器里。5.3.7每天須記錄本區(qū)的溫度、濕度，記錄時(shí)間為溫控設(shè)備開啟后半小時(shí)。5.3.8標(biāo)本處理過(guò)程均需嚴(yán)格遵守各種標(biāo)本處理的SOP文件。5.3.9取出冰箱中的PCR試劑，處理好的樣品加入試劑后通過(guò)傳遞窗送入Ⅲ區(qū)。5.3.10實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)后記錄、衛(wèi)生清潔處理、進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室記錄、溫控記錄等要求。6．基因擴(kuò)增區(qū)：6.1配置：7500Plus實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)儀一臺(tái)，可移動(dòng)紫外消毒車一臺(tái)，XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第5頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：電腦一臺(tái)，空調(diào)一臺(tái)，其他耗品、辦公用品若干。6.2功能：將樣品檢材（來(lái)自樣品準(zhǔn)備區(qū)）和主混合液（來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū)）加入成為反應(yīng)混合物，并在這唯一區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。6.3內(nèi)務(wù)管理：6.3.1著裝、標(biāo)識(shí)。該區(qū)工作服為粉紅色。工作人員進(jìn)入本區(qū)前須在緩沖間內(nèi)換上專用的工作服、鞋帽等。非本室工作人員嚴(yán)禁進(jìn)入本區(qū)。6.3.2本區(qū)每天在工作時(shí)利用本區(qū)的溫控設(shè)備，使本區(qū)的溫度控制在15~25℃范圍內(nèi)。6.3.3進(jìn)入工作區(qū)，打開傳遞窗門，取出加好試劑待擴(kuò)增的樣本。做好當(dāng)天PCR檢驗(yàn)流程記錄表。擴(kuò)增好必須棄于去指定的容器里。工作結(jié)束及下班前，必須清潔和凈化（去污染）實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面。6.3.4在緩沖間更換衣服，拖鞋，并帶手套和帽子。在此區(qū)域里手套應(yīng)該經(jīng)常更換。離開房間時(shí)應(yīng)將工作服留下。6.3.5按熒光擴(kuò)增儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件對(duì)各種樣本進(jìn)行檢測(cè)。本區(qū)在工作開始前、工作中和工作結(jié)束后的全過(guò)程均要按各相關(guān)文件的規(guī)定操作。6.3.6每天須記錄本區(qū)內(nèi)的溫度、濕度，記錄時(shí)間為溫控設(shè)備開啟后半小時(shí)。6.3.7本區(qū)內(nèi)的所有設(shè)備、物品為本區(qū)內(nèi)專用，且要有明顯的標(biāo)識(shí)，不得移出使用，也不得從事本區(qū)工作范圍以外的事項(xiàng)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-002版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第6頁(yè)；共6頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：6.3.8作好擴(kuò)增儀的維護(hù)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的記錄、質(zhì)控記錄。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)后消毒記錄等。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和環(huán)境管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-003版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共1頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：為了防止實(shí)驗(yàn)室的污染，特制訂本程序。2.范圍：分子實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)：分子實(shí)驗(yàn)室工作人員。4.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：4.1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ區(qū)的空氣流向由實(shí)驗(yàn)室區(qū)域外向內(nèi)。4.2Ⅱ、Ⅲ這兩區(qū)應(yīng)空氣對(duì)流通暢，但兩區(qū)之間不應(yīng)存在空氣對(duì)流。4.3實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)應(yīng)為寬60-80cm，長(zhǎng)不小于200cm的堅(jiān)固、平整、光滑、耐酸、耐紫外照射的臺(tái)面，臺(tái)面距地面高度80cm。4.4實(shí)驗(yàn)室各區(qū)上方應(yīng)安裝40W日光燈一盞，近工作臺(tái)上方安裝兩只40W紫外燈。緩沖間上方安裝一只40W紫外燈。4.5Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ區(qū)應(yīng)有空氣恒溫設(shè)備（如冷暖空調(diào)），室溫宜為18-25℃,空氣濕度宜≤70%.4.6儀器設(shè)備、標(biāo)本架、槍頭盒、離心管盒各區(qū)均專用，且有各區(qū)專用標(biāo)志,各物品須擺放整齊,滅菌的物品須與未滅菌物品嚴(yán)格區(qū)分放置。4.7冰箱內(nèi)試劑分類擺放。4.8消毒和污物處理見(jiàn)各自的SOP。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序臨床標(biāo)本管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-004版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共1頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：規(guī)范標(biāo)本采集、運(yùn)送、貯存、廢棄的管理，確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。2.范圍：臨床各類標(biāo)本，涉及標(biāo)本的采集、處理、保存。3.責(zé)任人：分子實(shí)驗(yàn)室工作人員和臨床護(hù)士。4.工作程序：4.1實(shí)驗(yàn)室所有臨床標(biāo)本必須有唯一性編號(hào)，標(biāo)本的唯一性編號(hào)須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改。4.2所有標(biāo)本均可能具有傳染性，須嚴(yán)格遵守醫(yī)院有關(guān)院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾管理和處理規(guī)定，工作人員注意保持并隨時(shí)檢查容器的完整和無(wú)標(biāo)本外泄發(fā)生。4.3標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存見(jiàn)相應(yīng)的操作程序文件。4.4接收標(biāo)本時(shí)應(yīng)該核對(duì)標(biāo)本與檢驗(yàn)申請(qǐng)單的一致性。工作人員有權(quán)拒收與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不一致的標(biāo)本、標(biāo)識(shí)不清的標(biāo)本。檢驗(yàn)申請(qǐng)有不清晰情況時(shí)，應(yīng)即時(shí)與臨床科室或相關(guān)人員聯(lián)系核實(shí)。4.5標(biāo)本接受人須檢查標(biāo)本狀態(tài)：標(biāo)本不合要求（使用不適當(dāng)?shù)娜萜?、容器有破損、標(biāo)本外泄污染、標(biāo)本溶血、標(biāo)本量不足等），工作人員有權(quán)拒受標(biāo)本，應(yīng)記錄其狀態(tài)并通知臨床重新送檢。4.6檢測(cè)前標(biāo)本處理時(shí)，工作人員須仔細(xì)核對(duì)標(biāo)本與標(biāo)本資料記錄的一致性，準(zhǔn)確無(wú)誤時(shí)，方可進(jìn)行處理。4.7標(biāo)本的廢棄處理見(jiàn)“廢棄物的處理程序”XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)本采集、驗(yàn)收、保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-005版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1、目的：保證所接收的標(biāo)本符合實(shí)驗(yàn)要求,保證標(biāo)本的保存質(zhì)量。2、適用范圍：門診患者和病區(qū)患者送檢標(biāo)本。3、責(zé)任人：XX科人員、臨床護(hù)士和運(yùn)送部人員。4、標(biāo)本的采集（標(biāo)本由醫(yī)護(hù)人員采集）血液標(biāo)本：病區(qū)標(biāo)本由護(hù)士采集，門診標(biāo)本由門診抽血處專人采集，全血樣本根據(jù)需要選擇真空無(wú)菌無(wú)抗凝專用試管抽取靜脈血2ml或于含EDTA-K2真空采集管中抽取靜脈血2ml。痰標(biāo)本：用一次性無(wú)菌痰杯（帶蓋）收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢。對(duì)于無(wú)痰或少痰的患者，可用45℃加溫的100g/LNaCl水溶液霧化吸入或改變體位以使痰液易于咳出；對(duì)于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標(biāo)本。生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用一次性滅菌取樣拭子采集樣本，及時(shí)送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本，要求病人在采樣2小時(shí)內(nèi)排尿，采樣時(shí)，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2~3cm，轉(zhuǎn)動(dòng)一周以獲得上皮細(xì)胞。將取樣后的棉拭子管加1ml無(wú)菌生理鹽水。宮頸脫落細(xì)胞：宮頸脫落細(xì)胞由醫(yī)生用專用取樣宮頸刷（滅菌，一次性）采集樣本，及時(shí)送檢。采集要求病人在采樣有24小時(shí)內(nèi)不能有性交，采樣時(shí)，用無(wú)菌棉球輕拭宮頸表面過(guò)多的分泌物及血跡，宮頸刷到達(dá)宮頸外口上方10mm左XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)本采集、驗(yàn)收、保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-005版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：右，部分毛刷覆蓋宮頸外口表面，用適當(dāng)?shù)耐饬Τ粋€(gè)方向轉(zhuǎn)3圈。取出后將毛刷置于細(xì)胞保存液中，封蓋。及時(shí)送檢。腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時(shí)送檢。乳汁標(biāo)本：由病人直接擠入1.5ml無(wú)菌EP管中，封蓋送檢。尿液標(biāo)本：由病人自留尿液于無(wú)菌封閉的杯中送檢。注：定期對(duì)臨床醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行有關(guān)標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸?shù)戎R(shí)的培訓(xùn)。5、標(biāo)本的運(yùn)送：標(biāo)本由送檢人員統(tǒng)一收取，運(yùn)送容器為一次性無(wú)抗凝劑真空試管，4小時(shí)內(nèi)送到遺傳科標(biāo)本接收區(qū)。6、標(biāo)本驗(yàn)收程序：6.1對(duì)符合檢測(cè)要求的標(biāo)本及時(shí)地用計(jì)算機(jī)條碼系統(tǒng)進(jìn)行簽收，然后進(jìn)行唯一性編號(hào)（詳見(jiàn)標(biāo)本唯一性編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)操作程序）。6.2認(rèn)真查對(duì)姓名，條碼號(hào)，ID號(hào)，病區(qū)床號(hào)，項(xiàng)目及標(biāo)本性狀等。對(duì)不符合要求者記入拒收標(biāo)本記錄表中，并及時(shí)通知采樣科室，正確及時(shí)地補(bǔ)采樣，以免延誤病人的檢測(cè)報(bào)告。7、標(biāo)本的保存：HBV-DNA：血樣標(biāo)本4~8℃短期保存（2天），或分離出血清，-20℃下保存（兩周以上）。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)本采集、驗(yàn)收、保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-005版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：HCV-RNA：血樣標(biāo)本應(yīng)盡快分離血清（或血漿），-20℃保存，保存期不得超過(guò)2周。長(zhǎng)期保存需存放在-70℃以下。痰、乳汁、尿、全血、胸腹水、腦脊液標(biāo)本置4℃下短期保存。血清、血漿、胸腹水、腦脊液和處理后的痰、尿-20℃下長(zhǎng)期保存。注：所有標(biāo)本在報(bào)告發(fā)出后保存1周。由專人負(fù)責(zé)，確保標(biāo)本保存的溫度及狀態(tài)正常，1周后丟棄并做記錄。特殊標(biāo)本處理：對(duì)暫不檢測(cè)的項(xiàng)目或規(guī)定時(shí)間外收到的零散標(biāo)本，要隨時(shí)登記和交班，以免漏檢，遺失和延誤檢驗(yàn)。對(duì)特殊標(biāo)本或特殊病人的標(biāo)本，實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制。所謂特殊標(biāo)本是指難于采集的標(biāo)本，以及特殊病人的標(biāo)本?！笆捉印必?fù)責(zé)制是指無(wú)論那位工作人員，一旦收到標(biāo)本，均須負(fù)其責(zé)任，及時(shí)和正確保管，轉(zhuǎn)送標(biāo)本到有關(guān)實(shí)驗(yàn)室或有關(guān)人員，同時(shí)作交班記錄和雙簽名，不得以任何借口推托。對(duì)于做長(zhǎng)期病情動(dòng)態(tài)考察的病人標(biāo)本一律置-20℃下長(zhǎng)期保存，使用時(shí)再按需取出檢測(cè)。注：定期對(duì)本科室工作人員進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)本唯一性編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-006版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：規(guī)范待檢標(biāo)本的唯一識(shí)別標(biāo)記的編碼規(guī)則，保證在任何時(shí)候?qū)?biāo)本的識(shí)別不發(fā)生混淆。2.適用范圍：基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室所開展的檢測(cè)項(xiàng)目。3.操作人：分子實(shí)驗(yàn)室人員和臨床護(hù)士。4.操作方法：XX科已使用條形碼系統(tǒng)，其條形碼已具備唯一性標(biāo)識(shí)，但由于病區(qū)標(biāo)本多，項(xiàng)目雜，不能做到PCR檢測(cè)項(xiàng)目標(biāo)本的條形碼單獨(dú)特征性區(qū)分，且條形碼不具有連續(xù)性，這給上機(jī)標(biāo)本編輯檢測(cè)號(hào)帶來(lái)不便和影響工作效率。因此，必須重新為帶有條形碼的標(biāo)本編號(hào)。編號(hào)原則詳見(jiàn)下述。4.1按檢測(cè)類型+檢測(cè)日期+檢測(cè)順序進(jìn)行。4.2編號(hào)步驟：Ⅰ.對(duì)當(dāng)天送來(lái)的標(biāo)本，根據(jù)編號(hào)的基本原則編號(hào)，每個(gè)樣本的每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)一個(gè)唯一的編號(hào)（如2018年1月1日檢測(cè)的第3個(gè)乙肝標(biāo)本為HBV-DNA2018010103或20180101HBVDNA03）Ⅱ.用筆在每張檢驗(yàn)申請(qǐng)單和對(duì)應(yīng)的樣品管上作好相同的標(biāo)記。Ⅲ.做好標(biāo)本的接收記錄，每個(gè)樣本的記錄都應(yīng)包括以下信息:接收時(shí)間、醫(yī)院、科室、送檢醫(yī)生、患者姓名、性別、年齡、標(biāo)本類別、標(biāo)本狀態(tài)、送標(biāo)本者、接收人、標(biāo)本唯一統(tǒng)編號(hào)等。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序標(biāo)本唯一性編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-006版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：Ⅳ.處理好樣品、點(diǎn)樣后，將反應(yīng)管放入擴(kuò)增儀上開始擴(kuò)增。Ⅴ.擴(kuò)增得到結(jié)果后，先在統(tǒng)計(jì)簿上填入結(jié)果，作好記錄，再依次把實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入相應(yīng)申請(qǐng)單。Ⅵ.發(fā)放檢驗(yàn)報(bào)告單。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作、維護(hù)和校準(zhǔn)程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-007版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證儀器設(shè)備得到正確無(wú)誤的操作使用、穩(wěn)定狀態(tài)，保障儀器設(shè)備的使用壽命和結(jié)果檢測(cè)的準(zhǔn)確性。2.范圍：PCR涉及的主要設(shè)備，包括：7500Plus熒光擴(kuò)增儀，離心機(jī)，可調(diào)式移液器，恒溫金屬浴，生物安全柜等。3.職責(zé)： 3.1操作者必須嚴(yán)格遵循操作程序的規(guī)定。3.2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)程序的落實(shí)和督導(dǎo)。4.儀器設(shè)備的操作使用：4.1儀器設(shè)備的使用授權(quán)：僅本實(shí)驗(yàn)室工作人員有權(quán)使用實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備，儀器設(shè)備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設(shè)備的操作使用程序并經(jīng)科室主任考核認(rèn)可。4.2儀器的使用：儀器設(shè)備的使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理，儀器設(shè)備的使用必須嚴(yán)格遵循儀器設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。5.儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)：5.1維護(hù)保養(yǎng)的實(shí)施：按PCR實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)的SOP文件進(jìn)行。5.2維護(hù)保養(yǎng)應(yīng)有及時(shí)的實(shí)施記錄，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)記錄應(yīng)及時(shí)檢查，核實(shí)。6.儀器設(shè)備的校準(zhǔn)程序：6.1校準(zhǔn)方法：XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備操作、維護(hù)和校準(zhǔn)程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-007版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：6.1.1可調(diào)式移液器校準(zhǔn)應(yīng)送到該地區(qū)計(jì)量單位進(jìn)行校準(zhǔn)。6.1.2恒溫金屬浴使用經(jīng)檢定的溫度計(jì)進(jìn)行日常溫度監(jiān)控，廠家每年校準(zhǔn)一次。6.2校準(zhǔn)安排在不進(jìn)行樣本檢測(cè)的日期完成。6.3校準(zhǔn)后設(shè)備要貼上本次校準(zhǔn)的日期及下次校準(zhǔn)的預(yù)定日期。6.4校準(zhǔn)記錄保存在各自的設(shè)備檔案中.。6.5校準(zhǔn)計(jì)劃：6.5.1啟用前校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用前實(shí)施校準(zhǔn)。6.5.2周期性校準(zhǔn)：設(shè)備在投入使用后定期進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)各儀器校正SOP。6.5.3維修后校準(zhǔn)：設(shè)備經(jīng)維修后須經(jīng)校準(zhǔn)后才可重新投入使用。6.5.4校準(zhǔn)計(jì)劃外的校準(zhǔn)：在日常工作中懷疑某些已校準(zhǔn)設(shè)備出現(xiàn)偏差時(shí)，應(yīng)對(duì)其作計(jì)劃外校準(zhǔn)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-008版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證PCR實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善的管理。2.范圍：PCR實(shí)驗(yàn)室的所有儀器設(shè)備。3.職責(zé)：3.1儀器設(shè)備的管理、維護(hù)、保養(yǎng)等的具體事項(xiàng)由設(shè)備操作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行。3.2由PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織執(zhí)行和監(jiān)督管理。4.工作內(nèi)容：4.1建檔管理。儀器設(shè)備的檔案管理應(yīng)包括以下內(nèi)容：4.1.1儀器設(shè)備的一般情況：名稱，制造商，型號(hào)，序號(hào)，接受日期，接收狀態(tài)（全新，改裝，原件調(diào)撥等），啟用日期，目前放置地點(diǎn)，接受人員簽字等。4.1.2儀器設(shè)備的相關(guān)文件：儀器設(shè)備的說(shuō)明書，操作手冊(cè)，保修卡等，有關(guān)文件（或復(fù)印件）的文件序號(hào)，名稱，保存方式，管理負(fù)責(zé)人等。4.1.3儀器設(shè)備的損壞，故障，修理須作如下記錄：日期，設(shè)備名稱，設(shè)備標(biāo)記號(hào)，損壞或故障的表現(xiàn)，損壞或故障的原因，修理人員及單位，修理的結(jié)果，記錄人員簽名，質(zhì)量負(fù)責(zé)人簽名等。4.1.4有問(wèn)題的儀器設(shè)備加貼明顯的紅色停用標(biāo)識(shí)，標(biāo)識(shí)上應(yīng)有停用XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-008版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：日期及原因；可搬動(dòng)的儀器移至設(shè)備處報(bào)修，不可移動(dòng)的設(shè)備原地使用布罩封存待修，直至修復(fù)校驗(yàn)后重新標(biāo)識(shí)。4.1.5儀器設(shè)備的報(bào)廢處理：因使用壽命，損壞，故障導(dǎo)致儀器設(shè)備不能滿足檢測(cè)需要時(shí)，該設(shè)備即行報(bào)廢。由管理人填寫報(bào)廢申請(qǐng)，科質(zhì)量負(fù)責(zé)人核實(shí)，設(shè)備處批準(zhǔn)后由質(zhì)量負(fù)責(zé)人在設(shè)備檔案中簽名注銷。4.2儀器設(shè)備實(shí)行嚴(yán)格的分區(qū)專用。4.3使用的儀器設(shè)備應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)和鑒定，具體見(jiàn)文件SOP；4.4為保持儀器設(shè)備工作狀態(tài)的穩(wěn)定，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行定期的，必要的維護(hù)和保養(yǎng)，見(jiàn)文件SOP；4.5為使7500Plus熒光定量PCR檢測(cè)儀處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)，在該電腦上不得使用非本室的外來(lái)U盤，不能在電腦里加載其它程序和軟件；在使用本室U盤進(jìn)行資料備份時(shí)，需在報(bào)告系統(tǒng)電腦上預(yù)先殺毒方可使用。5、儀器故障時(shí)的標(biāo)記、放置程序：5.1步驟：a）用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器。b）小型儀器送儀器部門維修。c）大型貴重儀器關(guān)閉電源開關(guān)，取下電源插頭。用相應(yīng)防塵罩遮蔽儀器。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-008版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：d）維修完成后取下紅色故障標(biāo)示，換上黃色未校準(zhǔn)標(biāo)示牌。e）調(diào)試實(shí)驗(yàn)通過(guò)，去掉未校準(zhǔn)標(biāo)示牌,換上綠色運(yùn)行標(biāo)牌。f）儀器重新正常使用。5.2修復(fù)后設(shè)備必須經(jīng)校準(zhǔn)、檢定或檢測(cè)滿足要求后方能正常投入使用。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-009版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證PCR檢測(cè)可靠性和準(zhǔn)確性。2.范圍：PCR檢測(cè)前質(zhì)控、樣本分離純化質(zhì)控、統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控。3.職責(zé)：由分子實(shí)驗(yàn)室工作人員具體操作，負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)本落實(shí)。4.試劑質(zhì)檢管理：4.1對(duì)PCR檢測(cè)的試劑首先要驗(yàn)收其三證是否齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊(cè)證、經(jīng)營(yíng)許可證）。4.2外包裝檢查：包裝應(yīng)完整、無(wú)污、無(wú)損，各標(biāo)識(shí)清晰（廠家名稱、品名、批準(zhǔn)文號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期、貯存條件等）。4.3內(nèi)包裝檢查：內(nèi)包裝是否有破損、泄漏，內(nèi)容物是否齊全，是否有相應(yīng)的使用說(shuō)明書，是否有肉眼可見(jiàn)的變質(zhì)等。4.4上述檢查在試劑準(zhǔn)備區(qū)完成，并同時(shí)進(jìn)行記錄，記錄放在試劑準(zhǔn)備區(qū)內(nèi)。4.5試劑盒的性能檢查(見(jiàn)試劑性能檢查SOP)5.室內(nèi)質(zhì)控：5.1.質(zhì)控品的來(lái)源：由試劑公司提供。5.1.質(zhì)控品處理：質(zhì)控品與樣本同時(shí)處理，排列順序?yàn)椋号R床樣本、陰性質(zhì)控品陽(yáng)性質(zhì)控品，具體見(jiàn)室內(nèi)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)操作程序。6.室間質(zhì)控：必須參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心組織的全國(guó)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目的室間質(zhì)XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-009版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：量評(píng)價(jià)。6.1室間質(zhì)控標(biāo)本的接收和驗(yàn)收：收到質(zhì)控血清后由相關(guān)人員登記、簽字，根據(jù)質(zhì)控標(biāo)本的有關(guān)況明對(duì)血清的數(shù)量、批號(hào)、包裝進(jìn)行驗(yàn)收并將質(zhì)控標(biāo)本按要求置-20℃以下保存與標(biāo)本處理區(qū)。6.2質(zhì)控標(biāo)本的檢測(cè)按常規(guī)臨床標(biāo)本對(duì)待，若需要，檢測(cè)前先根據(jù)說(shuō)明對(duì)質(zhì)控物進(jìn)行復(fù)溶。6.3室間質(zhì)控樣本必須按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作一樣進(jìn)行，由負(fù)責(zé)常規(guī)工作的人員測(cè)試，工作人員必須使用實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)方法和試劑，不得特殊對(duì)待。檢測(cè)結(jié)果須在截止日期前上報(bào)。6.4室間質(zhì)評(píng)的檢測(cè)結(jié)果和反饋結(jié)果均記錄于室間質(zhì)評(píng)記錄表，根據(jù)反饋結(jié)果分析室間質(zhì)評(píng)的狀態(tài)，如有失控應(yīng)查找原因，并采取相應(yīng)的措施。7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷：7.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果合格，即發(fā)報(bào)告。7.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果不合格，報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，會(huì)同有關(guān)人員，查找原因，妥善解決。7.3每次檢測(cè)質(zhì)控結(jié)果須有記錄。7.4失控原因及糾正措施須有記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序化學(xué)試劑的管理及配制操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-010版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑安全使用及正確配制。2.適用范圍：基因擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)試劑(NaOH、乙醇、含氯消毒片)。3.管理程序:3.1化學(xué)試劑的購(gòu)買或領(lǐng)用：每次實(shí)驗(yàn)前清點(diǎn)試劑，發(fā)現(xiàn)試劑存量不足時(shí)，及時(shí)領(lǐng)用或提交進(jìn)購(gòu)申請(qǐng)。發(fā)現(xiàn)有試劑過(guò)期或明顯變質(zhì)時(shí)要立即報(bào)廢，并將報(bào)廢試劑妥善處理。3.2化學(xué)試劑貯存：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)試劑均置于避光、陰涼、干燥處保存。實(shí)驗(yàn)中常用到的一些化學(xué)試劑則根據(jù)要求保存于不同環(huán)境(如預(yù)冷乙醇保存于4℃)。PCR試劑貯存于-20℃或以下。3.3化學(xué)試劑使用：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)試劑均無(wú)毒性或僅有低腐蝕性，故使用時(shí)主要應(yīng)注意分類、分區(qū)保存、關(guān)注失效日期和使用后的及時(shí)清潔等。3.4化學(xué)試劑由專人負(fù)責(zé)管理，未經(jīng)主任許可不能隨意帶出實(shí)驗(yàn)室。4.化學(xué)試劑配制：4%的NaOH配制1.用天平稱取4克分析純的NaOH固體，置于一只三角燒瓶中。2.200ml量桶取100ml雙蒸水，緩緩注入盛放NaOH固體的三角燒瓶中。3.搖三角燒瓶使NaOH固體充分溶解。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序化學(xué)試劑的管理及配制操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-010版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.緩緩傾倒入250ml廣口瓶中密封保存?zhèn)溆谩?5%酒精的配制常規(guī)消毒的75%酒精由醫(yī)院藥劑科提供。含氯消毒液的配制1升水加2片含氯消毒片濃度為500mg/L。一般桌面，器具和地面的消毒只要使有效氯達(dá)到500mg/L,即可達(dá)到消毒作用。如需加大消毒力度，則有效氯濃度加大。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室PCR試劑性能質(zhì)檢程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-011版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證每批用于臨床實(shí)驗(yàn)的試劑的質(zhì)量良好。2.適用范圍：各種用于臨床實(shí)驗(yàn)的核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑。3.操作人：實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及工作人員。4.質(zhì)檢步驟：4.1收到試劑后，目測(cè)試劑是否處在凍存狀態(tài)。4.2核對(duì)試劑品種和數(shù)量，檢查試劑批號(hào)。4.3及時(shí)將試劑轉(zhuǎn)入－20℃以下冰箱保存。取出陽(yáng)性、陰性對(duì)照，提取液、稀釋液，從傳遞窗傳至Ⅱ區(qū)保存。將上述檢測(cè)核對(duì)情況在記錄本上登記。4.4最遲在前批次試劑存量尚可維持常規(guī)實(shí)驗(yàn)一周時(shí)，按如下要求對(duì)新批號(hào)試劑進(jìn)行效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)。4.5效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置：空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各一，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品梯度（104、105、106、107）。4.6出現(xiàn)如下情況中任何一種的，判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測(cè)：a）空白對(duì)照和陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增。如擴(kuò)增曲線CT值大于35，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)確證試劑污染。b）陽(yáng)性對(duì)照和陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品均未檢出，或陽(yáng)性對(duì)照未檢出而陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品檢出率大幅下降，表示試劑失效或檢測(cè)靈敏度大幅下降。4.7陽(yáng)性對(duì)照未檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)正常，提示樣品提取液可能存在問(wèn)題。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室PCR試劑性能質(zhì)檢程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-011版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：重復(fù)新舊提取液陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)，確定提取液失效問(wèn)題。更換提取液后該批試劑方可使用。4.8空白對(duì)照無(wú)擴(kuò)增，陰性對(duì)照有擴(kuò)增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。單獨(dú)用提取液點(diǎn)樣上機(jī)，出現(xiàn)擴(kuò)增，需更換提取液后方可使用該批試劑。4.9陽(yáng)性對(duì)照檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品未檢出或擴(kuò)增曲線明顯系統(tǒng)性CT值4.9偏大3個(gè)循環(huán)以上。提示陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品存在問(wèn)題。更換陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品后該批試劑方可投入使用。4.10空白對(duì)照、陰性對(duì)照無(wú)擴(kuò)增，陽(yáng)性對(duì)照正常檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品導(dǎo)出的標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率（－2.6～－3.4）、截距（36～44）、相關(guān)性（﹤－0.98）均在使用范圍內(nèi)，表明該批試劑良好，可以投入臨床使用。4.11將實(shí)驗(yàn)結(jié)果歸入記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序樣本核酸提取操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-012版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：規(guī)范臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室樣本預(yù)處理的操作過(guò)程。2.范圍：經(jīng)《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室樣本接收程序》確認(rèn)合格的樣本。3.工作流程：血清、胸腹水、腦脊液標(biāo)本的DNA獲?。?）按待測(cè)標(biāo)本數(shù)和定量標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)，取0.5ml離心管做好標(biāo)記；2）取待測(cè)樣本血清100ul，胸腹水、腦脊液離心后取沉淀，分別加到1.5ml離心管中；3）分別加入裂解液100ul，裂解液使用前應(yīng)振搖混懸；4）然后分別加入待測(cè)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品50ul，振蕩混懸，室溫靜置10分鐘；12000rpm離心5min，去上清；5）加入150ul洗滌液，振蕩混懸，12000rpm離心5min，去上清；6）加入150ul重復(fù)洗滌液振蕩混，12000rpm離心5min，去上清備用。痰標(biāo)本處理：標(biāo)本加入等量的半胱氨酸液化劑或NaOH液化，室溫振搖25-30分鐘，取0.5ml加入1.5ml離心管中，12000rpm離心10min，吸去上清，沉淀用500ul生理鹽水充分混懸，12000rpm離心10min，吸去上清，沉淀中加入裂解液100uL，振蕩混懸，室溫靜置10分鐘；（標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)需NaOH液化處理，直接加入裂解液100ul振蕩混勻，室溫靜置10分鐘）。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序樣本核酸提取操作程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-012版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：2）10000rpm離心5min，去上清；加入150ul洗滌液，振蕩混懸,10000rpm離心5min，去上清；加入150uL重復(fù)洗滌，振蕩混懸，10000rpm離心5min，去上清備用。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室一次性離心管和吸嘴的質(zhì)檢程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-013版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證每批用于臨床實(shí)驗(yàn)的離心管和吸嘴的質(zhì)量良好。2.適用范圍：分子實(shí)驗(yàn)室。3.操作人：實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及實(shí)驗(yàn)人員。4.離心管質(zhì)檢：目測(cè)是否管子有破損、畸形、管蓋不嚴(yán)等情況。4.1離心管的PCR抑制物質(zhì)檢:從新購(gòu)的樣品離心管中，抽取3支，采用已知的中、低2個(gè)濃度（105和103IU/ml）的HBVDNA質(zhì)控血清，使用抽取的離心管按程序進(jìn)行檢測(cè)，每一濃度雙管重復(fù)，同時(shí)使用已知無(wú)PCR抑制物的進(jìn)口或無(wú)DNase和Rnase的離心管作為對(duì)照，然后觀察測(cè)定結(jié)果。如果檢測(cè)待檢離心管結(jié)果較對(duì)照或預(yù)期結(jié)果明顯偏低，如低1--2個(gè)數(shù)量級(jí)，則證明其有抑制物的存在。4.2離心管的密封性質(zhì)檢方法：抽取3支新購(gòu)離心管，每管準(zhǔn)確加入一定量如500ul（對(duì)1.5ml離心管）或50ul（對(duì)0.2ml離心管）水，在離心機(jī)上12000轉(zhuǎn)離心10分鐘，看其是否有破損和漏液情況發(fā)生，然后按核酸提取程序煮沸或金屬浴加熱，觀察其是否有爆蓋或漏液現(xiàn)象，如果有則應(yīng)進(jìn)行更換處理。5.帶濾芯吸頭的質(zhì)檢：5.1對(duì)帶濾芯吸頭密封性的質(zhì)檢：首先制備一個(gè)含1%~2%甘油及色素（如甲基橙、紅墨水、藍(lán)墨水等）的水溶液，如果吸頭的最大體積為100ul，則將加樣器吸取體積調(diào)至110~120ul，再套上吸頭后吸取上述有色液體。如果吸頭質(zhì)量好，則有色液體不應(yīng)出現(xiàn)在濾芯以上，否則說(shuō)明濾芯不嚴(yán)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室一次性離心管和吸嘴的質(zhì)檢程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-013版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：5.2帶濾芯吸頭質(zhì)量的質(zhì)檢：加樣器吸取量設(shè)至擴(kuò)增加樣所需的體積，使用待評(píng)價(jià)帶濾芯吸頭對(duì)一份107陽(yáng)性模板,來(lái)回吸取10次（模擬10份陽(yáng)性樣本的吸?。?，將最后1次的吸取液加至一含擴(kuò)增反應(yīng)液的管中，之后，換一個(gè)新吸頭，連續(xù)吸取10份陰性模板,將最后1次的吸取液加至一含擴(kuò)增反應(yīng)液的管中,按所用試劑方法進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。強(qiáng)陽(yáng)性樣本應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性，陽(yáng)性弱或出現(xiàn)陰性說(shuō)明吸頭可能含有擴(kuò)增抑制物。陰性樣本應(yīng)為陰性，出現(xiàn)陽(yáng)性則表明吸頭不能有效地防止氣溶膠對(duì)加樣器的污染。5.3記錄質(zhì)檢日期,離心管和吸嘴批號(hào)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室HBV-DNA室內(nèi)質(zhì)控程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-014版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：隨時(shí)了解并控制實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的精密度變化。2.適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。3.操作人：實(shí)驗(yàn)室工作人員。4.操作步驟：4.1低值定值質(zhì)量控制品4.1.1醫(yī)院自配HBV陽(yáng)性血清。4.1.2每管200μl。7管/盒。置于Ⅱ區(qū)-20℃冰箱,有效期半年。4.1.3本質(zhì)控適用于利用基因擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)HBV-DNA實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè)的質(zhì)量控制，試劑方法評(píng)估等。4.1.4質(zhì)控品定值定值標(biāo)準(zhǔn)來(lái)源于國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)的GBW(E)090031所提供的乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）血清標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。項(xiàng)目名稱平均數(shù)（X）IU/ml靶值（LOG）標(biāo)準(zhǔn)差（S）變異系數(shù)（CV）X±2S（IU/ml）低值3.63E±0.55.560.264.68％1.10E+05~1.20E+0.64.2質(zhì)控流程：4.2.1工作人員進(jìn)入II區(qū),取出中值質(zhì)控血清,恢復(fù)室溫,低速離心,放置項(xiàng)目標(biāo)本最后位置,同樣本一起操作。操作程序見(jiàn)標(biāo)本DNA流程SOP。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室HBV-DNA室內(nèi)質(zhì)控程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-014版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.2.2記錄結(jié)果,每天將結(jié)果登記在質(zhì)控圖中,得出質(zhì)控曲線。4.3.3分析質(zhì)控圖形4.3.3.1如果在X±3s線以外，則為失控，應(yīng)立即報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人，迅速查找原因。必要時(shí)復(fù)測(cè)標(biāo)本，然后方可發(fā)出報(bào)告，并將失控情況、查找過(guò)程及處理結(jié)果等詳細(xì)記錄。4.3.3.2如果在X±2s線以外，或出現(xiàn)連續(xù)5點(diǎn)以上在一側(cè)等規(guī)律變化，均應(yīng)即使向有關(guān)負(fù)責(zé)人反映，并積極查找原因。但當(dāng)天的檢驗(yàn)結(jié)果一般可以發(fā)出。4.3.3.3通過(guò)觀察圖形的規(guī)律性變化進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源。曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，準(zhǔn)確度發(fā)生了一次性的向上或向下改變。這種變化往往是由于一個(gè)新的情況引起的。如更換不同批號(hào)試劑，啟用新批號(hào)的質(zhì)控血清、操作人員的變換等。在找原因時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)注意“漂移”前后發(fā)生了那些變動(dòng)的因素。趨勢(shì)性變化：向下或向上的趨勢(shì)性變化表明檢測(cè)的準(zhǔn)確度發(fā)生了漸漸地變化。這種變化往往是由于一個(gè)逐漸改變的因素造成的。如質(zhì)控血清的降解，試劑效價(jià)的降低等。連續(xù)多點(diǎn)分布在靶值一側(cè)：目前，一般認(rèn)為質(zhì)控血清的檢測(cè)結(jié)果連續(xù)5天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)，則應(yīng)迅速查找原因，爭(zhēng)取盡快使之回復(fù)圍繞在靶值隨機(jī)分布的狀態(tài)。因?yàn)榘凑战y(tǒng)計(jì)學(xué)原理，由純隨機(jī)誤差造成的這種情況的可能性很小。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室HBV-DNA室內(nèi)質(zhì)控程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-014版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)可能性小于1.5％。因此凡出現(xiàn)連續(xù)5天以上出現(xiàn)在靶值同一側(cè)者均有可能存在非隨機(jī)誤差因素。如結(jié)果與靶值偏離并不太大，不會(huì)給臨床使用帶來(lái)太大影響時(shí)，一般化驗(yàn)報(bào)告可以照常填發(fā)。4.3.3.4其他規(guī)律變化（周期性等）：通過(guò)圖形的資料對(duì)比進(jìn)行誤差分析，消除誤差來(lái)源。每個(gè)月的月底將該月的全部質(zhì)控血清檢測(cè)結(jié)果的X和s與該批測(cè)定的X和s進(jìn)行比較。如果X發(fā)生了變化，說(shuō)明準(zhǔn)確度發(fā)生了變化提示有非隨機(jī)誤差存在。如果當(dāng)月s不同側(cè)表明檢測(cè)的精密度發(fā)生了變化。將使用同一批號(hào)質(zhì)控血清的CT值的X和s按月份列出。如果X逐在月上升，應(yīng)考慮保存不當(dāng)造成的試劑效價(jià)降低或質(zhì)控血清本身出現(xiàn)降解。如果各月份X基本一致而s逐月加大，則主要提示常規(guī)工作的精密度下降，應(yīng)重點(diǎn)從操作、管理上找原因。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告和審簽管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-015版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：確保結(jié)果的準(zhǔn)確發(fā)放。2.范圍：PCR檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告的審核、發(fā)放及管理。3.職責(zé)：經(jīng)相關(guān)培訓(xùn)后獲得上崗資格的工作人員方有權(quán)審核簽發(fā)檢驗(yàn)報(bào)告。4.工作流程：4.1報(bào)告的要求：檢測(cè)報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、客觀。4.2報(bào)告的形式:見(jiàn)各檢測(cè)項(xiàng)目SOP文件規(guī)定。4.3實(shí)時(shí)熒光PCR測(cè)定時(shí)，其檢測(cè)數(shù)據(jù)要經(jīng)過(guò)分析，避免因非特異性熒光而造成假陽(yáng)性,根據(jù)質(zhì)控品判斷PCR擴(kuò)增的有效性，只有當(dāng)質(zhì)控品的擴(kuò)增結(jié)果符合有關(guān)項(xiàng)目SOP條件時(shí)，才可發(fā)出報(bào)告,否則應(yīng)重新測(cè)定。4.4檢測(cè)項(xiàng)目其結(jié)果報(bào)告HBV-DNA以每毫升活力單位（IU／ml）報(bào)告，如結(jié)果高于測(cè)定方法線性范圍上限，則對(duì)樣本稀釋后再測(cè)，結(jié)果乘上稀釋倍數(shù)；如結(jié)果低于方法的測(cè)定范圍下限，則報(bào)告小于測(cè)定范圍下限，不能報(bào)告為“0”、“陰性”或其它各種形式的結(jié)果。4.5服務(wù)臺(tái)工作人員憑“取檢驗(yàn)報(bào)告單憑證領(lǐng)取單”（或發(fā)票）發(fā)放檢驗(yàn)報(bào)告。4.6當(dāng)臨床科室醫(yī)生要求電話報(bào)告結(jié)果時(shí)，應(yīng)先確認(rèn)對(duì)方身份，核對(duì)其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號(hào)等情況，方可報(bào)告，并明確告知對(duì)方，實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為準(zhǔn)。4.7當(dāng)患者要求電話報(bào)告結(jié)果時(shí)，應(yīng)讓患者提供病人檢驗(yàn)報(bào)告單憑證號(hào)碼后XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告和審簽管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-015版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：方可告知對(duì)方其檢測(cè)結(jié)果，并需明確告知對(duì)方，實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為準(zhǔn)；不得在無(wú)有效證據(jù)的情況下以任何方式提供諸如某人做過(guò)某項(xiàng)檢查和/或檢測(cè)結(jié)果的信息（包括提示性、暗示性語(yǔ)言）。當(dāng)需郵寄報(bào)告時(shí)，應(yīng)由患者填寫地址及郵政編碼等，并作記錄。本實(shí)驗(yàn)室暫不提供其它的報(bào)告方式。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材的購(gòu)買和管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-016版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：規(guī)定試劑購(gòu)買原則、驗(yàn)收的程序和試劑的正確貯存。2.范圍：適用于實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)的診斷試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材。3.職責(zé)：3.1本程序由實(shí)驗(yàn)室工作人員一個(gè)月統(tǒng)計(jì)一次試劑采購(gòu)訂單，提交給負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)人審核好后，開始訂貨。3.2本程序的改動(dòng)，可由任一使用本程序的工作人員提出，經(jīng)論證其合理性后，報(bào)經(jīng)科主任批準(zhǔn)簽字后實(shí)施。4.工作程序：4.1試劑的購(gòu)買和管理4.1.1試劑購(gòu)買原則：試劑的購(gòu)買須本著“質(zhì)優(yōu)價(jià)廉”進(jìn)行，所購(gòu)基因診斷試劑必須三證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊(cè)證、經(jīng)營(yíng)許可證），并能與7500Plus熒光定量PCR檢測(cè)儀相配套。4.1.2試劑購(gòu)買程序：1）試劑廠家的確定：購(gòu)買時(shí)首先考慮中標(biāo)試劑。中標(biāo)廠家無(wú)試劑情況下考慮操作方便、質(zhì)量好的廠家，提交西藥庫(kù)，由西藥庫(kù)決定購(gòu)買。2）試劑廠商的變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則上一年內(nèi)不變更試劑廠商，如在使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題，由室負(fù)責(zé)人向科主任提出申請(qǐng)，交試劑審核小組討論決定。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材的購(gòu)買和管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-016版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共2頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.1.3試劑的驗(yàn)收：供貨商送來(lái)試劑后由科專門人員和項(xiàng)目操作人員共同驗(yàn)收，在廠家的供貨清單上簽字，項(xiàng)目操作人員負(fù)責(zé)試劑質(zhì)量驗(yàn)收（內(nèi)外包裝），科專門人員核對(duì)試劑的數(shù)量和價(jià)格，供貨清單交室試劑管理人員保管，試劑驗(yàn)收后登記。4.1.4試劑貯存：試劑登記后，及時(shí)放入試劑貯存區(qū)的冰箱，保存條件按說(shuō)明書規(guī)定進(jìn)行。4.1.5試劑的質(zhì)檢：按試劑質(zhì)檢SOP進(jìn)行。4.2實(shí)驗(yàn)耗材的購(gòu)買和管理4.2.2購(gòu)買：由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人填寫申請(qǐng)，按需提出所購(gòu)耗材的品名、規(guī)格、數(shù)量，由科室主管采購(gòu)人員交院設(shè)備科購(gòu)買。4.2.3驗(yàn)收：消耗品購(gòu)進(jìn)后由科相關(guān)人員驗(yàn)收。核對(duì)數(shù)量、規(guī)格，查驗(yàn)外包裝是否破損，如發(fā)生破損或其它質(zhì)量問(wèn)題，給予退回。4.2.4貯存：消耗品按要求存入各區(qū)指定位置。4.3項(xiàng)目具體負(fù)責(zé)人發(fā)現(xiàn)試劑或耗材少于一定的數(shù)量時(shí)（不足2周使用時(shí)），應(yīng)向室負(fù)責(zé)人提出，以便及時(shí)購(gòu)買；使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)試劑有質(zhì)量問(wèn)題時(shí)向室負(fù)責(zé)人提出，由室負(fù)責(zé)人核實(shí)后采取措施。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)和清潔廢棄物處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-017版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：對(duì)各種危險(xiǎn)因素采取有效的控制措施，預(yù)防實(shí)驗(yàn)室中存在的污染源對(duì)實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的污染。2.范圍：分子實(shí)驗(yàn)室全體人員。3.職責(zé)：所有工作人員必須在工作中嚴(yán)格遵守本程序各項(xiàng)措施規(guī)定。4.工作流程：臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)知曉在實(shí)驗(yàn)工作中存在的污染途徑和防護(hù)措施。4.1感染途徑：4.1.1空氣傳播：其他病原體及化學(xué)物的氣溶膠。4.1.2直接接種：工作中偶然的針刺、碎玻璃劃傷直接引起傳染。4.1.3皮膚、粘膜接觸：臨床標(biāo)本中的感染源通過(guò)破損皮膚，粘膜接觸造成感染。4.1.4化學(xué)物質(zhì)：溴化乙錠（EB）、焦碳酸二乙酯（DEPC）、丙烯酰胺有致癌性。若處理的擴(kuò)增片段來(lái)自潛在的腫瘤基因，應(yīng)考慮采取保護(hù)措施。4.2預(yù)防措施4.2.1來(lái)自所有病人的血液、體液、痰等標(biāo)本都被認(rèn)為是具有傳染性。標(biāo)本采集、運(yùn)送過(guò)程中，應(yīng)保持容器完好，無(wú)泄漏。完成檢測(cè)后及時(shí)處理。4.2.2處理標(biāo)本的工作人員都應(yīng)戴上雙層手套，穿防護(hù)服，戴帽子、口罩。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)和清潔廢棄物處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-017版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.2.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若接觸血液或其它標(biāo)本、毒物等后必須立即徹底清洗。4.2.4在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，病人標(biāo)本或試劑不慎濺入眼內(nèi)應(yīng)立即用清水沖洗。4.2.5實(shí)驗(yàn)過(guò)程中在使用針具等銳器時(shí)，盡量小心防止受傷。若被銳器刺破時(shí)，應(yīng)立即脫下手套，盡量擠壓傷處，使血流出，然后用碘酒、酒精消毒，必要時(shí)進(jìn)行預(yù)防補(bǔ)救措施。4.2.6在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中病人標(biāo)本（血液、體液）外漏時(shí)，應(yīng)立即用10％次氯酸鈉消毒，再用75％酒精擦凈消毒。4.2.7實(shí)驗(yàn)完畢離開時(shí)，應(yīng)脫下所有該實(shí)驗(yàn)區(qū)個(gè)人防護(hù)裝備。4.2.8標(biāo)本處理區(qū)應(yīng)備有急救包,包內(nèi)存有75%酒精,復(fù)合碘、棉簽、創(chuàng)口貼等。5.實(shí)驗(yàn)室的清潔:5.1PCR實(shí)驗(yàn)室人員要明確造成污染的來(lái)源有前一次PCR產(chǎn)物、檢測(cè)樣本及陽(yáng)性質(zhì)控物，標(biāo)準(zhǔn)品。PCR實(shí)驗(yàn)室人員要明確造成污染的途徑有空氣，吸液嘴，移液器的氣腔、外表，標(biāo)本處理過(guò)程中的開蓋閉蓋，手套，夾取標(biāo)本用的鑷子，標(biāo)本處理的公用設(shè)備如離心機(jī)、樣本架等。5.2離心管在使用前要經(jīng)高壓消毒滅菌。5.3所有滅好菌的物品先放置在試劑準(zhǔn)備區(qū)，在滅菌效期內(nèi)由傳遞窗傳至各區(qū)。5.4工作人員工作結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面均應(yīng)用10%次氯酸鈉清潔液的抹布擦拭，XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)和清潔廢棄物處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-017版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：再用75%乙醇清潔，最后用清水擦拭。5.5移液器的外表每天用75%乙醇清潔一次，加樣器的氣腔每月用75%乙醇浸洗一次。5.6夾標(biāo)本用的鑷子應(yīng)浸泡在75%乙醇中，使用過(guò)的試管架、凈化臺(tái)及操作臺(tái)面用10%次氯酸鈉擦拭1遍后，再用75%酒精擦拭1遍，然后用紫外燈至少照射60min。5.7已滅菌的離心管在取用時(shí)須用鑷子取，不允許用手去拿。5.8各區(qū)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)做好各區(qū)的清潔工作，并將各區(qū)的廢棄物、垃圾帶出實(shí)驗(yàn)區(qū)，打開該區(qū)紫外燈進(jìn)行紫外線消毒60分鐘，作好實(shí)驗(yàn)后處理記錄。5.9每天須對(duì)各區(qū)的地面進(jìn)行清潔，各區(qū)地面的清潔抹布須嚴(yán)格分開使用，清潔順序嚴(yán)格按一區(qū)到三區(qū)順序進(jìn)行。5.10污染的處理：實(shí)驗(yàn)中若在操作臺(tái)面發(fā)生液體外瀉，應(yīng)立即用浸有10%次氯酸鈉溶液的衛(wèi)生紙覆蓋污染處，半小時(shí)后再用軟布浸水擦拭干凈。5.11實(shí)驗(yàn)用過(guò)Tip頭、離心管的處理見(jiàn)廢棄物處理程序。5.1210%次氯酸鈉每月新配一次。5.13對(duì)使用過(guò)的一次性手套，應(yīng)將其反一面后再丟入專用拉圾袋中。5.14對(duì)以上所有的生物垃圾在移交給技工時(shí)，應(yīng)作好交接記錄，確保焚燒。6.實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理:XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)和清潔廢棄物處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-017版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第4頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：6.1實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的廢液缸應(yīng)裝有足量濃度的施爾康消毒液，在實(shí)驗(yàn)完成后將廢液缸中棄置物轉(zhuǎn)入密閉垃圾桶袋中。每天更換廢液缸里面的施爾康消毒液，并保證用量為廢液缸內(nèi)總液量的1/3左右。6.2臨床標(biāo)本，擴(kuò)增后產(chǎn)物及一次性使用物品等實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)完畢密封包裝進(jìn)行焚燒。6.3檢查操作臺(tái)面和設(shè)備內(nèi)是否有遺漏的吸頭，試管等。如有，撿起置于施爾康消毒液廢液缸內(nèi)，并立即用1%次氯酸鈉對(duì)可能污染區(qū)域擦拭2-3遍，再用75%酒精擦拭1遍，最后用清水擦拭。6.4擴(kuò)增后的反應(yīng)管嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)打開。6.5手套、口罩等廢棄物投入廢物桶，交接給專人處理并做好登記。6.6實(shí)驗(yàn)區(qū)域的所有垃圾袋以黃色為標(biāo)志，各區(qū)域垃圾在實(shí)驗(yàn)區(qū)緩沖間內(nèi)封口，實(shí)驗(yàn)完畢后移出各實(shí)驗(yàn)區(qū)域，在公共走廊內(nèi)移交專人處理，并做好記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-018版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證試驗(yàn)資料的原始性、真實(shí)性、可靠性，便于回顧。2.范圍：檢驗(yàn)過(guò)程產(chǎn)生的數(shù)據(jù)資料，諸如病人信息資料、樣本資料、檢測(cè)數(shù)據(jù)、檢驗(yàn)結(jié)果等。3.職責(zé)：檢測(cè)人員對(duì)記錄負(fù)責(zé)，室負(fù)責(zé)人對(duì)管理措施的落實(shí)和監(jiān)督負(fù)責(zé)。4.工作流程：4.1試驗(yàn)記錄分為兩個(gè)部分：4.1.1檢測(cè)前的記錄：病人信息資料、樣本資料的書面記錄。4.1.2檢測(cè)結(jié)果的電子記錄。4.1.3記錄的種類：PCR標(biāo)本接收記錄、臨床拒收標(biāo)本記錄、PCR檢驗(yàn)流程記錄、PCR結(jié)果記錄、PCR質(zhì)控記錄、抱怨記錄、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)記錄、試劑和消耗品的質(zhì)檢記錄、應(yīng)急記錄、人員培訓(xùn)記錄。4.2記錄方法：4.2.1接受標(biāo)本記錄：以書面形式記錄病人信息、樣本信息、是否保存，同時(shí)對(duì)樣本作標(biāo)識(shí)，記錄人簽名；檢驗(yàn)時(shí)，將標(biāo)識(shí)的樣本、記錄本帶入樣本處理間處理。4.2.2PCR擴(kuò)增檢測(cè)記錄：a）記錄文件必須保存在非系統(tǒng)分區(qū)中，如D盤、E盤等。保存路徑要清晰、便捷、易查找。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-018版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：b）文件夾目錄結(jié)構(gòu)要求層次感分明：一整年的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均保存在一個(gè)年度文件夾里，如“2019年”文件夾；每個(gè)年度文件夾又包含12個(gè)月文件夾，如“9月”、“10月”，每天的實(shí)驗(yàn)結(jié)果就保存在當(dāng)月文件夾里。c）SDS文件保存時(shí)以當(dāng)天日期命名，如2019年9月10日的保存為20190910HBV，20190910XB。d）若某天進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)，須保存多個(gè)SDS文件，命名時(shí)在后面以01、02、03等字母標(biāo)識(shí)，如2019年9月10日做的兩次實(shí)驗(yàn)，分別保存為20190910HBV01和20190910HBV02，20190910XB01和20190910XB02。e）為了防止儲(chǔ)存實(shí)驗(yàn)結(jié)果的電腦發(fā)生系統(tǒng)崩潰、硬件故障等問(wèn)題導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果丟失、無(wú)法查詢等情況，每個(gè)月的實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄文件都要用移動(dòng)存儲(chǔ)設(shè)備（如U盤、移動(dòng)硬盤等）拷貝備份；如“2019年實(shí)驗(yàn)結(jié)果備份”。4.2.3電子保存的軟件備份要求：a）保存周期：每一個(gè)月進(jìn)行一次電子報(bào)告的軟件備份；安排在每月的最后一個(gè)工作日完成。備份路徑為D盤PCR備份。b）備份注明：備份由分子實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行。4.3記錄的歸檔：4.3.1PCR標(biāo)本接收記錄、臨床拒收標(biāo)本記錄、PCR檢驗(yàn)流程記錄、PCR結(jié)果記錄裝訂成冊(cè)。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室記錄管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-018版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共3頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：4.3.2記錄保存期為3年，科室統(tǒng)一保管。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室抱怨和應(yīng)急處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-019版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：為避免因儀器設(shè)備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問(wèn)題而影響到臨床檢測(cè)報(bào)告的及時(shí)性和準(zhǔn)確性，特制定本程序。保證對(duì)抱怨的正確處理，提高工作質(zhì)量。2.范圍：來(lái)自于患者，臨床醫(yī)護(hù)人員和/或?qū)嶒?yàn)室工作人員針對(duì)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量和/或?qū)嶒?yàn)室管理等問(wèn)題的投訴和/或抱怨。注：本程序適用于檢驗(yàn)科權(quán)限內(nèi)能處理解決的問(wèn)題?？剖也荒芡咨平鉀Q的，移交醫(yī)院醫(yī)務(wù)處，遵循醫(yī)務(wù)處處理程序和辦法。3.職責(zé)：3.1實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)抱怨的處理，必要時(shí)應(yīng)會(huì)同科主任采取更進(jìn)一步的措施。3.2對(duì)于外部抱怨，任何一個(gè)工作人員不得推卸，須負(fù)責(zé)將抱怨人領(lǐng)到實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處或科主任處，對(duì)電話抱怨須作記錄并及時(shí)報(bào)告負(fù)責(zé)人。4.工作流程：4.1抱怨的接受：執(zhí)行者在接受抱怨時(shí)，應(yīng)記錄抱怨者姓名、地址、聯(lián)系方式、抱怨內(nèi)容（必要時(shí)首先穩(wěn)定抱怨者情緒）。4.2抱怨的處理：4.2.1能當(dāng)時(shí)處理的抱怨應(yīng)給予及時(shí)解決，記錄處理意見(jiàn)及結(jié)果。4.2.2不能當(dāng)即答復(fù)的報(bào)怨應(yīng)約定反饋時(shí)間，同時(shí)為了防止報(bào)怨的擴(kuò)大化，根XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室抱怨和應(yīng)急處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-019版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第2頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：據(jù)情況盡快召集有關(guān)人員處理。4.2.3抱怨的處理以抱怨者的滿意為目的，但必須以遵重科學(xué)，遵重事實(shí)為原則，在不違背科學(xué)原則，醫(yī)療行為規(guī)范的基礎(chǔ)上，爭(zhēng)取抱怨者最大程度的理解。4.3抱怨處理的方式：4.3.1患者對(duì)服務(wù)態(tài)度抱怨的處理方式：a）接到抱怨后，由室負(fù)責(zé)人責(zé)成相關(guān)人員向患者致歉。b）對(duì)患者提出的合理要求及時(shí)進(jìn)行處理。c）調(diào)查事情原委，根據(jù)調(diào)查結(jié)果對(duì)相關(guān)責(zé)任人進(jìn)行處罰。d）記錄抱怨及其處理結(jié)果。4.3.2患者對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確性抱怨的處理方式a）為患者展示原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。b）向患者解釋相關(guān)實(shí)驗(yàn)程序和可能臨床情況，幫助患者解除疑慮。c）如確有實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合有效性要求或出現(xiàn)錯(cuò)誤，則應(yīng)及時(shí)糾正錯(cuò)誤，重新實(shí)驗(yàn)以得到準(zhǔn)確結(jié)果。同時(shí)由室負(fù)責(zé)人向患者致歉以爭(zhēng)取得到其諒解，按有關(guān)條例對(duì)責(zé)任人進(jìn)行相應(yīng)處罰，并記錄。4.3.3醫(yī)生對(duì)檢測(cè)結(jié)果和臨床診斷的符合率抱怨的處理方式a）針對(duì)醫(yī)生抱怨的檢查項(xiàng)目進(jìn)行從實(shí)驗(yàn)前到實(shí)驗(yàn)后的全程調(diào)查，查找是否存在影響結(jié)果的因素，并形成書面報(bào)告。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室抱怨和應(yīng)急處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-019版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第3頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：b）就調(diào)查發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行針對(duì)性解決。c）與醫(yī)生建立定期交流機(jī)制，定期了解臨床使用情況和對(duì)臨床作出解釋。4.3.4醫(yī)生對(duì)結(jié)果發(fā)放時(shí)效性抱怨的解決方式a）嚴(yán)格按承諾時(shí)間發(fā)放臨床報(bào)告。b）在與醫(yī)生交流會(huì)上就報(bào)告發(fā)放過(guò)程及時(shí)間作出解釋，獲取臨床對(duì)結(jié)果報(bào)告時(shí)效性的理解。4.4 抱怨處理程序：a）接到抱怨。b）記錄抱怨。c）提出針對(duì)具體抱怨的處理方法。d）將處理方法交室負(fù)責(zé)人審核。e）征求抱怨方對(duì)處理方法的意見(jiàn)。f）執(zhí)行解決方案。g）記錄最后的處理結(jié)果。5.應(yīng)急處理：5.1為避免因儀器設(shè)備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問(wèn)題而影響到臨床檢測(cè)報(bào)告的及時(shí)性和準(zhǔn)確性，嚴(yán)格遵循下列程序。5.2工作程序：XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室抱怨和應(yīng)急處理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-019版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第4頁(yè)；共4頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：5.2.1實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人接到儀器設(shè)備故障的報(bào)警后，立即現(xiàn)場(chǎng)確認(rèn)異常情況的性質(zhì)和故障程度并及時(shí)排除。5.2.2儀器設(shè)備故障本室不能解決的，應(yīng)及時(shí)通知有關(guān)設(shè)備維修人員或供應(yīng)商，具體程序見(jiàn)儀器設(shè)備管理程序。對(duì)于發(fā)生故障的儀器設(shè)備，及時(shí)維修的同時(shí)，采取以下處理辦法。5.2.3有滿足使用要求的替用設(shè)備的，啟用替用設(shè)備。5.2.4可借用其他部門儀器設(shè)備時(shí)，核實(shí)該設(shè)備的使用狀態(tài)良好后可借用。5.2.5替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時(shí)，必須同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)室管理措施（特別是防污染）的要求。5.2.6試劑盒質(zhì)量發(fā)生問(wèn)題，經(jīng)核實(shí)后，及時(shí)通知供貨商更換另一批次試劑，使用前需先作質(zhì)量檢測(cè)，合格后方可使用。5.2.7儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)量問(wèn)題不能得到解決，預(yù)期將會(huì)影響到檢測(cè)報(bào)告的及時(shí)發(fā)出，可將標(biāo)本送至其它實(shí)驗(yàn)室檢查（該實(shí)驗(yàn)室同樣應(yīng)為獲同類認(rèn)準(zhǔn)的PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室）；如己影響到報(bào)告的及時(shí)發(fā)出，應(yīng)向病人或相關(guān)病區(qū)公告，取得病人和醫(yī)生的諒解。5.2.8影響到檢測(cè)報(bào)告的情況，應(yīng)在應(yīng)急處理登記表作記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室保密制度文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-020版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共1頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：為了確保實(shí)驗(yàn)室工作的有序開展；保護(hù)病人的隱私權(quán)，防止不必要的醫(yī)患糾紛，特制定此制度。2.本程序的改動(dòng)程序：本程序的改動(dòng)，可由任一使用本程序的工作人員提出，經(jīng)論證其合理性后，報(bào)經(jīng)科主任批準(zhǔn)簽字后實(shí)施。3.適用范圍：本實(shí)驗(yàn)室所有人員應(yīng)熟知并遵守本程序。4.職責(zé)：4.1實(shí)驗(yàn)室所有原始資料包括病人的原始化驗(yàn)單、實(shí)驗(yàn)原始記錄及總匯表應(yīng)各自歸檔保存于專柜中。所有病人資料和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)記錄非經(jīng)許可，一般人員不可查詢或借閱，特殊情況時(shí)必須在科主任或本室負(fù)責(zé)人同意的情況下方可查詢。4.2當(dāng)臨床科室要求電話報(bào)告結(jié)果時(shí)，應(yīng)先確認(rèn)對(duì)方身份，核對(duì)其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號(hào)（或檢驗(yàn)報(bào)告單憑證號(hào)碼）情況后，由室負(fù)責(zé)人或其授權(quán)者報(bào)告結(jié)果，并明確告知對(duì)方，實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以檢測(cè)報(bào)告單為準(zhǔn)。4.3實(shí)驗(yàn)室所有標(biāo)本建擋保存，放置在-20℃以下冰箱，并建立標(biāo)本擋案，冰箱上鎖，科研所需保留的核酸模板由使用者自行保管，但不得用于其它用途。XXX醫(yī)院XX科分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序分子實(shí)驗(yàn)室人員實(shí)習(xí)、培訓(xùn)和進(jìn)修管理程序文件編號(hào)：PCR-BZCZCX-021版本號(hào)：第2版第0次修改頁(yè)碼：第1頁(yè)；共1頁(yè)受控狀態(tài)：受控號(hào)：1.目的：保證分子實(shí)驗(yàn)室有足夠的技術(shù)力量和發(fā)展?jié)摿Α?.范圍：分子實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)。3.職責(zé)：分子實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)督促指導(dǎo)，由實(shí)驗(yàn)室全體工作人員實(shí)施。4.工作計(jì)劃：4.1實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有上崗證5人，計(jì)劃培養(yǎng)2人。4.2待培訓(xùn)人員在分子實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人輔導(dǎo)下，先完成分子生物學(xué)基礎(chǔ)理論、檢驗(yàn)技術(shù)的理論學(xué)習(xí)。（自學(xué)或有機(jī)會(huì)參加繼續(xù)教育項(xiàng)目）4.3新培訓(xùn)的人員需本科或研究生畢業(yè)。4.4教材為《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)》，李金明主編。4.5有理論基礎(chǔ)后，在分子實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人輔導(dǎo)下，參加分子實(shí)驗(yàn)室輪轉(zhuǎn)。4.6嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室管理文件的規(guī)定。4.7嚴(yán)格按分子實(shí)驗(yàn)室SOP規(guī)定正規(guī)操作，不得更改。4.8爭(zhēng)取參加上級(jí)部門專業(yè)培訓(xùn)，取得上崗證。4.9經(jīng)過(guò)學(xué)習(xí)的人員有責(zé)任指導(dǎo)實(shí)習(xí)生的理論