山楊無(wú)性繁育技術(shù)規(guī)程

1山楊無(wú)性繁育技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了山楊嫩枝扦插、根插繁殖及組織培養(yǎng)技術(shù)要求。本文件適用于遼寧省山楊無(wú)性繁育。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程LY/T2289林木種苗生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)檔案DB21/T3924歐美楊組培育苗技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1山楊Populusdavidiana山楊為楊柳科（Salicaceae）楊屬（Populus）的植物，詳見(jiàn)附錄A。3.2無(wú)性繁育vegetativepropagation樹(shù)木無(wú)性繁育也稱營(yíng)養(yǎng)繁殖，是指采集樹(shù)木的部分器官、組織或細(xì)胞，在適當(dāng)條件下使其再生完整植株的過(guò)程。一般可以分為嫁接、扦插、壓條、組織培養(yǎng)等。3.3插穗cuttings用于扦插的帶有成熟葉片和健壯葉芽的當(dāng)年生枝條。3.4嫩枝扦插softwoodcuttings在生長(zhǎng)期中用半木質(zhì)化的枝條作插穗進(jìn)行扦插育苗,又叫綠枝扦插或軟枝插條育苗。3.5組織培養(yǎng)tissueculture在無(wú)菌條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞及原生質(zhì)體，培養(yǎng)在人工培養(yǎng)基上和人工控制的環(huán)境中，使其生長(zhǎng)、分化、增殖，至發(fā)育形成完整植株的過(guò)程和技術(shù)。24山楊嫩枝扦插4.1插穗采集在6月中下旬～7月中下旬，選取當(dāng)年生萌條或其他半木質(zhì)化枝條，采集后迅速運(yùn)至扦插地，適當(dāng)噴水保濕并置于陰涼處保持新鮮狀態(tài)，當(dāng)日采集當(dāng)日扦插。4.2插床準(zhǔn)備扦插選擇具有通風(fēng)、遮光、微噴條件下的溫室或塑料大棚內(nèi)進(jìn)行。插床規(guī)格1m×2m，基質(zhì)為草炭土和河沙，在下層鋪3cm草炭土，上層覆蓋10cm河沙。插床在扦插前用0.1%～0.5%的高錳酸鉀溶液進(jìn)行噴灑消毒。4.3插條處理扦插前進(jìn)行剪穗，插穗長(zhǎng)度8cm～12cm，具有兩個(gè)以上節(jié)間，切口上平下斜，每個(gè)插穗保留上部1~2片葉，剪去三分之二葉片，并保留葉柄。已制好的插穗放入水桶中保濕或直接用配制好的生根劑進(jìn)行處理，處理后馬上進(jìn)行扦插。4.4嫩枝扦插扦插時(shí)先用略粗于插穗的木棒或鐵棒在基制上鉆孔，將插穗插入孔中，用手指壓實(shí)保持插穗直立，再噴清水彌合。扦插深度為3cm～5cm，株距6cm～10cm，行距6cm～10cm。4.5苗期管理扦插后立即噴透水一次，并用薄膜覆蓋，保持周?chē)諝庀鄬?duì)濕度在80%-90%，溫度控制在20℃~27℃。插后育苗期間每隔7d噴灑多菌靈100倍液，防止病菌感染。4.6出圃扦插一個(gè)月后即可進(jìn)行室外鍛煉，選擇陰天或傍晚，帶基質(zhì)栽植于大田，株行距20cm×50cm，栽完立即澆透水。移栽后根據(jù)土壤墑情適時(shí)澆水，保持土壤濕度不低于40%。每隔15d除草一次，定期松土，保持土壤通透性。5山楊根插繁殖5.1圃地選擇選擇在交通方便、勞力充足、土壤肥沃、有水源且地勢(shì)平坦、排水良好的地塊。5.2整地與作床整地時(shí)間在春季土壤解凍30cm以上時(shí)進(jìn)行。播種前10天進(jìn)行深翻，深度20cm～25cm，粉碎土塊，除去雜物、殘根，進(jìn)行平整。4月份進(jìn)行翻地，土壤深翻25cm～30cm，做南北走向高壟，垅底面3寬60cm～70cm，垅面寬30cm～35cm，壟距60cm，長(zhǎng)度依據(jù)地形而定，澆足底水。5.3根條采集與處理春季，芽沒(méi)有萌動(dòng)時(shí)采集優(yōu)良單株根條，采集根粗0.5cm～2cm的根條。把采集的根條剪成15cm~20cm長(zhǎng)的根段，切口上平下斜，在清水中浸泡12h，并用生根劑淹沒(méi)處理2h，立刻根插。5.4根插采用斜埋法。在苗垅上挖深25cm、寬30cm的溝，根段大頭向上，斜埋根段并覆土2cm～4cm，根插株行距為30cm×60cm，根插后立刻壓實(shí)土壤，覆地膜。5.5苗期管理出苗后，在清晨、黃昏或陰天去除地膜。根據(jù)土壤濕度適時(shí)澆水，全年澆水3次-5次。越冬前灌透水1次，第二年春及時(shí)灌頭水。幼苗出齊后及時(shí)進(jìn)行松土、除草。苗高生長(zhǎng)至10cm～15cm時(shí)第一次抹芽、除蘗，全年抹芽、除蘗2次-3次。5.6萌生苗移植及撫育管理在秋季落葉后至春季發(fā)芽前進(jìn)行苗木移植，密度約2779株/畝，移植完成后及時(shí)澆水。生長(zhǎng)季根據(jù)土壤濕度適時(shí)適度澆水，并及時(shí)進(jìn)行除草、除蘗。5.7出圃移植苗生長(zhǎng)1年～2年出圃，出圃時(shí)間為春季土壤完全解凍，樹(shù)液尚未萌動(dòng)前。6山楊組織培養(yǎng)6.1培養(yǎng)基6.1.1培養(yǎng)基配方基本培養(yǎng)基為MS和WPM培養(yǎng)基。初代培養(yǎng)基：WPM+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20.0g/L+瓊脂6.0g/L，pH6.0。繼代培養(yǎng)基：MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+蔗糖20.0g/L+瓊脂6.0g/L，pH6.5。生根培養(yǎng)基：WPM+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+瓊脂6.0g/L，pH6.0。6.1.2培養(yǎng)基配置、滅菌及保存按LY/T1882有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。6.2外植體選擇4山楊萌動(dòng)前采集無(wú)病蟲(chóng)害、生長(zhǎng)健壯的1年生萌條，經(jīng)室內(nèi)水培，待芽展葉后，剪取萌發(fā)伸展長(zhǎng)度在1cm以上的幼葉，用流水沖洗1h。6.3外植體滅菌與接種在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行外植體消毒，消毒后的外植體接種至初代培養(yǎng)基上，外植體消毒與接種方法參照DB21/T3924執(zhí)行。6.4組培苗繼代及生根培養(yǎng)參照DB21/T3924執(zhí)行。6.5組培苗移栽參照DB21/T3924執(zhí)行。7檔案管理按LY/T2280有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。5山楊簡(jiǎn)介山楊，落葉喬木，高可達(dá)25米。樹(shù)皮光滑灰綠色或灰白色，老時(shí)基部黑色粗糙，樹(shù)冠圓形。小枝光滑，萌枝被柔毛。芽卵形或卵圓形，無(wú)毛。葉三角狀卵形，先端鈍尖、漸尖，基部圓形、截形或淺心形，邊緣具有波浪狀鈍齒。萌枝葉大，下面被柔毛。早春先葉開(kāi)花，雌雄異株，柔荑花序下垂，紅色花藥，苞片深裂，裂緣有毛；蒴果兩裂。山楊分布廣泛，北自黑龍江、內(nèi)蒙古、吉林、華北、西北、華中及西南高山地區(qū)均有分布，垂直分布自東北低山海拔1200米以下，到青海2600米以下，湖北西部、四川中部、云南在海拔2000-3800米之間。木材白色，輕軟，富彈性，比重0.41，供造紙、火柴桿及民房建筑等用；樹(shù)皮可作藥用或提取栲膠；萌枝條可編筐；幼枝及葉為動(dòng)物飼料；幼葉紅艷、美觀供觀賞樹(shù)；綠化荒山保持水土有較大作用。6（資料性）MS培養(yǎng)基配方表B-1列出了MS培養(yǎng)基配方。表B-1MS培養(yǎng)基配方類型成分母液濃度（g/L）培養(yǎng)基母液用量/mL培養(yǎng)基劑量（mg/L）名稱分子式大量元素（20倍）硝酸銨NHNO33.000501650.00硝酸鉀KNO38.0001900.00磷酸二氫鉀KHPO3.400170.00硫酸鎂MgSO·7HO7.400370.00氯化鈣CaCl·2HO8.800440.00微量元素（200倍）硫酸錳MnSO·HO3.380516.900硫酸鋅ZnSO·7HO1.7208.600硼酸HBO1.2406.200碘化鉀KI0.1660.830鉬酸鈉NaMoO·2HO0.0500.250氯化鈷CoCl·6HO0.0050.025硫酸銅CuSO·5HO0.0050.025鐵鹽（200倍）硫酸亞鐵FeSO·7HO5.560527.800乙二胺四乙酸鈉Na-EDTA·2HO7.46037.300有機(jī)物（200倍）肌醇20.0005100.00鹽酸硫胺素0.0200.100鹽酸吡哆素0.1000.500煙酸0.1000.500甘氨酸0.4002.000表B-2列出了WPM培養(yǎng)基配方。表B-2WPM培養(yǎng)基配方類型成分母液濃度（g/L）培養(yǎng)基母液用量/mL培養(yǎng)基劑量（mg/L）名稱分子式大量元素（20倍）硝酸銨NHNO33.000501650.00硫酸鉀K2SO438.0001900.00磷酸二氫鉀KHPO3.400170.00硫酸鎂MgSO·7HO7.400370.00鈣鹽硝酸鈣Ca（NO）·4HO9.04025556.00微量元素（200倍）硫酸錳MnSO·HO3.380516.900硫酸鋅ZnSO·7HO1.7208.600硼酸HBO1.2406.200碘化鉀KI0.1660.830鉬酸鈉NaMoO·2HO0.0500.25