土壤錳過氧化物酶（SoilmanganeseperoxidaseS-Mnp）試劑盒說明書_第1頁
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第第頁土壤錳過氧化物酶（Soilmanganeseperoxidase，S—Mnp）試劑盒說明書土壤錳過氧化物酶（Soilmanganeseperoxidase，SMnp）試劑盒說明書微量法100T/48S注意：正式測定之前選擇23個預(yù)期差別大的樣本做猜測定。測定意義：錳過氧化物酶（EC1.11.1.13）是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶，緊要存在于擔(dān)子菌中，屬于木質(zhì)素降解酶系，能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物，疊氮化合物、DTT，多環(huán)芳烴等。測定原理：錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下，將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚，在465nm有特征吸取峰。自備試驗用品及儀器：天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、甲苯。試劑構(gòu)成和配制：試劑一：液體12mL×1瓶，4℃保管。試劑二：液體2mL×1支，4℃保管。試劑三：液體4mL×1瓶，4℃避光保管。試劑四：液體2mL×1支，4℃保管。樣品處理：新鮮土樣風(fēng)干，過3050目篩。測定操作：對比管測定管土樣（mg）4040甲苯（μL）303025℃，靜置15min試劑一（μL）140120試劑二（μL）20試劑三（μL）4040試劑四（μL）2020充分混勻，于30℃震蕩反應(yīng)3h，于10000rpm，4℃離心10min，取150μL于微量石英比色皿/96孔板，測定465nm處吸光值，記為A對比管和A測定管，△A=A測定管A對比管酶活計算公式：a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個酶活力單位。SMnP活性（nmol/d/g土樣）=×V反總÷W÷T=66.4×△A÷Wε：愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù)：12100L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，3hb.用96孔板測定的計算公式如下酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個酶活力單位。SMnP活性（nmol/d/g土樣）=×V反總÷W÷T=132.8×△A÷Wε：愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù)：12100L/mol/cm；

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