臨床基因擴增PCR實驗室SOP標準操作程序文件(32項)

臨床基因擴增實驗室標準操作程序編寫人：審核人：批準人：啟用日期：年月日XXX醫(yī)院前言為使基因擴增檢驗技術有效地應用于臨床，更好地為疾病的預防、診斷和治療服務，保證檢驗質量，嚴格按照《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》要求，制定本實驗室管理文件，本實驗室任何實驗均需遵循本管理文件中規(guī)定執(zhí)行。臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的，以擴增檢測DNA或RNA為方法的檢測技術，快速、可靠、準確、安全、收費合理方式下，以規(guī)范的操作對臨床標本進行分析。本室采用經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局批準的試劑盒。開展的檢測項目：1、乙型肝炎病毒（HBV）核酸定量檢測2、人巨細胞病毒（HCMV）核酸定量檢測文件編號文件名稱頁碼PCR-BZCZCX-001分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序6--10PCR-BZCZCX-002分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序11--16PCR-BZCZCX-003分子實驗室設施和環(huán)境管理程序17PCR-BZCZCX-004臨床標本管理程序18PCR-BZCZCX-005標本采集、驗收、保存標準操作程序保存標準操作程序保存標準操作程序19-21PCR-BZCZCX-006標本唯一性編號標準操作程序22-23PCR-BZCZCX-007分子實驗室儀器設備操作、維護和校準程序24-25PCR-BZCZCX-008分子實驗室儀器設備的管理程序26-28PCR-BZCZCX-009分子實驗室儀器設備的管理程序29-30PCR-BZCZCX-010化學試劑的管理及配制操作程序31-32PCR-BZCZCX-011分子實驗室PCR試劑性能質檢程序33-34PCR-BZCZCX-012樣本核酸提取操作程序35-36PCR-BZCZCX-013分子實驗室一次性離心管和吸嘴的質檢程序37-38PCR-BZCZCX-014分子實驗室HBV-DNA室內質控程序39-41PCR-BZCZCX-015分子實驗室檢測結果報告和審簽管理程序42-43PCR-BZCZCX-016分子實驗室試劑、耗材的購買和管理程序44-45PCR-BZCZCX-017分子實驗室生物防護和清潔廢棄物處理程序46-49文件編號文件名稱頁碼PCR-BZCZCX-018分子實驗室記錄管理程序50-52PCR-BZCZCX-019分子實驗室抱怨和應急處理程序53-56PCR-BZCZCX-020分子實驗室保密制度57PCR-BZCZCX-021分子實驗室人員實習、培訓和進修管理程序58PCR-BZCZCX-022ABI-7500Plus熒光定量PCR儀使用、維護和校準程序59-65PCR-BZCZCX-023儀器設備的使用、維護操作程序（離心機）66-68PCR-BZCZCX-024儀器設備的使用、維護操作程序（移液器）69-71PCR-BZCZCX-025實驗室儀器使用、維護程序（冰箱）維護程序（冰箱）維護程序（冰箱）72-73PCR-BZCZCX-026實驗室儀器使用、維護程序（生物安全柜）74-76PCR-BZCZCX-027恒溫金屬浴的使用、維護標準操作和校準程序77-78PCR-BZCZCX-028實驗室儀器使用、維護程序（旋渦混合器）79PCR-BZCZCX-029移動紫外消毒車使用、維護程序80-81PCR-BZCZCX-030溫度校準標準操作程序82-83PCR-BZCZCX-031乙肝病毒（HBV）核酸提取標準操作程序84-88PCR-BZCZCX-032人巨細胞病毒（HCMV）核酸提取標準操作程序89-95XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標準操作程序文件文件編號：PCR-BZCZCX版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共1頁受控狀態(tài)：受控號：標準操作程序文件標準操作程序文件XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-001版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共5頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：為了分子實驗室的規(guī)范管理，特制訂本程序。2.范圍：分子實驗室。3.職責： 3.1臨床PCR檢驗實驗室工作人員共同遵守、相互督促。3.2因科研活動需要，進入實驗區(qū)域（試劑準備區(qū)、樣本準備區(qū)、PCR擴增區(qū)）的非本室人員需首先熟悉本程序的各項規(guī)定并嚴格遵守執(zhí)行。4.實驗室設置：4.1實驗室設計為：專用走廊、試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)、PCR擴增區(qū)組成。三個區(qū)域各有一個緩沖間。（見設置圖）4.2三個工作區(qū)各配備專用的設備、儀器、輔助設施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服，并有明顯的區(qū)分標識。試劑準備區(qū)—白色、樣品處理區(qū)—蘭色、基因擴增區(qū)—紅色。4.3工作區(qū)的配置、功能、內務管理制度見各工作區(qū)文件。4.4實驗室須嚴格遵守試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴增區(qū)的流向制度，嚴禁誤入和逆進入各工作區(qū)。4.5實驗室流程：PCR室工作人員上班后，由過道走廊→試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴增區(qū)流向，XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-001版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共5頁受控狀態(tài)：受控號：打開排風、光源、溫控裝置。2）標本接收區(qū)接收標本、驗收登記后離心（不開蓋），由內走廊入口將標本送入標本制備區(qū)緩沖間（標本制備區(qū)內門關閉）。3）PCR工作人員按從試劑區(qū)→樣本區(qū)→擴增區(qū)更衣開始流水操作。4.6工作開始時，按開啟實驗區(qū)門。工作結束，內務整理完畢，關閉實驗區(qū)。4.7實驗室內嚴禁飲食、吸煙。5.人員配置：5.1人員要求：5.1.1鑒于PCR檢測干擾因素較多，結果分析復雜，其應用需要與臨床充分溝通。因此，PCR實驗室工作人員應具備大學?？埔陨蠈W歷，掌握相關學科知識及應用能力（實驗技能、分析能力、溝通能力）。5.1.2PCR實驗室工作人員應取得上崗培訓合格證書。5.1.3在崗未取得培訓合格證書者，必須由具有上崗培訓合格證書者對其先作專業(yè)培訓，在條件許可時，應在最短時間內獲得上崗培訓合格證書。其臨床PCR檢驗過程須在具有培訓合格證書的技術人員監(jiān)督指導下完成，其臨床PCR檢驗報告須由具培訓合格證書的技術人員審核簽發(fā)。5.1.4實驗室工作人員上崗前必須學習掌握PCR實驗室管理文件及要求，并由實驗室負責人核查。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-001版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共5頁受控狀態(tài)：受控號：5.2人員配置：實驗室根據(jù)工作開展情況配備足夠數(shù)量的工作人員。目前，實驗室配置人員為3人。實驗室負責人負責實驗室全面管理、技術指導、解決與臨床溝通及技術疑難問題。實驗室負責人不在崗時，應指定代理人負責。5.3人員培訓：5.3.1實驗室負責人（或其指定代理人）每年必須參加上級管理部門組織的有關PCR內容的會議及再繼續(xù)教育培訓。5.3.2實驗室其他人員每年要進行1次專業(yè)學習。5.3.3未取得培訓合格證書者，在有條件情況下，完成上崗培訓，取得上崗培訓合格證書。6.工作人員職責：6.1中、高級職務人員職責：6.1.1結合實驗室特點，參與指導實驗室發(fā)展規(guī)劃的制定工作，編寫技術管理件。6.1.2熟悉、追蹤本學科國內外最新學術發(fā)展動態(tài)，引進先進的技術和方法：6.1.3承擔部分臨床檢測工作、部分帶教工作。組織制定醫(yī)療、科研的實驗方案。6.1.4解決本學科實驗技術的重要問題，設定新實驗項目。6.1.5通過學術報告、專題講座等形式培養(yǎng)本室的相關技術人員。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-001版本號：第2版第0次修改頁碼：第4頁；共5頁受控狀態(tài)：受控號：6.1.6協(xié)助科主任擬訂實驗室建設方案和精密貴重儀器、大型設備的配置方案。6.1.7參與精密儀器、大型設備的可行性論證，組織安裝、調試、維修工作。6.2初級職務人員職責：6.2.1在上級技術人員的指導下，參加具體臨床檢測工作的技術操作，參與制定與本室工作有關的操作規(guī)范和儀器設備的使用規(guī)程。6.2.2負責本室儀器設備的保養(yǎng)和一般故障的維修工作，定期檢查儀器設備的完好狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)問題，主動會同有關部門及時解決。6.2.3積極參加室內外各種技術培訓，認真學習與本專業(yè)技術有關的理論知識，不斷提高技術平。6.2.4幫助進修生和實習生的技術工作。6.2.5完成上級技術人員交辦的與技術工作有關的其它任務。6.3工作人員行為規(guī)范：6.3.1有強烈的時間觀念，按時上下班，不遲到、不早退。6.3.2.每天實驗完成后要清潔實驗室，擦拭工作臺面。6.3.3實驗人員須保持儀表整潔，工作區(qū)域須穿工作服，離開時應換下。6.3.4實驗室內不得飲食。6.3.5工作區(qū)域內收集標本外，不得擅離工作崗位，特殊情況需請假。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設置、人員配置和職責管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-001版本號：第2版第0次修改頁碼：第5頁；共5頁受控狀態(tài)：受控號：6.3.6上班時間內除操作規(guī)范，不得隨意更改操作步驟。6.3.7嚴格遵守實驗流程，盡量減少往返走動。6.3.8操作過程中應嚴謹、認真、專心，不得與他人交談，不得同時做與實驗無關的事情。如確有需要，應暫停工作，并記錄下已進行的步驟。6.3.9每日實驗結束后及時記錄，報告單按時發(fā)送，原始記錄存檔清晰，以備查詢，文件記錄不骯臟、破損。6.3.10語言有禮貌、舉止講文明，對待來訪病人或電話應和藹禮貌，解釋明確耐心，不得推脫或生硬回絕。6.3.11應本著敬業(yè)愛崗的精神，努力做好本職工作，愛護儀器，節(jié)約消耗品，減少浪費。6.3.12晚上下班要關門、關窗、檢查空調和儀器的電源是否關閉，處理好廢棄物。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：規(guī)范分子實驗室各區(qū)的配置、功能、內務管理等。2.適用范圍：PCR實驗室。3.樣本接收區(qū)：3.1配置：計算機、操作臺及其他耗品和辦公用品若干。3.2功能：負責病人標本的接收、驗收、登記、檢驗結果的報告和簽發(fā)、抱怨的接受處理，Tip頭和離心管的分裝，檢驗試劑的外內包裝驗收。分離的標本、項目登記單隨分離的標本傳遞到標本處理區(qū)。3.3內務管理3.3.1本區(qū)內不允許與基因檢測無關的工作人員和病人進入。3.3.2本區(qū)無人在崗時要關好房門，以保證檢驗報告及其他物品的安全。3.3.3各種物品放置有序，清潔物與可疑污染物（如檢驗申請單）要分開放置。3.3.4本區(qū)內工作有相關文件的則按文件規(guī)定執(zhí)行，無相關文件的暫不作具體規(guī)定。4．試劑準備區(qū)：4.1配置：普通冰箱一臺，離心機，空調，加樣器，可移動紫外燈一臺、辦公用品若干。4.2.消耗品：消耗品包括酒精和次氯酸鈉，一次性手套，一次性帽子，各種尺寸的能高壓消毒的試劑容器，制備核酸的試劑，及反應試劑（例如酶，緩沖液，XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：dNTPs），Eppendoff管，帶濾心的吸嘴。4.3功能：儲存溶液的準備，應用液、主混合液的準備，分裝，成品試劑和化學試劑的貯存，75%乙醇等簡單試劑的配制。工作完畢立即清洗工作場地。其他的工作不準進入。4.4.1著裝和標識。該區(qū)工作服白色為標識。4.4.2進入本區(qū)時先開門，隨后關上，進入緩沖間；在緩沖間內換上專用工作服、鞋帽，做好工作人員出入實驗室記錄，打開緩沖間門，進入工作區(qū)，隨后將緩沖間門關上。非工作人員嚴禁入內。4.4.3PCR擴增體系的試劑配制和分裝、化學試劑的配制在本區(qū)內完成即可。根據(jù)當天的標本驗收登記表，取出當天實驗須配制和使用的試劑，其余試劑要立即收好放回冰箱內。配制好的試劑需通過傳遞窗再分送至Ⅱ區(qū)使用。實驗中所使用的離心管、吸頭等需經(jīng)高壓滅菌處理，使用時應在消毒有效期內。4.4.4做好當天冰箱溫度和臨床PCR檢驗流程記錄表，通過傳遞窗再分送至Ⅱ區(qū)記錄。4.4.5本區(qū)內的所有設備物品（除滅好菌的耗品外）均為本區(qū)內專用，且要有明顯的標識，不得移出使用，也不得從事本區(qū)規(guī)定以外的工作。4.4.6本區(qū)在工作開始前和工作中、工作結束后全過程均要嚴格按照各相關文件的規(guī)定操作。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：4.4.7每天須記錄本區(qū)的溫度和濕度，記錄時間為本區(qū)溫控設備開啟后半小時。4.4.8取下口罩、帽子放入垃圾筒。將本區(qū)所有廢棄物裝入垃圾袋，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，離開實驗區(qū)時帶走垃圾袋，隨后關上實驗區(qū)門。進入緩沖間，脫下鞋套放入垃圾袋，然后將垃圾袋封口，脫下Ⅰ區(qū)專用工作服，打開Ⅰ區(qū)門，帶出垃圾，，關上門。5．標本處理區(qū)：5.1配置：冰箱一臺，生物安全柜一臺，冷凍高速離心機一臺，混勻器一臺，加樣器一套，可移動紫外消毒車一臺、金屬浴一臺，空調一臺，其他耗品、辦公用品若干。5.2功能：本區(qū)負責各種臨床樣本、質控樣本的核酸提取純化，儲藏，樣本貯藏，在這一工作區(qū)完成。5.3內務管理：5.3.1工作人員進入本區(qū)前必須在緩沖間內換上本區(qū)專用的工作服、鞋帽等，非本室工作人員嚴禁入內。5.3.2標識、著裝。該區(qū)為藍色工作服。其他要求同上述。5.3.3進入工作區(qū)，打開傳遞窗門，取出當天用的PCR試劑，做好當天冰箱溫度和臨床PCR檢驗流程記錄表，通過傳遞窗再分送至III區(qū)記錄。試劑放4℃冰XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第4頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：箱暫存。5.3.4這一工作區(qū)的試劑和消耗品切不可帶入PCR加樣區(qū)，因為它們可能污染了不準備擴增的核酸。同樣，剩余的主混合液，酶，或者其他試劑也不準返回試劑準備區(qū)。5.3.5氣溶膠可引起污染，故應避免實驗室內不必要的走動。通過實驗室內部的排風調節(jié)，能減少過道區(qū)形成的氣溶膠對標本準備區(qū)的污染。每次加入待檢核酸后含反應混合物反應容器必須關閉，以避免樣品間的交叉污染。對于可能有傳染性的材料，必須遵守關于處理和消毒的已制定的SOP文件要求。5.3.6本區(qū)每天在工作時利用本區(qū)的溫控設備使本區(qū)的溫度控制在15~25℃之間。用過的加樣頭必須丟棄于相應濃度的消毒液容器里。5.3.7每天須記錄本區(qū)的溫度、濕度，記錄時間為溫控設備開啟后半小時。5.3.8標本處理過程均需嚴格遵守各種標本處理的SOP文件。5.3.9取出冰箱中的PCR試劑，處理好的樣品加入試劑后通過傳遞窗送入Ⅲ區(qū)。5.3.10實驗前、實驗后記錄、衛(wèi)生清潔處理、進出實驗室記錄、溫控記錄等要求。6．基因擴增區(qū)：6.1配置：7500Plus實時熒光定量PCR檢測儀一臺，可移動紫外消毒車一臺，XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第5頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：電腦一臺，空調一臺，其他耗品、辦公用品若干。6.2功能：將樣品檢材（來自樣品準備區(qū)）和主混合液（來自試劑準備區(qū)）加入成為反應混合物，并在這唯一區(qū)域進行擴增反應。6.3內務管理：6.3.1著裝、標識。該區(qū)工作服為粉紅色。工作人員進入本區(qū)前須在緩沖間內換上專用的工作服、鞋帽等。非本室工作人員嚴禁進入本區(qū)。6.3.2本區(qū)每天在工作時利用本區(qū)的溫控設備，使本區(qū)的溫度控制在15~25℃范圍內。6.3.3進入工作區(qū)，打開傳遞窗門，取出加好試劑待擴增的樣本。做好當天PCR檢驗流程記錄表。擴增好必須棄于去指定的容器里。工作結束及下班前，必須清潔和凈化（去污染）實驗臺表面。6.3.4在緩沖間更換衣服，拖鞋，并帶手套和帽子。在此區(qū)域里手套應該經(jīng)常更換。離開房間時應將工作服留下。6.3.5按熒光擴增儀的標準操作程序文件對各種樣本進行檢測。本區(qū)在工作開始前、工作中和工作結束后的全過程均要按各相關文件的規(guī)定操作。6.3.6每天須記錄本區(qū)內的溫度、濕度，記錄時間為溫控設備開啟后半小時。6.3.7本區(qū)內的所有設備、物品為本區(qū)內專用，且要有明顯的標識，不得移出使用，也不得從事本區(qū)工作范圍以外的事項。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室分區(qū)的配置、功能、管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-002版本號：第2版第0次修改頁碼：第6頁；共6頁受控狀態(tài)：受控號：6.3.8作好擴增儀的維護、實驗數(shù)據(jù)的記錄、質控記錄。實驗前準備、實驗后消毒記錄等。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室設施和環(huán)境管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-003版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共1頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：為了防止實驗室的污染，特制訂本程序。2.范圍：分子實驗室。3.職責：分子實驗室工作人員。4.實驗室環(huán)境：4.1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ區(qū)的空氣流向由實驗室區(qū)域外向內。4.2Ⅱ、Ⅲ這兩區(qū)應空氣對流通暢，但兩區(qū)之間不應存在空氣對流。4.3實驗室工作臺應為寬60-80cm，長不小于200cm的堅固、平整、光滑、耐酸、耐紫外照射的臺面，臺面距地面高度80cm。4.4實驗室各區(qū)上方應安裝40W日光燈一盞，近工作臺上方安裝兩只40W紫外燈。緩沖間上方安裝一只40W紫外燈。4.5Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ區(qū)應有空氣恒溫設備（如冷暖空調），室溫宜為18-25℃,空氣濕度宜≤70%.4.6儀器設備、標本架、槍頭盒、離心管盒各區(qū)均專用，且有各區(qū)專用標志,各物品須擺放整齊,滅菌的物品須與未滅菌物品嚴格區(qū)分放置。4.7冰箱內試劑分類擺放。4.8消毒和污物處理見各自的SOP。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序臨床標本管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-004版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共1頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：規(guī)范標本采集、運送、貯存、廢棄的管理，確保檢驗結果準確性。2.范圍：臨床各類標本，涉及標本的采集、處理、保存。3.責任人：分子實驗室工作人員和臨床護士。4.工作程序：4.1實驗室所有臨床標本必須有唯一性編號，標本的唯一性編號須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改。4.2所有標本均可能具有傳染性，須嚴格遵守醫(yī)院有關院內感染及醫(yī)用垃圾管理和處理規(guī)定，工作人員注意保持并隨時檢查容器的完整和無標本外泄發(fā)生。4.3標本的采集、運送、保存見相應的操作程序文件。4.4接收標本時應該核對標本與檢驗申請單的一致性。工作人員有權拒收與檢驗申請單不一致的標本、標識不清的標本。檢驗申請有不清晰情況時，應即時與臨床科室或相關人員聯(lián)系核實。4.5標本接受人須檢查標本狀態(tài)：標本不合要求（使用不適當?shù)娜萜?、容器有破損、標本外泄污染、標本溶血、標本量不足等），工作人員有權拒受標本，應記錄其狀態(tài)并通知臨床重新送檢。4.6檢測前標本處理時，工作人員須仔細核對標本與標本資料記錄的一致性，準確無誤時，方可進行處理。4.7標本的廢棄處理見“廢棄物的處理程序”XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標本采集、驗收、保存標準操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-005版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：1、目的：保證所接收的標本符合實驗要求,保證標本的保存質量。2、適用范圍：門診患者和病區(qū)患者送檢標本。3、責任人：XX科人員、臨床護士和運送部人員。4、標本的采集（標本由醫(yī)護人員采集）血液標本：病區(qū)標本由護士采集，門診標本由門診抽血處專人采集，全血樣本根據(jù)需要選擇真空無菌無抗凝專用試管抽取靜脈血2ml或于含EDTA-K2真空采集管中抽取靜脈血2ml。痰標本：用一次性無菌痰杯（帶蓋）收集清晨第一口痰標本送檢。對于無痰或少痰的患者，可用45℃加溫的100g/LNaCl水溶液霧化吸入或改變體位以使痰液易于咳出；對于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標本。生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用一次性滅菌取樣拭子采集樣本，及時送檢。采集生殖道拭子標本，要求病人在采樣2小時內排尿，采樣時，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2~3cm，轉動一周以獲得上皮細胞。將取樣后的棉拭子管加1ml無菌生理鹽水。宮頸脫落細胞：宮頸脫落細胞由醫(yī)生用專用取樣宮頸刷（滅菌，一次性）采集樣本，及時送檢。采集要求病人在采樣有24小時內不能有性交，采樣時，用無菌棉球輕拭宮頸表面過多的分泌物及血跡，宮頸刷到達宮頸外口上方10mm左XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標本采集、驗收、保存標準操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-005版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：右，部分毛刷覆蓋宮頸外口表面，用適當?shù)耐饬Τ粋€方向轉3圈。取出后將毛刷置于細胞保存液中，封蓋。及時送檢。腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時送檢。乳汁標本：由病人直接擠入1.5ml無菌EP管中，封蓋送檢。尿液標本：由病人自留尿液于無菌封閉的杯中送檢。注：定期對臨床醫(yī)護人員進行有關標本采集、保存、運輸?shù)戎R的培訓。5、標本的運送：標本由送檢人員統(tǒng)一收取，運送容器為一次性無抗凝劑真空試管，4小時內送到遺傳科標本接收區(qū)。6、標本驗收程序：6.1對符合檢測要求的標本及時地用計算機條碼系統(tǒng)進行簽收，然后進行唯一性編號（詳見標本唯一性編號標準操作程序）。6.2認真查對姓名，條碼號，ID號，病區(qū)床號，項目及標本性狀等。對不符合要求者記入拒收標本記錄表中，并及時通知采樣科室，正確及時地補采樣，以免延誤病人的檢測報告。7、標本的保存：HBV-DNA：血樣標本4~8℃短期保存（2天），或分離出血清，-20℃下保存（兩周以上）。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標本采集、驗收、保存標準操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-005版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：HCV-RNA：血樣標本應盡快分離血清（或血漿），-20℃保存，保存期不得超過2周。長期保存需存放在-70℃以下。痰、乳汁、尿、全血、胸腹水、腦脊液標本置4℃下短期保存。血清、血漿、胸腹水、腦脊液和處理后的痰、尿-20℃下長期保存。注：所有標本在報告發(fā)出后保存1周。由專人負責，確保標本保存的溫度及狀態(tài)正常，1周后丟棄并做記錄。特殊標本處理：對暫不檢測的項目或規(guī)定時間外收到的零散標本，要隨時登記和交班，以免漏檢，遺失和延誤檢驗。對特殊標本或特殊病人的標本，實行“首接”負責制。所謂特殊標本是指難于采集的標本，以及特殊病人的標本。“首接”負責制是指無論那位工作人員，一旦收到標本，均須負其責任，及時和正確保管，轉送標本到有關實驗室或有關人員，同時作交班記錄和雙簽名，不得以任何借口推托。對于做長期病情動態(tài)考察的病人標本一律置-20℃下長期保存，使用時再按需取出檢測。注：定期對本科室工作人員進行相關培訓。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標本唯一性編號標準操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-006版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：規(guī)范待檢標本的唯一識別標記的編碼規(guī)則，保證在任何時候對標本的識別不發(fā)生混淆。2.適用范圍：基因擴增實驗室所開展的檢測項目。3.操作人：分子實驗室人員和臨床護士。4.操作方法：XX科已使用條形碼系統(tǒng)，其條形碼已具備唯一性標識，但由于病區(qū)標本多，項目雜，不能做到PCR檢測項目標本的條形碼單獨特征性區(qū)分，且條形碼不具有連續(xù)性，這給上機標本編輯檢測號帶來不便和影響工作效率。因此，必須重新為帶有條形碼的標本編號。編號原則詳見下述。4.1按檢測類型+檢測日期+檢測順序進行。4.2編號步驟：Ⅰ.對當天送來的標本，根據(jù)編號的基本原則編號，每個樣本的每個檢測項目對應一個唯一的編號（如2018年1月1日檢測的第3個乙肝標本為HBV-DNA2018010103或20180101HBVDNA03）Ⅱ.用筆在每張檢驗申請單和對應的樣品管上作好相同的標記。Ⅲ.做好標本的接收記錄，每個樣本的記錄都應包括以下信息:接收時間、醫(yī)院、科室、送檢醫(yī)生、患者姓名、性別、年齡、標本類別、標本狀態(tài)、送標本者、接收人、標本唯一統(tǒng)編號等。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序標本唯一性編號標準操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-006版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：Ⅳ.處理好樣品、點樣后，將反應管放入擴增儀上開始擴增。Ⅴ.擴增得到結果后，先在統(tǒng)計簿上填入結果，作好記錄，再依次把實驗結果填入相應申請單。Ⅵ.發(fā)放檢驗報告單。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備操作、維護和校準程序文件編號：PCR-BZCZCX-007版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證儀器設備得到正確無誤的操作使用、穩(wěn)定狀態(tài)，保障儀器設備的使用壽命和結果檢測的準確性。2.范圍：PCR涉及的主要設備，包括：7500Plus熒光擴增儀，離心機，可調式移液器，恒溫金屬浴，生物安全柜等。3.職責： 3.1操作者必須嚴格遵循操作程序的規(guī)定。3.2實驗室負責人負責程序的落實和督導。4.儀器設備的操作使用：4.1儀器設備的使用授權：僅本實驗室工作人員有權使用實驗室的儀器設備，儀器設備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設備的操作使用程序并經(jīng)科室主任考核認可。4.2儀器的使用：儀器設備的使用嚴格遵守分區(qū)使用管理，儀器設備的使用必須嚴格遵循儀器設備的標準操作規(guī)程。5.儀器設備的維護保養(yǎng)：5.1維護保養(yǎng)的實施：按PCR實驗室儀器設備的維護保養(yǎng)的SOP文件進行。5.2維護保養(yǎng)應有及時的實施記錄，實驗室負責人對記錄應及時檢查，核實。6.儀器設備的校準程序：6.1校準方法：XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備操作、維護和校準程序文件編號：PCR-BZCZCX-007版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：6.1.1可調式移液器校準應送到該地區(qū)計量單位進行校準。6.1.2恒溫金屬浴使用經(jīng)檢定的溫度計進行日常溫度監(jiān)控，廠家每年校準一次。6.2校準安排在不進行樣本檢測的日期完成。6.3校準后設備要貼上本次校準的日期及下次校準的預定日期。6.4校準記錄保存在各自的設備檔案中.。6.5校準計劃：6.5.1啟用前校準：設備在投入使用前實施校準。6.5.2周期性校準：設備在投入使用后定期進行校準，具體參見各儀器校正SOP。6.5.3維修后校準：設備經(jīng)維修后須經(jīng)校準后才可重新投入使用。6.5.4校準計劃外的校準：在日常工作中懷疑某些已校準設備出現(xiàn)偏差時，應對其作計劃外校準。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備的管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-008版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證PCR實驗室儀器設備得到妥善的管理。2.范圍：PCR實驗室的所有儀器設備。3.職責：3.1儀器設備的管理、維護、保養(yǎng)等的具體事項由設備操作人員負責執(zhí)行。3.2由PCR實驗室負責人組織執(zhí)行和監(jiān)督管理。4.工作內容：4.1建檔管理。儀器設備的檔案管理應包括以下內容：4.1.1儀器設備的一般情況：名稱，制造商，型號，序號，接受日期，接收狀態(tài)（全新，改裝，原件調撥等），啟用日期，目前放置地點，接受人員簽字等。4.1.2儀器設備的相關文件：儀器設備的說明書，操作手冊，保修卡等，有關文件（或復印件）的文件序號，名稱，保存方式，管理負責人等。4.1.3儀器設備的損壞，故障，修理須作如下記錄：日期，設備名稱，設備標記號，損壞或故障的表現(xiàn)，損壞或故障的原因，修理人員及單位，修理的結果，記錄人員簽名，質量負責人簽名等。4.1.4有問題的儀器設備加貼明顯的紅色停用標識，標識上應有停用XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備的管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-008版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：日期及原因；可搬動的儀器移至設備處報修，不可移動的設備原地使用布罩封存待修，直至修復校驗后重新標識。4.1.5儀器設備的報廢處理：因使用壽命，損壞，故障導致儀器設備不能滿足檢測需要時，該設備即行報廢。由管理人填寫報廢申請，科質量負責人核實，設備處批準后由質量負責人在設備檔案中簽名注銷。4.2儀器設備實行嚴格的分區(qū)專用。4.3使用的儀器設備應進行校準和鑒定，具體見文件SOP；4.4為保持儀器設備工作狀態(tài)的穩(wěn)定，應對其進行定期的，必要的維護和保養(yǎng)，見文件SOP；4.5為使7500Plus熒光定量PCR檢測儀處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)，在該電腦上不得使用非本室的外來U盤，不能在電腦里加載其它程序和軟件；在使用本室U盤進行資料備份時，需在報告系統(tǒng)電腦上預先殺毒方可使用。5、儀器故障時的標記、放置程序：5.1步驟：a）用紅牌故障標志標示故障儀器。b）小型儀器送儀器部門維修。c）大型貴重儀器關閉電源開關，取下電源插頭。用相應防塵罩遮蔽儀器。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備的管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-008版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：d）維修完成后取下紅色故障標示，換上黃色未校準標示牌。e）調試實驗通過，去掉未校準標示牌,換上綠色運行標牌。f）儀器重新正常使用。5.2修復后設備必須經(jīng)校準、檢定或檢測滿足要求后方能正常投入使用。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備的管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-009版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證PCR檢測可靠性和準確性。2.范圍：PCR檢測前質控、樣本分離純化質控、統(tǒng)計學質控。3.職責：由分子實驗室工作人員具體操作，負責人負責本落實。4.試劑質檢管理：4.1對PCR檢測的試劑首先要驗收其三證是否齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊證、經(jīng)營許可證）。4.2外包裝檢查：包裝應完整、無污、無損，各標識清晰（廠家名稱、品名、批準文號、生產(chǎn)日期、有效期、貯存條件等）。4.3內包裝檢查：內包裝是否有破損、泄漏，內容物是否齊全，是否有相應的使用說明書，是否有肉眼可見的變質等。4.4上述檢查在試劑準備區(qū)完成，并同時進行記錄，記錄放在試劑準備區(qū)內。4.5試劑盒的性能檢查(見試劑性能檢查SOP)5.室內質控：5.1.質控品的來源：由試劑公司提供。5.1.質控品處理：質控品與樣本同時處理，排列順序為：臨床樣本、陰性質控品陽性質控品，具體見室內質量標準操作程序。6.室間質控：必須參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的全國臨床基因擴增檢驗項目的室間質XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室儀器設備的管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-009版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：量評價。6.1室間質控標本的接收和驗收：收到質控血清后由相關人員登記、簽字，根據(jù)質控標本的有關況明對血清的數(shù)量、批號、包裝進行驗收并將質控標本按要求置-20℃以下保存與標本處理區(qū)。6.2質控標本的檢測按常規(guī)臨床標本對待，若需要，檢測前先根據(jù)說明對質控物進行復溶。6.3室間質控樣本必須按實驗室常規(guī)工作一樣進行，由負責常規(guī)工作的人員測試，工作人員必須使用實驗室的常規(guī)檢測方法和試劑，不得特殊對待。檢測結果須在截止日期前上報。6.4室間質評的檢測結果和反饋結果均記錄于室間質評記錄表，根據(jù)反饋結果分析室間質評的狀態(tài)，如有失控應查找原因，并采取相應的措施。7.實驗結果的判斷：7.1實驗結果合格，即發(fā)報告。7.2實驗結果不合格，報告實驗室負責人，會同有關人員，查找原因，妥善解決。7.3每次檢測質控結果須有記錄。7.4失控原因及糾正措施須有記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序化學試劑的管理及配制操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-010版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證實驗室化學試劑安全使用及正確配制。2.適用范圍：基因擴增檢測實驗室常用化學試劑(NaOH、乙醇、含氯消毒片)。3.管理程序:3.1化學試劑的購買或領用：每次實驗前清點試劑，發(fā)現(xiàn)試劑存量不足時，及時領用或提交進購申請。發(fā)現(xiàn)有試劑過期或明顯變質時要立即報廢，并將報廢試劑妥善處理。3.2化學試劑貯存：臨床基因擴增實驗室常用化學試劑均置于避光、陰涼、干燥處保存。實驗中常用到的一些化學試劑則根據(jù)要求保存于不同環(huán)境(如預冷乙醇保存于4℃)。PCR試劑貯存于-20℃或以下。3.3化學試劑使用：臨床基因擴增實驗室常用化學試劑均無毒性或僅有低腐蝕性，故使用時主要應注意分類、分區(qū)保存、關注失效日期和使用后的及時清潔等。3.4化學試劑由專人負責管理，未經(jīng)主任許可不能隨意帶出實驗室。4.化學試劑配制：4%的NaOH配制1.用天平稱取4克分析純的NaOH固體，置于一只三角燒瓶中。2.200ml量桶取100ml雙蒸水，緩緩注入盛放NaOH固體的三角燒瓶中。3.搖三角燒瓶使NaOH固體充分溶解。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序化學試劑的管理及配制操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-010版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：4.緩緩傾倒入250ml廣口瓶中密封保存?zhèn)溆谩?5%酒精的配制常規(guī)消毒的75%酒精由醫(yī)院藥劑科提供。含氯消毒液的配制1升水加2片含氯消毒片濃度為500mg/L。一般桌面，器具和地面的消毒只要使有效氯達到500mg/L,即可達到消毒作用。如需加大消毒力度，則有效氯濃度加大。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室PCR試劑性能質檢程序文件編號：PCR-BZCZCX-011版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證每批用于臨床實驗的試劑的質量良好。2.適用范圍：各種用于臨床實驗的核酸擴增熒光檢測試劑。3.操作人：實驗室負責人及工作人員。4.質檢步驟：4.1收到試劑后，目測試劑是否處在凍存狀態(tài)。4.2核對試劑品種和數(shù)量，檢查試劑批號。4.3及時將試劑轉入－20℃以下冰箱保存。取出陽性、陰性對照，提取液、稀釋液，從傳遞窗傳至Ⅱ區(qū)保存。將上述檢測核對情況在記錄本上登記。4.4最遲在前批次試劑存量尚可維持常規(guī)實驗一周時，按如下要求對新批號試劑進行效驗實驗。4.5效驗實驗要求設置：空白對照、陰性對照、陽性對照各一，陽性標準品梯度（104、105、106、107）。4.6出現(xiàn)如下情況中任何一種的，判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測：a）空白對照和陰性對照出現(xiàn)擴增。如擴增曲線CT值大于35，需重復實驗確證試劑污染。b）陽性對照和陽性標準品均未檢出，或陽性對照未檢出而陽性標準品檢出率大幅下降，表示試劑失效或檢測靈敏度大幅下降。4.7陽性對照未檢出，陽性標準品檢測正常，提示樣品提取液可能存在問題。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室PCR試劑性能質檢程序文件編號：PCR-BZCZCX-011版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：重復新舊提取液陽性對照實驗，確定提取液失效問題。更換提取液后該批試劑方可使用。4.8空白對照無擴增，陰性對照有擴增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。單獨用提取液點樣上機，出現(xiàn)擴增，需更換提取液后方可使用該批試劑。4.9陽性對照檢出，陽性標準品未檢出或擴增曲線明顯系統(tǒng)性CT值4.9偏大3個循環(huán)以上。提示陽性標準品存在問題。更換陽性標準品后該批試劑方可投入使用。4.10空白對照、陰性對照無擴增，陽性對照正常檢出，陽性標準品導出的標準曲線之斜率（－2.6～－3.4）、截距（36～44）、相關性（﹤－0.98）均在使用范圍內，表明該批試劑良好，可以投入臨床使用。4.11將實驗結果歸入記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序樣本核酸提取操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-012版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：規(guī)范臨床基因擴增檢驗實驗室樣本預處理的操作過程。2.范圍：經(jīng)《臨床基因擴增檢驗實驗室樣本接收程序》確認合格的樣本。3.工作流程：血清、胸腹水、腦脊液標本的DNA獲?。?）按待測標本數(shù)和定量標準品數(shù)，取0.5ml離心管做好標記；2）取待測樣本血清100ul，胸腹水、腦脊液離心后取沉淀，分別加到1.5ml離心管中；3）分別加入裂解液100ul，裂解液使用前應振搖混懸；4）然后分別加入待測標本或標準品50ul，振蕩混懸，室溫靜置10分鐘；12000rpm離心5min，去上清；5）加入150ul洗滌液，振蕩混懸，12000rpm離心5min，去上清；6）加入150ul重復洗滌液振蕩混，12000rpm離心5min，去上清備用。痰標本處理：標本加入等量的半胱氨酸液化劑或NaOH液化，室溫振搖25-30分鐘，取0.5ml加入1.5ml離心管中，12000rpm離心10min，吸去上清，沉淀用500ul生理鹽水充分混懸，12000rpm離心10min，吸去上清，沉淀中加入裂解液100uL，振蕩混懸，室溫靜置10分鐘；（標準品無需NaOH液化處理，直接加入裂解液100ul振蕩混勻，室溫靜置10分鐘）。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序樣本核酸提取操作程序文件編號：PCR-BZCZCX-012版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：2）10000rpm離心5min，去上清；加入150ul洗滌液，振蕩混懸,10000rpm離心5min，去上清；加入150uL重復洗滌，振蕩混懸，10000rpm離心5min，去上清備用。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室一次性離心管和吸嘴的質檢程序文件編號：PCR-BZCZCX-013版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證每批用于臨床實驗的離心管和吸嘴的質量良好。2.適用范圍：分子實驗室。3.操作人：實驗室負責人及實驗人員。4.離心管質檢：目測是否管子有破損、畸形、管蓋不嚴等情況。4.1離心管的PCR抑制物質檢:從新購的樣品離心管中，抽取3支，采用已知的中、低2個濃度（105和103IU/ml）的HBVDNA質控血清，使用抽取的離心管按程序進行檢測，每一濃度雙管重復，同時使用已知無PCR抑制物的進口或無DNase和Rnase的離心管作為對照，然后觀察測定結果。如果檢測待檢離心管結果較對照或預期結果明顯偏低，如低1--2個數(shù)量級，則證明其有抑制物的存在。4.2離心管的密封性質檢方法：抽取3支新購離心管，每管準確加入一定量如500ul（對1.5ml離心管）或50ul（對0.2ml離心管）水，在離心機上12000轉離心10分鐘，看其是否有破損和漏液情況發(fā)生，然后按核酸提取程序煮沸或金屬浴加熱，觀察其是否有爆蓋或漏液現(xiàn)象，如果有則應進行更換處理。5.帶濾芯吸頭的質檢：5.1對帶濾芯吸頭密封性的質檢：首先制備一個含1%~2%甘油及色素（如甲基橙、紅墨水、藍墨水等）的水溶液，如果吸頭的最大體積為100ul，則將加樣器吸取體積調至110~120ul，再套上吸頭后吸取上述有色液體。如果吸頭質量好，則有色液體不應出現(xiàn)在濾芯以上，否則說明濾芯不嚴。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室一次性離心管和吸嘴的質檢程序文件編號：PCR-BZCZCX-013版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：5.2帶濾芯吸頭質量的質檢：加樣器吸取量設至擴增加樣所需的體積，使用待評價帶濾芯吸頭對一份107陽性模板,來回吸取10次（模擬10份陽性樣本的吸?。?，將最后1次的吸取液加至一含擴增反應液的管中，之后，換一個新吸頭，連續(xù)吸取10份陰性模板,將最后1次的吸取液加至一含擴增反應液的管中,按所用試劑方法進行擴增檢測。強陽性樣本應為強陽性，陽性弱或出現(xiàn)陰性說明吸頭可能含有擴增抑制物。陰性樣本應為陰性，出現(xiàn)陽性則表明吸頭不能有效地防止氣溶膠對加樣器的污染。5.3記錄質檢日期,離心管和吸嘴批號。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室HBV-DNA室內質控程序文件編號：PCR-BZCZCX-014版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：隨時了解并控制實驗室檢測的精密度變化。2.適用范圍：核酸擴增熒光定量檢測實驗室。3.操作人：實驗室工作人員。4.操作步驟：4.1低值定值質量控制品4.1.1醫(yī)院自配HBV陽性血清。4.1.2每管200μl。7管/盒。置于Ⅱ區(qū)-20℃冰箱,有效期半年。4.1.3本質控適用于利用基因擴增技術檢測HBV-DNA實驗室，進行HBV-DNA檢測的質量控制，試劑方法評估等。4.1.4質控品定值定值標準來源于國家技術監(jiān)督局批準的GBW(E)090031所提供的乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）血清標準物質。項目名稱平均數(shù)（X）IU/ml靶值（LOG）標準差（S）變異系數(shù)（CV）X±2S（IU/ml）低值3.63E±0.55.560.264.68％1.10E+05~1.20E+0.64.2質控流程：4.2.1工作人員進入II區(qū),取出中值質控血清,恢復室溫,低速離心,放置項目標本最后位置,同樣本一起操作。操作程序見標本DNA流程SOP。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室HBV-DNA室內質控程序文件編號：PCR-BZCZCX-014版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：4.2.2記錄結果,每天將結果登記在質控圖中,得出質控曲線。4.3.3分析質控圖形4.3.3.1如果在X±3s線以外，則為失控，應立即報告有關負責人，迅速查找原因。必要時復測標本，然后方可發(fā)出報告，并將失控情況、查找過程及處理結果等詳細記錄。4.3.3.2如果在X±2s線以外，或出現(xiàn)連續(xù)5點以上在一側等規(guī)律變化，均應即使向有關負責人反映，并積極查找原因。但當天的檢驗結果一般可以發(fā)出。4.3.3.3通過觀察圖形的規(guī)律性變化進行誤差分析，消除誤差來源。曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，準確度發(fā)生了一次性的向上或向下改變。這種變化往往是由于一個新的情況引起的。如更換不同批號試劑，啟用新批號的質控血清、操作人員的變換等。在找原因時，應重點注意“漂移”前后發(fā)生了那些變動的因素。趨勢性變化：向下或向上的趨勢性變化表明檢測的準確度發(fā)生了漸漸地變化。這種變化往往是由于一個逐漸改變的因素造成的。如質控血清的降解，試劑效價的降低等。連續(xù)多點分布在靶值一側：目前，一般認為質控血清的檢測結果連續(xù)5天以上出現(xiàn)在靶值同一側，則應迅速查找原因，爭取盡快使之回復圍繞在靶值隨機分布的狀態(tài)。因為按照統(tǒng)計學原理，由純隨機誤差造成的這種情況的可能性很小。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室HBV-DNA室內質控程序文件編號：PCR-BZCZCX-014版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：連續(xù)6天以上出現(xiàn)在靶值同一側可能性小于1.5％。因此凡出現(xiàn)連續(xù)5天以上出現(xiàn)在靶值同一側者均有可能存在非隨機誤差因素。如結果與靶值偏離并不太大，不會給臨床使用帶來太大影響時，一般化驗報告可以照常填發(fā)。4.3.3.4其他規(guī)律變化（周期性等）：通過圖形的資料對比進行誤差分析，消除誤差來源。每個月的月底將該月的全部質控血清檢測結果的X和s與該批測定的X和s進行比較。如果X發(fā)生了變化，說明準確度發(fā)生了變化提示有非隨機誤差存在。如果當月s不同側表明檢測的精密度發(fā)生了變化。將使用同一批號質控血清的CT值的X和s按月份列出。如果X逐在月上升，應考慮保存不當造成的試劑效價降低或質控血清本身出現(xiàn)降解。如果各月份X基本一致而s逐月加大，則主要提示常規(guī)工作的精密度下降，應重點從操作、管理上找原因。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室檢測結果報告和審簽管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-015版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：確保結果的準確發(fā)放。2.范圍：PCR檢測試驗報告的審核、發(fā)放及管理。3.職責：經(jīng)相關培訓后獲得上崗資格的工作人員方有權審核簽發(fā)檢驗報告。4.工作流程：4.1報告的要求：檢測報告應準確、清晰、客觀。4.2報告的形式:見各檢測項目SOP文件規(guī)定。4.3實時熒光PCR測定時，其檢測數(shù)據(jù)要經(jīng)過分析，避免因非特異性熒光而造成假陽性,根據(jù)質控品判斷PCR擴增的有效性，只有當質控品的擴增結果符合有關項目SOP條件時，才可發(fā)出報告,否則應重新測定。4.4檢測項目其結果報告HBV-DNA以每毫升活力單位（IU／ml）報告，如結果高于測定方法線性范圍上限，則對樣本稀釋后再測，結果乘上稀釋倍數(shù)；如結果低于方法的測定范圍下限，則報告小于測定范圍下限，不能報告為“0”、“陰性”或其它各種形式的結果。4.5服務臺工作人員憑“取檢驗報告單憑證領取單”（或發(fā)票）發(fā)放檢驗報告。4.6當臨床科室醫(yī)生要求電話報告結果時，應先確認對方身份，核對其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號等情況，方可報告，并明確告知對方，實驗的最終結果以檢測報告單為準。4.7當患者要求電話報告結果時，應讓患者提供病人檢驗報告單憑證號碼后XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室檢測結果報告和審簽管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-015版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：方可告知對方其檢測結果，并需明確告知對方，實驗的最終結果以檢測報告單為準；不得在無有效證據(jù)的情況下以任何方式提供諸如某人做過某項檢查和/或檢測結果的信息（包括提示性、暗示性語言）。當需郵寄報告時，應由患者填寫地址及郵政編碼等，并作記錄。本實驗室暫不提供其它的報告方式。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室試劑、耗材的購買和管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-016版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：規(guī)定試劑購買原則、驗收的程序和試劑的正確貯存。2.范圍：適用于實驗室所購的診斷試劑盒、實驗耗材。3.職責：3.1本程序由實驗室工作人員一個月統(tǒng)計一次試劑采購訂單，提交給負責人，負責人審核好后，開始訂貨。3.2本程序的改動，可由任一使用本程序的工作人員提出，經(jīng)論證其合理性后，報經(jīng)科主任批準簽字后實施。4.工作程序：4.1試劑的購買和管理4.1.1試劑購買原則：試劑的購買須本著“質優(yōu)價廉”進行，所購基因診斷試劑必須三證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊證、經(jīng)營許可證），并能與7500Plus熒光定量PCR檢測儀相配套。4.1.2試劑購買程序：1）試劑廠家的確定：購買時首先考慮中標試劑。中標廠家無試劑情況下考慮操作方便、質量好的廠家，提交西藥庫，由西藥庫決定購買。2）試劑廠商的變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則上一年內不變更試劑廠商，如在使用過程中發(fā)現(xiàn)質量問題，由室負責人向科主任提出申請，交試劑審核小組討論決定。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室試劑、耗材的購買和管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-016版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共2頁受控狀態(tài)：受控號：4.1.3試劑的驗收：供貨商送來試劑后由科專門人員和項目操作人員共同驗收，在廠家的供貨清單上簽字，項目操作人員負責試劑質量驗收（內外包裝），科專門人員核對試劑的數(shù)量和價格，供貨清單交室試劑管理人員保管，試劑驗收后登記。4.1.4試劑貯存：試劑登記后，及時放入試劑貯存區(qū)的冰箱，保存條件按說明書規(guī)定進行。4.1.5試劑的質檢：按試劑質檢SOP進行。4.2實驗耗材的購買和管理4.2.2購買：由實驗室負責人填寫申請，按需提出所購耗材的品名、規(guī)格、數(shù)量，由科室主管采購人員交院設備科購買。4.2.3驗收：消耗品購進后由科相關人員驗收。核對數(shù)量、規(guī)格，查驗外包裝是否破損，如發(fā)生破損或其它質量問題，給予退回。4.2.4貯存：消耗品按要求存入各區(qū)指定位置。4.3項目具體負責人發(fā)現(xiàn)試劑或耗材少于一定的數(shù)量時（不足2周使用時），應向室負責人提出，以便及時購買；使用過程中發(fā)現(xiàn)試劑有質量問題時向室負責人提出，由室負責人核實后采取措施。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室生物防護和清潔廢棄物處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-017版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：對各種危險因素采取有效的控制措施，預防實驗室中存在的污染源對實驗室、實驗人員和環(huán)境的污染。2.范圍：分子實驗室全體人員。3.職責：所有工作人員必須在工作中嚴格遵守本程序各項措施規(guī)定。4.工作流程：臨床實驗室工作人員應知曉在實驗工作中存在的污染途徑和防護措施。4.1感染途徑：4.1.1空氣傳播：其他病原體及化學物的氣溶膠。4.1.2直接接種：工作中偶然的針刺、碎玻璃劃傷直接引起傳染。4.1.3皮膚、粘膜接觸：臨床標本中的感染源通過破損皮膚，粘膜接觸造成感染。4.1.4化學物質：溴化乙錠（EB）、焦碳酸二乙酯（DEPC）、丙烯酰胺有致癌性。若處理的擴增片段來自潛在的腫瘤基因，應考慮采取保護措施。4.2預防措施4.2.1來自所有病人的血液、體液、痰等標本都被認為是具有傳染性。標本采集、運送過程中，應保持容器完好，無泄漏。完成檢測后及時處理。4.2.2處理標本的工作人員都應戴上雙層手套，穿防護服，戴帽子、口罩。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室生物防護和清潔廢棄物處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-017版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：4.2.3實驗過程中若接觸血液或其它標本、毒物等后必須立即徹底清洗。4.2.4在實驗過程中，病人標本或試劑不慎濺入眼內應立即用清水沖洗。4.2.5實驗過程中在使用針具等銳器時，盡量小心防止受傷。若被銳器刺破時，應立即脫下手套，盡量擠壓傷處，使血流出，然后用碘酒、酒精消毒，必要時進行預防補救措施。4.2.6在實驗過程中病人標本（血液、體液）外漏時，應立即用10％次氯酸鈉消毒，再用75％酒精擦凈消毒。4.2.7實驗完畢離開時，應脫下所有該實驗區(qū)個人防護裝備。4.2.8標本處理區(qū)應備有急救包,包內存有75%酒精,復合碘、棉簽、創(chuàng)口貼等。5.實驗室的清潔:5.1PCR實驗室人員要明確造成污染的來源有前一次PCR產(chǎn)物、檢測樣本及陽性質控物，標準品。PCR實驗室人員要明確造成污染的途徑有空氣，吸液嘴，移液器的氣腔、外表，標本處理過程中的開蓋閉蓋，手套，夾取標本用的鑷子，標本處理的公用設備如離心機、樣本架等。5.2離心管在使用前要經(jīng)高壓消毒滅菌。5.3所有滅好菌的物品先放置在試劑準備區(qū)，在滅菌效期內由傳遞窗傳至各區(qū)。5.4工作人員工作結束后，實驗臺面均應用10%次氯酸鈉清潔液的抹布擦拭，XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室生物防護和清潔廢棄物處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-017版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：再用75%乙醇清潔，最后用清水擦拭。5.5移液器的外表每天用75%乙醇清潔一次，加樣器的氣腔每月用75%乙醇浸洗一次。5.6夾標本用的鑷子應浸泡在75%乙醇中，使用過的試管架、凈化臺及操作臺面用10%次氯酸鈉擦拭1遍后，再用75%酒精擦拭1遍，然后用紫外燈至少照射60min。5.7已滅菌的離心管在取用時須用鑷子取，不允許用手去拿。5.8各區(qū)實驗結束后，應做好各區(qū)的清潔工作，并將各區(qū)的廢棄物、垃圾帶出實驗區(qū)，打開該區(qū)紫外燈進行紫外線消毒60分鐘，作好實驗后處理記錄。5.9每天須對各區(qū)的地面進行清潔，各區(qū)地面的清潔抹布須嚴格分開使用，清潔順序嚴格按一區(qū)到三區(qū)順序進行。5.10污染的處理：實驗中若在操作臺面發(fā)生液體外瀉，應立即用浸有10%次氯酸鈉溶液的衛(wèi)生紙覆蓋污染處，半小時后再用軟布浸水擦拭干凈。5.11實驗用過Tip頭、離心管的處理見廢棄物處理程序。5.1210%次氯酸鈉每月新配一次。5.13對使用過的一次性手套，應將其反一面后再丟入專用拉圾袋中。5.14對以上所有的生物垃圾在移交給技工時，應作好交接記錄，確保焚燒。6.實驗室廢棄物處理:XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室生物防護和清潔廢棄物處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-017版本號：第2版第0次修改頁碼：第4頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：6.1實驗過程中的廢液缸應裝有足量濃度的施爾康消毒液，在實驗完成后將廢液缸中棄置物轉入密閉垃圾桶袋中。每天更換廢液缸里面的施爾康消毒液，并保證用量為廢液缸內總液量的1/3左右。6.2臨床標本，擴增后產(chǎn)物及一次性使用物品等實驗材料，實驗完畢密封包裝進行焚燒。6.3檢查操作臺面和設備內是否有遺漏的吸頭，試管等。如有，撿起置于施爾康消毒液廢液缸內，并立即用1%次氯酸鈉對可能污染區(qū)域擦拭2-3遍，再用75%酒精擦拭1遍，最后用清水擦拭。6.4擴增后的反應管嚴禁在實驗室內打開。6.5手套、口罩等廢棄物投入廢物桶，交接給專人處理并做好登記。6.6實驗區(qū)域的所有垃圾袋以黃色為標志，各區(qū)域垃圾在實驗區(qū)緩沖間內封口，實驗完畢后移出各實驗區(qū)域，在公共走廊內移交專人處理，并做好記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室記錄管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-018版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證試驗資料的原始性、真實性、可靠性，便于回顧。2.范圍：檢驗過程產(chǎn)生的數(shù)據(jù)資料，諸如病人信息資料、樣本資料、檢測數(shù)據(jù)、檢驗結果等。3.職責：檢測人員對記錄負責，室負責人對管理措施的落實和監(jiān)督負責。4.工作流程：4.1試驗記錄分為兩個部分：4.1.1檢測前的記錄：病人信息資料、樣本資料的書面記錄。4.1.2檢測結果的電子記錄。4.1.3記錄的種類：PCR標本接收記錄、臨床拒收標本記錄、PCR檢驗流程記錄、PCR結果記錄、PCR質控記錄、抱怨記錄、室間質量評價記錄、試劑和消耗品的質檢記錄、應急記錄、人員培訓記錄。4.2記錄方法：4.2.1接受標本記錄：以書面形式記錄病人信息、樣本信息、是否保存，同時對樣本作標識，記錄人簽名；檢驗時，將標識的樣本、記錄本帶入樣本處理間處理。4.2.2PCR擴增檢測記錄：a）記錄文件必須保存在非系統(tǒng)分區(qū)中，如D盤、E盤等。保存路徑要清晰、便捷、易查找。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室記錄管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-018版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：b）文件夾目錄結構要求層次感分明：一整年的實驗結果均保存在一個年度文件夾里，如“2019年”文件夾；每個年度文件夾又包含12個月文件夾，如“9月”、“10月”，每天的實驗結果就保存在當月文件夾里。c）SDS文件保存時以當天日期命名，如2019年9月10日的保存為20190910HBV，20190910XB。d）若某天進行了多次實驗，須保存多個SDS文件，命名時在后面以01、02、03等字母標識，如2019年9月10日做的兩次實驗，分別保存為20190910HBV01和20190910HBV02，20190910XB01和20190910XB02。e）為了防止儲存實驗結果的電腦發(fā)生系統(tǒng)崩潰、硬件故障等問題導致實驗結果丟失、無法查詢等情況，每個月的實驗結果記錄文件都要用移動存儲設備（如U盤、移動硬盤等）拷貝備份；如“2019年實驗結果備份”。4.2.3電子保存的軟件備份要求：a）保存周期：每一個月進行一次電子報告的軟件備份；安排在每月的最后一個工作日完成。備份路徑為D盤PCR備份。b）備份注明：備份由分子實驗室人員進行。4.3記錄的歸檔：4.3.1PCR標本接收記錄、臨床拒收標本記錄、PCR檢驗流程記錄、PCR結果記錄裝訂成冊。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室記錄管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-018版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共3頁受控狀態(tài)：受控號：4.3.2記錄保存期為3年，科室統(tǒng)一保管。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室抱怨和應急處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-019版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：為避免因儀器設備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質量問題而影響到臨床檢測報告的及時性和準確性，特制定本程序。保證對抱怨的正確處理，提高工作質量。2.范圍：來自于患者，臨床醫(yī)護人員和/或實驗室工作人員針對檢測結果質量、服務質量和/或實驗室管理等問題的投訴和/或抱怨。注：本程序適用于檢驗科權限內能處理解決的問題?？剖也荒芡咨平鉀Q的，移交醫(yī)院醫(yī)務處，遵循醫(yī)務處處理程序和辦法。3.職責：3.1實驗室負責人負責抱怨的處理，必要時應會同科主任采取更進一步的措施。3.2對于外部抱怨，任何一個工作人員不得推卸，須負責將抱怨人領到實驗室負責人處或科主任處，對電話抱怨須作記錄并及時報告負責人。4.工作流程：4.1抱怨的接受：執(zhí)行者在接受抱怨時，應記錄抱怨者姓名、地址、聯(lián)系方式、抱怨內容（必要時首先穩(wěn)定抱怨者情緒）。4.2抱怨的處理：4.2.1能當時處理的抱怨應給予及時解決，記錄處理意見及結果。4.2.2不能當即答復的報怨應約定反饋時間，同時為了防止報怨的擴大化，根XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室抱怨和應急處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-019版本號：第2版第0次修改頁碼：第2頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：據(jù)情況盡快召集有關人員處理。4.2.3抱怨的處理以抱怨者的滿意為目的，但必須以遵重科學，遵重事實為原則，在不違背科學原則，醫(yī)療行為規(guī)范的基礎上，爭取抱怨者最大程度的理解。4.3抱怨處理的方式：4.3.1患者對服務態(tài)度抱怨的處理方式：a）接到抱怨后，由室負責人責成相關人員向患者致歉。b）對患者提出的合理要求及時進行處理。c）調查事情原委，根據(jù)調查結果對相關責任人進行處罰。d）記錄抱怨及其處理結果。4.3.2患者對結果準確性抱怨的處理方式a）為患者展示原始實驗數(shù)據(jù)。b）向患者解釋相關實驗程序和可能臨床情況，幫助患者解除疑慮。c）如確有實驗結果不符合有效性要求或出現(xiàn)錯誤，則應及時糾正錯誤，重新實驗以得到準確結果。同時由室負責人向患者致歉以爭取得到其諒解，按有關條例對責任人進行相應處罰，并記錄。4.3.3醫(yī)生對檢測結果和臨床診斷的符合率抱怨的處理方式a）針對醫(yī)生抱怨的檢查項目進行從實驗前到實驗后的全程調查，查找是否存在影響結果的因素，并形成書面報告。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室抱怨和應急處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-019版本號：第2版第0次修改頁碼：第3頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：b）就調查發(fā)現(xiàn)的問題進行針對性解決。c）與醫(yī)生建立定期交流機制，定期了解臨床使用情況和對臨床作出解釋。4.3.4醫(yī)生對結果發(fā)放時效性抱怨的解決方式a）嚴格按承諾時間發(fā)放臨床報告。b）在與醫(yī)生交流會上就報告發(fā)放過程及時間作出解釋，獲取臨床對結果報告時效性的理解。4.4 抱怨處理程序：a）接到抱怨。b）記錄抱怨。c）提出針對具體抱怨的處理方法。d）將處理方法交室負責人審核。e）征求抱怨方對處理方法的意見。f）執(zhí)行解決方案。g）記錄最后的處理結果。5.應急處理：5.1為避免因儀器設備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質量問題而影響到臨床檢測報告的及時性和準確性，嚴格遵循下列程序。5.2工作程序：XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室抱怨和應急處理程序文件編號：PCR-BZCZCX-019版本號：第2版第0次修改頁碼：第4頁；共4頁受控狀態(tài)：受控號：5.2.1實驗室負責人接到儀器設備故障的報警后，立即現(xiàn)場確認異常情況的性質和故障程度并及時排除。5.2.2儀器設備故障本室不能解決的，應及時通知有關設備維修人員或供應商，具體程序見儀器設備管理程序。對于發(fā)生故障的儀器設備，及時維修的同時，采取以下處理辦法。5.2.3有滿足使用要求的替用設備的，啟用替用設備。5.2.4可借用其他部門儀器設備時，核實該設備的使用狀態(tài)良好后可借用。5.2.5替用、借用或備用設備的使用在滿足質量要求的同時，必須同時滿足實驗室管理措施（特別是防污染）的要求。5.2.6試劑盒質量發(fā)生問題，經(jīng)核實后，及時通知供貨商更換另一批次試劑，使用前需先作質量檢測，合格后方可使用。5.2.7儀器設備故障或試劑質量問題不能得到解決，預期將會影響到檢測報告的及時發(fā)出，可將標本送至其它實驗室檢查（該實驗室同樣應為獲同類認準的PCR檢測實驗室）；如己影響到報告的及時發(fā)出，應向病人或相關病區(qū)公告，取得病人和醫(yī)生的諒解。5.2.8影響到檢測報告的情況，應在應急處理登記表作記錄。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室保密制度文件編號：PCR-BZCZCX-020版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共1頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：為了確保實驗室工作的有序開展；保護病人的隱私權，防止不必要的醫(yī)患糾紛，特制定此制度。2.本程序的改動程序：本程序的改動，可由任一使用本程序的工作人員提出，經(jīng)論證其合理性后，報經(jīng)科主任批準簽字后實施。3.適用范圍：本實驗室所有人員應熟知并遵守本程序。4.職責：4.1實驗室所有原始資料包括病人的原始化驗單、實驗原始記錄及總匯表應各自歸檔保存于專柜中。所有病人資料和實驗檢測記錄非經(jīng)許可，一般人員不可查詢或借閱，特殊情況時必須在科主任或本室負責人同意的情況下方可查詢。4.2當臨床科室要求電話報告結果時，應先確認對方身份，核對其所查詢的病人姓名、病區(qū)床號（或檢驗報告單憑證號碼）情況后，由室負責人或其授權者報告結果，并明確告知對方，實驗的最終結果以檢測報告單為準。4.3實驗室所有標本建擋保存，放置在-20℃以下冰箱，并建立標本擋案，冰箱上鎖，科研所需保留的核酸模板由使用者自行保管，但不得用于其它用途。XXX醫(yī)院XX科分子生物學檢驗標準化操作程序分子實驗室人員實習、培訓和進修管理程序文件編號：PCR-BZCZCX-021版本號：第2版第0次修改頁碼：第1頁；共1頁受控狀態(tài)：受控號：1.目的：保證分子實驗室有足夠的技術力量和發(fā)展?jié)摿Α?.范圍：分子實驗室人員培訓。3.職責：分子實驗室負責人負責督促指導，由實驗室全體工作人員實施。4.工作計劃：4.1實驗室現(xiàn)有上崗證5人，計劃培養(yǎng)2人。4.2待培訓人員在分子實驗室負責人輔導下，先完成分子生物學基礎理論、檢驗技術的理論學習。（自學或有機會參加繼續(xù)教育項目）4.3新培訓的人員需本科或研究生畢業(yè)。4.4教材為《臨床基因擴增檢驗技術》，李金明主編。4.5有理論基礎后，在分子實驗室負責人輔導下，參加分子實驗室輪轉。4.6嚴格遵守實驗室管理文件的規(guī)定。4.7嚴格按分子實驗室SOP規(guī)定正規(guī)操作，不得更改。4.8爭取參加上級部門專業(yè)培訓，取得上崗證。4.9經(jīng)過學習的人員有責任指導實習生的理論